NF—KBp65、VEGF-C及受体VEGFR-3在乳腺癌组织中的表达

目的检测乳腺癌组织内NF．KBp65、VEGF—C及受体VEGFR-3的表达水平,并观察它们与临床病理特征的关系,为乳腺癌的早期诊断、治疗提供依据。方法采用免疫组化染色法检测50例乳腺癌组织及10癌旁组织内NF。KBp65、VEGF—C及受体VEGFR-3的表达,并分析与临床病理因素的关系。结果乳腺癌组织内NF．KBp65蛋白表达的阳性率为76．0％,明显高于癌旁对照组织30．0％,二者相比差异显著（尸〈0．05）;乳腺癌组织内VEGF—C蛋白表达的阳性率为84．0％,明显高于癌旁对照组织20．0％,二者相比差异显著（P〈0．05）;乳腺癌组织内VEGFR-3蛋白表达的阳性率为88．0％,明显高于癌旁对照组VEGFR-3阳性表达率20．0％,两者相比差异显著（P〈O．05）;乳腺癌组织内NF—KBp65、VEGF—C及受体VEGFR-3三者的表达存在显著相关性（P〈O．05）,均与肿瘤淋巴转移密切相关（P〈0．05）,而与病人年龄、肿瘤大小无关（Jp〉0．05）。结论乳腺癌中NF—KBp65的表达可能上调VEGF—C的表达,进而导致肿瘤周围淋巴管增生、扩张,促进肿瘤细胞向区域淋巴结转移。     

新生鼠脑缺氧缺血时天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-3表达的研究

目的：探讨新生大鼠缺氧缺血脑损伤（HIBD）时皮质及海马中天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）表达的变化。方法： 分假手术组和模型（HI）组。用新生7 d的大鼠建立新生儿HIBD的模型，于缺氧后不同时点取脑，分别行病理学检查、免疫组化和半定量逆转录-聚合酶反应（RT-PCR），观察双侧皮质及海马caspase-3 蛋白及mRNA表达的程度。结果： HI组皮质及海马caspase-3 mRNA 于HI后0 h出现瞬时高表达，然后下降，6 h可检测到mRNA和蛋白同时升高，表达峰值于HI后24-48 h出现，然后下降。结论： Caspase-3参与未成熟脑HIBD后皮质及海马区神经细胞凋亡的进程。在其表达峰值出现以前，即HI后24-48 h之前，抑制caspase-3的表达，应是治疗脑损伤的适宜时机。     

大鼠坐骨神经损伤早期NF-κB和Bcl-2在脊髓运动神经元的诱导激活

目的：探讨大鼠坐骨神经损伤早期NF—KB和Bcl-2在脊髓中的表达变化。方法：健康成年sD大鼠48只，随机分为正常组、假手术组和右侧坐骨神经压榨组，动物存活不同时问（6，12，24和72h）获取L。脊髓段，用免疫组织化学方法检测脊髓内NF—KB和Bcl-2的表达变化。结果：（1）正常L4-6脊髓内，NF—KB和Bcl-2免疫阳性产物主要位于前角运动神经元胞浆内，NF—KB活化少，Bcl-2表达低；（2）损伤后双侧脊髓中NF—κB免疫阳性产物则主要位于胞核内，呈活化状态，损伤侧活化起始时问（6h）早于损伤对照侧（12h），且6、12、24hNF—κB活化细胞数明显高于对照侧（P〈0．05），72h双侧比较无明显差异（P〉0．05）。（3）损伤后6h损伤侧脊髓中Bcl-2免疫阳性反应即增强，12h达到高峰，24h下降，72h又增高；其中6、12、72h损伤侧Bcl-2免疫阳性反应灰度值与对照侧和正常组相比差别具有统计学意义（P〈0．05），而24h损伤侧与对照侧和正常组比较无统计学差异（P〉0．05）。结论：坐骨神经损伤后脊髓前角细胞中NF—κB的活化，激活了其下游抗凋亡基因Bcl-2的转录，两者可能在损伤早期参与抑制细胞凋亡，促进细胞存活和神经再生。     

