常温条件下拮抗酵母菌对葡萄果实的抗性诱导研究

以从草莓果实上筛选的、对由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起的灰霉病具有较好抑制作用的葡萄有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)菌株为供试拮抗酵母菌,研究其对"巨峰"葡萄果实抗性的诱导。将葡萄果实分组,并分别进行喷洒和人工接入浓度为1×108cfu/mL的拮抗酵母菌悬液,常温条件下贮藏,观察果实感官品质变化,并测定抗性相关酶酶活变化。结果表明,拮抗酵母菌处理不影响果实感官品质,甚至可以较好地维持果实的感官品质;人工接入的拮抗酵母菌可以较好的诱导果实的POD、PAL、CAT、PPO及APX的酶活,而对喷洒拮抗酵母菌的整个果实可以较好的诱导POD、SOD、PAL及APX的酶活。整体而言,拮抗酵母菌可引起果实的应激反应,诱导寄主产生抗性。     

贝莱斯芽孢杆菌处理对厚皮甜瓜保鲜效果及保护酶活性的影响

为探究生防菌处理对厚皮甜瓜保鲜效果和保护酶活性的影响,本研究选用西州蜜25号厚皮甜瓜作为研究对象,通过在25 ℃和4 ℃条件下在厚皮甜瓜表面接种贝莱斯芽孢杆菌BG-2,测定贮藏期间拮抗菌在厚皮甜瓜表面定殖特性、保鲜效果和厚皮甜瓜过氧化物酶（Peroxidase,POD）、多酚氧化酶（Polyphenol oxidase,PPO）和苯丙氨酸解氨酶（Phenylalnine ammonialyase,PAL）活性的变化。结果表明,在25 ℃和4 ℃条件下,拮抗菌在厚皮甜瓜表面定殖数量均呈现先上升后下降的趋势且能稳定定殖。接种拮抗菌的厚皮甜瓜腐烂效果、抑制pH和可溶性固形物含量的下降显著优于对照组（P<0.05）。POD和PAL活性呈现先上升后下降的趋势,PPO活性在室温下呈现先上升后下降趋势,在低温下呈现缓慢上升趋势。25 ℃下,拮抗菌处理组POD在第20 d时酶活最高,PAL和PPO在第10 d时酶活最高;4 ℃下,拮抗菌处理组POD和PAL在第20 d时酶活最高。PPO处理在第40 d时酶活最高。且拮抗菌处理过的厚皮甜瓜酶活始终高于病原菌处理组。在25 ℃和4 ℃贝莱斯芽孢杆菌BG-2均能在厚皮甜瓜表皮上稳定定殖,抑制贮藏期厚皮甜瓜腐烂,延缓pH、可溶性固形物、POD、PPO和PAL酶活性下降,且BG-2和低温相结合对上述效果更好。本研究为延长新疆厚皮甜瓜贮藏期提供理论依据,为生防菌作用在厚皮甜瓜采后保鲜提供技术支持。     

烟草根黑腐病根际拮抗菌的筛选、鉴定及其促生防病效果

为挖掘对烟草根黑腐病菌有较高拮抗效果的根际促生菌资源,从四川广元和陕西汉中等地采集30份烟草根际土壤,以烟草根黑腐病菌为靶标,采用温度筛选法和平板对峙法分离筛选出有高效拮抗活性的菌株,并对该菌株进行系统发育分析,采用抗生素标记法和温室盆栽法测定菌株LY79的定殖规律、对烟草的促生效果以及对烟草根黑腐病的防治效果。结果表明：（1）从烟草根际土壤分离到一株烟草根黑腐病高效拮抗菌株LY79,经形态学、生理生化鉴定结合16S rRNA和持家基因ropB分析将菌株LY79鉴定为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。（2）抗生素标记菌株LY79^A在烟草根际土定殖规律为先下降后上升再下降最终趋于稳定,且施药40 d后仍能在烟草根际土、根系、茎、叶分离到1.34×10⁶、2.91×10⁴、1.81×10⁴、1.01×10⁴ CFU/g的菌株LY79^A,说明其定殖能力较强。（3）菌株LY79对烟草促生效果较好,处理60 d后,烟草的株高、茎粗、整株干质量、根干质量分别增加了34.68%、37.85%、103.79%、72.55%。（4）1×10⁹ CFU/mL浓度的菌株LY79发酵液对烟草根黑腐病的盆栽防效达71.54%,仅略低于对照药剂70%甲基托布津500倍液。解淀粉芽孢杆菌LY79在烟草根黑腐病防治中具有较大的应用潜力。     

