柚皮苷酶脱苦工艺优化及对金桔汁品质的影响

为优化柚皮苷酶对金桔汁的脱苦工艺,试验采用单因素试验,考察了酶用量、pH、酶解温度和酶解时间对柚皮苷酶脱苦效果的影响。在此基础上采用响应面分析优化柚皮苷酶脱苦工艺条件,并通过VC、可溶性固形物、氨基酸等营养成分保留率,评价脱苦方法对金桔汁品质的影响。响应面法分析显示,各因素对脱苦率的影响均达到显著水平,但因素间的交互作用未达到显著水平,经优化的柚皮苷酶脱苦的最优工艺参数为:酶添加量0.6g/L, pH 4.2,酶解温度51℃,酶解时间93 min。在此条件下,脱苦率为81.74%。柚皮苷酶脱苦法处理30 d后的金桔汁,其VC含量下降25.9%,总氨基酸含量下降10.2%,可溶性固形物和总酸含量下降5%和3%。柚皮苷酶脱苦法对金桔汁营养成分影响较小。柚皮苷酶对金桔汁脱苦率影响高,对营养品质影响小,操作简单,是一种行之有效的脱苦方法。     

响应面优化柚皮苷酶对长坝柚汁的脱苦工艺

柚汁中含有柚皮苷和柠檬苦素,这些苦味物质降低柚汁的口感和品质。本文采用酶法对柚汁进行脱苦研究。以柚汁的脱苦率为指标,在单因素实验的基础上,采用响应曲面法优化柚苷酶对柚子汁的脱苦工艺。结果表明,酶法对柚汁脱苦的最佳工艺为:柚苷酶的添加量为0.5 g/L,酶解温度为53℃,酶解时间为142 min,柚汁的p H为4,在此条件下脱苦率达到51.5%。     

柚皮苷酶对琯溪蜜柚果汁脱苦效果工艺优化

以琯溪蜜柚果汁为对象,研究在不同条件下柚皮苷酶对蜜柚果汁的脱苦效果。采用HPLC 测定柚皮苷含量,通过单因素试验分别考察加酶量、温度、酶解时间及pH 值对柚皮苷酶酶解反应的影响,在单因素试验基础上以柚皮苷脱除率为指标进行正交试验,确定最佳工艺条件：酶解温度60℃,酶活7.4U/mL 柚汁,酶解时间100min,pH3.6。在此条件下琯溪蜜柚果汁的柚皮苷脱除率达97% 以上。     

脉冲辐解研究橙皮苷、柚皮苷抗氧化活性及机理探讨

利用脉冲辐解瞬态吸收光谱技术研究了橙皮苷和柚皮苷与羟基自由基(·OH)的瞬态反应机理和动力学.研究结果表明:N2O饱和的4.9×10-5 mol·L-1的橙皮苷、5.2×10-5 mol·L-1的柚皮苷水溶液经脉冲辐解分别产生了橙皮苷酚氧自由基(特征瞬态吸收峰320nm)和柚皮苷酚氧自由基(特征瞬态吸收峰310～340nm);反应的袁观反应速率常数分别为8.38×105s-1和6.48×105s-1.橙皮苷和柚皮苷可有效清除羟基自由基.实验还从结构上探讨了橙皮苷和柚皮苷的抗氧化活性机制.     

5种柚汁中主要抗氧化成分含量及其抗氧化能力的比较

采用高效液相色谱法测定了5种柚汁中黄酮类物质、VC的含量.并用FRAP、DPPH及ABTS三种方法对其抗氧化能力做出评价.通过比较,得出佛柚汁中的柚皮苷含量、VC含量和总酚含量均为最高;除胡柚汁外,其他柚汁均未检测到橙皮苷和新橙皮苷;佛柚汁的抗氧化能力最强.酚类物质和VC则是柚汁中最主要的抗氧化物质.     

一种棘孢曲霉α-L-鼠李糖苷酶的结构及性质特征研究

α-L-鼠李糖苷酶是一种具有重要应用价值的诱导酶。目前,α-L-鼠李糖苷酶的结构与功能关系尚不明确。本文以柚皮苷为诱导物培养棘孢曲霉产α-L-鼠李糖苷酶,研究该酶的结构及酶学性质特征。经质谱分析该α-L-鼠李糖苷酶属于棘孢曲霉α-L-鼠李糖苷酶A。三维结构模拟发现该α-L-鼠李糖苷酶具有N端β-折叠结构域、C端β-折叠结构域、clan-L(alpha/alpha)(6)-桶状催化结构域以及具有Asp等九个完全保守氨基酸残基,说明该酶属于糖苷酶78家族成员。分子对接发现该酶通过酸碱催化的机制水解柚皮苷。该酶的最适温度50℃,最适pH 4.0,1 mM与10 mM的Ag+、Fe~(2+)及Fe~(3+)对该酶有较强的抑制作用;该酶可以水解柚皮苷、橙皮苷和杨梅苷,其水解柚皮苷的动力学符合典型的米氏方程,Km值为0.23 mM,Vmax为565.1 U/mg。以上结果丰富了α-L-鼠李糖苷酶的结构与功能关系的研究理论,为开发性质优良的α-L-鼠李糖苷酶提供了信息参考。     