脑缺氧缺血后新生大鼠海马CA1区NMDAR的表达

目的 :研究新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)后 ,海马CA1区N甲基D天门冬氨酸受体 (NMDAR)及NMDARmRNA表达的变化。方法 :建立HIBD模型 ,用免疫组化及原位杂交方法 ,检测正常对照 (NORM)组和缺氧缺血 (HI)后不同时间点 ,NMDA受体I型亚单位 (NR1)表达的阳性细胞及NR1mRNA表达的阳性细胞。结果 :HI后 2h时NR1、NR1mR NA的表达稍下降 ,2 4h开始上升 ,72h达高峰 ,与正常对照组相比较有显著意义 (P <0 .0 5 )。结论 :正常新生大鼠海马CA1区有NR1及NR1mRNA的表达 ,HI后NR1及NR1mRNA的表达上调     

羟丁酸钠对缺氧缺血后新生大鼠海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的：观察羟丁酸钠(GHB)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后海马CA1区神经元Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法：生后 7 d SD大鼠采用Rice等法，制成HIBD动物模型。新生大鼠随机分成假手术（sham）组、缺氧缺血（HI）组、GHB组。其中GHB组包括GHB50（50 mg/kg）、GHB100（100 mg/kg）、GHB200（200 mg/kg）亚组。各组在缺氧完成后 1 h、3 h、24 h、72 h 和 168 h 时点取脑切片作HE染色，用免疫组化染色观察Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果：①光镜下HE染色结果：HI组海马CA1区锥体细胞排列紊乱，锥体细胞减少，海马带宽窄不一，可见细胞肿胀和核碎裂。GHB50组和GHB100组可减轻锥体细胞层病理改变。②免疫组化染色结果：HI组缺血缺氧后1h海马CA1区 Bcl-2、Bax表达开始增强，24 h 时达到高峰，其后逐渐减弱。在GHB50组和GHB100组可使Bcl-2表达明显高于HI组（P<0.05，P<0.01），Bax表达明显低于HI组（P<0.05，P<0.05）。结论：GHB可通过对Bcl-2、Bax表达的调控抑制新生大鼠HIBD后海马CA1区神经元损伤。     

大鼠缺氧缺血脑组织AQP-4蛋白和AQP-4mRNA表达的研究

目的探讨sD大鼠缺氧缺血过程中脑组织水通道蛋白_4（aquaporin-4,AQP-4）和AQP-4mRNA的表达情况及意义。方法健康雄性sD大鼠60只,分为缺氧缺血性脑损伤（HIBD）组和对照组。HIBD组经右侧颈总动脉结扎后建立模型,对照组仅行假手术,不结扎颈总动脉缺氧。HIBD组和对照组于模型制成后0h、6h、1d．2d和3d分别处死动物,对两组动物脑组织进行病理学观察,并检测脑组织中AQP-4蛋白和AQP-4mRNA表达。结果HIBD组在模型建立后6h、1d,2d和3d均出现脑水肿并发生组织病学改变,随时间延长病理改变加重。与对照组比较,HIBD组脑组织AQP-4蛋白和AQP-4mRNA表达从HIBD后6h即开始下降,2d内下降至最低,3d出现恢复。结论AQP-4可能参与了大鼠脑内渗透平衡的维持,AQP-4表达下降可能与HIBD脑组织水肿和病理学变化的发生发展相关。     

CEPO调控新生大鼠缺氧缺血性脑损伤Bcl-2、Bax基因表达的研究

目的 观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）脑组织Bcl-2、Bax基因表达变化及氨基甲酰化促红细胞生成素（CEPO）干预对其表达的影响,探讨CEPO发挥脑保护作用的可能机制.方法 将新生7日龄SD大鼠建立HIBD模型,利用RT-PCR检测缺氧缺血和CEPO干预后2h、12h、24 h、48 h、72 h凋亡基因Bcl-2、Bax的mRNA表达的改变.结果 与假手术组相比,缺氧缺组在2h、12h、24 h、48 h、72 h脑组织中Bcl-2、Bax的表达均增加（P＜0.05）,与缺氧缺血组相比,CEPO干预组在不同时间点Bcl-2表达增加（P＜0.05）,Bax表达下降（P＜0.05）.结论 在新生大鼠HIBD中Bcl-2、Bax mRNA的表达发生改变,调控二者的表达水平可能是CEPO发挥脑保护的作用机制之一.     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤caspase-3表达与自由基损伤机制的研究

