AOAC PetrifilmTM菌落总数测试片法与食品中菌落总数测定国标方法的比较研究

目的:确证AOAC 990.12PetrifilmTM菌落总数测试片计数食品中菌落总数的检测性能.方法:对AOAC990.12 PetrifilmTM菌落总数测试片法与国家标准GB4789.2菌落总数测定法进行比较实验.在20个政府机构和食品企业实验室,对生肉、熟肉、水产品、调味品、冰激凌、原奶、奶粉和豆制品等8大类845份食品样品进行了测定.结果:AOAC 990.12PetrifilmTM方法与国标GB4789.2法检测8类食品样品的菌落总数测定结果的P值均大于0.05,无显著性差异.结论:使用AOAC 990.12PetrifilmTM菌落总数测试片法检测食品中的菌落总数等效于食品微生物学检验菌落总数测定的国家标准方法.     

两种不同检测方法分析不同类型天然和人工染菌食品中菌落总数的比较研究

目的：验证分析测试片检测不同类型食品菌落总数计数的适用性。 方法：与传统国标平板计数方法平行比较,应用测试片检测肉制品、面食、冷饮、奶制品、豆制品、果蔬和坚果7大类70份天然食品,以及以最常见的两种食源性微生物金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌作为标准菌株,制备22的份不同食品基质的人工染菌样品。所有检测结果使用两种不同数据方法进行处理分析,以此探讨不同方法检测结果的相关性。 结果：依据ISO 16140-2 2016推荐的数据处理分析方法发现测试片和国标平板计数方法检测不同类型天然和人工染菌食品样品的菌落总数结果对数值差值的平均值均小于0.5;同时、单因素方差分析结果也证实两种方法检测结果无显著性差异（P>0.05）,相关系数高达0.938,不同方法检测结果之间呈正相关。以此发现本研究随机选择食品中菌落总数最高的分别为豆沙春卷、京酱肉丝和鲜猪皮。 结论：本研究证实测试片对不同类型食品菌落总数检测结果与国标平板计数方法结果一致性好,并且具有简单、快捷、易于标准化的优点,适用于不同层级食品承检机构。     

螺旋平板法在菌悬液计数及食品和化妆品菌落总数检测中的应用

应用螺旋平板法和国标方法分别对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌的培养菌悬液以及食品、化妆品样品161份进行菌落总数检测,国标法培养48h后进行手工计数,螺旋平板法自动接种培养48h后进行仪器自动计数,将两种方法结果进行比较,结果无显著性差异(P＞0.05)。因此螺旋平板法适用于菌悬液计数及食品和化妆品菌落总数的测定。     

平板计数法与纸片法检测食品微生物菌落总数的比较研究

目的找出平板倾注法与纸片法2种检测食品菌落总数方法之间的相关性,判断2种方法有无显著性差异。方法样品处理按GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》进行处理,平板倾注法取样品稀释液接种平皿倾注琼脂、纸片法取样品稀释液接种细菌计数纸片。用上述2种方法对市场上随机抽取30份饼干及糕点和2份质控样品进行菌落总数检测,最后做统计学分析(t-test)。结果倾注法与纸片法检测结果无显著差异(P0.05)且对不同菌落数区间(0～100CFU/g、100～1000CFU/g、1000～10000 CFU/g)都适用。2份质控样品评价结果为满意。结论纸片法可用于食品菌落总数的快速检测,缩短检测流程,提高工作效率。     

Easy Test~(TM)菌落总数测试片的评价

评价Easy TestTM菌落总数测试片法在食品检测中的准确性和适用性。采用室内技术参数验证和协同试验的方式进行评价。通过5类16种代表性食品同时用测试片方法与参考方法进行测试,对测试片方法的线性、准确度进行评价;同时对测试片的耐变性和批间变异进行评价试验。测试片方法检测结果与国家标准方法检测结果比较无显著差异,测试片的耐变性和批间无显著差异,能满足食品样品的检测要求。     

3M PetrifilmTM快速测试片用于饮料中菌落总数的测定

使用3M PetrifilmTM快速测试片法（3M测试法）和滤膜法对饮料中的菌落总数进行定量测定,分析两种方法的一致性程度。选用大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、爱媛类芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、Asia Siamensis、白色念珠菌和黑曲霉七种菌,对饮料样本进行人工接种并测试。实验结果显示,对于不同菌株及不同污染水平的测试,3M测试法和滤膜法的线性拟合度较好（决定系数R2均>0.95）。且3M测试片法结果回收率均>70%,RSD值（2.9%~34.3%）也均在2020《中国药典》的规定范围内,说明3M测试片法的准确度及精密度较好。对于细菌、真菌分别污染的专属性检验和不同批次的3M测试片的重复性测试中,3M测试片法的回收率>70%,且RSD值（3.6%~34.3%）均在可接受范围之内,表现出良好的专属性和重现性。使用相对正确度和精度剖面分析方法对3M测试片法和滤膜法的结果进行分析,结果显示两种方法具有较好的一致性和等效性。综合以上分析结果,3M测试片法可等效于滤膜法,进行饮料中的菌落总数测定。     

