铁-邻二氮杂菲间接分光光度法检测皮革甲醛含量

建立了一种用铁-邻二氮杂菲间接分光光度法检测皮革甲醛含量的方法。该法是基于在碱性条件下,甲醛与水合氧化银发生氧化还原反应,生成的银定量还原铁(Ⅲ)为铁(Ⅱ),铁(Ⅱ)与邻二氮杂菲形成稳定的桔红色络合物。此络合物的ε510为1.1×104L·mol-1·cm-1,方法用于皮革样品中游离甲醛的测定,取得了满意的结果。     

新显色剂3-噻唑偶氮-5-氨基苯酚与铜(Ⅱ)显色反应的研究与应用

研究了铜(Ⅱ)与3-噻唑偶氮-5-氨基苯酚(3-TAP)的显色反应,在十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)存在下,pH6.5的clark-lubs缓冲溶液中3-TAP与铜反应,生成1:1稳定络合物,λmax=546nm,ε546=3.45×104L/mol·cm铜含量在 0～2.8μg/ml内符合比耳定律,该方法用于食品中铜的测定,结果满意。     

红酵母多糖的提取、化学组成及抗氧化性的鉴定

为研究红酵母细胞中多糖的化学组成及抗氧化性和对增强哺乳动物、水产鱼类的免疫活性的影响.以红酵母菌为材料,通过化学抽提法得到多糖,经蒽酮比色法测得其中葡萄糖为0.012%,蔗糖为0.013%;经凯氏定氮法分析,蛋白质为3.2%,该多糖为蛋白多糖:经氨幕酸分析表明含有多种氨基酸,其中天冬氨酸含量最多;由邻苯三酚自氧化法检测发现该多糖能够抑制邻苯三酚自氧化,具有抗氧化能力.     

邻苯三酚自氧化法测定抗氧化活性的方法研究

通过对邻苯三酚自氧化反应体系的光谱吸收、缓冲液pH值和邻苯三酚浓度对自氧化速率的影响进行研究,建立邻苯三酚自氧化-分光光度法最佳应用体系。确定反应体系总体积为3mL,检测波长在319nm时的测定条件为：缓冲液pH值7．3,邻苯三酚浓度60mmol／L,自氧化速率可达0．060△A／min,线性时间4min;检测波长在420nm时的测定条件为：缓冲液pH值7．8,邻苯三酚浓度80mmol／L,自氧化速率可达0．050△A／min、线性时间3min。新方法建立的紫外和可见光两种检测波长体系,可针对样品的吸收光谱特征选择检测波长,避免了样品自身吸收强对测定检测限的影响,测定pH值接近生物体内真实条件,自氧化速率为最佳检测值且线性时间良好。     

奶粉中蛋白质含量的快速测定

从奶粉中蛋白质的快速检测方法入手,选取了分光光度法中的考马斯亮蓝G-250来进行研究。结果表明,在酸性介质中,蛋白质与考马斯亮蓝G-250溶液反应生成蓝色络合物。该络合物最大吸收波长为594 nm,摩尔吸光系数为3.75×10~(-5)L/(mol·cm),精密度(RSD)为0.55%,相关系数为0.999 3,加标回收率为97.8%。     

乌骨鸡活性肽组成成分及体外抗氧化活性研究

本实验对乌骨鸡活性肽的蛋白质含量、多肽含量、游离氨基酸含量和多肽的分子量分布进行了研究,并通过测定乌骨鸡活性肽对Fenton反应产生的羟自由基、邻苯三酚自氧化产生的超氧阴离子的清除率,考察乌骨鸡活性肽的体外抗氧化能力。乌骨鸡活性肽组成分析表明:活性肽中蛋白质含量为90.53%,其中主要成分为小分子多肽(51.46%)和氨基酸(36.17%)。乌骨鸡活性肽分子量分布的凝胶色谱法测定结果显示其分子量集中在1900Da以下,其中小肽所占相对比例较大。体外抗氧化实验结果表明:乌骨鸡活性肽具有较强的清除羟自由基的能力,其清除率与浓度呈剂量关系;并能明显降低邻苯三酚自氧化速率,抑制率与浓度呈正相关,但与肌肽比较,乌骨鸡活性肽的体外抗氧化能力相对要弱。     

