新型战伤急救止血剂体内抗菌活性的实验研究

目的:探讨新型战伤急救止血剂对家兔急性感染伤口的抗菌作用。方法:选用兔感染创面模型,分新型战伤止血剂、5A沸石、Quiclot和空白对照组对创面进行治疗,通过组织学观察、组织内细菌计数等方法对各组抗菌性能进行研究。结果:肉眼和组织学观察新型战伤急救止血剂治疗组动物模型伤口,炎症反应均小于其他各组;新型战伤急救止血剂治疗组织内细菌计数为104,比其他3组显著减少(P<0.01)。结论:新型战伤急救止血剂具有良好的体内抗菌性能。     

新型战伤急救止血剂体外细胞毒性研究

目的:研究新型战伤急救止血剂的体外细胞毒性,初步探讨其用于战伤急救止血时的生物安全性.方法:参照我国医疗器械生物学评价标准,选用小鼠L929细胞,应用MTT法、直接接触培养法、流式细胞检测细胞凋亡法、扫描电镜直接观察细胞生长状况等检测新型战伤急救止血剂的细胞毒性.结果:新型战伤急救止血剂细胞毒性为0-1级,符合我国医疗器械评价标准毒性分级标准,各浓度组与阴性对照组无差异,P＞0.05;L929细胞与沸石直接接触生长良好,流式细胞仪检测细胞凋亡率与阴性对照组无差异;扫描电镜观察在沸石表面生长良好.结论:复合新型战伤急救止血剂细胞相容性良好,符合我国医疗器械安全性评价标准,是一种安全、高效、多功能的战伤止血剂.     

Cu 型医用抗菌不锈钢在大鼠体内抗细菌感染研究

目的:比较普通304医用不锈钢和304-Cu型医用抗菌不锈钢的体内抗细菌感染性能。方法:将两种不锈钢片涂布浓度为1×107cfu/mL的金黄色葡萄球菌培养24 h,植入SD大鼠胫腓骨肌袋内,继续饲养并在术前及术后第1、4、7、14天进行大体观察、植入部位细菌培养、白细胞计数、组织学观察等检测。结果:普通304不锈钢组术后中度化脓,检测到较多细菌,白细胞增多且有大量的炎症细胞出现;而304-Cu型抗菌不锈钢术后只有轻微化脓,检测到的细菌较少,白细胞数稍有增多但无统计学差异,炎症细胞少,感染程度轻。结论:与医用304不锈钢相比,304-Cu型抗菌不锈钢有较好的抗细菌性能,有一定的抗感染作用。     

枯草芽胞杆菌喷雾剂防治小鼠创伤创面金黄色葡萄球菌感染的实验研究

目的：观察枯草芽胞杆菌喷雾剂对小鼠创伤创面金黄色葡萄球菌感染的治疗效果。方法：采用小鼠创伤感染模型,切取创面组织做细菌定量检查,第4天活杀取肺、肝组织做细菌定量检查,同时做心血培养。结果：枯草芽胞杆菌喷雾剂可显著抑制小鼠创伤创面金黄色葡萄球菌的生长,无菌血症发生。结论：枯草芽胞杆菌喷雾剂对金黄色葡萄球菌引起的体表创伤感染有较强的防治效果。     

创面生物活性玻璃修复材料促进家猪创面愈合的实验研究

目的：观察创面生物活性玻璃修复材料对家猪皮肤创面的促愈合作用。方法：选择14头家猪,随机分成7组,每组2头,在每头猪的脊柱两旁制造3个4×4cm的全层皮肤缺损的创面模型,每头猪6个创面又分成实验组和空白对照组,于试验后每天观察创面愈合情况,第1、3、7、14、21、28、35天图像分析计算创面愈合率,并同时取创面组织行组织学染色,观察各组材料对家猪皮肤全层缺损创面愈合的影响。结果：在涂材料的实验组和空白对照组创面愈合时间分别是23.19±1.27d、29.52±1.54d两组组间比较,具有统计学意义（P〈0.05）;实验组的创面愈合率在各时间段均高于空白对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;组织学观察实验组的上皮化程度、表皮生长、成纤维细胞、毛细血管数量均好于空白对照组。结论：创面生物活性玻璃修复材料对家猪皮肤创面愈合具有促进作用,可作为一种新型的促愈合覆盖材料进一步研究。     

