慢性重度乙型肝炎患者肝组织中NF-κ Bp65和Caspase-3的表达及其意义

目的:探讨慢性重度乙型肝炎患者肝组织中NF-κBp65和Caspase-3的表达及其意义.方法:选择慢性重度乙型肝炎肝组织标本68例(慢重肝组),正常肝组织标本20例(对照组).采用免疫组化方法检测肝组织中NF-κBp65和Caspase-3的表达.结果:慢重肝组患者肝组织中NF-κBp65和Caspase-3阳性表达程度均明显强于对照组(P＜0.05);慢重肝患者死亡组肝组织中NF-κBp65和Caspase-3阳性表达程度均明显强于存活组(P＜0.05).Spearman相关分析发现,慢重肝组患者肝组织中NF-κBp65和Caspase-3表达之间有明显的正相关性(r=0.449,P＜0.05).结论:NF-κBp65和Caspase-3可能参与了慢性重度乙型肝炎的肝细胞凋亡过程,且具有一定相关性,并对判断患者预后有重要临床价值.     

NF-κB和TNF-α在暴发性肝衰竭肝组织中的表达及其意义

目的探讨NF-κB，TNF-α与暴发性肝衰竭发生、发展的关系及其意义。方法雄性Wistar大鼠腹腔注射D-GalN＋LPS制造暴发性肝衰竭模型，采用免疫组化方法动态观察肝组织中NF-κB p65蛋白和TNF-α表达情况。结果①动态观察了暴发性肝衰竭病理变化过程。②模型组NF-κB p65蛋白表达阳性细胞主要为肝细胞、枯否细胞。造模后4h、8h、12h时核阳性表达的细胞数逐渐增多，明显高于对照组。2h组主要是非实质细胞的胞质着色。而4h、8h、12h、24h组以肝细胞胞核着色为主。对照组不同时间点NF-κB p65蛋白表达无明显差异（P〉0．05）。模型组则随着肝细胞坏死程度的增加而增加（r=0．694，P〈0．01）。③随着肝细胞炎症坏死程度的增加，模型组肝细胞质TNF-α表达逐渐增加（r=0．896，P〈0．01），以肝细胞表达为主。对照组肝细胞质TNF-α表达较弱（P〉0．05）。④肝组织中NF-κB活化与TNF-α表达呈密切正相关（r=0．852，P〈0．01）。结论NF-κB和TNF-α参与了暴发性肝衰竭的发生发展。NF-κB可能是暴发性肝衰竭肝细胞炎症坏死过程中的关键环节。     

miR-21对心肌缺血大鼠心肌细胞TLR-4/NF-κB通路的影响

摘要 目的：探究微小核糖核酸-21（miR-21）对心肌缺血大鼠心肌细胞Toll样受体4（TLR4）/核因子-κB（NF-κB）通路的影响。方法：取40只SD大鼠随机分为假手术组（10只）和建模组（30只）,建模组大鼠通过左冠状动脉前降支（LAD）结扎术建立心肌缺血大鼠模型,假手术组大鼠仅开胸后不做其他处理即缝合。将建模成功大鼠随机分为对照组（转染miR-NC慢病毒）、沉默组（转染miR-21 antagomir慢病毒）、过表达组（转染miR-21 mimics慢病毒）,假手术组注射等量生理盐水。苏木素-伊红（HE）染色观察心肌组织损伤情况;原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡率;实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）和蛋白质免疫印迹法（WB）检测TLR-4、NF-κB、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase3）、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2关联X蛋白（Bax）信使核糖核酸（mRNA）和蛋白表达及磷酸化NF-κB p65（p-NF-κB p65）水平。结果：对照组大鼠心肌纤维排列紊乱,大量心肌细胞肿胀坏死并伴随炎症细胞浸润,沉默组大鼠心肌组织损伤情况进一步加重,而过表达组大鼠心肌组织损伤现象得到明显改善。与假手术组比,对照组、沉默组、过表达组大鼠心肌细胞凋亡率,TLR-4、NF-κB、Caspase-3、Bax mRNA与其蛋白表达,以及p-NF-κB p65水平升高,Bcl-2 mRNA及其蛋白表达降低（P＜0.05）;与对照组比,沉默组大鼠心肌细胞凋亡率,TLR-4、NF-κB、Caspase-3、Bax mRNA表达与其蛋白表达,以及p-NF-κB p65水平升高,Bcl-2 mRNA及其蛋白表达降低（P＜0.05）,过表达组大鼠心肌细胞凋亡率,TLR-4、NF-κB、Caspase-3、Bax mRNA与其蛋白表达,以及p-NF-κB p65水平降低,Bcl-2 mRNA及其蛋白表达升高（P＜0.05）。结论：下调miR-21表达可促进TLR-4/NF-κB通路表达,加重心肌缺血大鼠心肌损伤。     

