桃仁多肽螯合亚铁的结构表征及体外模拟消化

以桃仁蛋白酶解分离所得多肽和氯化亚铁为原料,研究不同品种多肽、铁盐和不同分子质量多肽组分对螯合率的影响,以及对多肽螯合亚铁(PKP3-Fe)的结构表征和体外模拟消化的影响。研究结果表明,桃仁多肽与亚铁离子的螯合率显著高于(P<0.05)大豆多肽、玉米多肽和鱼胶原蛋白肽,氯化亚铁和小分子质量桃仁多肽具有更高的螯合率。桃仁多肽与亚铁离子螯合前、后的紫外光谱和荧光光谱图对比显示,螯合后紫外吸收峰位置、峰值均发生迁移,内源荧光强度明显减弱,有螯合物形成;傅里叶红外光谱分析表明,亚铁离子与桃仁多肽中的-COO-、N-H、C-N、O-H形成配位键;扫描电镜图显示,桃仁多肽螯合后微观结构发生明显改变,有光滑球状颗粒生成。在模拟胃部消化过程中,PKP3-Fe的铁离子释放率显著低于硫酸亚铁片和乳酸亚铁片(P<0.05),避免了大量氢氧化铁沉淀的生成,进入模拟肠液后,PKP3-Fe仍有相当部分成分在肠道中以离子态或与多肽以螯合物的状态存在,能更好地被人体吸收利用。     

鱼蛋白酶水解物亚铁螯合修饰物抑菌特性及机理研究

目的:探讨鱼蛋白酶水解物亚铁螯合修饰物的抑菌特性及机理,为带鱼下脚料和其它低值鱼高值化以及多肽亚铁螯合物抑菌剂的应用奠定理论基础。方法:采用葡聚糖凝胶、SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法分离纯化并鉴定;以牛津杯双层平板法测定抑菌特性;通过透射电镜观测螯合物对大肠杆菌形态的影响。结果:分离到1种具有较高抑菌活性的纯化组分,相对分子质量约26 kDa;其对多种常见微生物,包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等均有较强的抑制作用。红外光谱检测表明亚铁离子与多肽形成环状共轭结构;多肽亚铁螯合物通过形成跨膜的离子通道,使菌体内容物外泄,最终导致菌体死亡;铁含量与多肽亚铁螯合物抑菌活性有关。结论:多肽亚铁螯合物抑菌机理是通过在微生物细胞表面形成跨膜离子通道,从而具有抑菌功效。推测螯合物可竞争性结合微生物生长所需铁元素,且螯合环结构对其抑菌活性也有贡献。     

辣木籽粕多肽亚铁螯合物的制备及结构分析

为探究辣木籽粕多肽亚铁螯合物的制备工艺及其结构特性。本实验以辣木籽粕多肽和氯化亚铁为原料制备多肽亚铁螯合物，同时以亚铁螯合率为指标对辣木籽粕多肽-亚铁螯合物的制备条件进行优化，得到了最佳螯合反应条件：肽铁质量比为4.1:1，多肽浓度为7.9 mg/mL，pH=4.70，反应温度为40 ℃，反应时间为20 min，在此条件下亚铁离子螯合率为（88.27±1.49）%。紫外、红外、荧光光谱以及扫描电镜和能谱分析等方法对螯合物进行结构分析表明，亚铁离子能够与多肽氨基酸上C=O 、N-H、—COO-等官能团结合生成多肽亚铁螯合物，表面疏水性与氨基酸组成分析表明极性氨基酸能够在螯合反应中起到重要作用。     