ATP法测定奶中的细菌含量

为了评价ATP法在UHT奶中菌藩总数和商业无菌检测的实用性,本研究通过检测UHT乳中ATP本身的含量,以及微生物平板计数法和商业菌落总数Petfifilm俐测试片法对样品进行菌落总数和商业无菌检测,建立样品中ATP含量与菌落总数的对应关系。结果表明,不同品类UHT牛奶中ATP法结果与菌落总数Petrifilm^TM测试片法和国标平板计数法结果的相关性强,复现性好。由此可知,ATP法可以作为一种快速检测UHT奶中菌落总数和商业无菌的方法。     

菌落总数检测技术研究进展

菌落总数作为判定食品被污染程度标志,具有重要卫生学意义。该文详述菌落总数国家标准检测方法及近年来菌落总数快速检测方法进展,并对今后检测方向进行展望。     

采用ATP生物发光法分析6株常见细菌ATP含量差异

以ATP生物发光法为基础,辅以国标平板计数法,分析和测定了大肠埃希氏菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、乳酸链球菌、乳酸片球菌等6株常见细菌中ATP含量的差异。结果显示:当单位体积菌悬液的ATP荧光值相同时,6株细菌菌落总数无明显差异;当菌悬液的菌落总数相同时,6株细菌的单位体积菌悬液ATP含量无明显差异。研究结果同时说明ATP生物发光法能够定量测定常见区域中的细菌总数。     

3种不同培养基和1种测试片检测水溶性化妆品中菌落总数的结果分析

目的使用t检验法分析3种不同培养基和1种测试片检测水溶性化妆品中菌落总数结果。方法参照《化妆品安全技术规范》(2015年版),使用卵磷脂吐温80营养琼脂、TTC营养琼脂、平板计数琼脂方法进行样品菌落总数检测,然后使用Petrifilm TM菌落测试片检测样品。运用配对t检验法评价4种不同方法对水溶性化妆品中菌落总数计数结果一致性的影响。结果在10~2、10~3 CFU/m L 2种不同浓度,平板计数琼脂法结果波动性最大,无法抑制菌落蔓延,而TTC营养琼脂和菌落测试片相对卵磷脂吐温80营养琼脂,具有抑制菌落蔓延生长、提高计数结果准确性的作用。结论在一定浓度下,可根据实际情况来选择相应培养基检测水溶性化妆品中菌落总数以提高检测效率和质量。     

凝胶型菌落总数测试片的研制

本文以脑心浸液（BHI）肉汤为营养组分,以黄原胶与卡拉胶两种冷水可溶凝胶作为复合凝胶,研制出可应用于食品微生物菌落总数检测的凝胶型测试片。通过正交试验确定测试片培养基附加组分最优添加组合,并试验了两种凝胶不同复配比例对理化及微生物结果的影响,最终确定测试片培养基组分为BHI 38.5 g/L,TTC 0.008 g/L,SAP 0.05 g/L,丙酮酸钠2.0 g/L,且黄原胶与卡拉胶比例为8:2时,测试片达到最优性能。本文研制的菌落总数测试片,与国标平板计数方法相比,两种方法线性相关性达到0.99以上,测试片检出限可达2 CFU/mL,灵敏度达到100%;与行业主流产品3M Petrifilm菌落总数测试片相比,定量结果无明显差异,R2达到0.99。本文所研制的凝胶型菌落总数测试片可应用于食品中菌落总数的检测。     

果汁中菌落总数的不确定度评定

目的建立评定菌落总数不确定度的方法,以减少实验误差并提高检测结果的精确度。方法按照GB 4789.2-2010《食品安全国家标准菌落总数测定》检测20份果汁样品中菌落总数,依据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》分析菌落总数的不确定度来源;采用合并样本标准差计算,评定检测结果的不确定度。结果在包含概率为95%时,果汁中菌落总数的扩展不确定度为0.10(以对数计),此结果适用于同类样品的检测。结论用合并样本标准差评定多个同类样本菌落总数的不确定度较为方便,随着检验数量的不断增加,数据可随时加入到合并样本中,从而对菌落总数的不确定度进行合理判定,从而对食品进行正确的卫生学评价。     

电导率法快速检测食品细菌总数的研究

电导率法是最近发展起来的应用于微生物检验的一项电化学技术。本研究先建立了利用电导率法测定几种常见食品细菌总数的标准曲线,然后通过平行实验验证了电导率法快速检测食品细菌总数的重现性,再通过配对实验比较了电导率法与国标法测定结果符合率;经统计学卡方检验,结果 P〉0.05,表明两种方法无显著性差异,结果符合率为92.7%;说明电导率法作为一种快速检测方法用于食品细菌总数的检验是可行的。     