目的:研究缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠caspase-3表达与自由基损伤的机制。方法:建立7日龄新生大鼠HIBD模型,分为HIBD组和假手术组,两组分别于HI后6、12、24、48、72、96 h取脑组织,应用TUNEL法检测神经细胞凋亡,免疫组织化学法检测caspase-3蛋白的表达,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果:HIBD组神经细胞凋亡数量及caspase-3的表达量6 h开始增多,48 h达高峰,各时间点两者均显著高于假手术组(P0.05)。HIBD组MDA含量6 h增高,24 h达高峰,各时间点均较假手术组增高(P0.05)。HIBD组SOD含量6 h下降,24 h降至最低,各时间点均较假手术组降低(P0.05)。凋亡细胞数量与caspase-3蛋白表达量和MDA含量均呈正相关(r=0.748、0.654,P均0.05),与SOD含量呈负相关(r=-0.576,P0.05)。结论:HIBD时自由基损伤促进caspase-3的表达及神经细胞的凋亡。     

Apgar评分与早产儿窒息相关因素的研究

目的探讨Apgar评分与早产儿窒息相关因素的关系。方法采用同期住院的早产儿，分成三组：（1）无窒息组（Apgar评分8～10分）；轻度窒息组（Apgar评分4～7分）；重度窒息组（Apgar评分0～3分），然后分析各组与围产因素、动脉血pH值、血糖及早产儿脑损伤的关系。结果（1）重度窒息组的围产因素明显高于无窒息组和轻度窒息组（P〈0．01），而后二组则无显著差异（P〉0．05）。（2）首次动脉血气pH值≤7．2的病例，重度窒息组也显著多于无窒息组与轻度窒息组（P〈0．01），无窒息组与轻度窒息组则无显著差异（P〉0．05）。（3）重度窒息组发生严重低血糖（≤1．1mmol／L）的病例要明显高于无窒息组和轻度窒息组（P〈0．01），后二组则无显著差异（P〉0．05）。（4）出现脑损伤的情况：缺氧缺血性脑损伤（HIE）、脑室周周-脑室内出血（PIVH）及脑室周周白质软化（PVL），重度窒息组均显著高于无窒息组和轻度窒息组（P〈0．01），轻度窒息组与无窒息组则无显著差异性（P〉0．05）。结论Apgar评分评估早产儿轻度窒息时（4—7分），应考虑到各种影响因素，其准确性有一定的限度。但Apgar评分0～3时，则发生窒息的可能性大，需按窒息儿处理，以减少脑损伤的发生。     

地塞米松对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织AQP-4表达的研究

目的探讨DEX（地塞米松）对缺氧缺血性脑损伤新生鼠脑组织AQP-4表达的影响,为临床治疗新生儿缺氧缺血脑病提供实验和理论依据,揭示其发病机制,以期指导该病的早期治疗。方法将健康7日龄SD新生大鼠96只,清洁级,雌雄不限,平均体重12-18g,随机分为假手术组,HIBD组,DEX组,各组32只,分离左侧颈总动脉并结扎,吸入92%N2＋8%O2氮氧混合气体行缺氧处理3h,制成HIBD模型。假手术组只作分离左侧颈总动脉而不结扎,不作缺氧处理,不给与药物处理。DEX治疗组于建模成功后立即腹腔注射10mg/kg,假手术组及HIBD组大鼠腹腔注射等量生理盐水,上述各组均于术后6h、24h、48h、72h随机抽取8只,于麻醉下处死取脑组织,通过Western blot方法检测新生大鼠脑组织AQP-4蛋白表达及实时定量PCR检测AQP-4 mRNA的表达。结果 SD鼠在缺氧处理后出现异常行为学改变。AQP-4 mRNA及蛋白的表达在缺氧诱导后显著升高,DEX的治疗则使SD鼠异常行为的表现程度减轻,后趋于正常,且能够降低HIBD导致的AQP-4的升高。结论 DEX对HIBD的治疗具有一定的疗效。     