HE4、NF-κBp65和MMP-9在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义

目的探讨HE4、NF-κBp65以及MMP-9的表达与上皮性卵巢肿瘤临床病理生物学行为的关系以及对患者预后的影响。方法应用免疫组化对80例卵巢上皮性癌、10例交界性上皮性肿瘤及10例良性上皮性肿瘤组织进行HE4、NF-κB p65及MMP-9蛋白的检测。结果 HE4、NF-κBp65及MMP-9蛋白的阳性表达率在卵巢癌组均高于交界性及良性肿瘤组（P〈0.05）。三个指标的表达与EOC的组织学分级、腹腔脏器及淋巴结转移以及PTNM临床分期有关（P〈0.05）;在EOC中,NF-κBp65分别与HE4、MMP-9的表达呈正相关（r1=0.673,P〈0.05;r2=0.775,P〈0.05）。多因素分析,PTNM分期、MMP-9的表达是影响卵巢癌术后患者预后的独立因素（P〈0.05）;HE4阳性组与阴性组5年生存率分别为12.7%和84.0%,MMP-9阳性组与阴性组5年生存率分别为8.7%和70.6%,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 NF-κBp65可能通过上调HE4、MMP-9的表达促进EOC的浸润和转移,联合检测HE4、NF-κBp65以及MMP-9的表达可能作为预测和评价患者预后的生物学指标。     

β-catenin与NF-κB在结直肠腺癌中的表达及其相关性研究

目的：直肠腺癌组织中β-catenin和NF-κB的表达水平及二者与结直肠癌临床病理特征之间的相关性。方法：采用免疫组化SP法检测65例结直肠腺癌和20例正常结直肠组织中β-catenin与NF—κB蛋白表达水平。结果：结直肠癌和正常结直肠组织中β-catenin的阳性表达率分别为67．7％、0％,NF—κB的阳性率分别为75．4％、15．0％,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结直肠癌组织中β-catenin与NF．κB的表达与患者的年龄、性别、肿瘤发生部位均无关（P〉0．05）,但与TNM分期和淋巴结转移显著相关（P〈0．05）;NF-κB的表达与组织学分化程度呈显著负相关（P〈0．05）,B-catenin的表达与肿瘤的远处转移显著相关（P〈0．05）。结直肠腺癌组织中p-catenin的表达与NF—κB的表达呈显著正相关（r=0．293,P=0．018）。结论：结直肠癌中β—catenin与NF—κB的表达异常上调,在结直肠癌发生发展中起重要作用,二者联合检测有助于结直肠癌的病情和预后评估。     

