酱油渣蛋白水解产物抗氧化性研究

比较六种不同的蛋白酶对酱油渣中蛋白的水解效果,筛选出最适合生产抗氧化肽的Alcalase+中性蛋白酶反应体系,在加酶量6000 U/g、pH=8、60℃、水解2h得到产物具有最好的抗氧化活性.从羟基自由基(OH·)清除能力、超氧阴离子自由基(O2-)清除能力、DPPH清除能力研究水解产物的抗氧化活性.10 mg/mL水...     

松茸水解蛋白肽制备及其抗氧化活性的研究

目的：本文以松茸作为原料经过蛋白提取和蛋白酶解得到蛋白肽,并研究其抗氧化能力。方法：将前期在最优条件下提取的松茸蛋白（得率13.56%）经蛋白酶解,筛选酶及优化酶的组合并制备水解蛋白肽;通过DPPH自由基清除、ABTS自由基清除及羟自由基清除3种自由基清除测定其抗氧化活性。结果：最佳水解酶组合为风味蛋白酶:碱性蛋白酶=1:3,水解工艺为底物浓度6mg.ml-1,作用时间6h,酶添加量2.0%;抗氧化活性实验结果表明水解肽的DPPH自由基清除和ABTS自由基清除能力较强,ABTS自由基清除能力较稳定。结论：深入研究松茸水解蛋白肽并将其应用于食品工业,为食品行业需找新的可利用资源有一定的应用价值。     

合浦珠母贝肉短肽的分离及其抗氧化活性研究

为制备具有抗氧化能力的合浦珠母贝肉活性肽,本文采用Sephadex G-25分子筛层析法对合浦珠母贝肉酶解产物进行分离,测定分离到的各活性组分分子量及其总抗氧化活性、DPPH自由基清除能力及羟自由基清除能力。结果表明,合浦珠母贝肉酶解产物经Sephadex G-25分离得到6个主要活性组分,相对分子量分别为1437.5、833.7、421.9、244.7、89.0、17.4u,其中功能短肽F1(1437.5u)、F2(833.7u)、F4(244.7u)的抗氧化效果较强,特别是F2(833.7u)短肽具有最强的总抗氧化能力、DPPH自由基清除能力及羟自由基清除能力。该研究为合浦珠母贝肉抗氧化活性肽的开发提供理论技术依据。     

大米蛋白酶解产物抗氧化活性及功能性质研究

采用不同的蛋白酶(木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、精制中性蛋白酶和碱性蛋白酶)水解大米蛋白,以制备抗氧化活性肽.结果发现,精制中性蛋白酶水解大米蛋白得到的产物对DPPH自由基的清除能力最强,而且水解度其清除能力影响显著.同时测定了酶解产物的还原能力、金属离子螯合能力以及在Fe2引发的亚油酸过氧化物体系中的抗氧化活性,结果表明,此酶解产物表现出一定的还原能力,能够抑制由Fe2 引发的亚油酸过氧化物体系中的抗氧化活性,具有一定的金属离子螯合能力.结果表明,这种肽具有一定的抗氧化活性,具有良好的功能特性.     

牛骨股原蛋百肽体外清除自由基活性的研究

对经碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解的牛骨胶原蛋白肽清除自由基活性进行了研究。根据对羟基自由基、超氧阴离子自由基、二苯代苦味酰基自由清除能力的测定,以及还原能力、脂质抗氧化能力等抗氧化活性指标的测定,确定了水解度为7.9%左右的胶原蛋白肽清除自由基的综合效果最好,此时酶解产物的平均分子量为2025Da,含15个左右的氨基酸。在此条件下,超氧阴离子(O2-·)的清除率为63.86%,羟基自由基(·OH)的清除率为99.55%,二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的清除率为27.03%,对大豆卵磷脂过氧化作用的抑制率为74.78%。     

两种蛋白酶水解油松花粉蛋白的比较

本文研究了碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解油松花粉蛋白的工艺条件,对两种蛋白酶水解得到的肽进行了氮溶指数,清除·OH自由基和抗氧化能力方面进行了比较分析.其中,碱性蛋白酶水解得到的肽,其氮溶指数较高;木瓜蛋白酶水解得到肽,其清除·OH自由基和抗氧化能力较强.     