二丁酰环磷酰苷和氨茶碱对PC12细胞缺氧葡萄糖剥夺保护作用初探

目的探讨二丁酰环磷酰苷（db—cAMP）和氨茶碱分别作用以及联合用药对缺氧葡萄糖剥夺（oxygen—glueose deprivation,OGD）条件下大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞活性和凋亡的影响。方法采用OGD方法建立体外培养的PC12细胞缺氧缺血模型。将PC12细胞分为正常对照组和OGD组,OGD组又分为未用药组,氨茶碱组,db—cAMP组和联合用药组（氨茶碱和db—cAMP）。用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法观察不同药物和不同加药时间（0h,1h,2h,4h,8h,16h）对OGD后PC12细胞活性影响;用Hoechst33342荧光染料测定细胞凋亡。结果经OGD4h后,OGD组与正常组相比细胞活性降低和凋亡率增加（P〈0．05）,db—cAMP 1×10^-4μmol／L组与未用药组相比细胞活性增高,凋亡率减低（P〈0．05）;氨茶碱5×10^-2μg／L组与未用药组相比细胞活性和凋亡率无明显差别（P〉0．05）;3×10^-2μg／L氨茶碱和1×10^-5μmol／L的db—cAMP联合用药组与未用药组相比细胞活性增高,凋亡率减低（P〈0．05）;联合用药组与1×10^-4μmol／L的db—cAMP组相比细胞活性和凋亡率无明显差异（P〉0．05）;OGD损伤后4h内加药组较未用药组细胞活性明显增加（P〈0．05）,8h以后加药组与1h和2h加药组相比活性明显降低（P〈0．05）。结论提示db—cAMP对缺氧缺血损伤有保护作用,氨茶碱和db—cAMP两药联合使用有协同作用,OGD损伤后4h内给药可提高细胞活性,其中1—2h内给药效果最好。     

食管癌患者胸段手术前后血清激素水平的变化及临床意义

目的：探讨食管癌患者胸段手术前后血清激素水平的变化及其测定的临床意义。方法：皮质醇（cortis01）、血清垂体泌乳素（pmlactin,PRL）、促甲状腺激素（thyroidstimulatinghormone,TSH）测定采用化学发光免疫分析;生长激素（growthhormone,GH）和血管紧张素-Ⅱ（angiotensin-Ⅱ,AT-Ⅱ）采用放射免疫分析;肾上腺髓质素（adrenomedullin,AM）采用酶联免疫分析。结果：表1可见,患者血清PRL、TSH和GH三项指标水平在术前24h组略高于正常对照组,但无统计学差异（P均〉0．05）;麻醉前组三项指标水平则均显著高于正常对照组（P均〈0．05）;术后24h组三项指标水平更显著高于上述三组（P〈0．05,P〈0．01）,且还显著高于麻醉前组（P均〈0．05）。表1中血清cortisol水平在术前24h已显著高于正常对照组（P〈0．05）;AM和AT—Ⅱ含量略高于正常对照组,但无统计学差异（P均〉0．05）;麻醉前组三项指标水平均显著高于正常对照组（P〈0．05,P〈0．01）;术后24h组三项指标水平更显著高于上述三组（P〈0．05,P〈0．01）,且还显著高于麻醉前组（P均〈0．05）。结论：本文患者血清六项血清指标的变化证实患者存在明显的应激反应;提醒临床应在手术前后对患者实施必要的药物和心理治疗。     

