支气管肺炎患儿机体免疫功能变化的分析

目的通过对支气管肺炎患儿T细胞亚群、血清免疫球蛋白、血清补体及细胞因子变化的分析,探讨小儿支气管肺炎机体免疫功能状态及免疫学发病机制,为临床了解病情、选择适当的治疗方案提供理论依据。方法支气管肺炎组65例,男39例,女26例,年龄2个月～13岁,平均年龄4.1岁。对照组20例,男12例,女8例,年龄1～12岁,平均年龄4.3岁。应用多色流式细胞术检测T细胞亚群(CD3+、CD3+CD4+Th、CD3+CD8+Ts、CD3+CD4+Th/CD3+CD8+Ts)、应用免疫散射比浊法检测血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、血清补体(C3、C4)、应用ELISA法检测血清细胞因子(IFN-γ、IL-4)。结果支气管肺炎组T细胞亚群改变明显,CD3+、CD3+CD4+Th显著低于对照组,有统计学意义(P<0.01);CD3+CD8+Ts显著高于对照组,有统计学意义(P<0.01);CD3+CD4+Th/CD3+CD8+Ts比值降低,与对照组相比,有统计学意义(P<0.05)。支气管肺炎组血清IgA、IgG水平显著低于对照组,有统计学意义(P<0.01);支气管肺炎组血清补体C3低于对照组,有统计学意义(P<0.05)。支气管肺炎组血清细胞因子IFN-γ浓度及Th1/Th2比值高于对照组,有统计学意义(P<0.05)。结论支气管肺炎患儿存在细胞免疫和体液免疫功能紊乱,对支气管肺炎患儿检测免疫功能有助于判断病情、指导治疗。     

小剂量环磷酰胺对正常小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞的调节作用

目的比较多次与单次应用小剂量环磷酰胺(CTX)对小鼠CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)数量及功能的影响,明确小剂量CTX可否多次用于下调Treg细胞。方法 C57BL/6小鼠32只,随机分为正常对照、单次、两次及三次CTX注射组共4组,各组每10天腹腔注射20 mg/kg CTX或等体积PBS,末次给药后3 d,流式细胞技术测小鼠脾细胞中Treg细胞占CD4+T细胞百分比;同时3-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法比较各组脾细胞中T、B细胞增殖功能,中性红吞噬试验比较各组巨噬细胞吞噬功能。结果各实验组小鼠脾细胞中Treg细胞占CD4+T细胞百分比显著低于对照组(P<0.05),而各实验组间差异无统计学意义(P>0.05)。各实验组T、B细胞增殖指数及巨噬细胞吞噬功能明显高于对照组(P<0.05),但各实验组间差异无统计学意义(P>0.05)。应用CTX后Treg细胞数量与T、B细胞增殖功能及巨噬细胞吞噬功能呈线性负相关。结论多次与单次小剂量应用CTX对小鼠Treg细胞数量的下调作用无差异,下调Treg细胞后对免疫细胞的调节功能也无差异,小剂量CTX可多次用于下调正常小鼠Treg细胞。     

β2 GP1诱导的EAPS小鼠Treg/Th17细胞比率变化的研究

目的:观察EAPS疾病进展过程中小鼠外周血Th17细胞与CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的比率变化。方法:以重组人β2糖蛋白1(rhβ2GP1)主动免疫BALB/c小鼠建立EAPS模型,免疫12周后检测外周血浆抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2GP1)、抗心磷脂抗体(a CA)、IL-17、IL-2、IL-6、TGF-β、活化部分凝血活酶时间(APTT)和血小板计数(PLT)及流产率。流式细胞术(FCM)检测小鼠PBMC中CD4+CD25+Treg及Th17细胞的比率。结果:与对照组相比,模型小鼠anti-β2GP1、a CA、IL-17、IL-2、IL-6水平明显升高,APTT延长,TGF-β降低,PLT升高,流产率提高,差异有统计学意义(P<0.05)。PBMC中CD4+CD25+Treg细胞频率8周前与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),12周后逐渐减少,明显低于对照组(P<0.05);Th17细胞频率逐渐升高,明显高于对照组(P<0.05);CD4+CD25+Treg/Th17比值明显低于对照组(P<0.05)。结论:EAPS小鼠外周血Th17/Treg细胞比率失衡可能在EAPS的发生发展中起重要作用。     