羊骨多肽亚铁螯合物的制备工艺优化及结构表征

为探究羊骨多肽亚铁螯合物的最优制备工艺及结构的表征,本试验采用羊骨粉为原料,制备出羊骨多肽,并超滤分离得出螯合效果最好的肽段为0～3 KDa,再与FeCl_2进行螯合,得到羊骨多肽亚铁螯合物。以螯合率为指标,通过单因素与响应面试验,得到最优条件为反应的肽铁质量比为3∶1,底物浓度为30 mg/mL,pH为5.2,螯合时间为30 min,螯合温度为35℃,最终螯合率为78.00%。以羊骨多肽为参照,试验结果表明,定性检测确定了螯合物的形成,紫外光谱显示亚铁离子与多肽作用,红外光谱表明螯合位点为氨基,羟基和C=O,扫描电镜可看出羊骨多肽与亚铁离子发生了吸附作用,结构紧密。通过氨基酸分析可得出,氨基酸组成符合胶原多肽的成分特征,螯合后天冬氨酸与谷氨酸含量增加显著。     

鲢鱼源多肽锌的制备工艺对其抑菌活性的影响

研究了制备工艺中的主要因素对鲢鱼源多肽锌螯合物的抑菌活性影响。以抑菌圈直径为指标,探讨了酶解工艺(蛋白酶种类和酶解时间)和螯合工艺(螯合反应的pH、多肽与氯化锌的质量比、螯合反应的温度和时间)对多肽锌螯合物的抑菌活性影响。结果表明,酶法水解鲢鱼蛋白制备抑菌型多肽锌的最佳条件为风味蛋白酶酶解时间6h、螯合反应pH为6.0、多肽与氯化锌质量比为2:1、反应时间45min、温度30℃,得到的螯合物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为12.50mm和12.66mm,螯合物得率38.67%。因此,鲢鱼源多肽锌螯合物具有较好的抑菌活性,有望作为一种潜在的抗菌剂。     

多肽亚铁螯合物制备及抑菌活性研究

以舟山带鱼下脚料为原料,制备多肽亚铁螯合物,并研究亚铁鳌合物的抑菌活性。利用风味酶和动物复合蛋白酶双酶法制备水解液,采用氯化亚铁螯合。以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等为测试菌株,采用牛津杯双层平板法确定亚铁螯合物的抑菌中浓度及探讨pH和温度对亚铁螯合物抑菌活性的影响。结果表明：（1）最佳酶解条件为带鱼下脚料蛋白用量4．1g/100mL,温度40℃,复合比1：1,酶量6&#215;10^3 IU／100mL,pH7;（2）带鱼下脚料蛋白最佳螯合条件为：pH7,时间15min,温度20℃,抗坏血酸用量0．1％;（3）抑菌活性试验结果表明：亚铁螯合物对所选取的测试菌株除普通变形杆菌外都有一定抑菌作用,其中对巨大芽胞杆菌抑菌效果最好;在酸性条件下抑菌活性仍然较高,但在碱性环境中抑菌活性明显降低;在较低温度下保持抑菌活性,但高温处理后抑菌活性显著降低。亚铁螯合物对各测试菌株除普通变形杆菌之外均有较强的抑菌活性,是一种对细菌较为广谱的抑菌剂。     

蓝圆鲹多肽亚铁螯合物制备及其抗氧化性

利用木瓜蛋白酶水解蓝圆鲹蛋白制得多肽,研究pH、温度和时间等因素对多肽与亚铁离子螯合反应的影响;以自由基清除率为指标,研究不同分子量多肽与亚铁离子螯合物的抗氧化作用。结果表明,最佳螯合条件为:pH6,温度25℃,时间10 min,螯合率达到95.6%;抗氧化试验表明,多肽分子量在1 570～4 100 Da和170～1 230 Da范围内,亚铁离子螯合物具有较强的抗氧化作用,对羟基自由基(·OH)、超氧自由基(O_2~-·)和1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)自由基最大清除率分别为50.41%, 40.35%和55.46%。     

