野生和养殖大鲵群体遗传多样性的微卫星分析

中国大鲵是世界上最大的两栖动物并且为我国特有,现在该物种野生种群急剧下降, 而人工养殖种群逐渐增多。为了对大鲵(Andrias davidianus)群体进行遗传多样性的本底调查, 本文用10对微卫星引物对28尾野生大鲵和16尾人工养殖的大鲵样本进行了遗传多样性分析。结果表明, 在10对引物中有7对检测到多态位点, 野生群体和养殖群体的观察等位基因数分别为5–8和4–6, 期望杂合度分别为0.81和0.75, 说明本实验中研究的大鲵的遗传多样性水平较高。通过人工养殖群体和野生群体的比较发现, 人工养殖群体存在较大的等位基因丢失现象, 并且遗传多样性水平低于野生群体。以上结果将为大鲵的人工繁育和遗传多样性的保护、利用提供一定的理论依据。     

张家界大鲵人工放流效果及其影响因素分析

大鲵(Andrias davidianus)是我国特有的两栖动物, 由于栖息地破坏和人类过度捕杀等, 种群数量急剧下降, 被列为我国II类保护野生动物。为探索大鲵人工放流的有效方法, 实现野生大鲵资源增殖, 作者对2002–2008年间在湖南张家界大鲵国家级自然保护区内进行的大鲵人工放流活动与放流效果进行了评估, 并通过对放流点的隐蔽物、水质及饵料生物等生境特点的分析, 探讨影响放流成败的因素。该保护区内共在9处大鲵原栖息地进行了11次人工放流活动, 共放流各种规格大鲵995尾, 其中4次成功。成功放流的大鲵为1–4.5 kg的性成熟个体, 雌雄比在1:1和1:1.5之间, 成功放流点均有良好的后期管理措施, 如建立保护站, 补充饵料等。虽然所选择的多数放流点生境基本能满足大鲵生长和繁殖的要求, 但由于受水质、饵料或安全某一因素的制约, 野生大鲵资源增殖效果不明显, 导致放流失败。因此我们认为依据野生大鲵繁殖的生境特征标准, 科学选择放流地点, 选择性成熟的大鲵在春季放流, 并进行完善的后期跟踪保护, 可能是大鲵人工放流成功和实现资源增殖的有效途径。     

水温对大鲵野外放流的影响初探

大鲵是我国特有的两栖纲有尾目隐鳃鲵科动物。然而由于生境破坏、环境污染和人为捕杀等原因,该物种数量锐减,被列为国家Ⅱ类重点保护野生动物。为恢复大鲵野生资源数量,进一步评估水温、水质、饵料生物和两岸植被类型等生境因子对大鲵人工放流结果的影响,作者于2013年4月在秦岭山脉南麓(宁陕东河)、北麓(周至黑河)选择放流点分别人工放流16尾和15尾健康大鲵个体。利用PIT芯片进行标记追踪,实时监测水温变化,定期采集周边生境因子数据,一年后南、北麓回捕标记个体8尾和0尾,回捕率分别为50%和0。结果显示,南麓放流点日平均水温显著高于北麓放流点(p0.01),最高温度较北麓放流点高3.85℃,最低温度较北麓放流点高4.26℃,且南麓放流点水温日均温差变化较小。我们认为水温是影响放流成功与否的重要因子,因此,依据野生大鲵的生境特征标准,选择水温更加适宜的放流点,可能是大鲵人工放流成功和实现野生资源增殖的有效途径。     

野生大鲵繁殖洞穴生态环境的初步研究

为了探明野生大鲵(Andrias davidianus)自然繁殖所需要的主要生态条件,给人工养殖条件下大鲵的自然繁殖提供生态学依据,对张家界国家级大鲵保护区境内野生大鲵的栖息繁殖洞穴进行生态学考察。对海拔、洞口的宽度与高度等10个生态因子进行定量观测和主成分分析,结果表明,影响大鲵选择繁殖洞穴的主要因子是海拔、洞口高度、洞底组成,以及洞穴中水的透明度、pH、流速、饵料丰度7个因子。对大鲵繁殖洞穴相连河段进行调查,发现多为山溪流。对繁殖洞穴中水的溶解氧、化学耗氧量、硫化物等5项主要指标进行检测,除硫化物外,其他指标多达到国家饮用水的水质标准,可见大鲵自然繁殖对洞穴与水质的要求较高。     

