高效液相色谱建立掌叶大黄指纹图谱

采用高效液相色谱法建立不同来源掌叶大黄的指纹图谱,为其质量控制提供依据。本实验方法采用Nucleodur C18（4．6mm×250mm,5μm）色谱柱,流动相以甲醇：0．5％磷酸水溶液（1：9,V／V）作为A相,乙腈作为B相进行梯度洗脱（流速0．8mL／min,检测波长280nm）。通过聚类分析和相似度分析处理,14个不同来源的掌叶大黄样品被初步分为两大类：正品掌叶大黄和非正品。实验方法简便、可靠,可成为掌叶大黄质量评价的有效手段。     

甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂热贮稳定性研究

采用高效液相色谱法分析甲维盐微乳剂,以甲醇＋0．2％三乙胺溶液＋乙腈（V：V：V=30：30：40）为流动相,采用XterraRP184．6150mm色谱柱,检测波长245nm,测得54±2℃条件下14d分解率为3．42％。室内毒力测定热贮前后1％甲维盐微乳剂Lc50分别为0．499mg／L和0．524mg／L,热贮分解率为4．78％,与高效液相色谱测定结果基本一致。     

高效液相法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林含量

建立阿司匹林片HPLC含量测定方法。采用Kromasil（C18 150mm×4．6mm,5u）色谱柱,以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（23：5：5：61）为流动相;检测波长为280nm;流速1．0mL／min;进样量20uL,柱温：室温。阿司匹林在12．5～250ug／mL范围内有良好的线性关系。平均回收率100.22％,RSD为1．2％。本法操作简便、快速、结果准确、专属性强。     

反相高效液相色谱法测定不同产地紫苏子和白苏子中乌索酸和齐墩果酸

建立反相高效液相色谱（RP—HPLC）法测定了紫苏子和白苏子中乌索酸和齐墩果酸的含量。色谱柱为Kromasil C18柱（250mm×4．6mm,5um）,光电二极管阵列检测（PAD）,流动相甲醇一水体积比为87：13,检测波长210nm,流速0．8mL／min,柱温28℃。乌索酸在10～400ug／mL,齐墩果酸在5～200ug／mL内呈现良好的线性关系,平均加样回收率分别为100．6％和98．7％,相对标准偏差（RSD）分别为1．6％和1．2％。     

煎炸大豆油和云南牛干巴的品质变化与丙烯酰胺生成的关系及HPLC测定方法的建立

目的：探讨油炸云南牛干巴中丙烯酰胺含量与煎炸大豆油品质以及与牛干巴品质的动态关系,探索出一种适合检测油炸肉类食品中丙烯酰胺含量的高效液相色谱法。方法：用C18小柱结合活性炭小柱处理云南牛干巴样品,以甲醇为溶剂、甲醇和水（10：90）为流动相,流速为0.6mL/min,紫外检测波长为198nm的液相色谱条件下检测云南牛干巴中丙烯酰胺含量。结果：云南牛干巴中丙烯酰胺含量与煎炸大豆油的酸价相关性最大（相关系数为0.971）,与羰基价的相关性次之（相关系数为0.949）,与过氧化值的相关性最小（相关系数为0.928）;牛干巴中丙烯酰胺含量与牛干巴的a*相关性最大（相关系数为0.952）,与褐变度的相关性次之（相关系数为0.941）,而与TBARS值的相关性最小（相关系数为0.929）;C18小柱结合活性炭小柱处理样品可以使样品中的丙烯酰胺与杂质在保留时间（5.2min）完全分离,该方法的RSD为1.556%、平均回收率为96.61%、检出限为14.7μg /kg。结论：建立了一种适合检测油炸肉类食品中丙烯酰胺含量的快速、准确、高效的方法。     