马桑水提取物对大鼠深Ⅱ度烧伤创面微循环和氧化应激的影响

目的：探索马桑水提取物（CSME）对大鼠深Ⅱ度烧伤创面微循环和氧化应激的影响。方法：随机将180只SD大鼠分成6组（n=30）：对照组（生理盐水组,NS）、凡士林组（WPL）、磺胺嘧啶银组（SSD）、马桑提取物组（低剂量组（CSME-L）、中剂量组（CSME-M）和高剂量组（CSME-H）。麻醉后用烫伤仪烫伤脱毛区（病理结果证实深Ⅱ度烫伤）,伤后创面分别涂擦NS、WPL、SSD和不同浓度的CSME烧伤软膏。于伤后48 h、7 d、14 d、21 d计算创面愈合率（HR）,检测创面微血管（MVD）、创面组织含水量（TM）、血管内皮生长因子（VEGF）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、羟脯氨酸（HYP）,进行创面组织学观察。结果：CSME各组的HR呈剂量依赖性大于NS和WPL （P<0.05）;在21 d,其创面组织血管管径、数量、分布及TM呈剂量依赖性少于其他各组（P<0.05）,伤后7 d、14 d,CSME各组呈现剂量依赖性高于NS、WPL和SSD （P<0.05）,而伤后21 d呈剂量依赖性低于NS、WPL和SSD （P<0.05）;CSME的SOD活性、HYP、NO和ET含量呈剂量依赖性高于其他各组（P<0.05）,而MDA活性呈剂量依赖性弱于其他各组（P<0.05）,CSME呈剂量依赖性缩短创面修复时间,瘢痕少于其他各组。结论：CSME具有早期减轻烧伤创面组织水肿、促进创面收缩、加快创面结痂以及促进肉芽组织增生,有利于创面愈合;后期则抑制创面肉芽组织增生,防止瘢痕过度增生。其机制与创面微循环、氧化应激、NO和VEGF的调控有关。     

高压氧联合负压封闭引流术治疗口腔颌面部间隙感染的效果观察

摘要 目的：研究高压氧联合负压封闭引流术治疗口腔颌面部间隙感染的效果。方法：选择2017年12月～2019年12月于遂宁市中心医院（我院）的100例口腔颌面部间隙感染患者,将其随机分为两组。对照组的50例口腔颌面部间隙感染患者在常规清创后采用负压封闭引流术,观察组的50例口腔颌面部间隙感染患者在负压封闭引流术的基础上联用高压氧疗法。检测两组的超敏C反应蛋白(High sensitivity C-reactive protein, hs-CRP)、降钙素原(Procalcitonin , PCT)和白细胞(White blood cell, WBC)计数水平;并记录两组的伤口愈合时间、住院时间和肉芽组织生长时间。结果：观察组口腔颌面部间隙感染患者的有效率明显高于对照组(P<0.05);治疗后,两组的血清hs-CRP、PCT和WBC水平均明显降低(P<0.05),且观察组的血清hs-CRP、PCT和WBC水平明显低于对照组(P<0.05);观察组口腔颌面部间隙感染患者的伤口愈合时间、住院时间和肉芽组织生长时间均明显短于对照组(P<0.05)。结论：高压氧联合负压封闭引流术能明显降低口腔颌面部间隙感染患者的血清hs-CRP、PCT和WBC水平,加快创腔创面肉芽组织的生长速度,提高疗效,值得进行推广。     