我国的稀有珍贵动物—大鲵

两栖动物约近三千种,其中值得重视的是产于我国内陆水域的大鲵。大鲵作为一种珍稀动物,在我国虽然分布存在于广大的区域内,但长期以来,由于忽视了对它的保护和合理利用,致使产地资源数量严重下降和衰减,甚至有的大鲵产区濒临灭绝;笔者近年来对大鲵的人工增殖方面做了大量的工作,有关大鲵的资源保护提出了建设性的意见。     

大鲵食性分析

大鲵Andrias davidianus是我国分布较广、体型较大的有尾两栖类,是国家Ⅱ级保护动物。分析大鲵的食性可为人工养殖和保护大鲵提供资料。1985年10月—1988年3月,作者对大鲵的食性做了观察和分析,现整理报道如下。 方法 1985年—1988年,共采集大鲵标本71尾。每年除1—2月气温低河水冻结,无法采集标本外,其余3—12月份每月均可采到标本3—5尾。把采到的大鲵立即用福尔马林溶液浸泡,并在腹腔内注射福尔马林液。然后解     

广东阳春百涌自然保护区桫椤科植物资源调查

广东阳春百涌自然保护区属云开山脉,区内桫椤科植物资源丰富,但具体种类及其资源量并无准确资料,为此我们开展了相关野外调查和统计。调查表明,保护区内共有4种桫椤科植物,即桫椤Alsophila spinulosa、大叶黑桫椤Gymnosphaera gigantea、小黑桫椤G. metteniana和黑桫椤G. podophylla。依据保护区内桫椤科植物主要沿林道分布的特点,提出了按林道长度估算资源量的方法,据估算,保护区内有桫椤约900株,大叶黑桫椤约1.5万株,小黑桫椤约320株,黑桫椤约4500株。阳春百涌保护区是华南地区大叶黑桫椤的主要保存地。     

夏季广东省鲎保护区潮间带大型底栖动物群落研究

广东省划设有6个鲎保护区,但对鲎种群具体分布位置、数量及趋势数据几近空白,阻碍了科学管理策略制定和保护行动推进。为此,采用野外调查方法分别对该6个鲎保护区幼鲎资源现状展开调查,并对保护区潮间带大型底栖动物群落进行分析。结果表明,广东省6个鲎保护区中仅遂溪中国鲎保护区和徐闻圆尾鲎保护区发现有幼鲎分布,其中徐闻圆尾鲎保护区内幼鲎丰度极低,调查整个保护区仅发现2只幼鲎;遂溪中国鲎保护区幼鲎丰度为6.45 ind·100m^–2,但低龄期幼鲎个体数量明显低于高龄期。保护区潮间带大型底栖动物功能群分析显示,遂溪大型底栖动物以浮游生物食者为主,徐闻以植食者为主,浮游动物、微藻类以及浮游植物等天然饵料资源充足,符合幼鲎的摄食习性。此次鲎保护区资源调查表明广东省鲎资源现状严峻,鲎保护区管理亟待改善。提升鲎的保护等级、科学的人工放流、行之有效的保护区管理措施等行动已势在必行。     

人工养殖大鲵全长与体重关系的回归分析

大鲵(Andrias davidianus)隶属两栖纲,有尾目,隐鳃鲵科,大鲵属,为我国特有的珍稀濒危两栖动物。目前在我国一些主要历史分布区掀起了一股大鲵养殖高潮,但是对当前养殖效果缺乏成熟的评价手段,因此本研究通过对陕西省汉中市和安康市两大鲵养殖场养殖的1530尾大鲵的体重和全长进行实际测量,利用SPSS分析软件对数据进行了回归分析。结果表明,体重与全长之间存在极显著的相关关系,体重与全长之间的关系主要表现为幂函数关系,其关系式为:Y=0.010X2.867。本研究的顺利完成,为今后评价大鲵的人工养殖效果提供了科学的方法。     

广东省沙溪自然保护区植被资源与分布

文章通过对沙溪自然保护区的植物资源调查,对保护区的植被类型进行了分类,并对野生植物资源的种类的分布进行了分析.调查发现保护区有7种植被类型,其中以亚热带常绿阔叶林为主要植被类型,主要分布于海拔100~850m左右的丘陵和山地.亚热带常绿针叶与阔叶混交林面积较大,主要分布在长坪一带.亚热带常绿与落叶阔叶混交林、亚热带常绿针叶林、灌丛草坡分布较少.竹林主要在村庄附近的沟谷两旁和山地,处于半自然状态.保护区野生维管植物191科630属1225种,其中野生国家级保护植物7种,珍稀野生保护植物7种.保护区内植物资源丰富,其中野生维管植物资源种类繁多,蕴藏量较大,不少种类具有巨大的经济价值和生态价值,这对保护区及北江流域生态环境的保护和改善提供了基础依据.     