布地奈德对哮喘大鼠气道嗜酸细胞影响机制的实验研究

目的：观察布地奈德（Bud）对哮喘大鼠嗜酸细胞（EOS）在气道局部浸润的影响。方法：复制哮喘大鼠模型,分为正常组（C组）、哮喘组（A组）和Bud组（B组）,用免疫组化检测肺组织NF-κBp65及Eotaxin活性;细胞分类计数法检测支气管肺泡灌洗液中的EOS。结果：A组肺组织NF-κBp65表达量均显著高于C组;B组肺组织NF-κBp65的表达均显著低于A组;B组BALF中EOS的绝对计数和百分比均低于A组;光镜下观察B组气道炎症较A组显著减轻。结论：Bud能抑制EOS在气道局部的浸润,减轻气道炎症。其机制可能与抑制哮喘大鼠肺组织NF-κB的活性从而减少Eotaxin的转录合成有关。     

西比灵干预对沙鼠脑缺血再灌注后核因子-κB、单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的：研究西比灵对沙鼠脑缺血再灌注后核因子-κB、单核细胞趋化蛋白-1表达的影响。方法：52只健康蒙古沙鼠随机分为正常对照组、假手术组、脑缺血再灌注（I/R）组、西比灵干预组,I/R组及西比灵干预组再分为6h、1d、3d、7d四个亚组。通过夹闭双侧颈总动脉10 min后松夹,建立沙鼠全脑缺血再灌注模型。采用免疫组化的实验方法检测各组脑组织中NF-κBp65、MCP-1的表达。结果：缺血再灌注后各时间点I/R组及西比灵干预组,NF-κBp65的表达量显著高于正常对照组及假手术组（均P〈0.01）,且出现MCP-1阳性表达。与I/R组比较,西比灵干预组在I/R后6h、1d,NF-κBp65、MCP-1表达下调（均P〈0.05）。结论：在脑缺血再灌注早期,西比灵能够下调NF-κBp65、MCP-1的表达,减轻局部炎症反应及脑缺血再灌注损伤。     

高脂喂养大鼠肝脏的NF-κBp65表达与胰岛素抵抗的相关性

目的探讨高脂饲料喂养大鼠肝脏NF-κBp65蛋白的表达与胰岛素抵抗的关系。方法采用高脂饲料喂养建立胰岛素抵抗大鼠模型,并用正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术评估。应用Western blotting方法检测大鼠肝脏中NF-κBp65蛋白的表达。结果①高脂饲料组大鼠的葡萄糖输注率明显低于基础饲料组[GIR60~120（0.76±0.28vs4.26±0.70）mg/（kg.min）,P〈0.01]。②高脂饲料组大鼠肝脏NF-κBp65蛋白的表达明显高于基础饲料组（A值118.48±1.45vs68.13±4.84,P〈0.01）。③高脂胰岛素抵抗大鼠肝脏NF-κBp65蛋白表达与GIR60-120（r=-0.993,P=0.000）和ISI（r=-0.773,P=0.009）负相关。结论高脂诱导的胰岛素抵抗大鼠肝脏NF-κB的激活可能是产生肝脏和全身胰岛素抵抗的根源。     

妇科再造丸联合甲基睾丸素片治疗子宫肌瘤的疗效分析

目的：分析妇科再造丸联合甲基睾丸素片治疗子宫肌瘤的临床疗效和安全性。方法：62例子宫肌瘤患者随机分为治疗组和对照组,治疗组共32人,接受妇科再和联合甲基睾丸素片联合治疗,对照组共30人,单纯接受甲基睾丸素片治疗;免疫组织化学法检测治疗组和对照组患者子宫肌瘤PR表达水平;RT-PCR检测治疗组和对照组患者子宫肌瘤Caspase．3mRNA和PRmRNA表达;BC-5500血球分析仪检测HB、RBC、HCT,分析比较两组患者上述指标的差异。结果：治疗组临床疗效有效率为87．5％,对照组临床疗效有效率为53．3％,两组比较有统计学差异（P〈0．05）。两组在治疗后HB、RBC、HCT均较治疗前改善,且治疗组较对照组改善明显,差异有统计学意义（P〈O．01）。治疗组和对照组治疗后PRmRNA的表达程度与治疗前相比,明显下降,具有统计学意义（P〈0．05）;治疗组治疗后PRmRNA表达水平与对照组治疗后PRmRNA表达水平相比,有明显差异,具有统计学意义（P〈0．05）;治疗组治疗后Caspase-3mKNA的表达程度与治疗前相比,明显增强,具有统计学意义（P〈0．05）;治疗组治疗后Caspase-3mRNA表达水平与对照组治疗后Caspase-3mRNA表达水平相比,有明显差异（P〈0．05）;治疗组和对照组治疗后PR的阳性细胞数目与治疗前相比,显著下降（P〈0．001）;治疗组治疗后PR阳性细胞数目与对照组治疗后PR阳性细胞数目相比,有明显差异（P〈0．05）。结论：妇科再造丸联合甲基睾丸素片优于单独应用甲基睾丸素片治疗子宫肌瘤。     

