均匀设计优化党参多糖硫酸酯合成工艺

用氨基磺酸法对党参多糖进行硫酸化修饰,采用均匀设计U8(43)对党参多糖硫酸酯化工艺进行优化设计,并用氯化钡-明胶法测定硫酸根的取代度。确定了党参多糖硫酸酯化最佳工艺条件:温度为60℃、时间15min、投料比为1:0.04(g/mol)。此种方法能够为多糖硫酸化的进一步研究提供研究参数。     

硫酸酯化洋葱多糖的制备及其抗氧化活性的研究

以洋葱为原料,采用水提醇沉法制备洋葱多糖。用浓硫酸法对洋葱多糖进行硫酸酯法修饰,采用硫酸酯取代度为指标,对硫酸酯化反应的浓硫酸与正丁醇的体积比和反应时间进行优化,并对不同浓度的硫酸酯化洋葱多糖进行体外抗氧化实验。结果表明,制备硫酸酯化洋葱多糖的较佳工艺为浓硫酸和正丁醇体积比3∶1,反应时间20min和反应温度0℃,在此条件下多糖硫酸根取代度为0.51。同时,洋葱多糖硫酸酯化改性后可显著提高抗氧化性。     

氯化钡对卡拉胶硫酸酯含量测定的影响

恒重定量,硫酸酯检测可以通过加入氯化钡溶液的量不同测得物质中硫酸酯含量,钡离子与硫酸根反应产生硫酸钡沉淀,随着氯化钡溶液加入量的增多综合的硫酸根变多,最终达到完全中和后,沉淀量不在随着氯化钡增多而变大,称量恒重质量进行准确性分析。     

刺槐豆多糖的硫酸酯化工艺优选

以刺槐豆多糖为材料,利用氯磺酸-吡啶法对其进行硫酸酯化,考察氯磺酸-吡啶不同配比、不同反应温度和反应时间对其影响,红外光谱分析硫酸根取代情况,对酯化产物进行热重分析。结果表明,刺槐豆多糖硫酸酯的最佳合成条件为氯磺酸：吡啶比例为1：6,反应温度为94℃,反应时间为2h。热重分析表明：与纯多糖比较,硫酸化的多糖热稳定性稍有降低,可能是由于引入了硫酸根对分子结构产生影响。     

硫酸酯化修饰葛仙米多糖工艺研究

采用氯磺酸-吡啶法合成硫酸酯化葛仙米多糖,利用正交设计对酯化试剂比例、反应温度及反应时间进行优化。通过傅里叶红外光谱分析酯化前后的结构差异,氯化钡-明胶比浊法测定取代度,并分析红外光谱法与取代度之间的相关性。结果表明:葛仙米多糖硫酸酯化修饰的最佳条件为V(氯磺酸)与V(吡啶)比例1:4、反应温度70℃、反应时间6h,此条件下取代度达到1.042;红外光谱分析表明,硫酸酯化后的葛仙米多糖具有硫酸酯键的特征吸收峰,其吸光度比值A1261/A1418与化学方法所测得的硫酸酯化取代度的相关系数达到0.974。红外光谱不仅可以表征硫酸酯化多糖的结构差异,还可定量硫酸基的取代度。     

海参多糖硫酸根含量的离子色谱法测定及其差异分析

经过三氟乙酸水解后,利用Dionex ICS-2000离子色谱仪对不同海参粗多糖、海参硫酸软骨素(SC-CHS)和海参岩藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)中的硫酸根(SO42-)进行了分离和测定。平均加标回收率为100.90%,相对标准偏差为2.12%,检测限达到3.9×10-2μg/mL。较之传统的多糖硫酸根的测定方法,本方法重复性好,测定更为简便、准确,可应用于其它硫酸多糖硫酸根的定量测定。测定结果显示,所有种类海参SC-CHS的硫酸根含量高于SC-FUC,不同种类海参的多糖硫酸根含量存在特征性差异。     