水杨酸结合拮抗酵母菌处理对冷藏草莓果实的抗性影响

研究水杨酸与葡萄有孢汉逊酵母结合使用对草莓果实冷藏期间的抗性影响。将草莓果实分组,分别进行喷洒100μg/mL水杨酸(SA)与1×108CFU/mL拮抗酵母菌悬液、单独1×108CFU/mL拮抗酵母菌悬液、无菌水为对照,置于(2±1)℃、相对湿度90%～95%冷藏条件下贮藏,定期测定相关酶指标。结果显示：单独拮抗酵母菌处理与结合SA处理均能降低引起果实膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)含量的积累,提高过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸氧化物酶(APX)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)和β-1,3-葡聚糖酶等活性氧防御酶系的活性,延缓果实衰老。葡萄有孢汉逊酵母具有作为拮抗菌发展的潜力,且与SA结合处理的效果显著优于单独拮抗菌处理。     

葡萄采后果梗抗氧化系统与褐变的关系

以新疆红提、木纳格葡萄为试材,在10±0.5℃的温度条件下,分析贮藏期间果梗之间的差异,研究果梗褐变与抗氧化系统变化的相关性。结果表明:贮藏至第6 d,红提和木纳格葡萄果梗的总酚含量分别为5.37、5.41 A280 nm/g;PPO和POD的活性分别为0.21、1.09和0.82、0.11 U/g。红提葡萄果梗的SOD活性是26.98 U/g、CAT活性是64.44 U/g、APX活性是30.89U/g,分别是木纳格葡萄的1.03倍、2.19倍和1.85倍。红提葡萄果梗的褐变指数、超氧阴离子(O2-·)、H2O2含量、相对电导率、MDA含量及类黄酮含量显著低于木纳格葡萄(p0.05),分别低4.04%、43.17%、11.55%、43.32%、13.78%和30.94%。红提和木纳格葡萄果梗褐变指数均与相对电导率、丙二醛含量、总酚、类黄酮及H2O2含量呈现显著正相关(p0.05),与PPO活性呈正相关(p0.05);红提葡萄果梗褐变指数与POD活性、CAT活性有良好的相关性(p0.05);木纳格葡萄果梗褐变指数与PAL活性及SOD活性有较好的相关性(p0.05)。因此,葡萄品种与抗氧化系统密切相关,导致果梗褐变进程有所不同。     

采前茉莉酸甲酯处理提高红地球葡萄的贮藏品质

以红地球葡萄为研究试材,采用（0、50、100和200 μmol/L）茉莉酸甲酯（Methyl Jasmonate,MeJA）在膨大期、转色期和采收前2 d（预收期）喷施处理红提葡萄果实,在0±1 ℃条件下贮藏。结果表明,在离体条件下,MeJA对灰葡萄孢菌的菌体生长量和菌落直径无显著差异作用（p<0.05）,较高浓度对菌体生长具有一定的抑制作用。在贮藏期间,MeJA可以显著抑制葡萄果实采后腐烂的发生、延缓果实硬度的下降和提高果实可溶性固形物的含量,维持可滴定酸含量。100 μmol/L MeJA处理组优于其他组,在贮藏50 d时,CK组发病率为86.09%,是MeJA处理组的1.53倍,MeJA处理组的可溶性固形物含量为17.3%,可滴定酸含量为0.675%。40 d时MeJA处理组的硬度为7.5 N,是CK组的1.59倍,CHI活性为370.12 U/g,20 d时MeJA处理组GLU活性为105.86 U/g,是CK组的1.11倍。10 d时MeJA处理组PAL和POD活性为2.43 U/g和0.506 U/g,是CK组的1.18和1.58倍。MeJA采前喷施能有效诱导果实PAL、POD、CHI和GLU酶活性的上升,表明MeJA采前喷施处理能够通过诱导提高葡萄实酶活性来提高果实采后抗病性,提高葡萄贮藏效果,减少果实采后腐烂的发生。     

固载二氧化氯对最小加工竹笋品质和生理的影响

采用固体二氧化氯处理最小加工竹笋,于4 ℃贮藏12 d。以呼吸强度、颜色、硬度、苯丙氨酸解氨酶（PAL）、多酚氧化酶（PPO）、过氧化氢酶（CAT）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）和谷胱甘肽还原酶（GR）活性、超氧阴离子自由基生成速率、总抗氧化能力和菌落总数等为指标,研究0.50 mg/L二氧化氯对最小加工竹笋品质和生理的影响。结果表明：用0.50 mg/L的二氧化氯处理,可降低最小加工竹笋呼吸强度,抑制竹笋贮藏期间硬度的上升;延缓PAL、PPO活性的增加;提高CAT、APX和GR的活性,降低超氧阴离子自由基的生成速率,提高总抗氧化能力。     

