长链非编码RNA ANRIL对膀胱尿路上皮癌细胞侵袭能力的作用

目的检测膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)中长链非编码RNA Antisense Noncoding RNA在INK4 Locus(ANRIL)基因的表达,研究ANRIL基因对BUC细胞侵袭能力的调控作用。方法实时定量PCR法检测84例BUC组织和T24细胞系中ANRIL基因的表达。统计分析ANRIL基因在BUC组织的表达与BUC临床病理因素的相关性。ANRIL抑制剂(ss-ANRIL)沉默T24细胞中ANRIL的表达,Transwell小室法检测T24细胞的侵袭能力。结果与癌旁正常组织相比,ANRIL基因在BUC组织的表达显著上调。ANRIL基因在T24细胞系中的表达显著高于其在人膀胱上皮永生化细胞系SV-HUC-1中的表达。而且,ANRIL基因在高病理分级、侵袭肌层以及淋巴结转移阳性的BUC组织中的表达更高。转染ss-ANRIL能够显著抑制T24细胞中ANRIL的表达,而ANRIL沉默能够显著抑制T24细胞的侵袭能力。结论长链非编码RNA ANRIL在BUC组织及细胞系中高表达,且于BUC的侵袭转移相关,其表达沉默能够抑制BUC细胞的侵袭能力。     

沉默TUG1基因上调膀胱尿路上皮癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性

目的研究长链非编码RNA Taurine Up-Regulated 1(TUG1)基因调控膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)细胞对化疗药物顺铂(CDDP)的敏感性。方法实时定量PCR法检测TUG1基因在CDDP耐药的BUC细胞T24/CDDP中的表达。RNA干扰沉默T24/CDDP细胞中TUG1的表达。增强型CCK8法检测T24/CDDP细胞的增殖活力以及对CDDP的敏感性。Annexin V-FITC/PI双染法检测T24/CDDP细胞的凋亡。结果与T24细胞相比,TUG1基因在T24/CDDP细胞中的表达显著上调。TUG1沉默能够提高T24/CDDP细胞对CDDP的敏感性,并增强CDDP诱导的细胞毒效应,即抑制T24/CDDP细胞的增殖活力,促进细胞凋亡。结论长链非编码RNA TUG1基因与BUC的化疗耐药相关,其表达沉默能够提高BUC细胞对CDDP的敏感性。     

MTSS1基因在膀胱癌中表达下调促进T24细胞侵袭转移

目的筛查膀胱浸润性尿路上皮癌差异表达的基因,并探讨MTFSS1基因对膀胱癌T24细胞侵袭能力的影响。方法应用基因芯片结合生物信息学软件筛查膀胱浸润性尿路上皮癌差异表达的基因,并通过荧光定量PCR和Western Blot进行验证;通过转染技术,应用MTT和Transwell小室法分别检测MTSS1基因对膀胱癌T24细胞增殖和侵袭能力的影响。结果膀胱浸润性尿路上皮癌和其癌旁组织表达差异2倍以上的基因有1392个,荧光定量PCR和Westem Blot显示MTSS1在癌组织中较在癌旁组织中表达降低,两者差异35倍,P=0.0065,主要在趋化因子信号转导通路中发挥重要作用。转染结果显示MTSS1基因高表达列T24细胞增殖能力没有影响,而能明显抑制T24细胞的侵袭转移能力(P0.05)。结论 MTSS1基因在膀胱浸润性尿路上皮癌中表达下调是其促进该肿瘤侵袭转移的重要因素之一。     

干扰HOXA9基因表达对BTT739细胞增殖、迁移和侵袭的影响北大核心CSCD

目的探讨同源盒基因HOXA9表达对小鼠膀胱尿路上皮癌细胞系BTT739细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法免疫组化检测膀胱尿路上皮癌以及癌旁正常组织临床标本中HOXA9基因的表达情况;采用sh-RNA技术干扰BTT739细胞中HOXA9基因的表达后,进行克隆形成、CCK8、流式细胞术、Transwell和划痕等实验检测BTT739细胞增殖、凋亡、迁移以及侵袭等生物学特性的变化,并通过Western blot检测上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)特征因子E-cadherin、Vi⁃mentin和Snail的表达。结果膀胱尿路上皮癌组织中HOXA9基因的表达高于癌旁正常组织。sh-RNA敲低BTT739细胞中的HOXA9基因后,细胞增殖、迁移和侵袭能力显著下降,而细胞早期凋亡百分率增高,G1、G2期比例下降,S期升高;此外,EMT特征因子E-cadherin表达增强,Vimentin和Snail的表达下降。结论HOXA9基因具有促进小鼠膀胱尿路上皮癌细胞系BTT739细胞增殖、迁移和侵袭能力的作用,是膀胱尿路上皮癌潜在的免疫治疗靶点,其机制可能涉及EMT机制。     