海带岩藻聚糖硫酸酯降解及基本结构分析

用离子交换色谱法对海带岩藻聚糖硫酸酯粗糖进行分离纯化,然后采用铜-过氧化氢氧化降解法获得低分子量多糖,对降解条件和产物进行研究。得出结论:离子交换色谱中加入一定浓度氯化钠,可以获得高硫酸根和岩藻糖含量的岩藻聚糖硫酸酯。红外光谱和核磁共振分析确定硫酸根的位置在C2或C3上,糖构型属于α-D-吡喃糖。研究表明自由基氧化降解海带岩藻聚糖硫酸酯的降解条件与其硫酸根和岩藻糖含量有关,硫酸根含量越高,多糖越难以降解。最优降解条件:60℃下,500μL 20mg/mL糖溶液,加入0.0267mol/L乙酸铜,F3、F4加10μL 15%H2O2,F5加50μL15%H2O2,反应4h。采用PAGE凝胶电泳方法可以很好的分析氧化降解产物的分子量分布。     

多糖的硫酸酯化及其对结构和功能活性的影响研究进展

硫酸酯化是近年来常见的多糖分子修饰方法,通过对多糖进行硫酸酯化修饰可以极大的改善多糖的功能特性。因此,本文首先综述了近年来常见的多糖硫酸酯化方法,然后从结构和功能两个方面,深入阐述了硫酸酯化对多糖分子结构和功能活性的影响,旨在为多糖硫酸酯的进一步研究提供参考。     

发酵液中硫酸酯化茯苓多糖(SP)的制备及其结构改性的研究

茯苓菌株HD06-10进行液态发酵培养,获得的茯苓多糖进行硫酸酯化结构改性处理,制备硫酸酯化茯苓多糖(SP),并采用正交设计法优化其制备条件。采用柱层析纯化得到SP精制品,并通过紫外光谱、琼脂糖凝胶电泳和红外光谱对SP进行纯度和理化、结构性质鉴定,结果表明:SP为多糖纯品,符合多糖及其硫酸根反应特征,分子量大约为5000～6000u;SP特性黏数降低,水溶性增加,IR分析有硫酸根的特征吸收峰,说明茯苓多糖的硫酸酯化成功。     

硫酸酯化修饰米糠多糖研究

采用氯磺酸-吡啶法合成硫酸酯化米糠多糖,以取代度为指标,采用正交设计时硫酸酯化试剂比例、反应温度以及反应时间进行优化,通过傅立叶红外光谱分析酯化前后的结构.结果表明,米糠多糖硫酸酯化修饰的最佳条件为:氯磺酸和吡啶的比例为1:4,反应温度70℃,反应时间2h,取代度达到1.29.红外光谱表明,硫酸酯化后的米糠多糖具有硫酸酯键的特征吸收峰.此方法优化米糠多糖的工艺方便可行,为硫酸酯化米糠多糖的进一步研究打下坚实的基础.     

微波消解-1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生-高效液相色谱法测定枸杞多糖含量及组成

目的 建立微波消解-1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone, PMP)柱前衍生-高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)测定枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides, LBPs)含量及组成的方法。方法 采用微波消解技术水解LBPs进行样品前处理,利用PMP进行柱前衍生,建立结合HPLC检测LBPs的方法,并利用该方法测定4个不同枸杞产地LBPs的含量及单糖组成。结果 经方法学评价,8种单糖均具有良好的线性关系,相关系数均大于0.98;平均加标回收率为94.95%~99.22%,相对标准偏差小于1.90%;检出限和定量限良好。结论 该方法可用于LBPs含量及组成的测定,分析表明LBPs主要由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、木糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸组成,不同产地LBPs含量存在差异,其中甘肃玉门含量较高。     

香青兰多糖的提取、测定及其对活性氧自由基的清除作用

建立了热水提取、乙醇沉淀、Sevag法去蛋白、有机溶剂分离纯化提取香青兰多糖的方法,并用苯酚 硫酸比色法测定其含量;同时采用生物化学法测定了香青兰多糖对活性氧自由基O2 -·、·OH和H2 O2 的清除能力和还原能力,以枸杞多糖作为对照品。实验结果表明:香青兰中多糖含量为6 38% ,回收率为93 6 %～10 5 6 % ,RSD =2 3% (n =4 )。香青兰多糖对O2 -·、·OH和H2 O2 具有良好的清除能力,同时还有较强的还原能力,它们的活性大小与多糖的用量呈正相相关性,且均比枸杞多糖的活性强。     