乙醇和茉莉酸甲酯熏蒸处理对方竹鲜笋贮藏品质的影响

目的：为方竹鲜笋的采后贮藏保鲜提供依据。方法：采用500 μL/L无水乙醇、0.1 mmol/L MeJA熏蒸方竹鲜笋,以蒸馏水为空白对照（CK）,测定方竹鲜笋贮藏期间[温度（1.0±0.3） ℃,相对湿度（90±5）%]的呼吸强度、硬度、褐变指数、可溶性蛋白质、PAL、POD、PPO、APX等指标,并结合主成分分析方竹鲜笋贮藏期间的品质差异。结果：复合熏蒸处理可以降低贮藏期间方竹鲜笋硬度和褐变指数的上升,维持总黄酮和可溶性蛋白质含量,诱导APX、POD、PAL、PPO酶活性变化,延缓木质化、褐变。当贮藏时间为60 d时,复合熏蒸的主成分分析高于其他处理的。结论：复合熏蒸能够更好地维持方竹鲜笋贮藏期间的品质。     

拮抗菌Burkholderia contaminans对玫瑰香葡萄采后灰霉病的抗性诱导

以玫瑰香葡萄为实验试材,研究洋葱霍尔德氏菌（Burkholderia contaminans B-1）对玫瑰香葡萄采后灰霉病的抗性诱导机理,对经拮抗菌处理贮藏后果实的腐烂率及其抗性相关物质进行测定。结果表明：拮抗菌B. contaminans B-1可有效降低玫瑰香葡萄采后腐烂率,与对照相比,果梗腐烂率降低69.58%,果肉腐烂指数降低63.93%。拮抗菌处理对果实苯丙烷代谢途径、活性氧代谢途径和其他抗性相关酶类活性均有影响。与对照相比,B. contaminans B-1处理可提高葡萄果实苯丙氨酸解氨酶（PAL）、过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）和多酚氧化酶（PPO）活性,促进过氧化氢（H2O2）含量积累,延缓过氧化氢酶（CAT）活性峰值出现的时间。此外,拮抗菌处理也可以诱导果实病程相关蛋白几丁质酶（CHI）和β-1,3葡聚糖酶（GLU）活性的上升。     

红地球葡萄采后生理变化与发病率的相关性

研究红地球葡萄贮藏过程中果粒发病率和各项生理指标的关系,确定能够预测葡萄贮藏效果的指标,以5个不同产地红地球葡萄为试验材料,测定冷藏过程中POD、PAL、PPO、多酚等主要生理指标的变化.各生理指标在贮藏过程中与果实发病率有较好的相关性,其中果肉PPO活性及多酚含量与发病率的相关系数分别大于0.812和0.828;葡萄采收时多酚含量与贮藏结束(75 d)时果粒发病率的相关系数为0.885.果肉PPO活性及多酚含量能够监测贮藏过程中果粒发病率的变化,葡萄采收时果肉多酚含量能够较好地预测贮藏后期红地球葡萄病害的发生情况.     

无致病力青枯菌株对烟草青枯病的控制作用

为进一步揭示无致病力菌株对烟草青枯病的控病机理,以无致病力青枯菌株为材料,针对烟草青枯病进行了温室控病及田间小区试验,并通过抗药性标记测定其抗药性突变菌株在烟株体内的定殖状况,同时分析处理后烟株体内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)的活性变化。结果显示:无致病力菌株Tbw1-7-3在温室盆栽条件下对青枯病的相对防效达89.4%,其田间防效在发病初期10~20 d与药剂农用链霉素处理间无明显差异,且其抗药性突变株在烟株根表和体内可短暂定殖。同时菌株Tbw1-7-3能提高寄主中PAL、POD和PPO 3种酶活性及促进病程相关蛋白(PRP)的积累。无致病力菌株对烟草青枯病具有较好的控制作用,以菌株Tbw1-7-3的防效最优。田间试验也显示Tbw1-7-3菌株在发病初期具有良好的控病效果。无致病力青枯菌株的控病机理可能兼有占位效应及诱导抗病性。      

拮抗细菌活性蛋白诱导烟草对CMV的抗性研究

从烟田耕作层土样中分离到对CMV有拮抗作用的细菌菌株B6,通过离子交换层析和凝胶过滤层析初步确定其活性物质是分子质量大小为40．6kD的蛋白质。活性蛋白诱导后,对烟草叶片的病毒含量、过氧化物酶（POD）、苯丙氨酸解氨酶（PAL）和多酚氧化酶（PPO）的活性变化进行研究。结果表明,拮抗细菌活性蛋白诱导后烟草叶片内CMV含量明显降低,随着诱导天数的增加病毒的含量呈由多到少再增多的变化趋势,POD,PAL和PPO等细胞防御酶的活性增强。     