罗非鱼水解蛋白金属离子螯合物的抑菌活性研究

罗非鱼肉蛋白经木瓜蛋白酶水解后分别与CaCl2、FeCl2按质量比(水解物∶金属盐)为5∶1、10∶1、20∶1进行螯合,研究并比较了罗非鱼水解蛋白钙、亚铁离子螯合物的抗菌活性。结果表明:钙、亚铁离子与水解物的螯合率随着水解物与金属盐质量比的升高而逐渐增大;氨基酸分析表明罗非鱼肉蛋白水解物中具有金属螯合活性的氨基酸含量较高,其占总氨基酸含量的34.59%;抑菌实验显示得到的螯合物对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的生长表现出明显的抑制作用,其中以5∶1质量比得到的亚铁离子螯合物的抑菌活性最高。     

大豆多肽-锌螯合物的制备工艺优化及其结构表征

本文通过Alcalase酶水解大豆分离蛋白制备大豆多肽,并将大豆多肽与ZnCl₂进行螯合反应制备多肽-锌螯合物。以锌螯合能力为指标,通过单因素实验及正交试验,确定大豆多肽锌螯合物的最佳工艺条件为:反应温度75 ℃,pH5.5以及ZnCl₂溶液浓度为450 μmol/L,此条件下大豆多肽的锌螯合能力为(26.96±1.22) mg/g。紫外光谱和傅利叶红外光谱表明,锌离子可以与多肽中的羧基、氨基和肽键结合,从而形成大豆多肽锌螯合物。荧光光谱、扫描电子显微镜和Zeta电位的结果表明,与锌离子的螯合使得多肽发生分子内和分子间的折叠与聚集。 大豆多肽-锌螯合物为开发新型补锌制剂提供了新的研究思路和理论依据。     

多肽业铁螯合物制备及抑菌活性研究

以舟山带鱼下脚料为原料,制备多肽亚铁螯合物,并研究亚铁鳌合物的抑菌活性.利用风味酶和动物复合蛋白酶双酶法制备水解液,采用氯化亚铁螯合.以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等为测试菌株,采用牛津杯双层平板法确定亚铁螯合物的抑茵中浓度及探讨pH和温度对亚铁螯合物抑菌活性的影响.结果表明:(1)最佳酶解条件为带鱼下脚料蛋白用量4.1 g/100 mL,温度40℃,复合比1:1,酶量6×10(3)IU/100 mL,pH 7;(2)带鱼下脚料蛋白最佳螯合条件为:pH 7,时间15 min,温度20℃,抗坏血酸用量0.1%;(3)抑菌活性试验结果表明:亚铁螯合物对所选取的测试菌株除普通变形杆菌外都有一定抑菌作用,其中对巨大芽胞杆菌抑菌效果最好;在酸性条件下抑茵活性仍然较高,但在碱性环境中抑菌活性明显降低;在较低温度下保持抑菌活性,但高温处理后抑菌活性显著降低.亚铁螯合物对各测试菌株除普通变形杆菌之外均有较强的抑菌活性,是一种对细菌较为广谱的抑菌剂.     

响应面法优化鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合铁工艺

采用响应面法优化鳕鱼皮胶原蛋白肽与氯化亚铁进行螯合反应的条件,制备小分子肽螯合铁产品。以pH值、小分子肽与FeCl2的质量比和小分子肽液质量分数3因素的5水平进行二次正交旋转组合试验,建立螯合物得率的二次回归方程。结果表明：最佳螯合工艺条件为胶原蛋白肽与氯化亚铁的质量比4:1、小分子肽液质量分数3.5%、pH7.0。在此条件下,螯合物得率为37.31%,与模型的预测值37.46%接近。红外光谱检测结果显示,亚铁离子与小分子肽中的NH2+和COO－有螯合,是一种新型螯合物。     

