鸡肉中单核细胞增生李斯特氏菌的分离与鉴定

对从长春地区一家最大的肉鸡屠宰加工厂扦取的152个冻鸡肉样品(44份去皮胸肉,44份带皮胸肉,40份胸碎肉和24份鸡翅)进行了单核细胞增生李斯特氏菌分析,对分离菌株用AP1 Listeria试剂盒及其它方法进行了鉴定。经检验,152个样品中有16个样品(10．5％)为单核细胞增生李斯特氏菌阳性,另有87个(57．2％)为L．innocua,L．welschimeri和L．gray阳性。在16个(10．5％)单核细胞增生李斯特氏菌阳性样品中,去皮胸肉样品3个(6．8％),带皮胸肉样品5个(11．4％),胸碎肉样品6个(15．0％),翅肉样品2个(6．3％)。为了比较OXA和PALCAM两种选择培养基的单核细胞增生李斯特氏菌的分离效果,在进行细菌分离时同时选用了这两种培养基,用OXA从152个样品的16个(10．5％)中分离出单核细胞增生李斯特氏菌,用PALCAM从152个样品的12个(7．9％)中分离出单核细胞增生李斯特氏菌,表明在OXA和PALCAM这两种分离培养基中,OXA的分离效果更好些。     

石家庄市零售鸡肉样品中弓形杆菌污染调查

目的调查石家庄市零售鸡肉中弓形杆菌的污染情况,为石家庄市弓形杆菌分布特征和防控提供基础数据支持。方法从石家庄市市内四区的菜市场、超市、连锁肉店随机购买零售鸡肉样品90份,应用驱动增强动力双孔滤膜法从样品中分离培养弓形杆菌,利用弓形杆菌多重聚合酶链式反应(PCR)检测及测序的方法对分离菌株进行种属鉴定,利用16S rDNA、rpoB基因测序的方法验证菌种鉴定结果。结果 90份鸡肉样品中,60份样品检出弓形杆菌86株,其中嗜低温弓形杆菌49株、布氏弓形杆菌37株,弓形杆菌检出率为66.67%(60/90)。60份阳性样品中,嗜低温弓形杆菌阳性样品45份(75.00%),布氏弓形杆菌阳性样品35份(58.33%)。嗜低温弓形杆菌和布氏弓形杆菌混合感染阳性样品20份,占比为22.22%(20/90)。不同采样点弓形杆菌检出率有较大差异。结论石家庄市零售鸡肉中弓形杆菌污染较重,嗜低温弓形杆菌污染率高于布氏弓形杆菌,两种弓形杆菌混合污染样品率较高。     

东北市售鸡肉中空肠弯曲杆菌的分离鉴定、分型及耐药性分析

为了揭示东北地区市售鸡肉中空肠弯曲杆菌的污染情况、种群特征及耐药性。采集东北地区市售鸡肉样品1 000份,分离鉴定空肠弯曲杆菌。通过多位点序列分型技术分析空肠弯曲杆菌的遗传多样性。利用K-B琼脂扩散法检测该致病菌对8种抗生素的耐药性。结果表明:1 000份样品中共分离出62株空肠弯曲杆菌,污染率为6.2%;62株空肠弯曲杆菌被分为14个序列型(Sequence Type,ST),其中ST5和ST1为该种群的优势ST;耐药性分析结果显示,62株空肠弯曲菌对环丙沙星、复方新诺明和头孢噻肟具有高度的敏感性。     

内蒙古不同地区、不同畜种乳及乳制品中乳杆菌属细菌的分布

对采集呼伦贝尔市、巴彦淖尔盟及阿拉善盟牧民家庭的各类乳及乳制品样品中的乳酸杆菌进行了分离鉴定，以研究内蒙古不同地区、不同畜种乳样中乳酸菌的种类及分布情况：结果表明，不同地区、不同畜种乳样中乳酸杆菌的分布是有差异的，呼伦贝尔市以鼠李糖乳杆菌(24．1％)、戊糖乳杆菌(17.2％)、植物乳杆菌(13．8％)占优势；巴彦淖尔盟以植物乳杆菌(62.5％)、干酪乳杆菌(7.5％)和瑞士乳杆菌(7.5％)占优势；阿拉善盟以干酪乳杆菌(31．2％)和植物乳杆菌(25％)占优势。3个地区共有的菌株类型为植物乳杆菌、干酪乳杆菌和弯曲乳杆菌。在内蒙古传统乳制品中，植物乳杆菌占绝对优势，占分离菌数的38．8％，其次是干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌等。     

