骨胶原蛋白肽粉中DNA的提取及猪、羊源性成分的检测

目的 优化深加工骨胶原蛋白肽粉中DNA的提取方法, 鉴定检测其动物源性成分。方法 采用2种试剂盒法, 并对试剂盒部分步骤进行适度修改后提取骨胶原蛋白肽粉中的基因组DNA, 分别用猪、羊引物和探针对提取的DNA片段进行实时荧光PCR扩增检测。结果 只有DNeasy Blood & Tissue Kit提取试剂盒法提取的DNA纯度较好, A260/A280比值为1.73, 浓度为8.2 ng/μL, 并且经18S rDNA片段的PCR扩增结果表明样品中含有哺乳动物DNA, 且DNA中不含抑制PCR反应物质。检测结果表明该骨胶原蛋白肽粉中含有猪源性成分。 结论 采用试剂盒法提取深加工骨胶原蛋白肽粉中DNA时, 需对部分步骤做修改后才可进行。     

基于特征肽段的阿胶中异源性物种鉴别

为鉴别阿胶中动物源性掺假物,结合鸟枪蛋白组学技术对不同物种的热稳定特征肽进行检测和鉴定。首先找到3 种胶类药材（阿胶、新阿胶、黄明胶）的特征肽段,并发现3 个物种中不含羟脯氨酸的热稳定特异性肽段在I型胶原蛋白α1序列中的相似位置。通过对胶原蛋白源物种特异肽段的序列特征的研究,推测了制胶过程中胶原蛋白的裂解规律。其次,获得了2 条马皮特征肽,分别来源于马源角蛋白和未命名的马源蛋白,可用于鉴定阿胶中马皮胶。本研究不仅能够实现阿胶和异源性动物皮胶的鉴别,同时还可以为阿胶的真伪鉴别及其他物种胶原蛋白源特异肽段的发现提供技术支持。     

基于HPLC-Q-Exactive的PRM技术检测核桃露中核桃、杏仁、花生、大豆源性成分

应用高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱的PRM技术,检测核桃露中核桃、杏仁和主要掺杂物种大豆、花生4种源性成分。从植物组织(核桃、杏仁、大豆和花生)提取的蛋白质,经还原、烷基化、胰蛋白酶酶解后,采用HPLC-Q-Exactive的Full MS-ddMS~2(TopN)模式检测,数据经Proteome Discoverer软件与Uniprot蛋白数据库对比分析,筛选出各物种的特征肽段,然后根据这些肽标志物的质荷比和出峰时间建立HPLC-Q-Exactive-PRM检测方法,并使用Skyline软件对特征肽进行定量分析。结果表明:核桃露中核桃蛋白、杏仁蛋白、大豆蛋白和花生蛋白的最低检出限分别为10、30、20 mg/L和10 mg/L。经验证,该检测技术具有良好的专属性,比MRM技术更为准确、可靠,且有效消除了其他离子的干扰,为植物蛋白饮料物种来源鉴定提供了一种稳定、灵敏、可靠的检测技术。     

海参低聚肽的高通量HPLC-MS/MS分析鉴定和活性筛选

目的:海参低聚肽中肽段的分析鉴定及活性筛选。方法:采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析鉴定海参低聚肽中的肽段及来源蛋白质,利用在线数据库及构效关系进行降压肽的活性筛选。结果:海参低聚肽中共鉴定到88个小分子肽段,含有大量未经报道的小分子活性肽,来源于19种海参蛋白,主要为胶原蛋白、α-Ⅰ型胶原蛋白、富含甘氨酸的胶原蛋白、Ⅱ型胶原纤维及细胞外基质蛋白3等。经在线数据库活性筛选共获得9个潜在降高血压活性肽,进一步结合构效关系分析发现核心肽段KFPPPM、WEPPTFDGGRP、NPSPPF、FDGPEGPR和RPQYPQYPS具有潜在的降压活性,有望开发为降压肽。结论:该方法能简便快速、高通量、高效率的分析鉴定海参低聚肽中的多个肽段,实现复杂基质样品中多个肽段的快速检测及高效活性筛选,具有潜在的应用价值。     