灿烂黄褪色光度法测定调味品中铜含量

研究铜(Ⅱ)与1,10-菲啰啉和灿烂黄的络合反应,建立褪色光度法测定铜含量的新方法。通过试验优化酸度、1,10-菲啰啉用量、灿烂黄用量、反应温度和反应时间等测定条件。结果表明,最大褪色波长为474nm,表观摩尔吸光系数为7.92×104 L/mol·cm,铜(Ⅱ)浓度在0~0.6μg/mL范围内服从比尔定律,检出限为4.89μg/L。方法用于测定调味品中铜含量,结果与原子吸收光谱法一致,相对标准偏差为1.02%~1.36%(n=5),回收率为99.8%~102.1%。     

邻二氮菲固相萃取光度法测定食盐中的铁

研究了邻二氮菲与铁的显色反应,在pH为4.5的盐酸-六次甲基四氨缓冲介质中,邻二氮菲与铁反应生成3:1稳定络合物,该络合物可被C18固相萃取小柱萃取,小柱上富集的络合物用乙醇洗脱后用光度法测定,λmax=510nm,ε=2.10104L.mol-1.cm-1。铁含量在0￣5g/mL内,符合比尔定律,方法用于食盐中铁含量的测定,结果满意。     

一种测定食品中痕量铜(Ⅱ)的催化荧光新方法

本文确立下了测定食品中痕量铜(Ⅱ)的催化荧光分析新方法。该方法建立在pH8.8～9.2氨-氯化铵缓冲体系中,铜(Ⅱ)对罗丹明B(RhB)和过氧化氢(H2O2)的反应有强烈的催化作用并使其荧光熄灭的基础上。方法简便快速,具有极高的灵敏度,检出限达4×10-12g/ml,线性范围为10-11～10-6g/ml,且选择性好。用于五类食品中微量铜(Ⅱ)的测定与AAS相符,RSD(n=5)<5%,回收率在94.1%～103%之间。     

邻甲酚酞褪色分光光度法定量测定γ-环糊精

以邻甲酚酞(OCP)为探剂,首次建立了基于邻甲酚酞褪色反应的γ-环糊精含量分光光度测定方法。其原理是在碱性条件下,γ-环糊精(γ-CD)包络OCP分子使其发生褪色反应,并且其褪色程度△A与γ-CD浓度在一定范围内呈线性关系,符合朗伯比尔定律。研究了显色条件对γ-CD含量测定的影响。结果表明:当在30℃下显色15 min,加入OCP浓度为0.21 mmol/L,缓冲液pH=9.51时,γ-CD在0~15mmol/L范围内线性关系良好。回归方程为ΔA=0.032 5Cγ-CD(mmol/L),相关系数R2=0.997 5,检出限为0.066 mmol/L,表观摩尔吸光系数ε=3.06×10~3L·mol~(-1)·cm~(-1),灵敏度较高。样品平均实测回收率在99.1~101.5%之间,测定结果 RSD为1.47%(n=10)。该光度测定方法的准确度与HPLC法接近,且具有良好的稳定性与重现性,同时操作简便,测定快速,较HPLC法更易于推广普及。     

卟啉分光光度法测定豆类微量Cu(Ⅱ)含量

以meso-四(4-氯-3-磺酸钠基苯基)卟啉为显色剂,采用分光光度法,研究了该试剂与Cu(Ⅱ)络合反应,以及各种因素对吸光度的影响,从而确定了最佳测定条件.在pH条件为5.0、β-环糊精、盐酸羟胺介质中沸水浴加热5 min,卟啉与Cu(Ⅱ)可完全络合.络合后再加入(1+1)HCl,在423 nm处测定络合物的吸光度,表观摩尔吸光系数为4.12×105L·mol-1·cm-1,线性范围为0～1.2 μg/10mL,抗干扰能力强.该法首次应用于测定豆类中微量Cu(Ⅱ)含量,测定结果满意,有利于建立适合小企业采用的微量铜测试方法.     