牛骨胶原蛋白肽体外清除自由基活性的研究

对经碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解的牛骨胶原蛋白肽清除自由基活性进行了研究。根据对羟基自由基、超氧阴离子自由基、二苯代苦味酰基自由清除能力的测定,以及还原能力、脂质抗氧化能力等抗氧化活性指标的测定,确定了水解度为7.9%左右的胶原蛋白肽清除自由基的综合效果最好,此时酶解产物的平均分子量为2025Da,含15个左右的氨基酸。在此条件下,超氧阴离子(O2-·)的清除率为63.86%,羟基自由基(·OH)的清除率为99.55%,二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的清除率为27.03%,对大豆卵磷脂过氧化作用的抑制率为74.78%。     

酶解方式对核桃蛋白肽及其抗氧化活性的影响

分别采用7种蛋白酶对核桃蛋白进行单酶水解,并与双酶复合酶解进行比较,考察不同酶解方式对酶解产物水解度、短肽得率和抗氧化活性的影响。结果表明,碱性蛋白酶单酶酶解核桃蛋白,产物的水解度和短肽得率显著高于其它单酶处理,分别达到18.94%和76.37%,对DPPH自由基清除能力的IC50值仅为3.23mg/mL,抗氧化活性显著高于其它处理;将碱性蛋白酶分别与其它蛋白酶组合酶解,核桃蛋白酶解产物的水解度和短肽得率均有所提高,其中与木瓜蛋白酶组合处理的水解度可达28.36%,短肽得率可提高至85.62%。双酶酶解产物对提高清除DPPH自由基和羟自由基的活性不显著,碱性蛋白酶分别与中性蛋白酶、木瓜蛋白酶的组合可以显著提高酶解产物清除超氧阴离子自由基的活性。     

条斑紫菜活性肽的抗氧化作用

以条斑紫菜为原料,使用木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶水解紫菜蛋白制备活性肽,采用还原能力、清除羟自由基和二苯代苦味酰基自由基作为抗氧化性评价指标,研究紫菜活性肽的体外抗氧化活性,并测定其分子质量分布。结果表明：3种蛋白酶对紫菜蛋白具有较好的酶解效果,酶解产物具有一定的还原能力;自由基清除率和底物浓度之间具有正相关关系,木瓜蛋白酶酶解活性肽清除羟自由基活性最强,半数清除率质量浓度为0.397mg/mL;胃蛋白酶酶解活性肽清除二苯代苦味酰基自由基活性最强,半数清除率质量浓度为0.261mg/mL;经测定,具有抗氧化活性的小分子肽分子质量分布在148～1963u之间。     

酶解拟黑多刺蚁制备抗氧化活性肽

分别采用Alcalase2.4L、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、胰酶水解拟黑多刺蚁,利用超氧自由基、DPPH自由基、羟基自由基清除能力、还原力、铁离子螯合能力、亚油酸自氧化抑制能力6个指标衡量水解物的抗氧化能力,并结合水解度(DH)、蛋白质利用率、多肽含量等理化指标筛选最适蛋白酶。结果表明,酶解物具有良好的体外抗氧化活性,其抗氧化活性与抗氧化肽的剂量呈正相关,其中Alcalase2.4L水解能力、酶解液抗氧化能力最强。还研究了热处理、超声、均质等预处理方式对水解能力、抗氧化能力的影响,发现均质对酶解产物的影响最大。     

大豆生物活性肽的分离及其抗氧化活性研究

为制各具有抗氧化活性的大豆生物活性肽,本实验采用酶解处理大豆蛋白粉,对酶解产物进行葡聚糖Sephadex G-25凝胶柱层析分离,并对其各组分分子量分布及其抗氧化性进行了研究,对抗氧化活性最佳的肽段进行氨基酸组成分析。结果显示,大豆蛋白酶解物经Sephadex G-25分离后得到了六个肽片段,其中平均链长为4,即含有2～6个氨基酸残基的大豆功能短肽SPP4,对羟自由基具有最佳的清除作用,清除率达到80．13%,氨基酸组成分析发现该组分中缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸含量较高。结果表明,含2～6个氨基酸残基的大豆生理活性短肽具有较好的抗氧化活性。     