基于化学计量学的枸杞多糖部分酸水解产物PMP-HPLC指纹图谱

本文通过构建枸杞多糖的部分酸水解产物指纹图谱,结合多种化学计量学方法评价不同产地枸杞多糖的差异并用于市售样品的真伪鉴别。采用水提醇沉法提取16批不同产地的枸杞多糖,采用三氟乙酸部分水解,将水解产物中的单糖和寡糖采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化HPLC分析,通过中药色谱指纹图谱软件评估不同产地样品的相似性,采用聚类分析（HCA）、主成分分析（PCA）和偏最小二乘判别分析（PLS-DA）对指纹图谱进行综合评价。结果表明,不同产地枸杞多糖部分酸水解产物中均含有7种单糖、聚合度（DP 2~4）的半乳糖醛酸聚糖和3种其他类型的二糖。16批产地的枸杞多糖相似度在0.911~0.997,HCA、PCA和PLS-DA将不同产地的枸杞多糖分为3类,分类结果与产地有一定的相关性,并且筛选出3个影响产地间差异的标志性成分,分别为葡萄糖（Glc）、阿拉伯糖（Ara）和半乳糖（Gal）。本文建立的指纹图谱可用于枸杞多糖的质量控制。     

Polysaccharides derived from Lycium barbarum suppress IGF-1-induced angiogenesis via PI3K/HIF-1α/VEGF signalling pathways in MCF-7 cells

Lycium barbarum (LB) is a berry-type fruit. Lycium barbarum polysaccharides (LBPs), derived from LB, has anti-tumour properties and exhibits potent anti-angiogenic effects. The aim of this study was to elucidate possible signal transduction pathways functioning to mediate the breast cancer-suppressive effects of LBPs. Using MCF-7 cells, we determined that a 90 h treatment with 0.50 mg/ml of LBPs resulted in significant inhibition of cell proliferation. Using this same system, we observed that LBPs could also affect insulin-like growth factor (IGF)-1 protein accumulation, suppress phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) activity and phosphorylated-PI3K (p-PI3K) protein levels, inhibit hypoxia-inducible factor-1 (HIF-1α) protein accumulation without altering HIF-1α mRNA levels, and suppress VEGF mRNA expression and protein production. Our results demonstrate that LBPs may inhibit tumour cell growth by suppressing IGF-1-induced angiogenesis via PI3K/HIF-1α/VEGF signalling pathways.     

Review of the structural characterization,quality evaluation,and industrial application of Lycium barbarum polysaccharides

BackgroundLycium barbarum polysaccharides (LBPs) are considered to be the major bioactive components in L. barbarum. Due to the considerable health benefits of LBPs, and the significant research interest in LBPs, quality evaluation of LBPs and their related products is imperative for ensuring their efficacy and safety. The bioactivities of polysaccharides are closely associated with their physicochemical properties, which can be easily monitored via chemical techniques. Therefore, analysis of physicochemical properties is a more straightforward and viable approach for the quality control of polysaccharides.Scope and approachIn this review, special techniques for the structural characterization of LBPs are summarized and discussed. In addition, quality evaluation approaches of LBPs that have never been emphasized are highlighted herein. Furthermore, industrial applications of LBPs are reviewed and discussed.Key findings and conclusionsHigh-performance anion-exchange chromatography coupled with pulsed amperometric detection is one of the most effective techniques for analysis of both acidic and neutral LBPs. Size-exclusion chromatography coupled with multi-angle laser light scattering and refractive index detection is able to determine absolute molecular weights, chain conformations, and contents of LBPs. Fingerprinting analysis and saccharide mapping analysis are effective approaches for quality evaluation of LBPs. However, the lack of appropriate quality evaluation approaches indicates an unreliable regulation of LBPs and their related products. This reveals the deficiency in the quality control of commercial products. Thus, the development of reliable approaches for pharmacological activity-based quality control of LBPs and their related products must be extensively investigated.     