催化褪色光度法测定粮食中的痕量铜

基于 pH 6.5的磷酸盐缓冲介质中铜对高碘酸钾氧化胭脂红褪色反应的催化作用 ,提出一种催化褪色光度法测定痕量铜的新方法 ,并研究了该方法的适宜反应条件 .该方法的Cu(Ⅱ )检出限为 1 .1× 1 0 - 7g/L ,线性范围为 1 0mL的比色管中Cu(Ⅱ )含量 0～ 0 .5μg .该方法用于粮食中痕量铜的测定时 ,结果较准确 .     

酸性红359的合成研究

4-氯-2-氨基苯酚重氮化后,分别与1-（4’-磺酸基）苯基-3-甲基-5-吡唑酮和1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮偶合,得到偶氮物Ⅰ和偶氮物Ⅱ;偶氮物Ⅰ和氧化铬铬化反应得到络合物Ⅲ;络合物Ⅲ再与偶氮物Ⅱ在碱性条件下反应,得到红色不对称金属络合染料（酸性红359）。本文介绍了该染料的化学结构及合成方法。     

酸性红359的合成研究

4-氯-2-氨基苯酚重氮化后,分别与1-（4’-磺酸基）苯基-3-甲基-5-吡唑酮和1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮偶合,得到偶氮物Ⅰ和偶氮物Ⅱ;偶氮物Ⅰ和氧化铬铬化反应得到络合物Ⅲ;络合物Ⅲ再与偶氮物Ⅱ在碱性条件下反应,得到红色不对称金属络合染料（酸性红359）。本文介绍了该染料的化学结构及合成方法。     

5种不同纯度藻蓝蛋白的抗氧化特性

为深入探讨藻蓝蛋白中起抗氧化作用的基团,本实验采用铁离子总还原能力法、2,2’-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azino-bis(3ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS）阳离子自由基法、邻苯三酚自氧化法、氧自由基吸收能力法测定5 种不同藻蓝蛋白的抗氧化活性并分析其抗氧化活性与蛋白质量浓度、色基含量和藻蓝蛋白纯度的关系。结果表明,在铁离子总还原能力、ABTS阳离子自由基等以电子转移为主的抗氧化体系中,藻蓝蛋白的抗氧化活性与蛋白质量浓度呈正相关,说明在上述两种体系中,藻蓝蛋白中起抗氧化作用的主要基团是蛋白质;在邻苯三酚自氧化的活性氧体系中,藻蓝蛋白的抗氧化活性与蛋白质量浓度呈正相关,与色基含量呈负相关,表明在该体系中,藻蓝蛋白中发挥抗氧化作用的基团是蛋白质;在氧自由基吸收能力基于氢原子转移的抗氧化体系中,藻蓝蛋白的抗氧化活性与色基及纯度呈正相关,说明在该体系中,色基是藻蓝蛋白发挥抗氧化作用的主要基团。     