不同益生菌液态发酵牡蛎制品的体外抗氧化活性的比较

该试验选用鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、肠膜明串珠菌及布拉酵母菌液态发酵牡蛎,比较其总抗氧化能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、羟自由基及超氧阴离子自由基清除能力和总肽含量。结果表明,4株益生菌发酵牡蛎制品组的总抗氧化能力与空白组相比均显著提升,其中鼠李糖乳杆菌组最高,为（4.04±0.05）U/m L;4组均具有自由基清除能力,其中鼠李糖乳杆菌组的DPPH自由基清除能力最强,羟自由基清除能力与其他组相近,但超氧阴离子自由基清除能力最低;总肽含量由高到低排序的发酵牡蛎制品组为肠膜明串珠菌组>干酪乳杆菌组>鼠李糖乳杆菌组>布拉酵母菌组。初步确定鼠李糖乳杆菌为适用于发酵牡蛎制备活性肽的优良菌株,可为海洋食药资源高值化利用提供可借鉴的技术途径。     

谷朊粉活性肽的分离及其抗氧化性研究

为制备具有抗氧化活性的生物活性肽,采用中性蛋白酶和胰蛋白酶同时处理谷朊粉,对酶解产物进行超滤和葡聚糖Sephadex G-25凝胶柱层析分离,并对其各组分的抗氧化性进行研究,对抗氧化活性高的肽段进行分子量测定和氨基酸组成分析。结果显示,分子量小于3000Da的组分经葡聚糖Sephadex G-25凝胶柱层析以后得到2个肽段,其中WG-1具有最佳的DPPH.清除作用,清除率达到93%,氨基酸组成分析该组分中谷氨酸的含量较高。     

马尾松花粉多糖硫酸酯化前后清除活性氧自由基能力的比较

目的：对松花粉多糖硫酸酯化前后清除超氧阴离子自由基（O2^-·）和羟自由基（·OH）的作用进行比较。方法：用荧光分光光度法检测松花粉多糖及其硫酸酯体外清除O2^-·和·OH的作用。结果：松花粉多糖硫酸酯化前后对活性氧自由基均有一定的清除作用,酯化后对O2^-·的清除能力增强（P〈0．01）,对·OH的清除能力降低（P〈0．01）。     

超声预处理提高茶籽粕多肽抗氧化活性的研究

以茶籽饼粕为原料,研究了超声波预处理条件对酶解茶籽粕蛋白制备抗氧化肽的水解度和抗氧化活性的影响。以茶粕抗氧化肽的还原力为评价指标,得到超声波处理的最佳工艺条件:超声功率720W,超声初始温度60℃,超声时间40min。在上述条件下,水解度的增长率为32.52%,抗氧化肽还原力吸光值达0.823。与未处理的对照组比较发现,超声处理可以显著提高抗氧化肽的活性,其中.OH清除率、O2-.清除率、还原力吸光值的增长率分别为79.33%、71.72%、113.8%。     

泥鳅肉酶解物对羟自由基的清除作用

为了探讨深度开发泥鳅蛋白制备功能性肽的可能性,采用比色法研究泥鳅肉酶解物对Fenton 体系产生的羟自由基的清除效果,从复合风味蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、菠萝蛋白酶5 种酶中,筛选出菠萝蛋白酶作为酶解泥鳅肉制备具有清除羟自由基活性酶解物的适宜水解酶。用响应面分析法(RSM)对该酶的酶解条件进行优化,并采用Sephadex G-15 凝胶层析测定最佳酶解条件下制得的酶解液中活性肽的相对分子质量分布。结果表明,菠萝蛋白酶的最佳酶解条件为：固液比1:4、加酶量0.2%、pH6.47、温度54.48℃、酶解时间59.97min,酶解物对羟自由基的清除率为99.03 %,IC50 值为0.57mg/mL。酶解液中活性肽的相对分子质量范围为1129～2344。     