虫草制品中腺苷和虫草素含量的RP-HPLC分析

采用超声提取,反相高效液相色谱方法分析了各种虫草制品中的腺苷和虫草素的含量,以含0．05mol／L 的磷酸二氢钾：甲醇（85／15,V／V）作为流动相。检测波长为260nm。进样量为10μL,40℃条件下检测。在5mg／L到250mg／L的浓度范围内呈线性相关。研究显示利用蒸馏水在60℃超声提取20min,腺苷和虫草素的回收率在85％-95％之间。     

用高效液相色谱定量分析分支链氨基酸

目的：周2,4-二硝基氟苯（DNFB）对分支链氨基酸衍生后,采用优化的高效液相色谱（HPLC）对其进行定量分析。方法：色谱柱为AgilentZORBAXEclipsAAA（4．6mm×150mm,5-Micron）,流动相为乙酸盐缓冲液（pH6．4）-乙腈,流速1．0mL／min,检测波长360nm。结果：用HPLC法测定分支链氨基酸的浓度为20-200mg／L时线性关系良好,3种分支链氨基酸的R。均在0．9997以上,平均回收率高,RSD≤0．56％（n=6）。结论：此方法快速、准确、重现性好,适合于对发酵液中分支链氨基酸的定量分析。     

固相萃取-高效液相色谱法测定沙苑子苷含量

目的：建立沙苑子总黄酮中沙苑子苷的含量测定方法。方法：用以氨基为固定相的固相萃取柱对沙苑子总黄酮进行纯化,洗去杂质后的洗脱液进高效液相色谱仪测定。色谱柱为VP—ODS（150mm×4．6mm,5um）,流动相为甲醇：1％HAC溶液（41：59）;流速1．2mL／min;检测波长266nm。结果：沙苑子苷在5—25μg／mL范围内呈良好的线性关系,加样回收率为102．5％,RSD2．3％。结论：本法灵敏、快速、准确,可用于测定沙苑子总黄酮中沙苑子苷的含量。     

保健食品中红景天甙含量测定及其稳定性研究

测定保健食品中红景天甙的含量以控制产品质量。采用十八烷基硅烷键合硅胶柱;以乙腈-水（1：9）为流动相,流速为1.0mL／min,检测波长为280nm。结果表明红景天甙在0．4—4．0μg范围内呈线性关系,平均回收率（n=6）为98．96％（RSD=1.16％）。该方法简便、准确、重现性好,可用于保健食品中红景天甙的质量控制。     

高效液相色谱法测定羊痫疯丸中盐酸小檗碱含量

目的：建立高效液相色谱法测定羊痫疯丸中盐酸小檗碱含量的方法。方法：采用Agilent ZORBAX SB-C18（250mm×4．6mm,5μm）色谱柱,流动相：乙腈-0．05mol／L磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH值至3）（25：75）,流速：1．0mL／min,检测波长264nm,柱温40℃。结果：线形范围是：盐酸小檗碱0．0446～1．1150μg,r=0．9998（n=5）。平均回收率为97．25％,RSD为3．14％。结论：方法简便、快速准确,重现性好。可作为羊痫疯丸的质量控制方法。     

高效液相法测定香菇菇柄麦角甾醇的含量

采用高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HPLC)建立了测定菇柄麦角甾醇的含量测定方法。确定提取过程中皂化剂的种类和醇碱比后,将样品皂化,萃取后蒸干溶剂,乙醇定容测定。采用Phe-nomenex-C18色谱柱,V(流动相甲醇)∶V(水)=98∶2,流速1.0 mL/min,检测波长282 nm。结果表明:麦角甾醇线性回归方程为Y=9E+9×106X-8919.9(X:质量浓度,mg/mL),R2=0.998 9,0.01~0.30 mg/mL范围内线性关系良好,回收率为97.31%~101.95%。与紫外分光光度法所测结果比较,HPLC法测定菇柄中麦角甾醇含量灵敏、快速、准确,适用菇柄中麦角甾醇的含量测定。     