胸部恶性肿瘤患者开胸手术前后血清内脏蛋白和炎性细胞因子水平变化的意义

目的：探讨本文患者胸部恶性肿瘤手术前后血清内脏蛋白和炎性细胞因子水平的变化及其测定意义。方法：血清前白蛋白（prealbumin,PRE）、转铁蛋白（transferrin,Tf）和视黄醇结合蛋白（retinal-bindingpro-tein,RBP）三项内脏蛋白测定采用免疫散射比浊法;IL-6、IL-8、TNF-仪三项炎性细胞因子测定采用放射免疫分析,另以32人作为正常对照组。结果：血清内脏蛋白指标水平显示,术前24h组三项蛋白水平略低于正常对照组,但无显著性差异（P〉0．05）,术后2h组其水平则均显著低于正常对照组和术前24h组（P〈0．05）,术后24h组水平下降更甚（P〈0．01）,两手术组间比较后者更低,但无统计学差异（P〉0．05）。血清炎性介质水平则显示术前24h组IL-6和IL-8二项细胞因子水平略高于正常对照组,但无显著性差异（P均〉0．05）,TNF-a水平则高于正常对照组,有显著性差异（P〈0．05）,术后2h组和术后24h组水平均分别显著高于正常对照组和术前24h组（P〈0．05,P〈0．01）,两手术组间比较术后24h组水平显著高于术后2h组（P均〈0．05）。结论：本文患者血清六项血清指标的变化证实患者存在明显的围手术期应激反应;提醒临床应在整个手术期充分做好各种应对预案。     

Toll样受体4和NF-κ B p50在大鼠变应性鼻炎中的表达

目的研究Toll样受体4（Toll-Like Receptor4）及NF-κ B p50在大鼠变应性鼻炎鼻黏膜中的表达及脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）和地塞米松对其表达的影响。方法SD大鼠48只随机分为变应性鼻炎组（A组）;变应性鼻炎＋LPS刺激组（B组）;正常对照组（C组）;地塞米松干预组（D组）。Wright’s染色观察各组鼻黏膜炎性细胞的浸润情况,并行高倍镜下嗜酸性粒细胞计数;免疫组化测定鼻黏膜组织NF-κ B p50表达;Westernblotting检测鼻黏膜组织TLR4蛋白水平表达。结果A、B、D组大鼠均成功激发为AR动物模型;嗜酸性粒细胞计数：B组表达明显较A、C、D组高（P〈0．01）,A组表达较C、D组高,C、D间表达差异无统计学意义（P〉0．05）;免疫组化各组鼻黏膜中均有NF-κ B p50表达,B组表达明显较A、C、D组高（P〈0．01）,A组表达较C、D组高,C组较D组表达高（P〈0．01）;TLR4在各组鼻黏膜中均有表达,Western blotting示B组表达明显较A、C、D组高（P〈0．01）,A组表达较C、D组高,C、D间表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论AR大鼠鼻黏膜TLR4及NF-κ B p50、嗜酸性粒细胞计数的表达较正常组增高;LPS刺激后TLR4及NF-KBp50、嗜酸性粒细胞计数表达进一步增高,经地塞米松干预后表达下调,说明TLR4及NF-κ Bp 50可能参与AR的发病和发展,地塞米松可能通过下调TLR4及NF-κ B p50影响变应性鼻炎的发展。     