秦岭山区中国大鲵生境因子的选择

通过对秦岭山区中国大鲵(Andrias davidianus)栖息地生境因子调查、统计,利用R语言分析了各因子与大鲵生境选择的相关性,得出研究结果:秦岭山区影响大鲵生存的主要因子为栖息地类型(相关系数r=0.98),其次是水温(相关系数r=-0.8)、河岸坡度(r=-0.6)和p H (r=-0.6);浊度(相关系数r=0.5)、电导率(r=0.49)、DO(r=0.4)、人为干扰(r=0.35)和海拔(r=0.31)对大鲵分布影响不大。研究结果为探讨中国大鲵对野生环境的适应性选择提供了参考。     

患病大鲵中弗氏柠檬酸杆菌的分离与鉴定

【目的】确定导致大鲵(Andrias davidianus)细菌性感染死亡的病原。【方法】从大鲵肝脏中分离细菌,通过Biolog微生物自动鉴定系统及分子生物学方法对纯培养的细菌进行鉴定,再用大鲵和鲫鱼分别进行人工感染试验,以确定分离菌的致病性,同时对分离到的病原菌进行药物敏感试验。【结果】从患病大鲵肝脏中分离到一株致病菌JZ01,经人工感染健康大鲵,可复制与自然发病相同的症状,且从人工感染病鲵体内再次分离到相同的病原菌。该致病菌对健康鲫鱼也有致病性。经Biolog微生物自动鉴定系统的鉴定,以及进一步的16S rDNA基因序列和系统发育分析都表明,此致病菌为弗氏柠檬酸杆菌。药物敏感性试验表明,该菌株对氨曲南、头孢三嗪、先锋噻肟等9种药物高度敏感。【结论】弗氏柠檬酸杆菌是大鲵的一种致病菌。本文在国内外首次报道了该菌对大鲵具有致病性。     

Eradication of the chytrid fungus Batrachochytrium dendrobatidis in the Japanese giant salamander Andrias japonicus

The purpose of this study was to establish a method for eradicating a chytrid fungus (Batrachochytrium dendrobatidis; Bd) from the Japanese giant salamander Andrias japonicus. The emerging agent (Bd) has a high rate of detection in this endangered amphibian species, which is designated as a special natural monument in Japan. Four Japanese giant salamanders with Bd confirmed by PCR assay were bathed in 0.01% itraconazole for 5 min d-1 over 10 successive days. PCR assays were conducted prior to treatment, on Days 5 and 10 of treatment, and on Days 7 and 14 post-treatment. By treatment Day 5, all individuals tested negative for Bd and remained negative until the end of the experiment. No side effects associated with itraconazole were observed. The present method appears to be a safe and effective approach for Bd eradication and may contribute to reducing the threat and spread of Bd among endangered amphibians. Notably, this study represents the first reported Bd eradication experiment involving Japanese giant salamanders.     

Morganella morganii as a Causative Agent of Disease in the Chinese Giant Salamander （Andrias davidianus）

Morganella morganii strain 602-1 was isolated from a sick Chinese giant salamander （Andrias davidianus）. The strain 602-1 was identified through its physiological and biochemical properties and 16S rDNA gene amplification and analyses. Pathogenicity was proven by experimental animal infection, and histopathological examination. The results showed that the amplified 16S rDNA sequence of strain 602-1 was 1455 bp, and showed 99% identity with M. morganii. In the host infection experiment, the mortality of Chinese giant salamanders was about 70%. Pathological changes occurred in the spleen, heart, liver, kidney and intestine. This study will help the prevention, understanding and cure for M. morganii infections in amphibians.     

卢氏县大鲵种群年龄结构和性比的初步研究

对大鲵种群样本(n=252)及观察到的当年孵化的幼鲵进行测量,样本采自河南省卢氏县大鲵自然保护区。以大鲵体长、体重为指标,用重心法聚类划分出8个年龄组(不含当年孵化幼鲵)。在此基础上结合大鲵的生长发育特点,同时与人工养殖条件下的生长情况进行对照,根据样本聚类情况推断出大鲵5个个体年龄组及相应的体长和体重指标,对卢氏县大鲵20世纪90年代初的种群年龄结构和性比进行了分析,探讨了以大鲵体长和体重为生长指标、用聚类分析法划分大鲵年龄组的可能性。     

