热休克同源蛋白70羧基端作用蛋白的功能及其与神经退行性疾病的关系

神经退行性疾病是一组病因不明的慢性进行性神经损害.蛋白质的错误折叠和聚集是这类疾病共同的病理特征.热休克同源蛋白70羧基端作用蛋白(carboxyl-terminus of Hsc70 interacting protein,CHIP)具有双重功能,一方面可作为热休克蛋白的辅助因子,通过氮基端的34肽重复序列结构域与Hsp90和Hsc/Hsp70相互作用,调节热休克蛋白介导的蛋白质异常折叠,同时又可作为E3泛素连接酶,通过羧基端的U-box结构域参与泛素-蛋白酶体系统(ubiqutin-proteasome system,UPS)介导的蛋白质降解过程.CHIP在分子伴侣系统和UPS的交互作用中扮演重要角色,对维持细胞内蛋白质稳态具有重要的作用.本文从CHIP蛋白的分子结构特点、生理功能、在细胞代谢中的作用、与神经退行性疾病的关系等方面进行综述.     

神经毒性压力下秀丽隐杆线虫神经元排出蛋白聚合物及线粒体

正错误折叠蛋白的毒性作用和线粒体功能紊乱是促进年龄相关功能性神经元减少(age-associated functional neuronal decline)和神经退行性疾病的关键因素。相应地,神经元在蛋白伴侣、蛋白降解、自噬及线粒体自噬等方面投入了相当多的细胞资源来维持细胞内蛋白质平衡和线粒体质量。伴随着神经保护机制遇到挑战,错误折叠的人类病态蛋白和线粒体会通过未     

蛋白聚集体形成研究进展

神经退行性疾病(neurodegenerative disorder)是由于神经元进行性变性死亡导致的以中枢神经系统损害为主的神经系统疾病.其中包括帕金森病、阿尔茨海默症、亨廷顿舞蹈病等.当错误折叠的蛋白超过分子伴侣的重新折叠和泛素-蛋白酶体系降解能力的时候,错误折叠的蛋白质可以通过被介导的动力蛋白马达逆向转运至微管组织中心周围形成蛋白聚集体.蛋白聚集体的形成被认为是细胞的一种防御反应,隔离有毒的错误折叠蛋白进而进行清除.蛋白聚集体通路的研究可为多种神经退变性疾病提供治疗靶点.     

降解错误折叠蛋白的细胞系统对抗神经退行性疾病

错误折叠蛋白损害细胞功能并导致疾病。这些蛋白是怎样被检测和降解的仍然未知。美国科学家发现,PML／TRIM19和小泛素样修饰蛋白（ small ubiquitin-like modifier, SUMO）依赖的泛素连接酶RNF4共同促进哺乳动物细胞核内的错误折叠的蛋白质的分解。 PML通过不同的底物识别位点,选择性地与错误折叠的蛋白质相互作用,并通过其SUMO连接酶的活性将这些错误折叠蛋白与小泛素样修饰物结合。然后,SUMO修饰的错误折叠蛋白质被确认,由RNF4泛素化,并随后实现靶向蛋白酶体降解。 PML的缺乏在脊髓小脑性共济失调1（spinocerebellar ataxia 1, SCA1）的小鼠模型中加剧了多聚谷氨酰胺的疾病。这些发现揭示了一个哺乳动物的系统,它通过连续性SUMO修饰及泛素化去除错误折叠蛋白,并在对抗错误折叠蛋白类疾病中起作用。     

TREM2 介导小胶质细胞吞噬功能在神经退行性疾病中的作用

以阿尔茨海默病（AD）为代表的多种慢性神经退行性疾病发病机制尚未明确。近年研究发现神经退行性疾病发生与错误折叠的蛋白质、淀粉样蛋白（Aβ）、死亡神经元和受损髓鞘吞噬清除障碍有关,而完整的小胶质细胞吞噬功能是维持中枢神经系统稳态的重要原因。小胶质细胞表面吞噬受体髓样细胞触发受体2(TREM2)表达改变可调节小胶质细胞吞噬效率,负性调节TLR诱导的炎症反应,促进M2小胶质细胞表型表达,发挥神经保护作用。此外,TREM2功能突变对小胶质细胞吞噬功能的影响与AD、帕金森病等神经退行性疾病风险增加相关。因此,了解TREM2介导的小胶质细胞吞噬清除功能在不同神经退行性疾病中的作用对于探索神经退行性疾病新的治疗方向具有重要意义。     