烧烫伤创面感染的小鼠模型构建

目的探讨一种简单、稳定的烧烫伤创面感染的小鼠模型构建方法,以便进行相关烧烫伤创面修复研究。方法取30只BALB/c小鼠,采用自制木质烫伤板,沸水浴法烫取直径8 mm的圆形创面,烫伤时间分别为5 s、10 s、15 s。伤后48 h,取创面组织进行HE染色观察,筛选最佳创面烫伤时间。另取72只小鼠制成深Ⅱ度烫伤创面,采用擦刮法分别接种20μL菌浓度为1×106、l×107、1×108CFU/mL金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC 25923的菌液。接种细菌后72 h,取创面组织HE染色观察创面炎症反应情况,并测定3、7、14 d的皮肤菌负荷,筛选最佳的细菌接种浓度。最后,按最佳条件建模后,观察创面的完全愈合时间以及创面愈中、愈后的组织学变化,以确定此创面感染模型是否建立成功。结果组织学结果表明,10 s为深Ⅱ度创面的理想致伤时间,最佳接种菌浓度为l×108CFU/mL,此时期,14 d内菌负荷均高于l×105CFU/g。该模型的创面愈合时间(21±0.95 d)较正常创面愈合时间(15.92±0.34 d)明显延长(P<0.01),炎性反应明显,愈后不佳。结论烧烫伤创面感染的小鼠模型构建成功,可作为感染创面防治研究的实验动物模型。     

家蝇幼虫抗菌肽对铜绿假单胞菌感染小鼠创面的抗菌活性

通过超声处理诱导家蝇幼虫产生抗菌肤,观察抗菌肤对铜绿假单胞菌感染小鼠创面的抗菌作用.超声处理诱导家蝇幼虫产生抗菌肽,经分离纯化后,体外试验分析抗菌肽的抑菌特性.结果表明,术后对照组小鼠相比其他两组活动减少,且3组白细胞计数均减少.14 d后对照组存活率为30%,明显少于磺胺米隆组90%(P＜0.05)和抗菌肽组80%(P＜0.05).对照组小鼠的重量在第6 d开始下降,明显少于其他两组(P＜0.05).而无菌对照组无死亡,重量持续增加.因此,超声处理能诱导家蝇幼虫产生抗菌肽,其对铜绿假单胞菌感染的ICR小鼠创面有较强抗感染作用.能明显增加其存活率.     

细菌生物膜形成与慢性难愈性创面相关性的研究进展

感染是影响慢性难愈性创面愈合最常见的原因,由于多种细菌混合感染、耐药性产生、生物膜的形成使其治疗成为难题.其中,细菌生物膜形成是导致创面的难以愈合的重要因素之一.本文就慢性难愈合创面中细菌生物膜的形成机制、特征、生态学、对伤口愈合的影响以及可能的治疗对策等作一综述.     

VSD联合金因肽治疗手足外科难愈性伤口的临床研究

目的:观察封闭式负压引流技术(VSD)联合金因肽治疗手足外科难愈性伤口的临床疗效,为临床联合运用提供依据。方法:86例手足外科难愈性伤口患者随机分为治疗组和对照组各43例,治疗组采用VSD联合金因肽治疗,对照组采用常规换药治疗,观察两组临床疗效和上皮化时间、愈合时间、创面愈合率、换药次数、伤口疼痛评分、住院费用差异。结果:治疗组总有效率90.70%;对照组总有效率72.09%;两组比较,有显著性差异(P0.05);治疗组上皮化时间、愈合时间、创面愈合率、换药次数、伤口疼痛评分、住院费用较对照组相比明显缩短,差异有统计学意义(P0.05)。结论:VSD联合金因肽治疗手足外科难愈性伤口疗效确切,能更好促进损伤组织的修复,加速创面愈合,值得临床推广应用。     

封闭负压引流联合局部给氧治疗兔耳缺血性创面的实验研究

目的：观察封闭负压引流联合局部给氧促进兔耳缺血性创面愈合的效果。方法：28只大耳白兔,双耳背各造成直径2．5cm全层皮肤缺损,结扎中央血管神经束及后边缘动静脉,形成缺血创面。56个创面随机分为七组：A组（-50mmHg负压同时给氧,浓度为40％±5％,每日4小时）、B组（持续-50mmHg负压4小时继之局部给氧l小时）、c组（负压治疗4min,停止1min,每日4小时,之后给氧1小时）,D组（．50mrnHg负压治疗每日4小时）、E组（-125rnmHg负压治疗每日4小时）、F组（单纯给40％±5％氧l小时）和G组（空白对照）。在创面形成第0、1、3、5、7、10、14、18天拍照,测量创面面积,计算创面愈合率及创面愈合时间;在各时相点切取创面标本,组织学观察创面肉芽、上皮生长、水肿和炎细胞,Ki67免疫组化标记增殖细胞并计算增殖指数,TUNEL法计算凋亡指数。结果：负压给氧组在相同时相点创面愈合率高于单纯负压、氧疗或空白组（P〈0．05）,创面肉芽生长快,水肿和炎症轻,细胞增殖指数高于对照组（P〈0．05）,而细胞凋亡指数显著低于对照组（P〈0．05）。结论：负压联合局部给氧能显著促进兔耳缺血创面的愈合。     