正常和蛙病毒感染后大鲵血清和黏液蛋白图谱比较分析

为了更好地了解大鲵在感染蛙病毒过程中的生理生化及抗病毒反应, 通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 辅以密度分析, 对大鲵正常血清和感染血清、正常黏液和感染黏液的蛋白图谱分别进行测试比较。结果显示: 在正常血清(CS)、包括自然感染血清(NS)和人工感染血清(AS)在内的感染血清中,蛋白带集中在6080 kD, 其含量超过血清蛋白总量的42%; 正常血清在1457 kD 之间有16条蛋白带: 57、53、50、43、40、38、36、31、27、26、25、22、16、15.5、15 和14 kD, 其中正常与感染血清(包括NS和AS)比较, 有10条共有蛋白带: 57、43、40、31、27、26、25、15.5、15 和14 kD和4条差异蛋白带: 53、33、22 和16 kD。正常黏液(CM)和感染黏液(NM或AM)共有11条蛋白带: 116、100、75、57、53、45、27、18、17、16和15 kD, 但感染黏液多出7 条蛋白带: 90、52、43、32、26、20 和13 kD。还有些蛋白带含量出现变化, 如45 kD条带在CM中占总蛋白量的19.3%, 而在AM中仅占总蛋白的3.8%。研究证实蛙病毒感染能导致大鲵黏液和血清蛋白图谱发生变化, 也为深入探寻两栖类抗病毒相关的蛋白生物标记提供了有价值的信息。     

Ultrastructure of the skin mechanoreceptors of the Chinese giant salamander, Andrias davidianus

The ultrastructure of two kinds of mechanoreceptive organs, pit organs and neuromasts, in the skin of adult giant salamanders (Andrias davidianus) was studied by transmission electron microscopy. Neuromasts and pit organs differ in their types of synapses, the spatial distribution of kinocilia on sensory cells, and in the degree to which sensory cells are separated by processes of the supporting cells; the two organs probably serve complementary functions. The neuromasts in A. davidianus differ from those of other salamanders in the orientation of kinocilia, in the extent of intrusion of supporting cells into the sensory layer, in the degree of thickening of the synaptic membranes, in the distribution of synaptic spheres, and by the absence of a cupula.     

中国大鲵研究概况

中国大鲵(Andrias davidianus)为我国特有物种, 也是国家二类保护水生野生动物。野生大鲵多栖息在山区溪流里, 喜穴居, 怕光怕声, 以鱼蟹等水生动物为食, 从数量上看, 以陕西秦岭山区居多。大鲵经济价值极高, 在美食、保健、医药、观赏等方面均具有广泛开发利用的前景, 因而颇受社会各界关注。近年来对大鲵的科学研究涉及多个方面, 包括疾病方面, 如病毒性疾病、细菌性疾病、真菌性疾病、寄生虫性疾病等; 生理与发育方面, 如生长、发育、应激反应等; 遗传与进化方面; 保护与开发方面, 如开发药品、食品、保健品等。综上, 围绕大鲵从不同角度所展开的研究非常丰富。大鲵基因水平的研究仍是未来研究的热点和趋势, 其成果将为日后更深层的探究奠定基础。     

Historical museum collections clarify the evolutionary history of cryptic species radiation in the world's largest amphibians

Inaccurate taxonomic assessment of threatened populations can hinder conservation prioritization and management, with human‐mediated population movements obscuring biogeographic patterns and confounding reconstructions of evolutionary history. Giant salamanders were formerly distributed widely across China, and are interpreted as a single species, Andrias davidianus. Previous phylogenetic studies have identified distinct Chinese giant salamander lineages but were unable to associate these consistently with different landscapes, probably because population structure has been modified by human‐mediated translocations for recent commercial farming. We investigated the evolutionary history and relationships of allopatric Chinese giant salamander populations with Next‐Generation Sequencing methods, using historical museum specimens and late 20th‐century samples, and retrieved partial or near‐complete mitogenomes for 17 individuals. Samples from populations unlikely to have been affected by translocations form three clades from separate regions of China, spatially congruent with isolation by either major river drainages or mountain ranges. Pliocene–Pleistocene divergences for these clades are consistent with topographic modification of southern China associated with uplift of the Qinghai‐Tibet Plateau. General Mixed Yule Coalescent model analysis indicates that these clades represent separate species: Andrias davidianus (Blanchard, 1871) (northern Yangtze/Sichuan), Andrias sligoi (Boulenger, 1924) (Pearl/Nanling), and an undescribed species (Huangshan). Andrias sligoi is possibly the world's largest amphibian. Inclusion of additional reportedly wild samples from areas of known giant salamander exploitation and movement leads to increasing loss of biogeographic signal. Wild Chinese giant salamander populations are now critically depleted or extirpated, and conservation actions should be updated to recognize the existence of multiple species.