肝癌衍生生长因子与膀胱癌转移的相关性及其对细胞侵袭能力影响

目的探讨肝癌衍生生长因子(HDGF)基因与膀胱癌转移的相关性,及其稳定表达对膀胱癌细胞侵袭能力的影响。方法应用荧光定量PCR检测原发未转移膀胱癌和原发伴转移膀胱癌组织中HDGF mRNA的表达。设计并合成HDGF特异性的siRNA,转染膀胱癌T24细胞系,检测转染后细胞侵袭能力的变化。结果原发伴转移膀胱癌组织中HDGF mRNA表达较原发未转移膀胱癌中明显上调(P0.05)。RNA干扰后,HDGF蛋白明显降低,细胞侵袭能力也随之明显降低(P0.05)。结论 HDGF基因与膀胱癌的转移相关,其表达下调能够抑制T24细胞的侵袭能力。     

长链非编码RNA SNHG5在胰腺癌中的表达及作用研究

目的 研究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因5(lncRNA SNHG5)在胰腺癌组织中的表达水平及其临床意义,并探讨lncRNA SNHG5在胰腺癌中的生物学作用.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测lncRNA SNHG5在42例胰腺癌组织及其邻近的非癌组织中的相对表达量,并分析胰腺癌组织中SNHG5的相对表达量与患者临床病理参数的关系.SNHG5 siRNA转染胰腺癌细胞系PANC-1,分为si-NC组和si-SNHG5组,采用qRT-PCR检测SNHG5 siRNA转染效果.成功沉默SNHG5的表达后,采用CCK8实验检测细胞的增殖能力,Transwell实验检测细胞的转移能力,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞中β-catenin、cMYC和BCL-2蛋白的表达情况.结果 qRT-PCR结果 显示lncRNA SNHG5在胰腺癌组织中的相对表达量高于非癌组织(P<0.05),其相对表达量与TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05).沉默PANC-1细胞中lncRNA SNHG5的表达后,细胞的增殖和转移能力下降,细胞凋亡增多,细胞中β-catenin、cMYC和BCL-2蛋白的表达减少.结论 lncRNA SNHG5 在胰腺癌中表达上调,且其表达水平与TNM分期和淋巴结转移有关.lncRNA SNHG5 可能是通过调控β-catenin、cMYC 和 BCL-2 蛋白的表达促进胰腺癌的发生发展.     

lncRNA HOXA11-AS 对膀胱尿路上皮癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制研究

目的:研究lncRNA HOXA11-反义RNA(HOXA11-AS)对膀胱尿路上皮癌J82细胞增殖、侵袭迁移的影响及与微小RNA-515-5p(miR-515-5p)之间的调控关系。方法:qRT-PCR检测膀胱尿路上皮癌组织、癌旁组织和J82细胞中HOXA11-AS和miR-515-5p的转录水平,MTT法和Transwell实验检测J82细胞的增殖、迁移和侵袭能力,Western blot检测细胞中Cyclin D1、p21、p27、MMP-2、MMP-9和MMP-14的表达,双荧光素酶报告系统验证HOXA11-AS和miR-515-5p的结合关系。结果:与正常癌旁组织相比,膀胱尿路上皮癌组织中HOXA11-AS含量显著升高(P<0.05),miR-515-5p的含量显著下降(P<0.05);干扰HOXA11-AS表达可以抑制膀胱尿路上皮癌J82细胞增殖、迁移和侵袭,使Cyclin D1、MMP-2、MMP-9和MMP-14表达下降,p21和p27表达升高;过表达miR-515-5p抑制J82细胞增殖、迁移和侵袭;HOXA11-AS靶向负调控miR-515-5p的表达;抑制miR-515-5p表达可逆转干扰HOXA11-AS表达对J82细胞增殖、迁移和侵袭的作用。结论:LncRNA HOXA11-AS通过靶向miR-515-5p抑制膀胱尿路上皮癌J82细胞增殖、迁移和侵袭。LncRNA HOXA11-AS是膀胱尿路上皮癌的潜在靶点。     