褪黑素对油酸致大鼠急性肺损伤的防护作用及其机制研究

目的：研究油酸（OA）致大鼠急性肺损伤（ALI）时,P-选择素（Ps）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）和核因子-κB（NF-KB）在肺组织中的表达及褪黑素（MT）对肺组织的保护作用及其机制。方法：将48只SD大鼠随机分为4组（n=12）,对照组（Control）、油酸组（OA）、MT＋OA组,SB203580＋OA组。采用尾静脉注射油酸的方法建立大鼠Au的模型,测定肺系数,光镜下观察大鼠肺组织形态学改变,并通过免疫组织化学染色技术观察肺组织中Ps、ICAM-1和NF-κB的表达变化。结果：与control组相比,OA组大鼠肺系数明显升高（P〈0．05）;肺组织损伤严重,肺泡间隔明显增宽,肺泡腔及肺间质弥漫性炎细胞浸润;Ps、ICAM-1和NF-κB的阳性表达信号明显增强（P〈0．05）;应用MT和SB203580均显著缓解上述变化（P〈0．05）。结论：MT对ALI时的肺组织起明显的保护作用,其保护机制可能与抑制Ps、ICAM-1和NF-κB的表达有关。     

牛磺酸对肢体缺血／再灌注后肝损伤大鼠TNF-α、NF-κB表达的影响

目的：探讨给予牛磺酸预处理对肢体缺血／再灌注（limb ischemia-reperfusion,H／R）后大鼠肝脏损伤及,INn、NF—KB表达的影响及意义。方法：采用Wistar大鼠建立LI/R损伤模型,随机分为4组（n=10）：对照（C）组,缺血／再灌注（I／R）组,牛磺酸（T）组和牛磺酸＋缺血／再灌注（TR）组。比色法测定动物血浆ALT、AST、MDA,肝组织MDA、MPO、DNA裂解率和钙含量,放免法检测血浆及肝组织TNF-α水平;HE染色观察肝脏组织形态改变;免疫组化法观察NF-κB蛋白表达。结果：与C组比较,I／R和TR组各损伤性指标、TNF-α水平均升高,NF-κB蛋白表达增高（P〈0．01）;但TR组上述各项指标较I／R组显著降低。结论：牛磺酸预处理可减轻大鼠LI／R所致肝脏损伤,降低TNF-α、NF-κB表达。     

YKL-40和NF—KB在子宫内膜异位症中的表达及相关性研究

目的：通过检测人类软骨蛋白39（YKL-40）和核转录因子KappaB（NF—KB）在子宫内膜异位症组织中的表达,探讨二者与子宫内膜异位症的关系及二者的相关性。方法：用免疫组化二步法检测40例子宫内膜异位症（EMS）患者的异位内膜和在位内膜及40例子宫肌瘤患者子宫内膜（对照组）YKL-40和NF—KB的表达,并对检测结果进行统计学分析。结果：YKL-40、NF—KB在子宫内膜异位症患者的异位和在位内膜及对照组内膜中的表达率分别为67．5％、62．5％、35％及88．5％、57．5％、32．5％,差异有统计学意义（P〈0．01）;在不同月经周期YKL-40表达无统计学意义;在位内膜和正常内膜NF-KB的表达分泌期高于增殖期,差异有统计学意义（P〈0．05）;YKL-40和NF-KB在三种内膜中的表达具有正相关性,相关系数分别是0．305,0．267和0．457（P〈0．01）。结论：YKL-40和NF—KB在EMS发生发展中起重要的作用。     