缺氧缺血脑损伤大鼠脑组织Cofilin 1与ERK1/2蛋白表达与磷酸化的分析

目的探索新生大鼠缺氧缺血脑损伤模型脑组织Cofilin1与ERK1/2蛋白表达与磷酸化及其在脑组织中分布的规律。方法新生7日龄SD大鼠,手术结扎左侧颈总动脉并经低氧处理造成缺氧缺血脑损伤(HIBD)模型,以假手术组为对照,应用western Blot和免疫组化方法检测损伤后一定时间段(0h～48h)损伤侧脑组织Cofilin1与磷酸化cofilin1(p-Cofilin1)及Erk1/2和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的表达变化,同时检测其在损伤大鼠脑组织和细胞中的表达和分布。结果 Western blot检测显示,HIBD新生SD大鼠脑组织中Cofilin1在HI后的表达与对照组相比也未见明显改变,但磷酸化Cofilin1在HI后1h～12h之间降低,24h后恢复正常;ERK1/2蛋白在不同时点的表达与对照组相比未见明显差异,但可见磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)在缺氧缺血处理(HI)后0h略低于正常,而在1-2h内迅速升高并高于正常对照和假手术,在2h后又逐渐降低。免疫组化结果显示Cofilin1与p-cofilin1在损伤大鼠脑中主要分布于海马和大脑皮质,尤其p-Cofilin表达分布以海马的颗粒细胞为主,并且在HI后7d-14d表达明显增强,在21d则明显降低。结论 Cofilin和ERK的磷酸化修饰与缺氧缺血脑损伤的发生和发展过程有较密切的关系,且cofilin1和p-cofilin1在大脑海马区的定位分布,提示其可能与大脑的学习记忆功能的损伤与修复有一定的关系。     

TLR介导BCG和猪苓多糖激活巨噬细胞株J774 NF-κB的表达

目的通过观察BCG和猪苓多糖作用后的巨噬细胞株J774免疫分子的表达，探讨猪苓多糖协同BCG启动非特异性免疫反应机制和可能的激活途径。方法应用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜，定量和定性分析体外猪苓多糖协同BCG与巨噬细胞株J774相互作用后，TLR和CD14分子的表达及NF-κB在巨噬细胞中表达的核／浆荧光强度比。结果J774细胞在BCG和猪苓多糖作用后表达TLR4，而不表达TLR2。TLR4的表达在3h出现谷值，6h达峰值，之后迅速下降，到24h～48h时再缓慢上升。BCG加猪苓多糖组TLR4的表达高于BCG组（P〈0．05）。CD14的表达也是6h达峰值，随后缓慢下降，BCG加猪苓多糖组作用24h观察，CD14的表达都高于BCG组（P〈0．05）。NF-κB的表达细胞浆和胞核在3～6h几乎同步达到峰值，之后下降。BCG组、PPS组及BCG＋PPS组细胞核／浆荧光强度比均在6h处出现谷值，而在12h处出现一个峰值，随后下降。而PPS组及BCG＋PPS组在12～24h缓慢下降，同BCG组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。各实验组细胞的核／浆荧光强度比（Fc／Fn）增大，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论猪苓多糖能协同BCG，通过TLR4与CD14一起将胞外信号转导至胞内，从而使NF-κB迅速从胞浆移位到胞核，调节相应靶基因的表达。     

消栓颗粒对缺氧缺血性新生大鼠脑组织Caspase-3蛋白的影响

目的探讨消栓颗粒对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠Caspase-3蛋白的影响。方法 7日龄SD新生大鼠36只,随机分为假手术组、HIBD模型组和消栓颗粒治疗组,每组各12只。HIBD模型组和消栓治疗组参照Yager法建立HIBD模型,消栓颗粒治疗组灌服消栓颗粒（8g/kg,qd）,HIBD模型组及假手术组灌服等量9g/L氯化钠注射液。造模后第14d断头取出脑组织,观察3组大鼠左侧大脑半球病理形态学的变化,比较3组的病理学评分;免疫组化法检测3组大鼠海马及皮质区Caspase-3蛋白的表达情况。结果 HE染色结果显示,假手术组未见明显病变,HIBD模型组大鼠脑组织变性、坏死显著,消栓颗粒治疗组仅表现为局灶性神经细胞变性,病理学评分假手术组显著低于HIBD模型组及消栓颗粒治疗组（P〈0.01）,消栓颗粒组低于HIBD模型组（P〈0.01）。免疫组化结果显示,假手术组海马及皮质区有少量Caspase-3蛋白表达,HIBD模型组Caspase-3蛋白的表达较假手术组明显增多,消栓颗粒治疗组Caspase-3蛋白的表达较HIBD模型组明显减少,3组间两两比较均具有显著性差异（P〈0.01）。结论消栓颗粒可减轻HIBD新生大鼠的脑损伤,机制可能为抑制Caspase-3蛋白的表达。     

