口服Ⅱ型胶原蛋白诱导免疫耐受治疗佐剂关节炎的研究

目的： 观察口服Ⅱ型胶原蛋白（ｔｙｐｅＩＩｃｏｌｌａｇｅｎ, ＣＩＩ） 对大鼠佐剂关节炎（ａｄｊｕｖａｎｔａｒｔｈｒｉｔｉｓ, ＡＡ） 的治疗作用。方法： 采用酶消化法, 提取牛软骨ＣＩＩ, 经口插管灌注将ＣＩＩ给予佐剂关节炎ＳＤ大鼠。结果： 口服ＣＩＩ可推迟ＡＡ的发病, 降低发病率, 明显减轻病变关节的炎症反应和使病程缩短。结论： 口服ＣＩＩ可诱导抗原特异性免疫耐受并对淋巴细胞的增殖反应有抑制作用, 而且此种免疫耐受作用可以剂量依赖的方式通过淋巴细胞转移。     

离子交换色谱一步法纯化Ⅱ型胶原蛋白

类风湿性关节炎(RA)是常见的危害性和致残率极大的自身免疫性疾病。近年来的研究提示80％～90％均为Ⅱ型胶原的软骨胶原蛋白所诱发的自身免疫可能是RA发病的重要因素之一。在口服耐受对动物关节炎模型治疗作用的研究中发现,口服Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ)可使动物关节炎症明显减轻,病程缩短。国外已有学者将用鸡肋软骨提纯的CⅡ用于活动期RA患者的治疗,并取得了较好疗效[1]。由于鸡肋软骨来源较少,我们以牛软骨为原料,采用酶消化法[2]提取了CⅡ,并 对其进行了纯化和鉴定。     

II型胶原蛋白对CIA大鼠外周血CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞的影响

目的:观察Ⅱ型胶原蛋白对胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(Treg)的影响。方法:建立Ⅱ型胶原蛋白诱导的大鼠类风湿性关节炎(CIA)模型。采用流式细胞术分别检测正常对照组、模型组、Ⅱ型胶原蛋白治疗组和雷公藤多苷组大鼠外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg的水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠外周血CD4+T细胞亚群中CD25+FOXP3+Treg的水平明显下降(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,Ⅱ型胶原蛋白治疗组大鼠外周血CD25+FOXP3+Treg显著升高(P<0.05或P<0.01);而CD25+FOXP3-T细胞和CD25-FOXP3+T细胞的水平则明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:II型胶原蛋白治疗CIA大鼠的可能途径是升高外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg的水平。     

血管紧张素Ⅱ对心肌梗塞大鼠成纤维细胞的核酸、胶原合成影响的研究

目的和方法：本实验利用酶法分离、培养成年大鼠心肌成纤维细胞（Ｆｂｓ），观察了血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）在不同处理因素下对Ｆｂｓ的３Ｈ－ＴｄＲ、１４Ｃ－ＵＲ、３Ｈ－Ｐｒｏ掺入率的影响。结果：在相同浓度（１０７ｍｏｌ／Ｌ）ＡｎｇⅡ作用下，ＭＩ组Ｆｂｓ对上述３种标记底物的掺入率均显著高于假手术（ＳＯ）组（Ｐ＜０．０５）。ＡｎｇⅡ的上述作用，可被特异性ＡｎｇⅡ拮抗剂［１８］ＡｎｇⅡ和血管紧张素抗肽（Ａｎｇ－ＡＰ）完全阻断，却不能被Ｌｏｓａｒｔａｎ完全阻断。结论：ＡｎｇⅡ可直接作用于心肌Ｆｂｓ，促进Ｆｂｓ的ＤＮＡ、ＲＮＡ和胶原蛋白的合成。ＭＩ组大鼠Ｆｂｓ对ＡｎｇⅡ反应性显著高于ＳＯ组，介导ＡｎｇⅡ对Ｆｂｓ的作用除ＡＴ１外，可能还有其他机制参与     