HPLC法测定前列舒乐颗粒中淫羊藿苷的含量

目的:建立前列舒乐颗粒中淫羊藿苷的HPLC测定方法。方法:以C18(4.6 mm×15 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-水(30∶70)为流动相,流速1 mL/min,测定波长270 nm。结果:线性范围在0.40～4.00μg(r=0.9999),平均回收率为99.79%,RSD=2.5%(n=6)。结论:本方法简便可行,重现性好,结果可靠,可以用来测定淫羊藿苷的含量,控制前列舒乐颗粒的质量。     

SEC-HPLC法测定重组人生长激素注射液中苯酚含量

采用SEC-HPLC法测定重组人生长激素注射液中苯酚的含量。色谱柱为TSK G2000SWxL（7.8×300mm,5μ）,流动相为PB（pH值7.0）-异丙醇（97∶3）,流速0.6 mL/min,检测波长214nm,柱温25℃。苯酚在0.10～1.00 mg/mL浓度范围内线性关系良好,r=0.99915;最低检测限为0.5 ng/mL;平均回收率101.48%,RSD=0.58%（n=9）;3批重组人生长激素注射液中苯酚的含量分别为2.98、3.02和2.96 mg/mL,分别为标示量的99.33%、100.67%和98.67%。SEC-HPLC法环保、准确、快速、可靠,可用于重组人生长激素注射液中苯酚含量的测定。     

高效液相色谱法测定蒲公英提取物中咖啡酸含量

建立了一种高效液相色谱法测定蒲公英提取物中咖啡酸的含量。色谱柱为Diamonsil^TM（钻石）C18（4．6mm×150mm,5μm）,流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液（1．56g磷酸二氢钠／1000mL水,磷酸调节pH值3．8—4．0）（体积比为23：77）;检测波长为323nm,柱温为40℃。研究结果表明：线性范围为2．44—14．64mg/L,回归方程为y=41742x＋2287．9相关系数为R^2=0．9996,加标平均回收率为97．5％。本方法具有灵敏度高、重现性好、准确度高、操作简便等特点。     

生物检材中佐匹克隆的GC/μECD测定

目的：建立液-液萃取、GC/μECD气相色谱测定生物检材中佐匹克隆的方法。方法：以家兔为模型动物,500 mg佐匹克隆标准品灌胃家兔,6.5小时后处死,取其胃、肝、血、脑、心脏、尿,采用乙醚液-液萃取提取,Rtx-5毛细管柱分离,电子捕获检测器检测,标准曲线法定量。结果：该方法灵敏度达0.02μg/mL,在0.05-50μg/mL范围内线性关系良好;低、中、高3种浓度的加样回收率分别为91.7%、99.5%、94.4%,相对标准偏差（RSD）均小于5%;佐匹克隆在家兔脏器中的浓度分别为7.31μg/mL（血液）、7.63μg/g（肝脏）、7.96μg/g（脑）、14.67μg/g（心脏）、32.18μg/g（胃组织）、42.65μg/mL（尿液）,在各脏器中呈特异性分布。结论：该法操作简单、灵敏度高,结果可靠,完全满足临床检测及公安机关在办理佐匹克隆麻醉案件中的需要。     

响应面法优化有机溶剂极端耐受性菌株Burkholderia sp．ZYB002产脂肪酶条件

Burkholderia sp．脂肪酶具有较高的有机溶剂耐受性和转酯活性,广泛应用于手性化合物的拆分。本研究利用统计学方法对一株具有有机溶剂极端耐受性的脂肪酶高产茵株Burkholderia sp．ZYB002在摇瓶培养条件下产脂肪酶条件进行了优化。通过单因素实验,首先确定了最适碳源、氮源、诱导荆等。以Plackett—Burrman设计筛选影响Burkholderia sp．ZYB002产酶的主要因素,通过最陡爬坡实验和响应面分析法确定产酶最适条件。K2HP04、大豆油乳化液和起始RH确定为影响菌株产酶的3个主效因素。最佳产酶条件为：糊精0．3％（W／V）,牛肉膏2．0％（W／V）,MgSO4．7H2O．075％（W／V）,K2HPO4 0．14％（W／V）,大豆油乳化液4．89％（V／V）,pH8．11,玻璃珠10颗／瓶,接种量2．0％（V／V）,30℃,250r／min,发酵时间22h。在此条件下,发酵液脂肪酶酶活最高达45．6U／mL,较发酵基本培养基发酵液的脂肪酶酶活提高了3．44倍。     