HIV-1 RNA被有效抑制下T细胞与外周血中HIV-1前病毒DNA

目的:考察HIV-1 RNA被有效抑制下T细胞与外周血中HIV-1前病毒DNA的相关性。方法:对云南地区90例确诊为AIDS,HAART持续治疗时间超过6个月,血浆HIV RNA<50 Copies/ml的患者进行研究,采用Spearmans秩和相关回顾性分析CD4+、CD3+、CD8+、CD4+CD28+、CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD38+、CD8+CD38+T细胞的绝对计数和相对计数与外周血中HIV-1前病毒DNA的相关性,同时考察HIV-1前病毒DNA拷贝数与HAART持续治疗时间的相关性。将90例患者根据HAART后CD4+T细胞绝对计数分为A(CD4+<200 cells/μl)、B(200≤CD4+≤349 cells/μl)、C(CD4+≥350 cells/μl)3组,考察3组间T细胞亚群的差别。结果:HIV-1前病毒DNA的log拷贝数与CD4+CD45RA+T细胞绝对计数呈负相关(r=-0.231,P<0.05),与CD4+CD45RA+T细胞相对计数呈明显负相关(r=-0.270,P<0.01);与CD38+T细胞绝对计数呈正相关(r=0.250,P<0.05);与HAART持续治疗时间无相关性。B、C组的CD3+T细胞绝对计数明显高于A组(P<0.01);C组的CD8+T细胞绝对计数高于B组的(P<0.05);B、C组的CD4+CD28+T细胞绝对计数和相对计数明显高于A组(P<0.01),C组的CD4+CD28+T细胞绝对计数高于B组(P<0.05);B、C组的CD4+CD45RA+T细胞、CD4+CD45RO+T细胞绝对计数明显高于A组(P<0.01),C组的CD4+CD45RA+T细胞、CD4+CD45RO+T细胞绝对计数高于B组(P<0.05),B、C组的CD4+CD45RO+T细胞相对计数高于A组(P<0.05);B、C组的CD8+CD38+T细胞绝对计数低于A组(P<0.05),B组的CD8+CD38+T细胞相对计数低于A组(P<0.05);C组的CD38+T细胞绝对计数高于A组(P<0.05)。A、B、C组的HIV-1前病毒DNA的log拷贝数分别为3.561±0.297 9,3.605±0.277 6,3.434±0.289 1(copies/ml),3组间无显著性差异(P>0.05)。结论:经过HAART治疗后HIV-1前病毒DNA可能处于稳定状态,HIV-1前病毒DNA拷贝数只是某些T细胞亚群数量改变的原因之一。     

人尿激肽原酶治疗非心源性缺血性脑卒中的疗效及其对免疫功能的影响

为探讨人尿激肽原酶对非心源性缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)的疗效及其对免疫功能的影响,本研究以2013年2月至2016年3月期间重庆市第六人民医院诊治的82例非心源性IS患者为研究对象,依据治疗方法的不同将患者分为对照组(常规基础治疗组)和观察组(常规基础治疗+人尿激肽原酶组),每组各41例。分别利用美国国立卫生研究院脑卒中量表(national institutes of health stroke scale,NIHSS)、Barthel指数和长谷川简易智能量表(Hasegawa dementia scale,HDS)评估两组患者的临床治疗效果,同时采用速率散射免疫比浊法和流式细胞术检测免疫相关指标。研究结果显示,治疗后两组患者的NIHSS评分均明显降低,而Barthel指数和HDS评分则显著升高(P0.05);观察组患者的NIHSS得分明显低于单独组,Barthel指数和HDS评分则显著高于对照组,差异均具有统计学意义(P0.05);治疗后,两组患者CD4+T细胞(%)、CD4+T细胞/CD8+T细胞和Treg/CD4+T细胞的水平显著增加,而CD8+T细胞(%)、Th1细胞、Th2细胞百分比、Th1细胞/Th2细胞和Th17细胞/CD4+T细胞的水平明显降低(P0.05);观察组患者上述指标的改善幅度均明显优于对照组,差异均具有统计学意义(P0.05);两组患者CD3+T细胞(%)、IgA、IgM、IgG、补体C3和C4等水平之间的比较均无显著差异(P0.05)。综上,本研究发现人尿激肽原酶可显著改善非心源性IS患者的神经缺损功能,促进T细胞相关免疫功能的恢复,但对体液免疫功能影响较小。     