食品香辛料和调味品中克罗诺杆菌的分离与鉴定

利用生理生化鉴定方法和分子生物学方法对从湖南、湖北、江苏和上海等地的8个地区采集的64份干制食品香辛料和调味品样品进行了克罗诺杆菌分离与鉴定,结果从19份样品中检出了克罗诺杆菌,污染率为29.7%,其中检出率较高的样品为白胡椒粉、花椒粉和红辣椒粉,污染率分别为62.5%、50.0%和33.3%。本研究从采样的7个地区的样品中检出了克罗诺杆菌,其中检出率最高的地区为湖南永州,其次为上海市和湖北赤壁,检出率分别为50.0%、37.5%和33.3%。利用基于fus A基因序列分析的方法对克罗诺杆菌分离株进行了种的水平的鉴定,结果将本研究分离得到的克罗诺杆菌鉴定为5个种,其中9株(47.4%)被鉴定为阪崎克罗诺杆菌(C.sakazakii),4株(21.0%)为苏黎世克罗诺杆菌(C.turicensis),3株(15.8%)为都柏林克罗诺杆菌(C.dublinensis),2株(10.5%)为丙二酸盐阳性克罗诺杆菌(C.malonaticus),1株(5.3%)为尤尼沃斯克罗诺杆菌(C.universalis)。研究结果表明市售干制食品香辛料和调味品中存在克罗诺杆菌的污染,应该加强对该类食品中克罗诺杆菌的流行病学监测。     

2012—2013年成都市生鸡肉中弯曲菌调查分析

了解成都市零售环节鸡肉中的弯曲菌定量污染水平以及其随季节变化的趋势,为食品安全风险评估提供依据。方法 选择成都市及周边的大型超市和农贸市场作为采样点,采取未分割的新鲜鸡冷藏鸡胴体。用涂布平板法计数,用多重PCR进行鉴定。结果 采集255份样品,阳性数202份,检出率为79.22%;弯曲菌污染量＞500 cfu/g的样品占32.55%(83/255);农贸市场样品的阳性率高于超市样品;夏季阳性率高于其他季节;共分离到空肠弯曲菌300株、结肠弯曲菌393株和胎儿弯曲菌11株。结论 四川省零售环节鸡肉中弯曲菌的污染严重。     

肉鸡加工厂环境及半成品中沙门氏菌污染情况调查

对分割鸡肉加工企业肉鸡的肠道、加工环境及半成品进行了检测。在所取的149个样品中，共检出了15个阳性样品。从阳性样品的分布情况来看，鸡肉产品中的沙门氏菌主要来源于环境的污染。应加强对环境的消毒，减少产品的污染。     

五味子果浆对乳酸菌生长的影响及五味子酸奶的加工

对五味子酸奶的加工工艺进行了初步探讨。结果表明，五味子果浆(质量浓度为0．1g／L)与牛奶按l：9的比例混合，加入质量分数为9％绵白糖及0．1％的酸奶发酵剂，接入质量分数为3％保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌比例为l：l的发酵刺，在42．5℃条件下发酵5h，可得品质优良的五味子酸奶。     

鸡肉中弯曲菌定量检测方法的建立与初步应用

目的参照国标方法,建立鸡肉中弯曲菌定量检测的CCDA平板计数法。方法通过对选择性CCDA培养基中添加不同浓度组合的抗生素和生长促进剂,确定最佳添加浓度组合,并与普通CCDA平板计数法进行比较,建立鸡肉中弯曲菌定量检测方法,同时评价该方法的特异性和检测限。结果添加一定浓度抗生素和生长促进剂的选择性CCDA培养基和普通CCDA培养基对弯曲菌标准菌株定量计数的吻合度为(100±5)%;除弯曲菌外,其他5种肠道细菌在该CCDA培养基中均不能生长;该方法对弯曲菌菌悬液可检测至10 CFU/mL。运用该方法对50份鸡肉样品进行调查研究,共检测出22份阳性样品,弯曲菌检出率为44%,平均检测值为20CFU/100 cm~2,检测结果与国标方法阳性符合率为100%。结论该方法简便、特异性好、准确度高,为定量检测鸡肉中弯曲菌提供了新技术。     

