红曲黄色素的分离纯化与表征

采用硅胶柱层析法对菌体内醇溶性红曲黄色素进行分离、纯化,并对纯化后的红曲黄色素结构及纯度进行液相质谱鉴定表征,得到柱层析最佳洗脱条件:洗脱剂配比正己烷∶乙酸乙酯(v/v)=1∶8,上样量1.5 m L,洗脱流速50 m L/h。分离纯化所得的红曲色素经液相质谱检测含红斑胺素、红曲素、红斑素三种色素组分,采用相对定量法对分离所得的红曲黄色素组分进行纯度表征,结果显示其纯化保存率达85%。     

红曲黄色素的分离、纯化及光稳定性探讨

为深入研究红曲菌代谢产物生成过程及其用途,采用柱层析法对红曲中的醇溶性黄色素组分进行分离和纯化,并用高效液相色谱对其纯度及光稳定性进行表征。研究结果表明,利用柱层析法可以分离和纯化醇溶性红曲提取物中的黄色素,其最大吸收峰为385nm。红曲黄色素对光较敏感,光照后由于其分解使分子结构发生变化,导致褪色,因此对红曲黄色素应避光保存。     

食品添加剂红花黄色素化学成分的HPLC-ESI-MS分析

目的:采用HPLC-ESI-MS分析方法,鉴定其化学成分。方法:高效液相色谱采用Phenomenex Gemini-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.01%三氟乙酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,检测波长为全波长;质谱使用ESI离子源,正、负离子分别检测。结果:通过质谱分析以及参照相关文献共鉴定出11个成分,其中羟基红花黄色素A和脱水红花黄色素B为期主要的有效成分。结论:该方法灵敏度高、分离度好,为红花黄色素物质基础的研究提供一种快速准确的分析方法。对比了现行最新红花黄色素标准,建议现行红花黄色素标准规定的有效成分修改为羟基红花黄色素A和脱水红花黄色素B。     

蛹虫草子实体中抗氧化活性化合物的分离纯化

以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除活性为指导对蛹虫草子实体中的抗氧化活性化合物进行了分离纯化。对蛹虫草子实体经甲醇浸提后获得的甲醇提取物,再进行硅胶柱色谱分离得到一个具有较强抗氧化活性的组分CM9,组分CM9利用反相高效液相色谱法进行活性指导下的分离得到抗氧化活性化合物CM9-1。该化合物采用薄层色谱和高效液相色谱法进行纯度检测发现此为纯品化合物,液相色谱-质谱分析结果表明该化合物相对分子质量为430,分子式为C22H22O9。该物质在质量浓度为1.0 mg/m L时对0.4 mg/m L的DPPH自由基试剂的清除率为(73.67±0.29)%。     

高速逆流色谱法分离制备无花果叶中的补骨脂素及佛手内酯

利用高速逆流色谱分离制备无花果叶中的补骨脂素和佛手内酯,经过高效液相色谱、质谱、核磁共振检测,确定其纯度及结构.新鲜的无花果叶经干燥、破碎后用石油醚(60～90℃)室温浸提48h,浸提液经浓缩后得到浸膏.采用正己烷:乙酸乙酯:甲醇:水(1:1:1:1)的两相体系将所得的浸膏进行高速逆流色谱的分离纯化,得到样品A和样品B.利用高效液相色谱检测样品A和B的纯度分别为99.1%和98.2%.将得到的样品A和B进行MS,1H-NMR,13C-NMR检测确定其化学结构,并最终确认A为补骨脂素,B为佛手内酯.制备型高速逆流色谱可以成功的将无花果叶中的补骨脂素和佛手内酯进行分离制备.     