能力验证菌落总数测定结果不确定度的评定

目的对实验室能力验证样品菌落总数进行不确定度评定。方法能力验证菌落总数依据GB4789.2-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》以及能力验证计划参试指导书来进行测定和结果判断,再根据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》的规定,对测定过程中引入的不确定度分量进行评定,然后采用合成的方法来计算和评定菌落总数的不确定度。结果菌落总数测定结果合成不确定度为0.05042,扩展不确定度为0.1008(以对数计)。结论本研究建立的方法可以对能力验证样品的菌落总数进行不确定度评定,此方法适合于类似检测条件下菌落总数不确定度的评定。     

ATP生物发光检测技术的建立及应用可行性分析

建立了测定食品中细菌总数的ATP生物发光检测技术,考察了各种理化因素对生物发光反应的影响。反应体系最优化条件:Ln浓度为70mg/L,FL浓度为50mg/L,Mg2+浓度为0.25mmoL/L,pH为7.2,最适温度为23℃。在10-10～10-15mol/mL范围内,ATP浓度与生物发光强度之间有较好的线性关系,相关系数R2=0.978。方法检出限为10-15mol/mL,批内变异和批间变异分别小于7%和8%。将建立好的ATP生物发光反应体系应用于食品样品中细菌总数的检测,加标回收率范围为82.2%～112.4%,检测结果与平板计数结果相关性良好。因此,建立的ATP生物发光检测技术用于检测食品中细菌总数是可行的。     

水源水中菌落总数不确定度的评定

目的评估水源水中菌落总数检测结果的不确定度。方法按照GB/T 5750.12-2006《生活饮用水标准检验方法微生物指标》测定10份水源水样品中菌落总数,依据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》评定检测结果的不确定度。结果依据所采取的方法,在置信概率为95%时,水源水中菌落总数的扩展不确定度为0.062,10份样品测量结果均在其各自的置信区间范围内。结论本研究建立的方法同样适合类似检测条件下菌落总数不确定的评定。     

生物发光快速测定生乳菌落总数的方法

为消除利用ATP生物发光法测定生乳菌落总数时非细菌ATP对测定结果的干扰,建立了一种样品前处理方法。利用ATP生物发光法对经过前处理的生乳样品进行检测,结果表明,生乳菌落总数对数值与生乳细菌ATP发光对数值呈现较好的线性关系(R2=0.982),相关程度为显著相关(P<0.01),说明该前处理方法能够有效排除非细菌ATP的干扰,有利于提高ATP生物发光法定量测定生乳菌落总数准确性。     

武汉市售茶中2 种食源性致病菌的检测与分析

为了解市售茶叶中菌落总数和2 种食源性致病菌（蜡样芽孢杆菌和克罗诺杆菌）的检出情况,根据国标对武汉地区市售的46 份茶叶样品进行菌落总数和2 种食源性致病菌的初步分离和鉴定,分别用16S rDNA内转录间隔区-聚合酶链式反应方法鉴别蜡样芽孢杆菌,用16S rDNA和fusA序列分析对疑似克罗诺杆菌的分离株进行鉴定,进而比较和分析不同产地和类别间微生物的检出情况。结果发现,蜡样芽孢杆菌在市售茶叶中检出率极高,达97.9%,而且其数量约占细菌总数的6.0%。鉴定出3 株阪崎克罗诺杆菌（Cronobacter）,其检出率达6.5%,仅占细菌总数的0.1%～3.2%。花草茶中细菌总数最高,也是唯一检出克罗诺杆菌的茶类;发酵茶中蜡样芽孢杆菌数量最高,均超过1 100 MPN/g。不同产地茶叶在这3 个微生物指标上有显著差异。当茶及其深加工产品和其他食品原辅料混搭成新产品时,这2 种食源性致病菌可能带来风险隐患。     

电阻抗法快速测定食品中菌落总数的应用研究

为更好地提高现行食品中的菌落总数的检测效率,快速、准确地对食品中的菌落总数出评估,将电阻抗法应用到120份巴氏消毒奶和114份瓶装饮用纯净水中的菌落总数的测定,并与现行国标法测定结果作比较。二种方法检测结果经统计学处理均无显性差异。巴氏消毒奶和饮用纯净水的检测结果相符率分别为95%和94.7%,电阻抗法巴氏消毒奶的假阳性率为1.7%,假阴性率3.3%,纯净水假阳性率为1.8%,假阴性率为3.6%。对检出时间的分析表明,巴氏消毒奶的细菌指标合格的时间为4.2h,不合格时间为2.3h,纯净水的细菌指标合格的时间为14.5h,不合格时间为11.3h。以上结果表明,应用电阻抗技术测定巴氏消毒奶和纯净水的落总数,可以将检测时间从常规法的48h缩短至14.5h,是一种省时、可靠的检测方法。