卡介苗联合Poly I:C接种对新生期小鼠脾脏T细胞的影响

目的 研究卡介苗(BCG)联合Poly I:C新生期接种对小鼠脾脏T细胞功能亚群发育的影响.方法 新生清洁级BALB/c小鼠32只,分4组:对照组、BCG组、Poly I:C组、BCG和Poly I:C联合接种组,新生期接种4周后取脾细胞用流式细胞仪检测CD3+ CD8+ IFN-γ+、CD3+ CD8- IFN-γ+、CD3+ CD8+ IL-4+ 、CD3+ CD8- IL-4+、CIM+ Foxp3+ T细胞的比例,其分别代表Tc1、TH1、Tc2、TH2和调节性T细胞(Treg)亚群.结果 BCG组、Poly I:C组、BCG和Poly I:C联合接种组TH1、Tc1细胞比例明显高于对照组(P＜0.05或P＜0.01),3个接种组间比较差异无统计学意义;Tc2、TH2和Treg比例各组间比较差异没有统计学意义;3个接种组TH1/TH2和总IFN-γ/IL-4比值明显高于对照组(P＜0.05或P＜0.01),联合接种组TH1/TH2比值高于BCG组(P＜0.05),Tc1/Tc2比值各组间差异没有统计学意义;CD4+ Foxp3+ T细胞比例各组间比较差异没有统计学意义.结论 新生期BCG和Poly I:C接种均能促进TH1、Tc1细胞亚群的发育,提高TH1/TH2比值,其联合接种在TH1/TH2水平可能具有一定的协同作用,但不能影响CD4+ Foxp3+ Treg细胞的比例.     

原发性肾病综合征患儿外周血Th17与CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞的水平

目的:观察原发性肾病综合征(PNS)患儿外周血Th17细胞和CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞(Treg)及其相关因子的水平和功能,初步探讨其在儿童PNS发病中的作用。方法:PNS患儿分为单纯型肾病(SNS)20例、肾炎性肾病(NNS)15例;同时以20例健康体检儿童作为对照组。采用流式细胞术(FCM)检测外周血单个核细胞(PBMC)中Th17细胞和Treg细胞比例;Real-time PCR法检测PBMC中RORC、IL-23p19和Foxp3 mRNA的表达;ELISA分别检测血清中IL-1β、IL-6、TGF-β1的水平。结果:SNS、NNS组患儿Th17细胞及RORC、IL-23p19 mRNA、IL-1β、IL-6的水平均明显高于正常组(P0.05),且NNS组患儿以上指标明显高于SNS组(P0.05);SNS、NNS组患儿Treg细胞、Foxp3 mRNA和TGF-β1水平的表达明显低于正常组(P0.05),其中两组疾病患儿血清TGF-β1的水平无统计学意义(P0.05),其余指标NNS患儿均明显低于SNS组(P0.05)。结论:Th17/Treg细胞功能失衡可能在儿童PNS的发病中起到重要作用,其失调程度可能与PNS的临床表现、对激素的敏感性、病理类型、及预后有关。     

外周血CD4~+CD25~+Treg细胞及血清25-(OH)D_3水平在学龄前儿童喘息疾病中的临床意义

研究外周血CD4+CD25+Treg细胞和血清25-(OH)D3水平在学龄前儿童喘息性疾病中的临床意义。74例喘息组学龄前儿童和20例正常对照组学龄前儿童,其中喘息组根据有无特应征进行组内分组(特应征组和非特应征组)。采用流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+Treg细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、T细胞及B细胞的百分率,酶联免疫法检测血清维生素D活性代谢产物25-(OH)D3浓度。喘息组外周血CD4+CD25+Treg细胞(5.81±2.84)明显低于正常对照组外周血CD4+CD25+Treg细胞(7.71±2.45)水平,差异有统计学意义(P<0.05);喘息组组内比较,特应征组外周血CD4+CD25+Treg细胞(5.18±3.17)低于非特应征组(6.55±2.23,P<0.05);与正常对照组外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、T细胞及B细胞(22.13±5.79;34.53±5.42;9.92±2.95;65.84±4.98;20.87±4.06)比较,喘息组CD8+T细胞(29.51±8.43)、T细胞(60.76±9.48)明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),B细胞(26.86±8.73)高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而CD4+T细胞、NK细胞在两组之间比较无统计学意义;特应征组与非特应征组相比两组内之间外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、T细胞及B细胞均无统计学意义;喘息组血清25-(OH)D3明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而在特应征组与非特应征组两组内比较无统计学意义。外周血CD4+CD25+Treg细胞及血清25-(OH)D3水平的降低、细胞和体液免疫调节功能的紊乱,可能参与了儿童喘息性疾病的发病机制。     