大黄鱼蛋白肽-钙螯合物的制备及性质研究

目的 制备大黄鱼蛋白肽-钙螯合物,研究其结构性质,深度研究大黄鱼多肽的促钙吸收活性。方法 以大黄鱼鱼糜为原料,通过胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶进行酶解制备多肽,将肽与钙进行螯合,探究大黄鱼蛋白肽及其肽-钙螯合物的性质功能。结果 三种酶解肽中,胰酶肽钙螯合含量最高,胰酶肽的粒径最小,肽-钙螯合物相比于肽的粒径都有所减小,说明肽-钙螯合物是一种致密的纳米颗粒并呈现出折叠多孔的网络结构。这些变化可归因于肽和钙离子之间的相互作用。紫外吸收光谱、荧光光谱、红外图谱和圆二色光谱的结果表明大黄鱼蛋白肽与钙离子螯合,生成了新的肽-钙螯合物。结论 三种酶解肽中,胰蛋白酶水解物的钙离子结合能力在三种蛋白酶获得的水解物中最高。因此,在本研究中胰蛋白酶被认为是制备大黄鱼蛋白水解物钙离子结合活性肽的最优酶制剂,为大黄鱼的高值化利用和新型钙制剂的开发提供了理论依据和实验参考。     

舟山海域4种低值鱼酶解蛋白亚铁螯合物自由基清除活性与抑菌活性研究

对马鲛鱼、带鱼、鳀鱼、梅童鱼碱性蛋白酶酶解蛋白亚铁螯合多肽自由基清除活性和抑菌活性进行研究,结果表明:4种低值鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽(Low value fish enzymatic hydrolysates protein ferrous chelatingpeptides,LEFP)均出现不同程度的清除羟自由基、超氧阴离子、二苯基苦基苯肼(DPPH)等自由基的活性;4种低值鱼酶解产物亚铁螯合多肽对超氧阴离子的清除作用均较弱;羟自由基清除活性较强的是梅童鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽;DPPH自由基清除活性较强的是马鲛鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽;4种低值鱼酶解产物亚铁螯合多肽对待测菌株有不同程度的抑菌作用。其中带鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽对3个被测菌株都表现出明显的抑菌活性,而马鲛鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽则没有明显的抑菌活性。     

米糠肽-铁锌螯合物制备工艺研究

目的 研究米糠蛋白制备米糠肽-铁锌螯合物的工艺。方法 以米糠蛋白为原料,优化米糠肽-铁锌螯合物制备工艺。以亚铁离子与锌离子的螯合率和水解度为评价指标,考察蛋白酶种类、反应物质量比、温度、时间及pH值对米糠酶解产物铁锌螯合率的影响。在单因素试验的基础上,结合JMP软件进行定制试验设计,确定米糠肽-铁锌螯合物的制备工艺。结果 碱性蛋白酶较适宜制备米糠肽-铁锌螯合物,其最佳螯合工艺条件为时间70 min、温度70 oC、反应物质量比3:1、pH 5.0;在此条件下,其产物亚铁离子螯合率达到38.29%、锌离子螯合率达到57.2%,与预测值接近。结论 本研究采用米糠肽同时螯合铁锌2种金属离子,不仅可以充分吸收米糠肽的营养成分,提高消化率,发挥其降血压、降血脂、抗氧化等功能特性,还可以同时补铁、补锌,对人体具有积极作用。     

莜麦谷蛋白-1酶解物螯合亚铁离子影响因素的研究

采用连续提取法提取莜麦球蛋白、谷蛋白-1、水溶性清蛋白和谷蛋白-2,分析4种蛋白质对亚铁离子的螯合能力,最终筛选出莜麦谷蛋白-1的螯合能力最高(螯合率为29.55%)。以莜麦谷蛋白-1酶解物(naked oat glutelin-1 hydrolysates,NOG-1H)为原料制备肽-亚铁螯合物,并探讨酶的种类、亚铁离子用量、螯合时间等因素对NOG-1H亚铁离子螯合能力的影响。结果表明,莜麦谷蛋白-1经碱性蛋白酶结合风味蛋白酶水解后,水解产物的水解度(15.32%)和亚铁离子螯合能力(45.26%)均最高;当螯合时间为90 min,pH值为2.0、温度为30℃、亚铁离子浓度为1.25 mg/mL时,NOG-1H均表现出较高的亚铁离子螯合率。     

Preparation and identification of peptides and their zinc complexes with antimicrobial activities from silver carp (Hypophthalmichthys molitrix) protein hydrolysates