酶法转化柚皮苷产普鲁宁工艺研究

优化柚苷酶转化柚皮苷生成普鲁宁的工艺,在此基础上分离纯化得到浓度较高的普鲁宁。利用碱性缓冲液处理柚苷酶,使其β-葡萄糖苷酶的活力大部分丧失,而保留α-鼠李糖苷酶的活性,从而使酶水解柚皮苷的产物——普鲁宁得到积累。利用水解过程中还原糖生成量与普鲁宁生成量成正比的关系,用DNS法检测柚皮苷水解过程中还原糖的含量,分析不同工艺参数中普鲁宁的含量。通过对柚皮苷水解过程的动态分析,得到柚苷酶转化柚皮苷的最适条件:温度50℃,p H 4.0,酶用量10 U/m L,底物含量0.16%。在此条件下酶解90 min,普鲁宁还保持较高的浓度而柚皮苷基本转化完全。酶解液经化学萃取和硅胶柱层析,得到纯化的普鲁宁,用高效液相色谱检测,其纯度达到99%。     

黑曲霉DB056发酵α-鼠李糖苷酶和柚苷酶培养基的优化研究

目的:优化黑曲霉DB056产α-鼠李糖苷酶和柚苷酶的培养基,提高这两种醇的产量.方法:以α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力为指标,研究碳源、氯源和乳化剂Triton X-100对α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力的影响,优化黑曲霉DB056摇瓶发酵α-鼠李糖苷酶和柚苷酶的培养基.结果:碳氮源的种类与浓度,乳化剂Triton X-100的浓度对黑曲霉DB056产α-鼠李糖苷酶和柚苷酶有重要影响;黑曲霉DB056产酶的优化培养基是:柚皮苷3.5 g/L,玉米浆4g/L,MgSO4·7H2O 1.0g/L,KH2PO41.0g/L,KCl 0.5 g/L,无水CaCl20.1 g/L,乳化剂Triton X-1001.0%.此时α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力分别为994U/mL和276U/mL,分别比发酵初始培养基提高了42.3%和147.8%.结论:通过培养基优化,大幅度提高了黑曲霉DB056液态深层发酵α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力.     

黑曲霉DB056柚苷酶制剂对琯溪蜜柚果汁的脱苦效果

采用高效液相色谱法测定琯溪蜜柚果汁中柚皮苷及其降解产物的变化,研究黑曲霉DB056柚苷酶制剂脱苦琯溪蜜柚果汁的优化条件;并且在此优化条件下,使用该柚苷酶制剂对琯溪蜜柚鲜柚汁、浑浊浓缩柚汁和澄清浓缩柚汁进行脱苦。结果表明：黑曲霉DB056柚苷酶制剂催化琯溪蜜柚果汁中柚皮苷水解成普鲁宁和柚皮素;该柚苷酶制剂在40～55℃、果汁自然pH值条件下对琯溪蜜柚鲜柚汁进行脱苦,酶用量90U/mL、处理时间80min,柚皮苷脱除率达到89%;处理不同浓缩程度的浑浊浓缩柚汁,脱苦率约为80%左右。结果说明黑曲霉DB056柚苷酶制剂对琯溪蜜柚果汁具有良好的脱苦作用。     

陈皮中黄酮和辛弗林的不同提取方法优化比较

陈皮中的橙皮苷、柚皮苷和辛弗林同时提取的不同提取技术参数的优化。通过正交设计实验研究超声提取与微波提取同时提取橙皮苷、柚皮苷和辛弗林的最佳实验条件。采用高效液相(HPLC)测定提取的橙皮苷、柚皮苷和辛弗林的含量。对于陈皮药材,不同提取方法对3种活性成分的提取率影响较大,微波提取对这3种成分具有最高的提取率。在优化工艺条件下:80%甲醇水溶液,料液比1:200、微波功率300W、微波时间2min,陈皮中橙皮苷、柚皮苷和辛弗林产率分别可达(58.72±0.939)mg/g,(2.12±0.084)mg/g和(3.32±0.086)mg/g。