血液透析对终末期肾病合并HBV病毒感染患者免疫功能的影响

目的:探讨了血液透析对终末期肾病合并HBV病毒感染患者免疫功能的影响。方法:随机选取2011年6月至2013年6月期间我院接收救治的50例终末期肾病合并HBV病毒感染患者作为观察组,给予持续性血液透析治疗,同时选取50例单纯终末期肾病患者作为对照组,与观察组给予相同的持续性血液透析治疗方案。分别对两组患者治疗前后24 h尿蛋白量、血清白蛋白、尿素氮、肌酐进行分析;采用流式细胞术分析两组患者治疗前后外周血调节性T淋巴细胞比例和CD8+T淋巴细胞比例变化,同时对穿孔素/颗粒酶B进行分析。结果:经过透析治疗后,两组患者临床症状及实验室指标均较治疗前有显著性改善,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后临床症状和实验室指标比较无统计学意义(P>0.05)。对照组患者治疗后免疫功能与治疗前相比,无明显改变(P>0.05);观察组患者治疗前调节性T淋巴细胞(Treg细胞)比例和CD8+T淋巴细胞比例与对照组相比呈显著性升高趋势(P<0.05);治疗前观察组患者外周血中T细胞活化分子穿孔素/颗粒酶B表达率较对照组高(P<0.05),经过治疗后,Treg细胞和CD8+T淋巴细胞比例均显著下降(P<0.05),穿孔素/颗粒酶B表达率呈显著下降趋势(P<0.05)。结论:血液透析能够显著改善合并HBV病毒感染患者的免疫功能。     

成人隐匿性自身免疫糖尿病与调节性T细胞及相关基因Foxp3表达关系

目的探讨成人隐匿性自身免疫糖尿病与调节性T细胞(Treg)及相关基因Foxp3表达关系。方法采集LADA组、T1DM组、T2DM组和正常对照组新鲜外周血,密度梯度分离单个核细胞,流式细胞术检测4组CD3、CD4、CD25 T淋巴细胞亚群数量,计算Treg数量,RT-PCR检测转录因子Foxp3 mRNA的表达水平。结果 LADA组和T1DM组外周血CD4+T细胞明显高于T2DM组和正常对照组(P<0.05)。LADA组外周血Treg细胞高于T1DM组(P>0.05),明显低于T2DM组和正常对照组(P<0.05)。T1DM组外周血Treg细胞明显低于T2DM组和正常对照组(P<0.01),T2DM组和正常对照组之间无统计学差异(P>0.05)。LADA组Foxp3 mRNA明显高于T1DM组(P<0.05),明显低于T2DM组和正常对照组(P<0.05)。T1DM组Foxp3 mRNA明显低于T2DM组和正常对照组(P<0.01),T2DM组和正常对照组之间无明显统计学差异(P<0.05)。结论 LADA患者Treg细胞数量和活性降低,可能是其发病机制之一。     

IL‐23 Activated γδ T Cells Affect Th17 Cells and Regulatory T Cells by Secreting IL‐21 in Children with Primary Nephrotic Syndrome

This study (1) analysed the percentage of γδ T cells, γδ T cell subsets, Th17 cells and regulatory T cells (Treg cells) and (2) determined the role of IL ‐23 in primary nephrotic syndrome (PNS ) patients with active disease and in remission. Eighty‐four patients with PNS and 51 healthy age‐matched controls were included in this study. The percentage of γδ T cells, γδ T cell subsets, Th17 cells and Treg cells in peripheral blood mononuclear cells (PBMC s) were analysed by fluorescence‐activated cell sorting. PMBC s from PNS patients with active disease were cultured in the presence of IL ‐23, IL ‐23 and an IL ‐23 antagonist, or IL 23 and an anti‐IL ‐21 monoclonal antibody (mA b). The percentage of γδ T cells, IL ‐23R⁺ γδ T cells and IL ‐17⁺ γδ T cells were significantly increased in PNS patients with active disease. There was a positive correlation between the percentage of γδ T cells, IL ‐23R⁺ γδ T cells, IL ‐17⁺ γδ T cells and the Th17/Treg ratio. IL ‐23 increased the percentage of γδ T cells and Th17 cells and decreased the percentage of Treg cells in PBMC s isolated from PNS patients with active disease. Anti‐IL ‐21 mA b reduced the percentage of γδ T cells and Th17 cells, but increased the percentage of Treg cells. γδ T cells, IL ‐17⁺ γδ T cells and IL ‐23R⁺ γδ T cells may be involved in the pathogenesis of paediatric PNS by modulating the balance of Th17/Treg cells. γδ T cells may cause an imbalance in Th17/Treg cells by secreting IL ‐21 in the presence of IL ‐23.     