海参低聚肽的高通量HPLC-MS/MS分析鉴定和活性筛选

目的:海参低聚肽中肽段的分析鉴定及活性筛选。方法:采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析鉴定海参低聚肽中的肽段及来源蛋白质,利用在线数据库及构效关系进行降压肽的活性筛选。结果:海参低聚肽中共鉴定到88个小分子肽段,含有大量未经报道的小分子活性肽,来源于19种海参蛋白,主要为胶原蛋白、α-Ⅰ型胶原蛋白、富含甘氨酸的胶原蛋白、Ⅱ型胶原纤维及细胞外基质蛋白3等。经在线数据库活性筛选共获得9个潜在降高血压活性肽,进一步结合构效关系分析发现核心肽段KFPPPM、WEPPTFDGGRP、NPSPPF、FDGPEGPR和RPQYPQYPS具有潜在的降压活性,有望开发为降压肽。结论:该方法能简便快速、高通量、高效率的分析鉴定海参低聚肽中的多个肽段,实现复杂基质样品中多个肽段的快速检测及高效活性筛选,具有潜在的应用价值。     

不同蛋白源对营养粉的影响及产品特性研究

采用干混法研制一款包含全脂奶粉、浓缩乳清蛋白、大豆分离蛋白和鱼胶原蛋白肽等四种不同来源优质蛋白质的新型蛋白营养粉,重点研究添加不同蛋白源对营养粉干粉和冲调液感官特性的影响。结果表明,添加Y-D150型大豆分离蛋白和N-Nitta鱼胶原蛋白肽制得的营养粉干粉和冲调液感官特性最好,研制得到的新型蛋白营养粉必需氨基酸占比为43.20%,支链氨基酸占比为20.03%,氨基酸组成更加合理,营养丰富。     

食品中鱼源性成分PCR的检测方法

研究建立了食品中鱼源性成分的普通PCR检测方法,该方法特异、灵敏。应用鱼源性引物对35种鱼类、24种非鱼类动物和10种植物样品进行PCR检测,只在35种鱼类中出现224bp特异扩增条带,在其他的非鱼类动植物DNA中未出现扩增条带,实验表明,该PCR检测方法具有特异性。该检测方法的检测限为0.1ngDNA和0.1%(W/W)。运用建立的方法对市场上的80个不同类别的食品样品进行检测,其中有13个样品错误标识了鱼源性成分。该检测方法能够用于食品中鱼源性成分的鉴别。     

PCR法检测鱼及其制品中的鱼源性成分

目的:建立一种快速、特异、灵敏的鱼源性成分聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法。方法:根据鱼线粒体基因组12S r RNA中的保守序列设计鱼源性特异性引物,进行PCR扩增,建立鱼源性成分检测方法;对24种鱼及鸡、牛、羊、猪、鸭、虾6种常见的易混于鱼制品的动物源性成分进行特异性检测;将草鱼肉混入其他动物肉中,混合均匀后提取DNA进行PCR扩增,确定肉样水平的检测灵敏度;将草鱼DNA混入其他动物DNA中,以混合后的DNA为模板进行PCR扩增,确定DNA水平的检测灵敏度。结果:该方法能特异性的对鱼源性成分进行快速检测,检测灵敏度达0.5%。结论:该方法能对食品中是否含有鱼源性成分进行初筛,到达快速检测的目的,对防止食品掺假、维护消费者利益、规范市场秩序有重要意义。     

蛋白质组学在肉类真实性鉴别中的应用研究进展

基于质谱的蛋白质组学技术已逐渐应用于肉类食品的真实性鉴别中，通过对特异性生物标志物的蛋白或肽段进行鉴定、检测和定量，为确证物种的真实属性、含量及来源提供有效的技术手段。本文简要介绍蛋白质组学工作流程，对物种特异性多肽的提取、分析鉴定、热稳定性评价及筛选原则进行详细概述，列举了该技术在肉类食品的动物源性及非肉蛋白成分检测鉴别中的应用，并对其发展方向及前景进行了展望，以期为复杂的食品体系研究提供新思路，也为食品溯源提供更丰富的技术手段。     

南极磷虾过敏原的超高效液相色谱-飞行时间质谱方法检测

本研究建立了一种基于高分辨质谱的南极磷虾过敏原检测方法:使用Folin-酚法测定蛋白浓度,采用测序级胰蛋白酶对南极磷虾蛋白进行酶解,经超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)对肽段进行分离检测,结合NCBI蛋白数据库和计算机检索对酶解产物进行鉴定,并利用Skyline生物信息学软件进行虚拟酶解,结合三重四极杆质谱对酶解肽段进行验证,鉴定出了南极磷虾中两种主要的过敏原即原肌球蛋白和精氨酸激酶,对应肽段分别为74和44条。该方法灵敏度强,准确度高,操作简便。与传统生物学方法 ELISA和PCR法鉴定过敏原相比大大降低了假阳性结果,直接对过敏原蛋白进行鉴定,提高了检测效率,为食品中过敏原的检测提供了更为有力的手段,也为日后过敏原的消减提供了一定的理论基础。     