Calnexin/Calreticulin循环与糖蛋白内质网相关性降解

Calnexin/Calreticulin循环与糖蛋白内质网相关性降解 (GERAD)是真核细胞内负责糖蛋白折叠质量的重要监控机制 ,监督糖蛋白在内质网中空间构象的正确折叠 ,促进未完全折叠糖蛋白再折叠 ,错误折叠糖蛋白经GERAD途径被降解。内质网应激引起内质网功能障碍时 ,Calnexin/Calreticulin循环和 (或 )GERAD发生异常 ,错误折叠的糖蛋白在内质网堆积导致细胞功能障碍和某些疾病的发生。错误折叠糖蛋白从Calnexin/Calreticulin循环释放到GERAD一系列途径的分子机理现已逐渐明了 ,了解糖蛋白Calnexin/Calreticulin循环与内质网相关性降解过程对进一步设计针对病毒性肝炎、帕金森病等疾病的治疗方案有重要的指导意义。     

乙型肝炎病毒X蛋白通过泛素-蛋白酶体系统促进乙型肝炎病毒感染和肝癌发生发展的研究进展

慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染是导致肝癌发生发展的重要病因之一。泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system, UPS)在真核细胞内介导蛋白质翻译后修饰和降解。近年来研究发现, UPS在HBV感染及相关肝癌发生发展中发挥了重要作用, 通过靶向HBV X蛋白(HBV X protein, HBx)干预HBV感染或HBV相关肝癌的进展成为近年来国内外的研究热点。本文对HBx通过UPS促进HBV感染和肝癌发生发展的研究进展进行了综述。     

蛋白酶体抑制剂对神经细胞nicastrin表达的影响

目的:探讨蛋白酶体抑制剂能否引起神经细胞内nicastrin(NCT)蛋白表达及分布的变化,以明确NCT的蛋白降解是否与蛋白酶体有关。方法:在用人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)建立稳定表达NCT细胞株的基础上,应用蛋白酶体抑制剂处理NCT细胞株,并结合Western blotting、放射性同位素脉冲示踪技术、免疫荧光双标技术,检测蛋白酶体抑制剂处理后神经细胞内NCT的蛋白表达变化。结果:Western blotting结果显示,特异性蛋白酶体抑制剂处理后,神经细胞内源性和外源性转染的NCT的表达显著增强,高度特异的蛋白酶体抑制剂lacta-cystin对NCT蛋白的增强效应呈剂量依赖性和时间依赖性;放射性同位素脉冲示踪结果显示,蛋白酶体抑制剂可显著增强细胞内新合成的NCT蛋白的表达水平,其增强作用是通过阻止[35S]-NCT的蛋白降解来实现的;免疫荧光双标结果提示,NCT与泛素在细胞内共存。结论:神经细胞内NCT的降解由蛋白酶体途径介导;NCT在降解之前经泛素化修饰。     

蛋白酶体抑制剂处理神经细胞系后Nicastrin的表达变化及其与Aβ的关系

目的 探讨蛋白酶体抑制剂处理后神经细胞内Nicastrin(NCT)的表达变化,及其与γ-分泌酶活性和Aβ生成的关系.方法 运用亚细胞器分级分离技术、免疫共沉淀、Western blot和ELISA等检测神经细胞内NCT的表达及Aβ水平.结果 正常情况下NCT主要分布于内质网和高尔基复合体,极少量分布于溶酶体,蛋白酶体抑制剂Lactacystin处理后NCT水平升高(P<0.001),且细胞内增多的NCT也主要聚集在内质网和高尔基复合体;NCT与泛素在细胞内共存;NCT的蛋白降解不受PS的影响;NCT降解受阻可引起细胞内γ-分泌酶的底物C99、C83显著减少,而γ-分泌酶的产物Aβ40、Aβ42的生成显著增多(P<0.01).结论 NCT的降解可通过泛素-蛋白酶体途径实现,蛋白酶体抑制剂处理后神经细胞内NCT水平升高,且增多的NCT可促进APP的代谢及Aβ的生成.     

泛素－蛋白酶体途径降解胰腺癌细胞系中凝溶胶蛋白

目的 探讨胰腺癌中泛素-蛋白酶体途径对凝溶胶蛋白(gelsolin)的降解作用.方法 用特异性蛋白酶体抑制剂lactacystin处理胰腺癌细胞系BxPC-3和PANC-1,经Westem blot检测凝溶胶蛋白的表达,免疫沉淀细胞内凝溶胶蛋白,分析沉淀蛋白的泛素化.结果 BxPC-3细胞系经lactacystin作用12 h后,细胞内凝溶胶蛋白含量较对照组和处理前明显升高(P＜0.05),而且细胞内的凝溶胶蛋白表现出与泛素分子的相互作用.结论 泛素-蛋白酶体途径对凝溶胶蛋白的降解作用,可能是胰腺癌中凝溶胶蛋白表达降低的原因之一.