腋路臂丛3种神经定位方法阻滞效果的比较

目的　采用随机对照的方法对变体位、变角度两点法、传统一点法、神经刺激器法这3种定位方法应用于腋路臂丛阻滞的效果进行比较。 方法　75例拟行前臂和手部手术的病人被随机分为变体位、变角度两点法定位组（VTP组）;传统的腋动脉旁一点法定位组（TOP组）;周围神经刺激器定位组（PNS组）,每组25例。局麻药皆用0.375%盐酸罗哌卡因45 ml进行腋路臂丛阻滞,阻滞后观察对肘部远端5支神经支配区域的感觉和运动阻滞效果,比较3组在臂丛阻滞成功率、时效等方面的差异。 结果　VTP组、PNS组的阻滞成功率高于TOP组(96%、100%对72%, P<0.01);VTP组和PNS组的麻醉起效时间（T2）短于TOP组(P<0.01);VTP组手术等待时间(T3)短于TOP组和PNS组(P<0.05);PNS组操作时间(T1)长于TOP组、VTP组(P<0.05)。 结论　变体位、变角度两点法腋路臂丛阻滞是一种良好的阻滞方法,弥补了传统一点法的不足,能给手和前臂手术提供快捷、简单、有效又相对经济的麻醉。     

原发性肾病综合征并发急性肾损伤患者血清及肾组织中NGAL的表达及意义

 目的：检测原发性肾病综合征（PNS）患者血清及肾组织中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）的水平,探讨PNS合并急性肾损伤（AKI）时患者血清及肾组织中NGAL浓度的变化。方法：72例PNS患者根据病理结果分为：(1) PNS合并急性肾小管坏死（ATN）组15例,其中微小病变（MCD）合并ATN 10例,系膜增生（MsPGN）合并ATN 5例;(2) PNS不合并ATN组57例,其中MCD组24例,膜性肾病（MN）组23例和MsPGN组10例。15例健康体检者的血液及5例正常肾组织作为正常对照组。采用ELISA检测血清NGAL的水平;采用免疫组化法检测肾组织中NGAL的表达。结果：(1) PNS患者血清NGAL水平及肾组织中NGAL表达明显高于正常对照组（P<0.05）,其中MN组较MCD组和MsPGN组血清NGAL水平明显升高（P<0.05）。(2) MCD合并ATN组和MsPGN合并ATN组血清NGAL水平及肾组织中NGAL表达较不合并ATN组显著升高（P<0.05）。(3)血清中NGAL与24 h尿蛋白定量、血尿素氮和血肌酐呈正相关（P<0.05）,与血清白蛋白和β2微球蛋白无明显相关性（P>0.05）;血清中NGAL与肾组织NGAL的表达呈正相关（P<0.01）。结论：血清NGAL可能作为判断原发性肾病综合征并发急性肾损伤的早期、无创、敏感指标。     

三七总皂甙对慢性低氧大鼠右心室心肌细胞钙电流的影响

目的:探讨长期应用三七总皂甙对慢性常压低氧大鼠右心室心肌细胞钙电流的影响。方法:采用全细胞膜片钳方法分别记录并比较正常对照组、慢性低氧组、慢性低氧加三七总皂甙组大鼠单个右心室心肌细胞钙电流和电流-电压关系曲线。结果:正常对照组、慢性低氧组、慢性低氧加三七总皂甙组细胞钙电流峰值分别为(571.1±145.9)pA,(835.1±194.1)pA,(526.3±152.6)pA。缺氧组显著大于另两组(P＜0.05)。结论:应用三七总皂甙能阻滞慢性低氧引起的钙内流增高。     