鲢鱼鱼鳞胶原蛋白抗氧化活性肽提纯及结构鉴定研究进展

为了利用鲢鱼鱼鳞生产胶原蛋白,采用生物酶解技术制备胶原蛋白抗氧化活性肽,可以提高水产品加工附加值且更好地保护环境。本文综述了鲢鱼鱼鳞胶原蛋白抗氧化活性肽的不同制备方式(包括固相化学合成法、液相化学合成法、酶水解法、DNA重组法等)和分离纯化方法(包括超滤法、离子交换色谱法、凝胶色谱法、反相高效液相色谱法等),并对其结构鉴定方式(包括质谱分析、连续流快原子轰击质谱、电喷雾离子化质谱、基质辅助激光解析等)做了阐述,以期为鲢鱼鱼鳞胶原蛋白抗氧化活性肽的进一步开发利用提供理论依据。     

基于质谱技术的蛋白质组学在水产品鉴伪中的研究进展

目前, 水产品类的物种掺假问题是食品安全领域广泛关注的热点, 这种掺假行为不仅欺骗消费者, 侵害其经济利益, 而且由于水产中隐藏的过敏原等, 对人类健康造成潜在危害。而基于质谱技术的蛋白质组学技术为食品真伪鉴别提供了一个新的思路, 能够对物种特异性生物标志物进行鉴定和定量, 为确证物种的真实属性、来源和含量提供了有力的技术平台。利用该技术发现并确定了多个物种的特异性生物标志物蛋白或肽段, 并成功将其应用于实际产品的真伪鉴别中。本文详细介绍了质谱技术、蛋白质组学定性、定量分析以及工作流程, 对该技术在常见的水产品, 如鱼、虾、贝类产品中的应用进行了综述, 并对发展方向和应用前景进行了展望, 为有效的鉴别水产品的真伪提供参考。     

海洋胶原肽活性及其应用研究进展

海洋胶原肽由于其丰富的来源以及结构特点成为了胶原蛋白肽类的研究热点。海洋生物是具有高营养品质的丰富胶原蛋白来源,多项研究表明衍生自这些海洋胶原蛋白的水解物和肽类显示出多种益于健康的生物活性,在多种食品健康行业中有着广阔的应用前景。制备海洋胶原肽可以提高胶原蛋白回收率,使这些海洋生物资源得到有效利用,这不仅可以满足全球对胶原蛋白日益增长的需求,还能节省自然生物资源,并解决加工海洋生物产生的废品所造成的资源浪费和环境负担,有利于当今社会绿色生产和循环经济的发展。本文从胶原蛋白及其生物活性肽的介绍入手,综合阐述了近年来国内外对海洋胶原肽的各类生物活性开展的研究,并总结了海洋胶原肽当前在保健品、食品工业和医疗领域的实际应用,对MCPs在今后商业产品开发中的潜在用途进行了系统地总结和讨论。以期为海洋胶原肽在保健品、食品工业和医疗等行业的进一步的开发和应用提供科学依据。     

高分辨质谱在食品检测分析中的应用进展

高分辨质谱技术在食品检测分析领域的应用日益广泛。本文对高分辨质谱的特点进行了阐述,并对近十年发表的相关文献进行了总结和分析。以兽药、农药残留,生物毒素,持久性有机污染物的应用为例进行综述,并对高分辨质谱在食品检测分析领域的应用进行了展望。高分辨质谱可用于定向和非定向化合物的筛查,其参数设定简单,且不需要标准品,可同时测定上百种化合物,极大的提高了检测效率。     

Exploration of collagen recovered from animal by-products as a precursor of bioactive peptides: Successes and challenges

A large amount of food-grade animal by-products is annually produced during industrial processing and they are normally utilized as animal feed or other low-value purposes. These by-products are good sources of valuable proteins, including collagen or gelatin. The revalorization of collagen may lead to development of a high benefit-to-cost ratio. In this review, the major approaches for generation of collagen peptides with a wide variety of bioactivities were summarized, including antihypertensive, antioxidant and antidiabetic activities, and beneficial effects on bone, joint and skin health. The biological potentials of collagen peptides and their bioavailability were reviewed. Moreover, the unique advantages of collagen peptides over other therapeutic peptides were highlighted. In addition, the current challenges for development of collagen peptides as functional food ingredients were also discussed. This article discusses the opportunity to utilize collagen peptides as high value-added bio-functional ingredients in the food industry.     