炎症因子、生长因子以及凋亡因子在压疮慢性难愈合性创面中的表达及作用

目的：探讨炎症反应、生长因子及凋亡因子在压疮慢性创面中的表达及作用。方法：选取2013年10月至2015年7月河南大学第一附属医院收治的患者,其中临床Ⅲ、Ⅳ期压疮患者共20例,急性创面10例,正常皮肤组织6例。通过HE染色观察不同创面组织的形态学特征;免疫组织化学法检测组织中细胞凋亡因子Caspase-3的分布规律;荧光定量PCR法定量分析IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF、bFGF及其受体KDR、FGFR1基因水平的变化特征。结果：Ⅲ、Ⅳ期压疮创面中可见炎性细胞浸润;凋亡信号因子caspase-3在压疮组中的表达高于其他两组,差异有统计学意义;IL-1β、IL-6、TNF-α表达高于急性创面组和正常皮肤组;VEGF和bFGF生长因子及其受体KDR和bFGFR1表达分别低于对照组。结论：炎症因子和凋亡因子在压疮慢性创面中持续长时间的高表达、生长因子及其受体显著的低表达可能是压疮慢性难愈合性创面形成的机制和难以彻底治愈的重要因素。     

壳聚糖-三聚磷酸钠纳米粒对于肝组织严重出血模型的止血效果

目的:建立SD大鼠肝脏严重出血模型,考察壳聚糖-三聚磷酸钠(TPP)纳米粒的止血效果对于实质性器官严重出血的止血效果。方法:24只SD大鼠各分3组,每组8只,分为阴性对照组、壳聚糖-TPP组(NP组)和正常组,其中阴性对照组和NP组的大鼠建立肝脏严重出血模型。NP组,将壳聚糖-TPP纳米粒喷射到伤口,直至将整个伤口覆盖。阴性对照组,不使用任何止血材料处理创面。术后15天,用SEM和TEM观察NP组和阴性对照组的肝组织的微观结构。结果:通过组织学检查发现壳聚糖-TPP纳米粒在治疗严重伤口时能加速肉芽和大量胶原蛋白的生成,这正是伤口愈合初期的标志。结论:壳聚糖-TPP纳米粒对于严重出血的实质器官可发挥优良的止血性能,并能促使伤口愈合。     

Negative-Pressure Wound Therapy Enhances Local Inflammatory Responses in Acute Infected Soft-Tissue Wound

Clinical studies found that negative-pressure wound therapy (NPWT) displayed significant clinical benefits in the healing of infected wounds. However, the effect of NPWT on local inflammatory responses in acute infected soft-tissue wound has not been investigated thoroughly. The purpose of this study was to test the impact of NPWT on local expression of proinflammatory cytokines, amount of neutrophils, and bacterial bioburden in wound from acute infected soft-tissue wounds. Full-thickness wounds were created on the back of rabbits, and were inoculated with Staphylococcus aureus strain ATCC29213. The wounds were treated with sterile saline-moistened gauze dressings and NPWT with continuous negative pressure (?125 mmHg). Wound samples were harvested on days 0 (6 h after bacterial inoculation), 2, 4, 6, and 8 at the center of wound beds before irrigation for real-time PCR analysis of gene expression of IL-1β, IL-8, and TNF-α. Wound biopsies were examined histologically for neutrophil quantification in different layers of tissue. Quantitative bacterial cultures at the same time point were analyzed for bacterial clearance. Application of NPWT to acute infected wounds in rabbits was compared with treatment with sterile saline-moistened gauze, over an 8-day period. NPWT-treated wounds exhibited earlier and greater peaking of IL-1β and IL-8 expression and decrease in TNF-α expression over the early 4 days (P < 0.05). Furthermore, histologic examination revealed that significantly increased neutrophil count was observed in the shallow layer in wound biopsies of NPWT treatment at day 2 (P < 0.001). In addition, there was a statistically significant decrease of bacteria load from baseline (day 0) at days 2 and 8 in NPWT group (P < 0.05). In conclusion, this study demonstrates that NPWT of acute infected soft-tissue wounds leads to increased local IL-1β and IL-8 expression in early phase of inflammation, which may trigger accumulation of neutrophils and thus accelerate bacterial clearance. Meanwhile, the success of NPWT in the treatment of acute wounds can attenuate the expression of TNF-α, and the result may partly explain how NPWT can avoid significantly impairing wound healing.     