过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞 TLR2、TLR4表达及其与 Th1和 Th2型免疫应答相关性观察北大核心CSCD

目的：研究Toll样受体（Toll-like receptor,TLR）2、TLR4在过敏性紫癜（HSP）患儿外周血单核细胞的表达及其与Th1和Th2型免疫应答的相关性,探讨TLR2、TLR4在HSP发病机制中的作用。方法选取2011年10月-2012年11月于我院儿内科收治的HSP患儿64例为研究对象,分为HSP无肾损害组（NHSPN,36例）及HSP有肾损害组（HSPN,28例）,另选取我院儿保科健康查体儿童30例作为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群及单核细胞TLR2及TLR4蛋白表达,实时荧光定量PCR技术检测外周血单核细胞TLR2 mRNA及TLR4 mRNA的基因相对表达量,ELISA法检测血浆IFN-γ、IL-4、IL-6水平。结果（1） HSP 患儿外周血单核细胞TLR2 mRNA、TLR4 mRNA相对表达量及TLR2、TLR4蛋白表达均显著高于正常对照组（P均＜0．01）,HSPN组外周血单核细胞TLR2 mRNA、TLR4 mRNA相对表达量及TLR2、TLR4蛋白表达均明显高于NHSPN组（P＜0．05;P＜0．01;P＜0．01;P＜0．01）。（2）HSP组CD3＋T细胞、CD3＋CD4＋T细胞显著降低,CD3＋CD8＋T细胞及CD3＋HLADR＋活化T细胞明显升高（P均＜0．01）。（3）HSP组血浆IL-4、IL-6水平显著高于正常对照组（P＜0．01,P＜0．01）,IFN-γ水平显著低于正常对照组（P＜0．05）,IFN-γ/IL-4比值显著低于对照组（P＜0．01）。（4）HSP组TLR2、TLR4蛋白表达与血浆IL-4、IL-6水平均呈显著正相关（P＜0．01,P＜0．05;P＜0．01,P＜0．01）;与IFN-γ/IL-4比值均呈显著负相关（P＜0．01;P＜0．01）。结论TLR2及TLR4活化可能参与了HSP的免疫发病机制,TLR2及TLR4的过度活化可能与HSP的肾损伤有关。 HSP患儿存在T淋巴细胞亚群失调,功能紊乱,Th1/Th2失衡。活化的TLR2及TLR4可能通过上调Th2型免疫应答介导HSP的免疫发病机制。     

高压氧降低缺氧缺血性脑损伤大鼠脑组织内caspase-3表达

目的 探讨高压氧(HB0)对缺氧缺血新生大鼠神经细胞凋亡及easpase-3表达的影响.方法 建立缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠模型,将其分为HIBD组及HBO处理组,并设立假手术组(n=24).观察3组大鼠不同时间脑组织病理学改变,同时用免疫组化的方法检测3组大鼠脑组织内ca8pase-3蛋白表达的动态变化.结果 HIBD组18、24、48和96 h时间点海马及皮层区ca8pase-3蛋白的表达均明显高于假手术组(P相似文献   

亚低温对细胞凋亡及凋亡相关基因表达影响的实验研究

目的　研究亚低温对新生鼠缺氧缺血性脑损伤细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法　7日龄大鼠行左侧颈总动脉结扎后吸入 8%氧气 2h,制成缺氧缺血性脑损伤模型。动物随机分成三组 :假手术组 (C组 ) ,缺氧缺血正常温度组 (HI组 ) ,缺氧缺血后 30min亚低温治疗组。应用原位缺口末端标记 (TUNEL)检测凋亡细胞 ,用免疫组化SABC法检测表达bax基因阳性细胞数。结果　 30min后给予亚低温组凋亡细胞及表达bax基因细胞数明显少于HI组 ,差异有显著意义 (P <0 0 1)。结论　亚低温可以通过抑制细胞凋亡 ,抑制凋亡相关基因的表达等机制发挥对缺氧缺血性脑损伤的保护作用。