阿胶活性肽的结构鉴定及活性筛选

利用液相色谱-串联质谱联用技术鉴定阿胶模拟胃肠道消化产物中肽的结构,并通过分子对接技术从中筛选潜在的降血压、抗老年痴呆和抗肿瘤的活性肽。结果表明,从阿胶消化产物中获得519 种活性肽,其分子质量在661.4～2 851.4 Da之间,主要为胶原蛋白和血红蛋白的酶解产物;获得最具潜力的降血压肽KGETGLR、抗老年痴呆肽SGLDGAKG和抗肿瘤肽ADGVAGPK;氢键相互作用和静电相互作用在阿胶肽发挥降血压、抗老年痴呆和抗肿瘤活性中都起着重要的作用。     

Development,validation, and application of a fast,simple, and robust SPE-based LC-MS/MS method for quantification of angiotensin I-converting enzyme inhibiting tripeptides Val-Pro-Pro,Ile-Pro-Pro,and Leu-Pro-Pro in yoghurt and other fermented dairy products

Dairy products are an important part of a nutritionally balanced diet as their constituents can affect the human state of health. By inhibiting the angiotensin I-converting enzyme, the tripeptides Val-Pro-Pro, Ile-Pro-Pro, and Leu-Pro-Pro can lower blood pressure. As these peptides are produced during fermentation, they are found in various dairy products like cheese, yoghurt, etc., but except for cheese only little is known about their content. To investigate how other dairy products contribute to a supply of these antihypertensive peptides, we developed and validated a fast and sensitive assay for quantification of the three tripeptides with LC-MS/MS combined with a simple protocol for extraction and SPE-purification from yoghurt, curd, or other products. Finally, the entire method was successfully applied to survey peptide concentrations in samples from local dairies and thus expands our awareness on the content of antihypertensive peptides in our food.     

食品中硒的有机形态分析研究进展

硒是人体必不可少的微量元素, 不同形态的硒对人体的功能不同, 其中有机硒在抗氧化、抗癌、抗病毒、提高免疫力等方面对人体有重要作用。人体获取硒的途径主要通过膳食摄取, 如食用天然富硒食品、人工合成有机硒产品及有机硒强化剂等。市场上的富硒食品质量参差不齐, 为合理地评价食品中硒的摄入形态和水平, 对食品中硒的形态及含量的检测是近年来研究的一个重点。本文对食品中有机硒检测分离、形态分析以及含量测定等进行了综述, 并对以液相萃取法和酶解法为主的分离方法, 以气相色谱-电感耦合等离子体质谱法(gas chromatography-inductively coupled plasma spectrometry, GC-ICP-MS)、高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法(high performance liquid chromatography-inductively coupled plasma spectrometry, HPLC-ICP-MS)、高效液相色谱-串联三重四级杆质谱法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, HPLC-MS/MS)以及电泳-电感耦合等离子体质谱法(capillary electrophoresis-inductively coupled plasma spectrometry, CE-ICP-MS)为主的检测方法等研究进展进行了总结, 以期对食品中有机硒的检测提供相应的理论依据, 促进食品中有机硒检测标准的发展。     

鹿源生物活性肽的研究进展

生物活性肽在食品和医药领域的广泛应用为鹿产品的深加工提供了新思路、新挑战,如何从鹿茸及鹿副产品中提取分离纯化出具有生物活性的鹿源活性肽并转化为具有高附加值的产品已成为当前亟需解决的问题。该文综述了鹿源生物活性肽的制备分离、纯化及鉴定等研究方法,阐述了鹿源生物活性肽的抗氧化、增强免疫调节、抗炎、抗菌、抗癌、降低高血压、治疗骨质疏松等多种功能活性的研究进展,最后对目前鹿源生物活性肽研究中发现的问题进行总结并提出展望。该文旨在为鹿源生物活性肽的功能活性研究和产品开发提供参考。     

基于气相色谱-质谱联用技术的代谢组学在农产品产地溯源中的应用

随着人们生活水平的提高,人们对于食品安全也提出了更高的要求。农产品产地溯源不仅能保证农产品的真实性、维护农产品市场的稳定,还是确保食品质量安全、保护消费者权益的必要手段。建立高效的食品溯源体系是保证食品质量安全的关键。气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)联用技术是代谢组学研究的重要技术之一,因其效率高、灵敏度高、稳定性强等优点,近年来被广泛应用于农产品产地溯源研究中。本文通过近5年来的主要文献分析,对GC-MS的代谢组学研究进展及其在谷物、肉制品、油类、果蔬类农产品产地溯源中的应用进行了全面的综述,并对今后农产品产地溯源的研究进行了展望。以期为我国农产品溯源体制的建立提供借鉴,推动GC-MS代谢组学技术在食品溯源中的应用。