红曲素的光褪色研究

用紫外灯照射红曲黄色素-红曲素的甲醇溶液至无色,采用质谱、核磁图谱和红外图谱分析,鉴定其褪色后物质的分子式为C15H22O5,根据光化学理论分析,提出了红曲素的光褪色机理。     

红曲黄色素和红曲橙色素的稳定性研究

为了研究不同色素组分的稳定性差异,利用大孔树脂柱层析分离得到了黄色组分F1和橙色组分F2,其中F1主要含有红曲素（monascin）和安卡红曲黄素（ankaflavin）,F2主要含有红曲玉红素（monascorubrin）和红斑红曲素（rubropunctatin）。以F1和F2为材料,从光谱特征及色素残留率等方面分析了红曲黄色素和橙色素的pH、光和热稳定性。结果显示,红曲黄色素在pH2~9范围内稳定,红曲橙色素在pH2~4范围内稳定,当pH大于5时橙色素的特征吸收峰发生明显变化;红曲黄色素和橙色素的光稳定性均较好,紫外光照射270 min后,二者的特征吸收峰均未发生变化,色素残留率分别为70.4%±0.2%和64.4%±0.9%,明显高于姜黄色素（7.9%±0.7%）;红曲黄色素的热稳定性优于红曲橙色素,80℃处理120 min后红曲黄色素的特征吸收峰不变,而红曲橙色素的吸收峰变化明显,且橙色素残留率（40.8%±1.9%）明显低于黄色素（87.4%±3.2%）和对照组姜黄色素（90.9%±4.5%）。结果表明,红曲黄色素是一种稳定性好的红曲色素组分,可用于高稳定性红曲色素产品的开发。     

圣云蓝莓果中锦葵色素-3-半乳糖苷的结构鉴定

采用体积分数60%(pH3.0)的乙醇在恒温水浴(40℃)条件下提取圣云蓝莓花色苷,将所得浓缩液经AB-8 大孔树脂纯化,40℃减压浓缩,真空干燥得到紫黑色粉末,再经过制备型高效液相色谱分离获得单体化合物。经紫外光谱、红外光谱、质谱、1H 和13C 核磁共振、薄层色谱对单体化合物进行结构鉴定,确定此化合物为锦葵色素-3- 半乳糖苷。     

HPLC-ESI-MS/MS法分离鉴定类球红细菌类胡萝卜素

以氧化铝作层析柱填料,对类球红细菌类胡萝卜素进行分离纯化,采用石油醚-丙酮(9∶1,V/V)、石油醚-丙酮(7∶3,V/V)分别对样品进行洗脱,得到色素提取液Ⅰ和色素提取液Ⅱ。采用高效液相色谱-电子喷雾离子源质谱法(HPLC-ESI-MS/MS)分析类球红细菌类胡萝卜素的组成,其中4个色谱峰得到显著分离,初步鉴定这4个色谱峰对应的组分均属于类胡萝卜素。其中,1号色谱峰和3号色谱峰为同一种组分,即扇贝醇(Pectenol)B,相对分子质量583.4;2号色谱峰和4号色谱峰对应组分依次为葫芦黄素(Cucurbitaxanthin)B,玫红品(Rhodopin),相对分子质量依次为601.3,544.2。     

天然及还原型红曲黄色素的差异与国家标准改进思考

红曲色素是由红曲霉代谢产生的天然色素,包括红曲黄色素、红曲橙色素和红曲红色素三大类,其中红曲红色素应用历史悠久,而红曲黄色素则是在国家标准GB 1886.66—2015发布后才被合法使用。针对红曲黄色素的多样性以及现行国家标准的局限性,该文对天然红曲黄色素的种类、分子结构、特征性吸收波长、稳定性、功能活性等进行了分析,并与还原型红曲黄色素进行比较,对红曲黄色素国家标准作修订思考,建议增加天然红曲黄色素的生产工艺、使用范围、感官要求、鉴别试验、理化指标以及检测方法等相关内容,使其生产与销售合法化。该成果有助于为食品行业提供新型安全的天然红曲色素产品,促进我国红曲色素产业的健康发展。     

红光对紫色红曲霉生长及色素和桔霉素产量的影响

本文研究了红光对紫色红曲霉M9生长及色素和桔霉素产量的影响。采用高效液相色谱法对六种红曲色素,包括两种红色素：红斑红曲胺（rubropunctamine,RUM）和红曲玉红胺（monascorubramine,MOM）;两种黄色素：红曲素（monascin,MS）和红曲黄素（ankaflavin,AK）;两种橙色素：红斑红曲素（rubropunctatin,RUN）和红曲玉红素（monascorubrin,MON）以及桔霉素的产量进行测定。结果表明：持续红光照射促进了紫色红曲霉M9菌丝生长、色素合成积累以及孢子形成,尤其对于闭囊壳的产生有更显著促进作用。5种不同的红光照射条件促进了RUM、MOM、MS和AK的产生,抑制了RUN、MON和桔霉素的产生。在光照强度300 lux,光照时间30 min/d,光照节律12 h的最佳光照条件下,RUM、MOM的产量分别提高了53.8%和75.2%;MS和AK的产量分别提高了42.2%和59.4%;RUN和MON的产量分别降低了42.6%和54.5%;桔霉素的产量降低了42.5%。     