单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定玉米中的玉米赤霉烯酮

研究了单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定玉米中玉米赤霉烯酮的方法。样品通过乙腈-水(体积比9：1)提取，提取液用免疫亲和柱净化，Waters C18色谱柱分离，荧光检测器检测，外标法定量。对添加不同含量的玉米赤霉烯酮进行6次重复实验，平均回收率为87．8％～90．9％，变异系数(CV)为8．6％～11．3％，检测低限为001mg／kg。     

肉鸡加工厂环境及半成品中沙门氏菌污染情况的调查

对分割鸡肉加工企业肉鸡的肠道、加工环境及半成品进行了检测。在所取的149个样品中,共检出了13个阳性样品。从阳性样品的分布情况看来,鸡肉产品中的沙门氏菌主要来源于环境的污染。应加强对环境的消毒,减少产品的污染。     

扬州市市售鸡肉中弯曲菌定性定量流行病学分析

目的调查分析超市和农贸市场零售鸡肉中弯曲菌定量污染水平,为弯曲菌污染的定量风险评估、危害分析和防控提供数据。方法选择扬州市内各大型超市和农贸市场作为采样点,采取未分割的鸡胴体,在3 h内送到实验室开展检测。运用选择性CCDA平板直接计数法对弯曲菌进行定量检测,涂布平板法计数,用PCR进行鉴定。结果采集的40只整鸡,检测出阳性样品19份,平均阳性率为47.5%,平均带菌量为229.2 CFU/g。其中超市的8份阳性整鸡中,平均带菌量为28.3 CFU/g;农贸市场的11份阳性整鸡中,平均带菌量为313.6CFU/g。共分离出56株弯曲菌,其中空肠弯曲菌29株,结肠弯曲菌23株,其他弯曲菌4株。结论定性及定量结果显示,零售鸡中存在弯曲菌污染,农贸市场的零售鸡肉比超市的零售鸡肉污染严重,需要加强防控措施。     

醉鱼中乳酸菌的分离与鉴定研究

为优化醉鱼的加工工艺,从传统发酵方法制作的醉鱼中分离纯化获得14株乳酸菌。通过形态学鉴定、生化鉴定以及糖醇发酵试验,初步鉴定出9株戊糖乳杆菌、2株米酒乳杆菌、1株弯曲乳杆菌、1株鼠李糖乳杆菌及1株干酪乳杆菌。     

富硒乳酸菌种的筛选

本实验从样品中分离，纯化，筛选出嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus，简称LA)，保加利亚乳杆菌(Lactobacillus Bulgaria,简称LB)，嗜热链球菌(Streptococcus thermopiles，简称ST)。通过富硒抗性筛选，确定了LA为耐硒菌种。通过对其发酵培养获得富硒能力优良的菌株和富硒条件，试验结果表明：选用番茄汁液体培养基，接种量10％，加硒量18ug／ml，pH6．8，37℃培养24h，有机硒含量可达12．99μg／ml，转化率为72．17％。     

英国食品标准局发布2014年食品安全重点

英国食品标准局(FSA)近日公布了2014年的食品安全重点计划。在计划中,导致英国的食物中毒最常见的原因的弯曲杆菌成为防控重点。FSA将研究如何限制弯曲杆菌对加工设备的污染,避免病原体附加到鸡肉表面。FSA还计划重点防控李斯特菌在和戊型肝炎病毒。由于2013年初,英格兰东北部近1000人食用咖喱叶后患病,FSA计划采取措施降低咖喱叶食用风险。     

芥末油、青芥辣、冲菜的挥发性风味成分的SPME/GC/MS测定

利用固相微萃取／气相色谱／质谱(SPME／GC／MS)联用技术对芥末油、青芥辣、冲菜的挥发性风味成分进行了研究。本试验条件下，这三种样品分别鉴定出6、12、17种挥发性风味成分，主要风味物质均为具有辛辣风味的异硫氰酸烯丙酯(AITC)，相对丰度分别为73．45％、64．25％、32．74％，二硫化碳的相对丰度也较高，分别为14．37％、25．40%、51．67％。     