恒河猴血清孕酮含量测定方法

目的建立恒河猴血清中孕酮含量测定方法。方法本文采用放射免疫测定技术。结果孕酮的回收率为94％,批内CV为5．1％～8．3％,批间CV为4．5％～7．7％,灵敏度为5～10Pg。说明该方法具有较高的灵敏度、特异性、准确性。分别测定了幼年组、成年组和老年组的雌性恒河猴的血清中的孕酮含量分别为：（0．20±0．04）ng／mL、（6．26±0．17）ng,mL和（0．35±0．06）ng/mL;成年雌性恒河猴月经周期孕酮的变化范围为：滤泡期为（1．10±0．12）ng／mL,排卵期（2．36±0．18）ng/mL,黄体期（6．17±0．15）ng/mL,妊娠期随着妊娠月份的增加,孕酮浓度也增加,最高可达50ng／mL。结论经实验验证,该方法灵敏、可靠、适用,可作为恒河猴血清中孕酮含量测定的一种方法。     

Solid phase extraction--non-aqueous capillary electrophoresis for determination of metformin, phenformin and glyburide in human plasma

Solid phase extraction (SPE) was coupled at line to capillary electrophoresis (CE) for the determination of three basic and neutral diabetic drugs (metformin, phenformin and glyburide) in human plasma. The SPE procedure employed a C(18) cartridge to remove most of the water and proteins from the plasma sample. Analyte detectability was increased due to trace enrichment during the SPE process. Elution of metformin, phenformin and glyburide was achieved with methanol+3% acetic acid. CE analysis was performed using a non-aqueous buffer, acetonitrile+5mM ammonium acetate+5% acetic acid, which afforded rapid separation of metformin from phenformin within 3 min. Glyburide, with a migration time longer than 6 min, did not cause any interference. The present SPE-CE method, with an electrokinetic injection time of 6s and UV detection at 240 nm, was useful for monitoring down to 1 microg/mL of metformin and phenformin in human plasma. When the electrokinetic injection time was increased to 36s, the detection limits were improved to 12 ng/mL for metformin and 6 ng/mL for phenformin.     

Anion exchange SPE and liquid chromatography-tandem mass spectrometry in GHB analysis

In this study, the extraction of γ-hydroxybutyrate (GHB) from urine using solid-phase extraction (SPE) is described. SPE was performed on anion exchange columns after samples of urine had been diluted with de-ionized water. After application of the diluted samples containing GHB-d(6) as an internal standard, the sorbent was washed with deionized water and methanol and dried. The GHB was eluted from the SPE column with a solvent consisting of methanol containing 6% glacial acetic acid. The eluent was collected, evaporated to dryness, and dissolved in mobile phase (100 μL) for analysis by liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) in negative multiple reaction monitoring (MRM) mode. Liquid chromatography was performed in gradient mode employing a biphenyl column and a mobile phase consisting of acetontitrile (containing 0.1% formic acid) and 0.1% aqueous formic acid. The total run time for each analysis was less than 5 min. The limits of detection/quantification for this method were determined to be 50 and 100 ng/mL, respectively. The method was found to be linear from 500 ng/mL to 10,000 ng/mL (r(2)>0.995). The recovery of GHB was found to be greater than 75%. In this report, results of authentic urine samples analyzed for GHB by this method are presented. GHB concentrations in these samples were found to be range from less than 500 ng/mL to 5110 ng/mL.