miR-1在膀胱尿路上皮癌中的表达及其功能

目的研究miR-1在膀胱尿路上皮癌中的表达和临床意义,探讨miR-1在膀胱癌发病的作用。方法应用real-time PCR方法分别检测60例配对的新鲜膀胱尿路上皮癌及癌旁正常组织中miR-1的表达,统计分析miR-1表达差异与临床病理因素间的关系,应用CCK8法检测miR-1对膀胱癌T24细胞增殖能力的影响。结果miR-1在膀胱癌组织较癌旁正常组织中表达水平显著降低,而且肌层浸润性膀胱癌(T2-T4)患者组织中的miR-1表达显著低于非肌层浸润性膀胱癌组织(Ta-T1)。miR-1异常低表达与膀胱癌复发或转移、临床分期及病理分级密切相关,miR-1能够抑制膀胱癌T24细胞的增殖能力。结论miR-1在膀胱癌的发病过程中可能发挥着重要作用,可能成为未来膀胱癌治疗的新靶点及预后预测因子。     

长链非编码RNA UCA1对胰腺癌细胞系侵袭转移的影响

目的探讨尿路上皮癌相关1(UCA1)在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌细胞侵袭转移的影响。方法用荧光定量PCR检测11例胰腺癌组织和配对的癌旁组织及5种胰腺癌细胞系中UCA1的表达,通过RNA干扰技术降低胰腺癌细胞系Bx PC-3的UCA1水平,用Transwell侵袭实验和划痕实验观察Bx PC-3细胞的侵袭和迁移能力,Western blot检测MMP-2和MMP-9的蛋白水平。结果胰腺癌组织的UCA1水平高于相应的癌旁组织(P0.05),UCA1差异性表达于5种胰腺癌细胞系;干扰UCA1后,Bx PC-3细胞的MMP-2和MMP-9的蛋白水平均降低(P0.01),侵袭能力和迁移能力明显减弱(P0.01)。结论 UCA1在胰腺癌中高表达,下调UCA1通过降低MMP-2和MMP-9的表达减弱胰腺癌细胞系Bx PC-3的体外侵袭转移能力。     

转移相关蛋白1和埃兹蛋白在膀胱尿路上皮癌中的表达

目的 检测转移相关蛋白1(MTA-1)、埃兹蛋白(Ezrin)在膀胱尿路上皮癌(BUC)组织及正常膀胱黏膜组织中的表达,探讨两者与患者临床病理及预后之间的关系.方法 采用免疫组化法检测65例手术切除的BUC组织和30例正常膀胱黏膜组织中MTA-1和Ezrin蛋白表达,分析MTA-1和Ezrin在BUC中的表达与患者临床病理参数的关系,分析MTA-1和Ezrin表达之间的相关性和对患者预后的影响.结果 65例BUC组织中MTA-1和Ezrin阳性表达率分别为72.3%(47/65)和89.2%(58/65),30例正常膀胱黏膜组织MTA-1和Ezrin阳性表达率均为0,差异有统计学意义(均P＜0.01).BUC组织中,MTA-1表达与临床分期、肿瘤病理分级、有无转移、是否复发有关(均P＜0.01),Ezrin表达与临床分期、肿瘤有无转移、是否复发有关(均P＜0.01),MTA-1与Ezrin的表达呈正相关(r=0.742,P＜0.01).MTA-1和Ezrin联合表达组的无病生存率明显低于联合阴性表达组(P＜0.01).结论 MTA-1和Ezrin蛋白高表达与BUC发生发展、侵袭和转移有关.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.

     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

局部注射辛伐他汀对骨质疏松大鼠股骨髁骨小梁的改建效应

背景：局部注射具有成骨作用的辛伐他汀,可显著增加骨质疏松大鼠股骨颈及股骨髁部的骨密度及力学强度,分析局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。 目的：进一步研究骨质疏松大鼠股骨内局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。为将辛伐他汀应用于临床骨质疏松局部治疗提供实验基础。 方法：18只雌性SD大鼠双侧卵巢切除后3个月,制备大鼠骨质疏松模型。实验大鼠随机数字表法均分为3组,分别在实验大鼠的右侧股骨髓腔内单次注射辛伐他汀溶液5 mg、10 mg,对照组单纯注射空白载体。分别在注射后1个月处死大鼠并取材。Micro-CT扫描并定量分析骨组织形态变化。 结果与结论：给药后1个月,Micro-CT扫描结果显示,辛伐他汀治疗组的骨微结构参数如骨皮质厚度、骨小梁密度及连接率明显优于对照组。说明疏松骨骼单次注射小剂量辛伐他汀可显著促进股骨髁部骨小梁改建,改善骨骼微结构,可为强化局部、防治骨质疏松骨折的新选择进一步提供实验基础。