配制白酒中枸杞多糖含量测定方法的研究

该文研究了配制白酒中枸杞多糖含量的测定方法。样品前处理醇沉浓度为95%vol,浓缩方法为水浴蒸干。枸杞多糖在1.70mg/L~17.04mg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数R=0.9998,平均加标回收率95.35%,相对标准偏差为1.73%。说明用紫外-可见分光光度法所建立的方法简便、准确,重复性好,精密度高,可用于配制白酒中枸杞多糖的质量控制。     

亚硫酸钠浸渍-热空气干燥加工枸杞的质量评价

目的:利用亚硫酸钠防腐抗菌作用,采用0.5%亚硫酸钠浸渍-热空气干燥法加工制备枸杞,以期解决贮存中枸杞粘连、变色变质问题。方法:通过考察枸杞感官、pH、枸杞多糖含量、二氧化硫残留量、总黄酮含量、重金属残留量及体外抗氧化活性等理化指标,对制备枸杞的品质和安全性进行评价。通过糖发酵实验考察在湿热环境中亚硫酸钠浸渍加工枸杞的糖发酵抑制作用。结果:与对照品相比,经亚硫酸钠浸渍加工获得的枸杞制品外观品相优良、抑制糖发酵效果明显;SO₂残留量为77 mg/kg,重金属Pb的含量为0.080 mg/kg、As的含量为0.076 mg/kg、Cd的含量为0.024 mg/kg,均符合现行《中国药典》（2020版）与国家标准限量要求。与对照品相比,样品中枸杞多糖仅损耗2.08%。以V_C为参照物,对照品、样品中枸杞多糖和总黄酮成分对ABTS自由基清除率的IC₅₀值分别为285.6、322.1、92.17和93.74 μg/mL;清除DPPH自由基的IC₅₀值分别为1090、1468、181.9和182.7 μg/mL。体外抗氧化实验结果表明制备枸杞中营养成分（枸杞多糖、总黄酮）的抗氧化活性保持良好。结论:亚硫酸钠浸渍-热空气干燥枸杞制品具有品质优良、耐储存和食用安全的特点。     

泡沫分离法纯化枸杞多糖及其动力学过程分析

采用泡沫分离法纯化枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharides,LBPs）。通过苯酚-硫酸法测定LBPs含量,以富集比（E）和回收率（R）为响应值,采用响应面法Box-Behnken设计,建立了三因素三水平拟合模型,优化了稀释倍数、初始pH值和气体流速对分离效果的综合影响;在验证得到的最佳工艺条件下,对枸杞多糖泡沫分离的动力学模型进行了分析。稀释倍数7.6、初始pH 3.42、气体流速295 mL/min时,富集比和回收率最高,分别为2.57和57.31%,与验证值（2.41和61.28%）的相对误差分别为6.6%和6.5%;动力学分析显示,泡沫分离枸杞多糖的过程可拟合为一级化学反应,等效速率常数为0.006 02 min－1。实验建立了一种简单、高效的枸杞多糖纯化思路,并对生产工艺过程提供了一定的理论支持。     

醋酸催化下枸杞多糖的硒化修饰及抗肿瘤活性

制备硒化枸杞多糖,初步了解其结构及体外抗肿瘤活性。利用亚硒酸钠对枸杞多糖进行修饰,通过将无机硒转化为有机硒,为得到高含硒量的枸杞多糖进行探索,找出最佳反应条件为:2mL冰醋酸作为催化试剂,硒化试剂硒酸钠用量为2g,室温下反应时间48h。通过紫外光谱、红外光谱分析,并进行了体外抗肿瘤的初步试验研究。结果:确定了硒化枸杞多糖的分子结构中存在亚硒酸基团,人宫颈癌细胞抑制率可达到26.1%。硒化枸杞多糖对人宫颈癌细胞存在一定的抑制作用。     

枸杞果多糖对哮喘小鼠炎症损伤影响及作用机制

目的 探究枸杞果多糖对Ⅴ级卵清蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠模型炎症损伤影响及其作用机制。方法 以OVA诱导的哮喘小鼠为模型,并进行枸杞果多糖干预。肺组织苏木素-伊红(HE)染色、流式细胞术检测肺组织嗜酸性粒细胞水平反映炎症细胞浸润程度；肺组织马松(masson)染色检测肺组织纤维化程度,过碘酸-雪夫(PAS)染色检测支气管杯状细胞化生程度；流式细胞术检测小鼠肺组织辅助性T细胞(Th1、Th2、Th17细胞)和调节性T细胞(Treg细胞)水平。结果 与对照组比较,枸杞果多糖干预的哮喘小鼠肺组织嗜酸性粒细胞水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)；纤维化程度明显减轻,支气管化生的杯状细胞明显减少；Th1和Treg细胞水平上调,Th2和Th17细胞水平下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 枸杞果多糖可通过调节哮喘小鼠体内的Th细胞失衡缓解气道炎症。