均衡自发气调贮藏保鲜莱阳梨

以莱阳梨为试材,研究莱阳梨均衡自发气调贮藏的条件和效果。结果表明, EMAP贮藏能够较好地保持果实的硬度;抑制PPO活性,贮藏120d后,CK组PPO活性为40.9U/g,远高于EMAP组的28.4U/g,两者差异显著(P＜0.05);延缓POD活性的降低和膜透性的升高,贮藏120d后,EMAP组POD活性为0.25U/g,显著高于CK组的0.04U/g,使用EMAP冷藏的梨果膜透性上升及变化幅度较CK组小,两者的差异极显著(P＜0.01);减少VC含量的损失,贮藏至30d时, EMAP处理与CK相比梨果的VC含量较高,两者差异极显著(P＜0.01)。研究得到的莱阳梨EMAP贮藏的适宜气体组成为：2.2% CO2和14.0% O2,或者2.6% CO2和12.9% O2,在此条件下,莱阳梨的贮藏期可以达到200d以上。     

中药提取物对‘红地球’葡萄保鲜效果的影响

以黄连、黄芩、大黄、大青叶、艾叶五种中药材的乙醇提取物浸渍处理‘红地球’葡萄,以无菌水为CK1、2 g·L^-1的亚硫酸钠溶液为CK2,在4℃下贮藏65 d,比较不同中药提取物处理的‘红地球’葡萄果实腐烂率、总酚和抗坏血酸含量、可溶性固形物及相关抗氧化酶活性的差异,旨在明确中药提取物在葡萄贮藏保鲜方面的应用潜力。结果显示,大青叶处理组的葡萄果实多酚、抗坏血酸、可溶性固形物含量下降速度均较慢,烂果率较低,抑菌效果较优,多酚氧化酶(PPO)活性较低;艾叶处理组烂果率较低,抑菌效果最优,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性较高,多酚氧化酶(PPO)活性较低;黄芩处理组SOD、POD酶活性显著高于CK1、CK2,抗坏血酸、可溶性固形物含量下降速度较慢。大青叶、艾叶和黄芩提取物对‘红地球’果实的贮藏保鲜具有一定效果,其中黄芩处理能使葡萄果实维持较高的抗氧化保护酶活性,以保持果实的品质;而大青叶和艾叶处理能较好地抑制葡萄表面杂菌生长,延缓葡萄果实的腐烂来保持果实品质。综合比较,大青叶对葡萄贮藏品质的综合保鲜效果较佳。     

采前喷施拮抗菌罗伦隐球酵母对草莓保鲜效果的影响

研究采前喷施拮抗菌罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii对常温贮藏(20℃,4d)后的“丰香”草莓腐烂和品质的影响 结果表明:采用浓度为108CFU/mL的拮抗酵母菌悬液喷施能有效地减少草莓果实采后灰霉病和自然病害导致的腐烂,且采前喷施次数越多,抑制腐烂的效果越好.采前喷施三次拮抗酵母,贮藏结束后果实的腐烂指数比对照组减少了68.31c％.采前喷施拮抗酵母能减少草莓果实的失重率、延缓硬度和VC含量下降,但对可溶性固形物、可滴定酸和颜色没有显著影响. 酵母计数实验结果显示拮抗酵母能定殖在喷施处理组果实的表皮上.     

一株拮抗酿酒葡萄灰霉病的枯草芽孢杆菌T3筛选、鉴定及抑菌分析

为筛选出对酿酒葡萄灰霉病具有良好抑制作用的拮抗菌,从酿酒葡萄根际土壤进行微生物分离,以灰葡萄孢(Botrytis cinerea)为靶标菌株,采用牛津杯法对拮抗菌进行筛选,通过形态学、生理生化特征以及16S rDNA进行鉴定分析,对拮抗菌进行生长特性及抑菌分析。结果表明:筛选出一株对灰葡萄孢(Botrytis cinerea)具有显著抑制作用的T3菌株,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),培养24~48 h T3菌株进入稳定期,最适的生长温度为37 ℃,最适pH为7.0。T3菌株对灰葡萄孢(Botrytis cinerea)MIC为3.6×105 CFU/mL,MBC为3.6×106 CFU/mL,3.6×109 CFU/mL T3菌株对灰葡萄孢(Botrytis cinerea)抑菌直径为31.6±0.2 mm(P<0.05),抑菌效价为158.0±1.0 mm/mL(P<0.05)。扫描电镜观察T3菌株造成灰葡萄孢(Botrytis cinerea)菌丝畸形、扭曲、顶端膨大、原生质收缩、孢子稀松,抑制菌丝生长及孢子萌发。本实验为酿酒葡萄灰霉病的生物防治提供新的微生物资源,具有进一步研究价值。     