TNFα对IFNr诱导肿瘤细胞HLA－Ⅱ抗原表达的影响

本文用ＩＦＮｒ诱导人肿瘤细胞株表达ＨＬＡ－Ⅱ类抗原，并观察ＴＮＦα、ＢＣＧ－ＰＳＮ对ＩＦＮｒ诱导ＨＬＡ－Ⅱ类抗原表达的影响。发现两株肿瘤细胞当ＩＦＮｒ为５００ｕ／ｍｌ时，诱导第４天ＨＬＡ－Ⅱ类抗原表达最高；单用ＴＮＰα或ＢＣＧ－ＰＳＮ不能诱导ＨＬＡ－Ⅱ抗原表达；当ＴＮＦα、ＢＣＧ－ＰＳＮ分别与ＴＮｒ合用时，能诱导肿瘤细胞ＨＬＡ－Ⅱ类抗原的高表达率，有助于增加肿瘤细胞的免疫原性。提高宿主免疫应答能力。     

创伤性休克大鼠外周血白细胞表面LFA—1、ICAM—1表达的研究

自 198 1年发现ＣＤ11ａ/ＣＤ18,1986年发现不同于ＬＦＡ 1的细胞间粘附分子 (ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ ,ＩＣＡＭ 1,亦名ＣＤ54,是ＬＦＡ 1的一种可诱导的细胞表面配基 )以来。人们对ＬＦＡ 1、ＩＣＡＭ 1的了解日益增多 ,并发现它们在细胞粘附中作用特别活跃。而有关创伤性休克时白细胞表面ＬＦＡ 1、Ｉ ＣＡＭ 1表达情况少见报道 ,故我们设计此实验以探讨创伤性休克时白细胞表面ＩＦＡ 1、ＩＣＡＭ 1的表达变化。1　材料与方法1 1　材料　取雄性ＳＤ大鼠 8只 ,体重 2 10～ 2 50ｇ ,随机分为 2组 :正…     

乌梢蛇水解液对大鼠胶原性关节炎的防治作用

本研究观察乌梢蛇水解液对大鼠胶原性关节炎(CIA)的作用。实验分预防性和治疗性疗效观察两部分,均设低剂量组(0.5 mg/kg)、中剂量组(5 mg/kg)、高剂量组(15 mg/kg)和空白对照组,预防性疗效观察于大鼠致炎前14、11、8、5和2d,给药共5次;治疗性疗效观察于大鼠致炎后第18天,将患关节炎的大鼠分组,每天给药一次,共21d。分别于预防给药大鼠致炎后第25天和治疗给药大鼠致炎后第39天记录各组大鼠关节炎的发病率、关节炎症状指数、血清Ⅱ型胶原抗体水平和皮肤对Ⅱ型胶原的迟发型超敏反应(DTH)。结果表明预防给药中剂量和高剂量乌梢蛇水解液能降低大鼠CIA的发病率、改善关节炎症状(P<0.05),治疗给药中剂量和高剂量能减轻关节炎症状(P<0.05);低剂量无预防发病率和治疗作用。中、高剂量药物均能降低预防和治疗给药CIA的血清抗Ⅱ型胶原抗体水平和皮肤对Ⅱ型胶原的DTH。实验提示乌梢蛇水解液对大鼠CIA有预防和治疗作用。     

反义CⅡTA基因转移对MHCⅡ类分子表达的抑制作用

主要组织相容性复合体 (ＭＨＣ)Ⅱ类分子可将外源性抗原提呈给Ｔ辅助细胞。ＭＨＣⅡ类的组成型表达仅限于“专职性”抗原提呈细胞 ,但细胞因子如ＩＦＮ γ可引起诱导型Ⅱ类分子表达。无论是组成型还是诱导型Ⅱ类分子表达 ,ＭＨＣⅡ类分子转录活化因子 (ＣⅡＴＡ)都是绝对必需的。近年的研究提示ＣⅡＴＡ是控制ＭＨＣⅡ类基因表达的主宰调节者 ,决定着ＭＨＣⅡ类分子的存在与否及表达程度。因此 ,ＣⅡＴＡ是干预ＭＨＣⅡ类分子抗原提呈作用的理想靶点。反义技术是基因治疗中很有前途的策略 ,用反义核酸抑制靶基因的转录或翻译 ,从而阻断或减…     