不同品种大米发酵紫色红曲霉产色素的特性分析

该研究以一株色素产量稳定的紫色红曲菌为试验菌株,采用不同品种的大米（粳米、籼米、糯米）作为基质进行液态摇瓶发酵,通过测定生物量、葡萄糖含量、大米成分,分析红曲霉生长状况,借助高效液相色谱、薄层色谱和色差仪对发酵所产红曲色素的颜色特性及安全性进行评价。结果表明：粳米发酵的胞外色价最高,于505 nm处最高可达19.07 U/mL,是籼米的2.28倍,糯米的2.53倍;发酵3~4 d籼米的红曲菌胞内色价可达947.46 U/g（505 nm）,分别是糯米的1.24倍和粳米的1.33倍;发酵6~7 d粳米的胞内色价较高,于505 nm处可达1762.80 U/g,分别是籼米的1.41倍和糯米的1.86倍,粳米的后期发酵更利于M9的色素累积。HPLC分析六种主要红曲色素产量表明,籼米和糯米发酵显著促进了两种橙色素O1、O2在胞内积累,发酵第7 d的产量分别是粳米的5.00倍和6.31倍,粳米发酵更有利于红色素（R1、R2）及黄色素（Y1、Y2）产生;三种大米相比,粳米发酵所产桔霉素最低,安全性更高。总体而言,以粳米为基质发酵更利于M9产红、黄色素,而糯米和籼米更利于红曲菌M9产橙色素。     

Isolation and identification of two major acylated anthocyanins from purple sweet potato (Ipomoea batatas L. cultivar Eshu No. 8) by UPLC‐QTOF‐MS/MS and NMR

In recent years, researches on the isolation and preparation of monomeric anthocyanins have intensified because of the requirements of quantitative and structure–bioactivity relationship analyses. However, simple and effective methods about the scale of monomeric anthocyanins from the natural purple sweet potato powder are rarely reported. In this study, high molecular weight acylated monomeric anthocyanins were isolated from purple sweet potato (Ipomoea batatas L. cultivar Eshu No. 8) via the combination of column chromatography and semi‐preparative HPLC technology and identified mainly by ultra‐high‐performance liquid chromatography quadrupole time‐of‐flight tandem mass spectrometry/mass spectrometry (UPLC‐QTOF‐MS/MS) and ¹H and ¹³C nuclear magnetic resonance (NMR). Two major acylated anthocyanins were unambiguously determined as peonidin 3‐O‐(6‐O‐(E)‐caffeoyl‐(2‐O‐(6‐O‐p‐hydroxybenzoyl)‐β‐D‐glucopyranosyl)‐β‐D‐glucopyranoside)‐5‐O‐(β‐D‐glucopyranoside) and peonidin 3‐O‐(6‐O‐(E)‐caffeoyl‐(2‐O‐(6‐O‐(E)‐feruloyl)‐β‐D‐ glucopyranosyl)‐β‐D‐glucopyranoside)‐5‐O‐(β‐D‐glucopyranoside). The results of this study may help promote the purification of high molecular weight acylated anthocyanins from purple sweet potato as well as from other plant materials in nature.     