Anti-bacterial effects of poly-N-acetyl-glucosamine nanofibers in cutaneous wound healing: requirement for Akt1

BACKGROUND: Treatment of cutaneous wounds with poly-N-acetyl-glucosamine nanofibers (sNAG) results in increased kinetics of wound closure in diabetic animal models, which is due in part to increased expression of several cytokines, growth factors, and innate immune activation. Defensins are also important for wound healing and anti-microbial activities. Therefore, we tested whether sNAG nanofibers induce defensin expression resulting in bacterial clearance. METHODOLOGY: The role of sNAG in defensin expression was examined using immunofluoresence microscopy, pharmacological inhibition, and shRNA knockdown in vitro. The ability of sNAG treatment to induce defensin expression and bacterial clearance in WT and AKT1-/- mice was carried out using immunofluoresent microscopy and tissue gram staining. Neutralization, using an antibody directed against β-defensin 3, was utilized to determine if the antimicrobial properties of sNAG are dependent on the induction of defensin expression. CONCLUSIONS/FINDINGS: sNAG treatment causes increased expression of both α- and β-type defensins in endothelial cells and β-type defensins in keratinocytes. Pharmacological inhibition and shRNA knockdown implicates Akt1 in sNAG-dependent defensin expression in vitro, an activity also shown in an in vivo wound healing model. Importantly, sNAG treatment results in increased kinetics of wound closure in wild type animals. sNAG treatment decreases bacterial infection of cutaneous wounds infected with Staphylococcus aureus in wild type control animals but not in similarly treated Akt1 null animals. Furthermore, sNAG treatment of S. aureus infected wounds show an increased expression of β-defensin 3 which is required for sNAG-dependent bacterial clearance. Our findings suggest that Akt1 is involved in the regulation of defensin expression and the innate immune response important for bacterial clearance. Moreover, these findings support the use of sNAG nanofibers as a novel method for enhancing wound closure while simultaneously decreasing wound infection.     

壳聚糖抗菌生物医用膜在烧伤创面中的临床应用

目的总结水溶性壳聚糖抗菌生物医用膜凝胶剂(商品名:凯舒林)对人体II度烧伤创面的治疗作用和安全性,并探索后期创面色素沉着、瘢痕增殖的机制。方法选择II度烧伤患者60例,用药前均用生理盐水清洁创面、去腐皮,于创面上均匀涂壳聚糖抗菌生物医用膜治疗,观察记录创面成痂、止痛、感染及痂下愈合时间,追踪随访6个月后创面色素沉着及瘢痕增殖程度。结果本组60例使用壳聚糖抗菌生物医用膜治疗的烧伤患者,创面全部自行愈合。治愈时间:浅Ⅱ度患者平均8.5 d;深Ⅱ度患者平均19 d。创面愈合后随访6个月,浅Ⅱ度创面患者3个月内有轻度色素改变,3个月后逐步恢复正常;深Ⅱ度创面患者3个月后部分患者有散在的点样色素脱失改变;部分患者有散在的扁平瘢痕。随访6个月,创面色素沉着和瘢痕增生程度明显减轻,功能明显改善,未见瘢痕疙瘩增殖。结论壳聚糖抗菌生物医用膜用于烧伤创面具有良好的组织相容性,止痛效果好,创面成痂快,兼有控制创面感染,促进愈合,减轻瘢痕增殖的作用,无明显不良反应,安全性好。