关节炎中B7:CD28/CTLA-4共刺激途径的实验研究

目的：探讨Ｂ＆：ＣＤ２８／ＣＴＬＡ－４共刺激信号大关节炎发病机制中的作用。方法：经牛Ⅱ型胶原诱导ＳＤ大鼠建立关节炎动物模型;采用ＣＴＬＡ－４Ｉｇ作为负性调节因子,分析其对关节炎大鼠中特异性体液反应和组织病理学表现的影响。结果：ＣＴＬＡ＿４Ｉｇ可阻止ＳＤ大鼠发生胶原诱发 关节炎,降低大导ＢＩＩＣ的体液免疫反应。结论：Ｂ７：ＣＤ２８／ＣＴＬＡ－４共刺激信号在诱发Ｔ细胞介导的自身免疫病中起作用,ＣＴＬＡ     

乌梢蛇Ⅱ型胶原提取及其诱导大鼠关节炎特性的研究

提取和纯化乌梢蛇Ⅱ型胶原,观察乌梢蛇Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎的特性,为研究乌梢蛇治疗类风湿关节炎的机制提供研究方向。离心提取乌梢蛇Ⅱ型胶原,经DEAE-52纤维素交换柱纯化,斑点免疫渗滤试验和免疫印迹试验进行成分鉴定。乌梢蛇Ⅱ型胶原不完全佐剂免疫大鼠,观察大鼠关节炎发生情况、抗Ⅱ型胶原抗体、CD 4/CD8亚群、血清中TNF-α、IL-10、IL-1β、IL-4的变化。乌梢蛇Ⅱ型胶原提纯品在SDS-PAGE凝胶电泳上呈一条区带,斑点免疫渗滤试验和免疫印迹试验为阳性反应。诱导大鼠关节炎发生率为86.67%,关节炎大鼠血清中抗Ⅱ型胶原抗体明显增高(P<0.01),CD4 T细胞亚群和CD4~+/CD8~+增高(P<0.05),TNF-α含量增加(P<0.01),IL-10含量降低(P<0.01),血清中IL-1β和IL-4含量无变化。结果显示,乌梢蛇Ⅱ型胶原能通过免疫方法可以诱导大鼠产生多关节炎,并且体内有自身免疫反应的表现。     

固定剂对MHCⅡ类抗原的影响

主要组织相容性 (ＭＨＣ)Ⅱ类抗原在同种异体心脏移植急性排斥免疫应答中起着重要作用〔1〕,因此检测ＭＨＣⅡ类抗原对研究心脏移植后的急性排斥具有重要意义。1　材料与方法1.1　材料　实验动物选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠和ＳＤ大鼠各 16只 ,体重 30 0～ 4 5 0 ｇ ,♀♂不限 ,由中山医科大学实验动物中心提供 ,为清洁级。一抗为大鼠ＭＨＣＣｌａｓｓⅡ类分子Ｉ Ａ亚区的单克隆抗体Ｉａ(ＯＸ6 ) ,购自美国ＰｈａｒＭｉｎｇｅｎ公司 ,二抗和显色系统采用Ｄａｋｏ公司ＥｎＶｉｓｉｏｎＴＭ +Ｓｙｓｔｅｍ试剂盒 ,购自美国Ｄａｋｏ公司。冷冻切片采…     

中国汉族人群抗原肽运载体（TAP）基因结构的多态…

抗原肽运载体基因位于ＭＨＣ－Ⅱ类区，与ＭＨＣ－Ⅰ类基因的表达及内源性抗原加工后运输有关。类风湿关节炎作为一种自身免疫病被认为与遗传背景及一些内源性和自身抗原有关。本文对１４２名上海地区汉族人ＴＡＰ基因进行了分析，结果显示，ＴＡＰ１基因至少存在Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ４种亚型，其中Ｄ型尚未见报道，ＴＡＰ２基因至少存在Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，Ｈ８种亚型，其中后５种亚型尚未见报道。     