红花提取物抗氧化活性研究(英文)

本研究从红花提取物中分离并用质谱鉴定了四种黄色素。建立了一个快速测定红花提取物中黄色素的反相液相色谱方法,并对不同温度和时间加热对红花提取物中黄色素含量的影响及其动力学变化进行了研究。进一步采用清除DPPH自由基能力的方法测定红花提取物的抗氧化能力。结果显示随着温度的升高,红花提取物中黄色素的含量逐步减少,同时发现红花黄色素含量与其抗氧化能力有相关性。     

不产桔霉素高产红曲色素的基因工程红曲菌株构建

以一株高产红曲色素的紫色红曲菌（Monascus purpureus）J01为研究对象,采用根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）介导 的T-DNA转化技术,敲除紫色红曲菌株J01基因组中的桔霉素合成关键基因pksCT,构建一株不产桔霉素高产红曲色素的红曲菌株。 结果表明,通过菌落形态观察和生物量测定得出,菌株J42与菌株J01的菌落形态及生物量无显著性差异（P＞0.05）;经高效液相色谱（HPLC）与液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）分析得出,菌株J01的桔霉素含量为5.1mg/kg,pksCT基因敲除菌株J42菌丝体中未检测到 桔霉素;菌株J42的黄色素,橙色素和红色素色价分别为1 877 U/g、773 U/g、1 068 U/g,显著高于菌株J01（P＜0.01）,并且菌株J42的红 曲色素总色价为415 U/mL,是原始菌株的1.56倍,成功构建了一株不产桔霉素高产红曲色素的生产菌株J42。     

红曲菌液态发酵产天然黄色素的条件优化

该实验旨在通过优化发酵条件,提高红曲黄色素的产量。该实验室前期筛选获得了1株产黄色素的菌株sjs-6,以此为试验菌株,对培养基的碳源、氮源、Mg 2+添加量、初始pH、培养温度进行了优化。并通过液质联用、核磁共振检测该红曲黄色素中的主要成分。结果表明,当麦芽糖80 g/L,(NH 4)2SO 410 g/L,MgSO 41.0 g/L,培养基初始pH值为6.0,30℃下恒温培养时黄色素的色价最高,可达508.61 U/mL,是未优化前的1.52倍。经分析鉴定,该红曲黄色素中的主要成分为红曲素Monascin,纯度为97%。该研究为天然红曲黄色素的工业化生产提供了理论依据。     

Structural analyses of barbaloin-related compounds in aloe drinks

Four kinds of barbaloin (BA)-related compounds (A, B, C, D) in aloe drinks were isolated by using preparative HPLC. LC/MS analyses of these compounds showed the identical quasimolecular ion peak at m/z 833 [M-H]-. The chemical structures were mainly determined by NMR, including 1H-1H two-dimensional correlation spectroscopy (COSY), nuclear Overhauser and exchange spectroscopy (NOESY), heteronuclear multiple quantum coherence (HMQC), and heteronuclear multiple-bond connectivity (HMBC) experiments. They were identified as BA-related compounds A (10R, 10"S), B (10S, 10"S), C (10S, 10"R), and D (10R, 10"R) coupled through a C-10 to C-7' linkage, and newly found in nature. These results suggested that BA is converted to dimers during storage of aloe drinks.     

双梭隔梭孢中天然色素的提取分离和高分辨液质联用分析

在对虫生真菌多菌株生物色素的筛选过程中,发现1株双梭隔梭孢菌株RCEF3669菌丝体明显呈黄色,研究表明,甲醇能够很好地提取出该菌丝体中的黄色色素。利用HPLC法从甲醇提取物中分离1种橙黄色物质Sb-1,HPLC-MS和HPTLC分析证明该物质为一纯化合物,MS分析得出该化合物的分子式为C26H32O9。经Chapman&Hall天然产物数据库查询,该化合物尚未见报道。     

不同红曲菌中红曲色素与橘霉素的比较分析

红曲菌可产生红曲色素（Monascus pigments,Mps）等多种有益的次级代谢产物,但部分红曲菌产生的橘霉素（citrinin,CIT）引起了人们对红曲产品安全性的关注。本研究以22?株红曲菌（含14?株模式菌株）为研究材料,通过复合萃取剂前处理方法和超高效液相色谱法分析其发酵红曲米中Mps和CIT含量,结果表明13?株菌可同时产生Mps和CIT,4?株菌只产生CIT不产生Mps,5?株菌既不产Mps也不产CIT,Mps产量最高的菌株是紫色红曲菌3.4443,CIT产量最高的菌株是橙色红曲菌3.4384。利用主成分分析发现在产Mps和CIT的红曲菌株中,黄、橙色素与橘霉素呈正相关,而红色素与橘霉素呈负相关。该结果可为系统分析红曲菌株代谢产物差异,高产Mps产品开发提供参考。