The antibacterial activities of peptide–zinc complexes (PZCs) prepared from silver carp (Hypophthalmichthys molitrix) protein hydrolysates treated by four enzymes were evaluated. PZCs prepared from flavourzyme hydrolysates exhibited the highest antibacterial activities. The peptides that were able to produce PZCs with high antibacterial activity were isolated from flavourzyme hydrolysates using chromatographic procedures. Eleven peptides were identified through nano-liquid chromatography–electrospray ionization mass spectrometry. Five of these identified peptides were synthesized. The PZCs obtained were characterized and tested for antimicrobial activities. Results suggested that all five PZCs present strong antibacterial activities but no antifungal activities. Peptides with more acidic amino acid residues in their sequences could bind more zinc ions than peptides with fewer acidic amino acid residues. Zinc complexes of acidic amino acid-richer peptides showed stronger antibacterial activities. Results confirmed the antibacterial activities of PZCs from silver carp hydrolysates, and suggested the feasibility of PZCs as a provider of natural zinc ligands for antibacterial agents in the food and feed industries.     

美国红鱼鱼鳞制备多肽金属螯合物的工艺优化

本文研究并优化了以美国红鱼（Sciaenops ocellatus）鱼鳞为原料制备多肽及合成多肽金属螯合物的工艺条件。以美国红鱼鱼鳞为原料制备多肽,采用凝胶色谱分析多肽的分子量;利用水体系法合成多肽金属螯合物并采用EDTA络合滴定法测定金属螯合率;设计并利用L₉（34）正交试验优化了多肽金属螯合物工艺条件;利用红外光谱检测多肽和多肽金属螯合物,验证多肽与金属的结合。凝胶色谱分析获得多肽分子量在1~6 kDa左右,正交试验获得了多肽金属螯合物的制备工艺条件,即多肽锌螯合物的工艺条件为质量比2:1、pH5.5、温度55 ℃、时间60 min;多肽铜螯合物的工艺条件为质量比2:1、pH6.0、温度35 ℃、时间55 min,在该最佳螯合条件下制备的多肽锌、铜螯合物的螯合率分别为78.21%、91.24%。红外吸收光谱结果显示Zn2+、Cu2+与-NH₂结合成功,表明多肽锌、铜螯合物是新的物质。研究结果表明,该工艺条件下的螯合率明显提高,且富含金属离子、成本低廉、市场前景可观,有利于海洋水产加工副产物高值化应用,促进渔业加工产业的技术升级。     

家蝇幼虫培养及其抗菌肽的初步研究

通过天然家蝇幼虫的人工培养及Tricine-SDS-PAGE电泳,分离纯化出2种抗菌肽（命名为MDL-1、MDL-2）,并检测了该抗菌肽的抑菌活性.MDL-1的相对分子量10772Da,MDL-2的相对分子量6091Da.实验结果表明：剩肉菜（骨头和虾皮等）对天然家蝇的产卵引诱力最大;红糖和奶粉的最佳比例为3：1;家蝇幼虫食料最佳含水量为80%;家蝇幼虫单体平均增重最大的最佳培养基为麦麸和骨头的混合物.抑菌活性检测结果：MDL-1对枯草芽胞杆菌的抑菌效果最强,大肠杆菌次之,金黄色葡萄球菌最差;MDL-2对大肠杆菌的抗菌效果最好,金黄色葡萄球菌次之,枯草芽胞杆菌稍差.     

矿质离子螯合肽自组装递送体系研究进展

钙、铁、锌、硒、铜、铬等矿质元素与人体生长、发育、繁殖、代谢等生命活动密切相关,多肽与矿质离子间可自发组织或聚集成具有稳定结构的有机螯合物,这一类新型补充剂在稳定性、促吸收、生理活性等方面比以往的金属离子补充剂更具优势。该文阐述了多肽-矿质离子螯合物来源及制备、自组装模式、促生物利用度,并对多肽-矿质离子螯合物及其多元超分子自组装递送体系前景进行了展望。