NF—κB、VEGF在非小细胞肺癌中的表达及其与肿瘤血管形成的研究

目的探讨核因子-κB（NF-κB）和血管内皮生长因子（VEGF）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与肿瘤血管形成的关系。方法应用免疫组织化学方法,检测56例非小细胞肺癌及20例癌旁肺组织中的NF-κBP65、VEGF的表达,并用抗CD34测定肿瘤血管的密度（MVD）。结果（1）在非小细胞肺癌中NF-κBP65、VEGF的表达阳性率分别为83．9％（47／56）、69．6％（39／56）,明显高于癌旁组织（P〈O．05）;（2）NF-κBP65的表达在不同的TNM分期、淋巴结及胸腔积液、吸烟的分组之间差异有统计学意义,VEGF的表达在淋巴结及胸膜转移之间差异有统计学意义;（3）NF-κBP65、VEGF、MVD三者间存在明显相关性。结论NF-κB、VEGF异常表达与NSCLC的发生、发展及肿瘤血管的形成有着密切的关系。     

ID1对大鼠C6细胞侵袭转移能力的影响

目的：观察IDl对大鼠胶质瘤细胞（c6细胞）侵袭转移能力的影响。方法：以C6细胞为研究对象,ID1 siRNA通过脂质体转染c6细胞,western blot检测C6细胞中ID1、P-NF—KBp65蛋白的表达、Elisa法检测细胞培养上清MMP．9的含量,Transwell小室观察成的转移侵袭能力。结果：干扰ID1后能显著降低C6细胞中P-NF-KBp65蛋白、细胞培养上清中MMP-9的含量（P〈0．01）,降低C6细胞的转移侵袭能力（P〈0．01）。结论：干扰ID1能抑制C6细胞的转移侵袭,其机制可能与抑制C6细胞中P-NF-K Bp65蛋白、MMP-9的表达有关。     

异丙酚对大鼠心肌缺血/再灌注损伤时NF-κB活化和细胞凋亡的影响

目的:观察异丙酚对大鼠心肌缺血/再灌注时核因子-κB(NF-κB)的活化和细胞凋亡的影响,以探讨异丙酚的心肌保护作用机制。方法:采用阻断大鼠左冠状动脉前降支30min,再灌注2h心肌缺血/再灌注损伤模型。60只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血/再灌注组(I/R)和异丙酚3、6、12mg/(kg.h)组。光、电镜观察心肌组织的形态学变化。免疫组化染色分析心肌组织中NF-κB的核移位,Western blot检测心肌组织NF-κB和caspase-3的表达。原位末端标记(TUNEL)检测心肌细胞凋亡。结果:I/R组心肌纤维排列紊乱,心肌细胞水肿;线粒体膜肿胀,嵴排列紊乱甚至溶解消失。与I/R组相比,6,12mg/(kg·h)组异丙酚组心肌损伤明显减轻。与Sham组相比,I/R组NF-κB活化,明显从细胞浆移位于细胞核,表达量也显著增加(P0.05);心肌caspase-3表达增强(P0.01),心肌细胞凋亡指数升高(P0.05)。而异丙酚6mg/(kg·h)、12mg/(kg·h)组,NF-κB从细胞浆向细胞核的移位被明显限制,NF-κB的表达量也明显低于I/R组(P均0.05);心肌caspase-3表达减弱,心肌细胞凋亡指数减少(与I/R组相比,P0.05)。结论:异丙酚的心肌保护作用可能与其抑制NF-κB的活化,下调caspase-3的表达,从而抑制心肌细胞凋亡有关。