含内标的多重实时PCR法同时检测空肠弯曲菌和结肠弯曲菌

目的建立含内标的多重实时荧光PCR法同时检测空肠弯曲菌和结肠弯曲菌。方法针对空肠弯曲菌特有hipO基因和结肠弯曲菌特有ceuE基因设计引物探针,设计并优化内标DNA添加量。测试了方法的特异性、灵敏度以及在鸡肉中的检出限。结果内标的最适添加量为10~4copies/PCR。所建立方法对空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的灵敏度分别达到4.7copies/PCR和5.23copies/PCR;对115株空肠弯曲菌、49株结肠弯曲菌和42株非目标菌株在3种不同类型的实时荧光PCR仪上的特异性均达到100%;对鸡肉中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的检出限达到10CFU/25g,与传统检测方法一致。采用所建立的方法对50份市售生鲜鸡肉进行检测发现,空肠弯曲菌阳性率为12%(6/50),结肠弯曲菌阳性率为4%(2/50);传统国标检测方法除了1份空肠弯曲菌阳性样品未得到分离确认,其余PCR阳性样品均在平板上分离确认。结论该方法特异性强、灵敏度高、开放性好、含有内标可防止"假阴性",可应用于食品中2种重要致病性弯曲菌的快速同步检测。     

贵州少数民族酸肉、酸鱼中乳酸菌的分离鉴定

采用传统微生物分离方法进行乳酸菌纯种分离,利用16S rRNA序列分析方法进行乳酸菌鉴定,从7个酸肉、酸鱼样品中共分离出14株乳酸菌,有乳杆菌属、环丝菌属、乳球菌属3个属,9个种.从其中鉴定出7株乳酸菌,分别是:植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、消化乳杆菌(Lactobacillus alimentarius)、清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)、泡菜乳杆菌(Lactobacillus kinchi)、清酒乳杆菌亚种(肉)(Lactobacillus sakei subsp.carnosus)、草乳杆菌(Lactobacillus graminis)、弯曲乳杆菌(Lactobacillus curvatus).     

济南市零售鸡肉中沙门菌污染状况及可移动黏菌素耐药基因分析

目的 了解2020—2021年济南市零售鸡肉中沙门菌的污染状况,并探究可移动黏菌素耐药基因（mcr）的携带情况。方法 2020年12月至2021年11月在济南市采集零售鸡肉样品260份,依据GB 4789.4—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》对样品中的沙门菌进行分离鉴定,通过聚合酶链式反应（PCR）对分离株进行血清型鉴定和mcr基因筛选,使用微量肉汤法对mcr基因阳性株开展抗生素敏感性试验。结果 260份零售鸡肉样品中共检出阳性样品61份,污染率为23.46%(61/260),秋季污染率最高可达53.33%(32/60);共分离出沙门菌103株,56株为肠炎沙门菌,占比54.37%(56/103)。2株不同产地鸡翅样品来源的印第安纳沙门菌分离株检测出mcr-1基因,阳性率为1.94%(2/103)。2株mcr-1基因阳性印第安纳沙门菌分离株均为多重耐药株,其中1株可对碳青霉烯类和多黏菌素类在内的全部12类测试抗生素同时耐药。结论 2020—2021年济南市零售鸡肉中的沙门菌污染较为严重,秋季采集样品的污染率较高,肠炎沙门菌为优势血清型,检出携带mcr-1基因;同...     

改良半固体四硫磺酸钠煌绿培养基用于鸡肉中沙门菌的检测

目的使用改良半固体四硫磺酸钠煌绿(MSTT)培养基对鸡肉样品中的沙门菌进行初筛,作为附加步骤对ISO 6579.2002方法进行改良,以节约人力物力和时间。方法将MSTT培养基经虹吸法装入玻璃毛细管,插入预增菌液或增菌液类液体培养基,使半固体培养基和液体培养基相结合,预增菌或增菌过程同动力增菌过程同步进行。此外对使用MSTT培养基改良ISO 6579.2002方法分为纯菌种组和自然鸡肉样品组分别试验,并对结果进行评估。结果应用改良ISO 6579.2002方法,沙门菌株检出率纯菌种组为98%(126/129),自然污染的沙门菌阳性鸡肉样品检出率为92%(35/38),而原ISO 6579.2002方法对自然污染的沙门菌阳性鸡肉样品检出率为87%(33/38),低于改良法;与原方法相比,72%(264/367)的阴性样品不需要进一步分离和鉴定试验。结论应用MSTT培养基改良后的ISO 6579.2002方法能够应用于鸡肉中沙门菌的检测,且优势明显。