三七皂苷联合骨髓间充质干细胞移植促进急性脑损伤的恢复

BACKGROUND:Studies have shown that Panax notoginseng saponins (PNS) has extensive pharmacological basis for the treatment of cerebral ischemic injury, and animal experiments for treatment of brain injury by bone marrow mesenchymal stem cell transplantation are ongoing. However, little is reported about the combined use of PNS and bone marrow mesenchymal stem cell transplantation. OBJECTIVE:To investigate the effect of PNS combined with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation on traumatic brain injury in rats. METHODS:Traumatic brain injury models were made in 60 Sprague-Dawley rats by hydraulic shock method. Then, model rats were randomized into model group, cell transplantation group receiving bone marrow mesenchymal stem cell transplantation and combined treatment group undergoing PNS combined with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation. Nerve function recovery of the rats and protein expression of nerve growth factor in the brain tissue were evaluated and detected by Bederson scoring and western blot methods, respectively. Morphological changes of the brain tissue and apoptosis in cortical neurons were observed and detected by hematoxylin-eosin staining and TUNEL, respectively. RESULTS AND CONCLUSION:Highest Bederson score was found in the model group, followed by the cell transplantation group and combined treatment group (P < 0.05), while the protein expression of nerve growth factor was ranked as follows: the combined treatment group > the cell transplantation group > the model group (P < 0.05). Inflammatory infiltration and brain edema in the brain were relieved markedly in the combined treatment group compared with the other two groups, and the number of apoptotic neurons was significantly reduced as well. Our findings suggest that PNS combined with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation can promote neurological recovery from traumatic brain injury by increasing the expression of nerve growth factor and reducing neuronal apoptosis.     

三七总甙对实验性高脂血症大鼠脾脂质沉积的干预

目的观察三七总甙(PNS)对实验性高脂血症大鼠脾的脂质沉积干预。方法30只SD大鼠随机分为空白对照组、高脂组、PNS组。空白对照组不予任何处理;高脂组与PNS组则每天以脂肪乳剂灌胃,PNS组另加以每日PNS溶液200mg·kg-1·d-1灌胃。20周后处死动物取脾脏对比观察。结果正常组大鼠脾表面色泽暗红,镜下组织未见脂肪细胞;模型组大鼠脾表面色淡黄,镜下见被膜下大量脂肪细胞聚集成团;PNS组脾被膜下脂肪细胞则明显减少。结论三七总甙可减少脂肪细胞在高脂血症模型大鼠脾的沉积,从而减轻对机体最大免疫器官的损害。     

三七总皂甙对急性脑梗死重组组织型纤溶酶原激活物静脉溶栓后缺血再灌注损伤及出血性转化的影响

目的:探讨三七总皂甙(panax notoginseng saponins,PNS)对急性脑梗死重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue plasminogen activator,rt-PA)静脉溶栓后缺血再灌注损伤及出血性转化(hemorrhagic transformation,HT)的影响.方法:回顾性分析131例早期(发病后就诊时间＜4.5 h)急性脑梗死患者,其中PNS+rt-PA静脉溶栓治疗(PNS组)66例和rt-PA静脉溶栓治疗(对照组)65例.两组均常规治疗,PNS组中PNS注射液400 mg+5％葡萄糖注射液500 mL,1次/d,静脉滴注.观察两组治疗24 h和15d后的治疗效果,用试剂盒检测两组患者血液中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、细胞纤维连接蛋白(human cellular fibronectin,c-Fn),CT检测两组HT情况,用美国国立卫生研究院卒中量表(NIH Stroke Scale,NIHSS)和Barthel指数评价其神经功能.结果:溶栓后24 h,与溶栓前相比,两组MDA,MMP-9,c-Fn及Barthel指数均显著升高,SOD及NIHSS评分均显著降低,PNS组的各项指标较对照组明显改善(t=2.54,2.50,2.52,2.55,2.55,2.57,均P＜0.05).治疗15d后,两组患者的各项指标(MDA,SOD,MMP-9,c-Fn,NIHSS评分及Barthel指数)较治疗前均显著改善(均P＜0.01),且PNS组较对照组显著改善(t=4.61,4.98,4.46,4.68,4.38,5.87,均P＜0.01);CT检测显示PNS组患者出血性转化率显著低于对照组(x2=4.15,P＜0.05).结论:PNS减轻急性脑梗死患者rt-PA静脉溶栓后缺血再灌注损伤可能与降低溶栓后出血转化率有关.     