Ⅱ型胶原蛋白和雷公藤多甙对佐剂性关节炎治疗作用的实验研究

目的探讨口服Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen,CⅡ)、雷公藤多甙(Tripterygium Wilfordii Polyglycosidium,TWP)对大鼠佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)的治疗作用及在治疗过程中对大鼠外周淋巴器官中白介素10(IL-10)的影响。方法建立动物模型,采用关节炎评分法对关节肿胀程度进行评估,采用免疫组化法检测大鼠外周淋巴器官中IL-10水平的变化。结果口服Ⅱ型胶原及雷公藤多甙可以明显减轻病变关节的炎症反应,降低发病率,推迟AA的发病并且使病程明显缩短,而且大鼠外周淋巴器官中IL-10水平也较模型组显著升高。结论口服CⅡ及TWP可有效减轻佐剂型关节炎大鼠的关节病变,并能使AA大鼠外周淋巴结中IL-10水平升高。     

雷帕霉素对大鼠佐剂性关节炎的防治作用及其机理研究

本文研究了雷帕霉素（ｒａｐａｍｙｃｉｎ,ＲＰＭ）对大鼠佐剂性关节炎的作用,证明ＲＰＭ１０～５０ｍｇ／ｋｇ腹腔注射（ｉｐ）能完全预防弗氏完全佐剂（ＦＣＡ）所致大鼠关节继发肿胀的发生,对ＦＣＡ所致大鼠急性期原发性肿胀,环孢菌素Ａ（ＣｓＡ）效果优于ＲＰＭ,但ＣｓＡ停药不久即发生反跳。对继发肿胀的关节,ＲＰＭ５０ｍｇ／ｋｇｉｐ也显示了良好的治疗作用,且不发生反跳。Ｌ９２９细胞结晶紫染色法测得：关节炎大鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）产生的肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ α）浓度显著升高,ＲＰＭ体内、外给药,均可抑制关节炎大鼠腹腔ＭΦ产生ＴＮＦ α。２５ｍｇ／ｋｇ的ＲＰＭ预防和治疗给药,均可抑制关节炎大鼠的迟发型超敏（ＤＴＨ）反应。结果表明：ＲＰＭ对大鼠佐剂性关节炎的防治作用可能与其抑制ＴＮＦ α的产生和ＤＴＨ反应有关。     

41例心衰患者CA-125测定的临床意义

糖类抗原 12 5 (ＣＡ - 12 5 )作为卵巢癌的肿瘤标志物已众所周知 ,但其与充血性心力衰竭 (ＣＨＦ)关系的报道少见。我们自 2 0 0 0年 5月对 4 1例ＣＨＦ患者进行ＣＡ - 12 5检测比较 ,旨在探讨其临床意义。对象和方法　　一、对象 :ＣＨＦ组 :4 1例 (男 2 6 ,女 15 ) ,平均年龄 6 7(40～83)岁。按ＮＹＨＡ心功能分级 ,Ⅱ级 12例 ,Ⅲ级 14例 ,Ⅳ级 15例 ,肿瘤患者均除外。对照组Ａ :急性心肌梗死 (ＡＭＩ) (不伴心力衰竭 ) 10例 (男 7,女 3) ,年龄 5 8～ 81岁 ;对照组Ｂ :健康成人 10例 (男 5 ,女 5 ) ,年龄 30～ 70岁。二、方法 :ＣＨＦ和…     

细胞内Retinoid结合蛋白mRNA水平在生精过程中的周期性变化

目的 研究大鼠睾丸细胞内视黄醇结合蛋白－Ｉ（ＣＲＢＰ－Ｉ）及细胞内视黄酸结合蛋白－Ⅱ（ＣＲＡＢＰ－Ⅱ）ｍＲＮＡ水平与曲细精管生精上皮周期的相关关系。方法 分别以地高辛标记的大鼠ＣＲＢＰ－Ｉ及ＣＲＡＢＰ－ⅡｃＤＮＡ探针在ＳＤ大鼠睾丸冰冻切片上进行原位杂交,应用激光密度扫描系统对阳性信号进行定量。结果 ＣＲＢＰ－Ｉ及ＣＲＡＢＰ－Ⅱ ｍＲＮＡ在支持细胞（ｓｅｒｔｏｌｉ ｃｅｌｌ,ＳＣ）中表达。ＣＲＢＰ－     