青鱼肉活性肽的制备及其抗肿瘤活性研究

以青鱼肉为原料,经二步酶解、凝胶色谱分离纯化制备抗氧化和抗肿瘤活性肽。首先以抗氧化活性和水解度为评价指标,采用单因素和正交试验优化青鱼肉活性肽的制备工艺;然后采用凝胶色谱进行分离纯化,得到不同分子质量多肽组分并分析其氨基酸组成、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力和抗肿瘤活性。结果表明,二步酶解青鱼肉的最优酶解组合为碱性蛋白酶-复合蛋白酶,最佳制备工艺为:pH 8.00、酶解温度50℃、料液比2∶10(g∶mL)、酶添加量6000 U/g、酶解时间3 h,在此条件的二步酶解物清除DPPH自由基的半抑制浓度(half inhibiting concentration,IC 50)为9.52 mg/mL;经Sephadex G-15分离得到5个肽组分,其分子质量范围为130~1397 Da;抗氧化实验表明,组分IV具有最强的DPPH自由基清除能力,其IC ₅₀为3.17 mg/mL,为二步水解物的3倍。细胞增殖抑制实验发现,10 mg/mL组分IV对HepG 2细胞抑制率为92.54%,表明青鱼肉活性肽同时具有抗氧化和抗肿癌活性。     

榨前微波处理对油茶粕活性成分及抗氧化性的影响

通过不同微波功率和时间辐射油茶籽,测定油茶粕中茶皂素、蛋白质、粗多糖、总酚、糠氨酸含量以及DPPH自由基清除能力的变化规律,研究榨前微波处理对油茶粕活性成分及抗氧化性的影响。结果表明:随微波加热时间延长,低功率(245、420 W)微波处理油茶籽后,油茶粕中茶皂素含量稍有上升,随后下降;较高功率(560、700 W)微波处理后,茶皂素含量呈上升趋势;微波处理对油茶粕中蛋白质含量影响不大;微波处理后油茶粕中粗多糖含量整体呈下降趋势,但420、560、700 W处理20、5、10 min后含量分别比初始升高66.9%、79.6%和116.0%;微波处理后油茶粕中总酚含量呈先降低后升高再降低的趋势,且微波功率越高,总酚含量越高;微波功率较低(245 W)时,糠氨酸含量先降低后略有升高,微波功率较高(420、560、700 W)时,糠氨酸含量先升高后降低。245 W和700 W微波功率处理时油茶粕对DPPH自由基清除率先升高后降低,560 W时呈整体上升趋势,420 W呈波动状态。     

Antioxidation activity of oil extracts prepared from various seeds

The anti-oxidative activity of ethanol and methanol extracts from various seed oils (perilla seed oil, camellia seed oil, pine seed oil, flaxseed oil, and olive oil) was investigated using DPPH free radical scavenging activity (DPPH-RSA), hydroxyl radical scavenging activity (Hydroxyl-RSA), fluorescent development, browning level development, microsomal lipid peroxidation (MLP), and t-BOOH-induced cytotoxicity assays. Both browning and fluorescence level were observed higher value in methanol extract of camellia seed oil (CSO-ME). This meant that CSO-ME had more available antioxidant matters. Radical scavenging activity of CSO-ME was the highest among all seed oil extracts, and was 61.1% in the DPPH-RSA and 64.5% in the Hydroxyl-RSA test. Based on in vitro tests, all extract treatments significantly reduced both thiobarbituric acid-reactive substrate formation and lactate dehydrogenase release, indicating high antioxidant activity. These results suggest that ethanol and methanol extracts from seed oils can be a potentially good dietary lipid supplement source against oxidative stress.     

蛋清多肽体内外抗氧化活性的研究

本试验通过体外试验和动物试验两方面研究蛋清多肽(egg white polypeptide,EWP)的抗氧化能力,测定了1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picylhydrazyl,DPPH)自由基、羟自由基的清除能力和总还原能力以及小鼠血清、肝脏和心脏组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果表明,蛋清多肽浓度为5 mg/mL时,其对DPPH自由基清除率为69.2%,羟自由基清除率为68.5%,蛋清多肽对DPPH自由基和羟自由基均有较好的清除作用,并且清除率与浓度呈正相关。蛋清多肽可显著提高小鼠血清、肝脏和心脏组织中SOD活力和GSH含量(P<0.05),显著降低机体内MDA含量(P<0.05),且蛋清多肽灌胃剂量为150~900 mg/kg时,抗氧化能力与蛋清多肽浓度有一定量效关系,且高剂量组效果最佳。本研究为开发新型生物活性肽,提高农产品附加值提供理论基础与数据支持。