三七总皂苷通过Notch3/Hes-1/p27Kip1信号通路抑制低氧性肺动脉高压大鼠肺血管重构

目的：探讨Notch3/Hes-1/p27^Kip1信号通路与低氧性肺动脉高压大鼠肺血管重构的关系及三七总皂苷(PNS)的干预作用。方法：将SPF级雄性SD大鼠采用随机编号分为3组：正常组(C组),低氧组(H组)和PNS组(P组),检测肺动脉压,称量右心室重量,HE染色和Masson染色观察肺血管重构情况,RT-qPCR检测大鼠肺组织中Notch3、Hes-1和p27^Kip1的mRNA表达水平,Western blot检测大鼠肺组织中Notch3、Hes-1、p27^Kip1,增殖细胞核抗原(PCNA)和caspase-3的蛋白水平。结果：与C组相比,H组大鼠的肺动脉压和右心室肥厚指数明显增加;肺血管重构现象明显;Notch3、Hes-1和PCNA的蛋白水平增加,p27^Kip1和caspase-3的蛋白水平降低;Notch3和Hes-1的mRNA表达增加,p27^Kip1的mRNA表达降低(P<0.05)。经PNS干预后,与H组相比,P组大鼠的肺动脉压和右心室肥厚指数降低;肺血...     

三七总皂甙降低兔肺缺血再灌注损伤和抑制细胞凋亡

 目的: 探讨细胞凋亡与肺缺血再灌注损伤的关系以及三七总皂甙的作用及机制。方法: 健康日本大耳白兔84只,随机分为对照组、肺缺血再灌注1、3、5h组和相应三七总皂甙干预组。复制肺缺血再灌注损伤模型。用原位缺口末端标记(TUNEL)法、聚丙烯酰胺凝胶电泳观测肺组织细胞凋亡,原位杂交技术检测肺组织细胞Fas/FasL系统和Caspase-3基因表达。结果: 肺缺血再灌注组肺组织细胞凋亡指数(肺缺血再灌注5h组:22.08±1.93;对照组:2.04±0.67)、Fas/FasL和Caspase-3基因表达(肺缺血再灌注5h组:0.241±0.029;对照组:0.121±0.015)均显著高于对照组(P<0.01),并出现电泳梯形条带结构;三七总皂甙干预组Fas/FasL mRNA及其Caspase-3的表达(三七总皂甙干预5h组:0.199±0.020;肺缺血再灌注5h组:0.241±0.029)显著低于缺血再灌注组(P<0.01),肺组织细胞凋亡指数(三七总皂甙干预5h组:12.58±1.82;肺缺血再灌注5h组:22.08±1.93)也显著低于缺血再灌注组(P<0.01),梯形条带结构基本消失。肺组织细胞凋亡指数分别与Caspase-3 mRNA及Fas/FasL mRNA之间均呈显著正相关(P<0.01)。结论:三七总皂甙可能通过抑制Fas/FasL系统的激活,阻遏肺组织细胞凋亡,从而减轻肺缺血再灌注损伤。     

三七总皂甙对肺缺血再灌注损伤时细胞凋亡及Fas/FasL的影响

目的：探讨细胞凋亡与肺缺血再灌注损伤的关系以及三七总皂甙的作用及机制。 方法: 健康日本大耳白兔84只，随机分为对照组、肺缺血再灌注1、3、5 h组和三七总皂甙干预1、3和5 h组。复制肺缺血再灌注损伤模型。采用原位缺口末端标记（TUNEL）法观测肺组织细胞凋亡指数，免疫组化和原位杂交技术检测肺组织细胞Fas/FasL系统蛋白和基因表达的变化。 结果: 肺缺血再灌注组肺组织细胞凋亡指数和Fas/FasL蛋白及基因表达均显著高于对照组（均P<0.01）。三七总皂甙干预组Fas/FasL mRNA及其蛋白质的表达显著低于缺血再灌注组（P<0.01），肺组织细胞凋亡指数也显著低于缺血再灌注组（P<0.01）。肺组织细胞凋亡指数分别与Fas/FasL蛋白和Fas/FasL mRNA之间均呈显著正相关（r分别=0.540,0.658,0.668,0.686;均P<0.01）。 结论: Fas/FasL系统活化启动的肺组织细胞凋亡可能参与了肺缺血再灌注损伤的发生。三七总皂甙可能通过抑制Fas/FasL系统的激活，阻遏肺组织细胞凋亡，从而减轻肺缺血再灌注损伤。