骨质疏松大鼠膝关节组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白的含量变化

背景：目前研究认为胶原蛋白在骨细胞的增殖与分化、骨质的形成和吸收、骨基质矿化等过程中起着非常重要的作用。 目的：观察骨质疏松模型大鼠膝关节组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白含量变化。 方法：SD雌性大鼠40只随机分为实验组和对照组,实验组大鼠行双侧卵巢切除16周后,取膝关节软骨和交叉韧带,采用微量羟脯氨酸测定法及酶联免疫吸附法测定大鼠膝关节软骨及前交叉韧带组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白含量。 结果与结论：骨质疏松膝关节模型大鼠膝关节软骨、前交叉韧带总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白含量明显下降(P < 0.05),Ⅰ型/Ⅱ型胶原比值也显著降低(P < 0.05),提示骨质疏松可引起膝关节内组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原含量及其比值改变,与膝关节骨性关节炎的发生密切相关。     

GM－CSF对人单核细胞HLA－DR抗原表达的影响

本文采用ＥＬＩＳＡ方法，研究了重组的人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对体外培养的正常人外周血单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的影响。结果表明ＧＭ－ＣＳＦ能提高单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达，并且呈剂量依赖关系，最适剂量（５００ｕ／ｍｌ）时能使ＤＲ抗原表达量提高到对照组的２．５倍。ＧＭ－ＣＳＦ对ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的诱导作用并不是通过诱生的ＩＦＮ－γ的作用而实现的，因为有中和活性的ＩＦＮ－γ单抗并不能阻断这种效应。ＧＭ－ＣＳＦ能够增强低剂量ＩＦＮ－γ（５ｕ／ｍｌ）对单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导作用，但未观察到对高剂量ＩＦＮ－γ（１００ｕ／ｍｌ）的ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导增强作用。     

口服Ⅱ型胶原诱导分泌TGF—β的特异性Th3细胞

目的 了解饲喂Ⅱ型胶原（ｔｙｐｅ Ⅱ ｃｏｌｌａｇｅｎ，ＣⅡ）的大鼠能否在其肠相关淋巴细胞和脾脏中，诱导产生ＣⅡ特异性Ｔ细胞及其分泌的细胞因子的类型。方法 对口服ＣⅡ致耐大鼠进行特异和非特异性淋巴细胞增殖实验，并采用酶联免疫斑点法（ＥＬＩＳＰＯＴ），对ＣⅡ特异性Ｔ细胞在单细胞水平进行细胞内细胞因子检测。结果 ＣⅡ致耐大鼠的Ｔ细胞增殖能力下降，ＣⅡ特异性Ｔ细胞多数分泌ＴＧＦ－β，极少数分泌ＩＬ－４和     

GM－CSF对人单核细胞HLA－DR抗原表达的影响

本文采用ＥＬＩＳＡ方法，研究了重组的人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对体外培养的正常人外周血单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的影响。结果表明ＧＭ－ＣＳＦ能提高单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达，并且呈剂量依赖关系，最适剂量（５００ｕ／ｍｌ）时能使ＤＲ抗原表达量提高到对照组的２．５倍。ＧＭ－ＣＳＦ对ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的诱导作用并不是通过诱生的ＩＦＮ－γ的作用而实现的，因为有中和活性的ＩＦＮ－γ单抗并不能阻断这种效应。ＧＭ－ＣＳＦ能够增强低剂量ＩＦＮ－γ（５ｕ／ｍｌ）对单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导作用，但未观察到对高剂量ＩＦＮ－γ（１００ｕ／ｍｌ）的ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导增强作用。