复合保鲜剂结合MAP对鲜切茄子贮藏品质的影响

为延长鲜切茄子的保鲜时间,研究单一气调包装(2%CO2+5%O2+93%N2)和保鲜液(1.5%壳聚糖+1%抗坏血酸+1%氯化钙+2%柠檬酸)结合气调包装对鲜切茄子品质的影响。以感官评分、褐变度、硬度、多酚氧化酶(PPO)活性和细菌总数为指标,分析鲜切茄子于(10±1)℃下贮藏8d内的品质变化。结果表明:贮藏8d后,对照组样品的L*值、硬度、PPO酶活性和细菌总数分别为75.66、7.41kg/cm2、68.77U/(min·g)和5.52lg CFU/g,而经保鲜液结合气调包装的鲜切茄子各指标分别为82.51、10.05kg/cm2、23.70U/(min·g)和2.87lg CFU/g。气调包装能够抑制鲜切茄子的褐变、萎蔫等感官品质的下降,并抑制PPO活性的增加和细菌的生长繁殖,尤其在结合保鲜液处理后效果更加明显,贮藏8d仍保持较好的品质。     

采前喷施壳聚糖、壳寡糖对红地球葡萄贮藏品质和防御酶活性的影响

为探讨采前喷施壳聚糖、壳寡糖对红地球葡萄采后贮藏期果实品质及生理机制的影响,分别于采前30、20、10d对红地球葡萄果实进行500mg/L壳寡糖、500mg/L壳寡糖+1%乙酸、500mg/L壳聚糖+1%乙酸和清水对照处理。结果表明,采前喷施相同浓度的壳聚糖、壳寡糖均能显著降低葡萄贮藏期间的果实失重率、果柄抽干率和腐烂率,延缓果实硬度降低,提高果实的贮藏品质。能够保持过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性在较高水平上,并且明显提高了葡萄果实多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、β-1,3-葡聚糖酶(GUN)防御酶活性,使果实提高了自身抗性,延缓果实衰老。     

不同处理对花菇贮藏品质及抗氧化酶活性的影响

为探讨不同处理对花菇贮藏品质及抗氧化酶活性的影响,将花菇分为四个处理组(空白组、350 μL/L乙醇熏蒸组、25 mg/L二氧化氯浸泡组及20 g/L大豆分离蛋白浸泡组),在阴凉处通风30 min后,转入(4±0.5) ℃ 的环境中预冷8 h后装入PE20保鲜膜内,扎袋后于(2±0.5) ℃贮藏。每5 d测定不同处理对花菇贮藏期间感官评价、腐烂率、呼吸强度、亮度(L*)、丙二醛(MDA)含量、多酚氧化酶(PPO)及抗氧化酶系统的影响。结果表明,与对照组(CK)比较,3种处理均能够抑制花菇的腐烂率、呼吸强度、MDA含量、PPO活性的上升,减缓亮度和感官评价的下降,维持抗氧化酶系统的活性。贮藏20 d时,大豆分离蛋白处理组(SPI)超氧化物歧化酶(SOD)活性分别为CK、乙醇和ClO₂处理组的1.43、1.14和1.09倍,且SPI处理组能够更好地维持过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性。     

茉莉酸甲酯和乙烯利处理对鲜切富士苹果抗氧化酶活力和苯丙烷代谢的影响

为研究外源信号分子茉莉酸甲酯(Me JA)和乙烯(Eth)对鲜切果蔬抗氧化酶活力和苯丙烷代谢的影响,以鲜切富士苹果为实验材料,利用Me JA和乙烯利浸泡处理,在10℃下贮藏,分析贮藏期间抗氧化酶类多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)以及苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的变化。结果表明:与空白对照相比,Me JA和乙烯利可以显著提高鲜切富士苹果PPO和POD活性(p0.05),降低APX活性下降速率。两种处理都可以提高PAL的活性,乙烯利对增强PAL活性效果更显著(p0.05)。两种外源信号分子可以提高鲜切苹果的抗氧化能力及苯丙烷代谢能力,启动鲜切苹果的防御反应,提高果实抗性。