邻甲酚酞褪色分光光度法定量测定γ-环糊精含量

以邻甲酚酞(OCP)为探剂,首次建立了基于邻甲酚酞褪色反应的γ-环糊精含量分光光度测定方法。其原理是在碱性条件下,γ-环糊精(γ-CD)包络OCP分子使其发生褪色反应,并且其褪色程度△A与γ-CD浓度在一定范围内呈线性关系,符合朗伯比尔定律。研究了显色条件对γ-CD含量测定的影响。结果表明:当在30℃下显色15 min,加入OCP浓度为0.21 mmol/L,缓冲液pH=9.51时,γ-CD在0~15mmol/L范围内线性关系良好。回归方程为ΔA=0.032 5Cγ-CD(mmol/L),相关系数R2=0.997 5,检出限为0.066 mmol/L,表观摩尔吸光系数ε=3.06×10~3L·mol~(-1)·cm~(-1),灵敏度较高。样品平均实测回收率在99.1~101.5%之间,测定结果 RSD为1.47%(n=10)。该光度测定方法的准确度与HPLC法接近,且具有良好的稳定性与重现性,同时操作简便,测定快速,较HPLC法更易于推广普及。     

混合胶束协同增敏光度法测奶粉中微量锌

研究了混合表面活性剂SDS-OP对二甲酚橙(XO)光度法测锌(Ⅱ)的增敏作用。在醋酸-醋酸钠缓冲体系中,锌-二甲酚橙(XO)-SDS-OP络合物呈紫红色,络合物最大吸收波长为580nm,比不加表面活性剂时红移了20nm。摩尔吸光系数达1.15×105L/mol·cm。锌含量在0.0～28.0μg/ml范围内符合比耳定律,线性回归方程为:A=0.295C+0.001。该法用于奶粉中锌含量的测定,结果令人满意。     

有机溶剂CCl4萃取法测定酱油中的微量铜

采用DDTC(铜试剂)-光度法测定酱油中的微量铜,研究了DDTC与铜显色反应的条件。结果表明,在pH9.5~11.0条件下,铜试剂与Cu(Ⅱ)生成棕黄色的络合物,其最大吸收波长442nm,铜含量在0.02~4.50μg/mL范围内遵从比耳定律,表观摩尔吸光系数ε=1.34×103L.mol-1.cm-1。     

邻苯三酚自氧化法测定甲烷氧化菌素-铜配合物的超氧化物歧化酶活性

目的建立甲烷氧化菌素(methanobactin,Mb)-铜配合物(Mb-Cu)模拟超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的邻苯三酚自氧化体系分析方法。方法利用HP 20大孔树脂从甲基弯菌IMV301l发酵液中分离纯化得到Mb,制备Mb-Cu测定其具有的SOD活性,利用紫外光谱分析对SOD邻苯三酚测活法进行系统研究。考察缓冲液浓度、邻苯三酚浓度、Mb-Cu浓度、EDTA-Na_2浓度、pH值和温度等对Mb-Cu模拟SOD活性的影响。结果在Mb-Cu浓度为0.8 mg/L,Tris-HAC缓冲溶液为0.05 mol/L(其中缓冲溶液的pH值为8.2、EDTA-Na_2的浓度为2 mmol/L),邻苯三酚浓度为0.363 mmol/L,温度为20℃时,邻苯三酚的自氧化速率相对较低,此时Mb-Cu对超氧阴离子自由基(O_2~-.)的抑制率较高,以此建立Mb-Cu模拟SOD活性的邻苯三酚自氧化分析方法。发现Mb-Cu符合影响生物催化剂条件的一般规律,但比生物酶具有更高的热稳定性。结论Mb-Cu可作为清除O_2~-.的SOD模拟酶,本试验建立的分析条件是最佳反应体系。     

甘油铜比色法测定甘油含量的研究

利用甘油与铜离子在碱性溶液中生成深蓝色络合物(甘油铜),该络合物在一定波长下存在最大吸光度的特点,建立了比色法测定甘油含量的方法.结果表明,最佳测定条件为:取CuSO4溶液(0.05g/mL)1 mL与碱液(0.05g/mL)3.5 mL,摇匀,加入处理后的样品,振荡12 min,过滤,然后在波长630 nm处测定吸光度.实测显示,所建立的测定方法操作简单、速度快,相对误差为-1.33%～4.33%,变异系数为0.546%.