2株益生菌对抑郁模型大鼠行为学和肠道菌群的影响

为探究乳双歧杆菌BB-12（BB-12）及植物乳杆菌P-8（P-8）对抑郁行为和肠道菌群的影响,本文构建了慢性温和不可预知性（CUMS）抑郁模型,分别采用BB-12及P-8对其进行为期6周的灌胃治疗。灌胃前、后,分别进行行为学测试;治疗结束后,采集粪便样本进行16S rRNA V4-V5区测序。结果显示：与CUMS组相比,2株益生菌均能显著缓解慢性压力诱导的抑郁行为（糖水消耗率及旷场得分显著增加,暗箱中所处时间显著减少）,BB-12和P-8组的菌群结构显著偏离CUMS组;与健康对照组（HC）相比,CUMS组中OTU556,OTU194和OTU99的丰度显著升高,而OTU198的丰度显著降低,BB-12组显著降低了OTU556,OTU194和OTU99的丰度,P-8组显著调节了OTU556,OTU194,OTU99和OTU198的丰度;PICRUSt分析显示,与HC组相比,CUMS组肠道微生物的多种功能发生紊乱,2株益生菌仅能一定程度上缓解功能紊乱。研究表明,益生菌可通过调节肠道菌群缓解慢性压力诱导的抑郁相关症状。     

茶氨酸联合γ-氨基丁酸改善CUMS大鼠抑郁症状的研究

目的:观察L-茶氨酸和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)联合干预对慢性不可预知温和刺激(CUMS)模型大鼠抑郁症状的缓解作用。方法:采用CUMS法建立抑郁症大鼠模型,不同剂量L-茶氨酸和GABA混合物或西酞普兰连续灌胃45 d,期间持续CUMS刺激。另设对照组,常规饲养。监测大鼠体重变化、糖水偏好程度、以及旷场实验水平运动、垂直运动等行为学指标,测定大鼠血清及脑组织中五羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、白介素-6(IL-6)、脑源性神经营养因子(BDNF)、β-内啡肽(β-EP)的水平。结果:与对照组比较,CUMS大鼠体重、糖水消耗百分比、旷场水平和垂直运动显著降低(P<0.05);与模型组比较,茶氨酸联合GABA干预可显著增加大鼠体重增量、糖水消耗百分比,运动距离和站立次数(P<0.05),抑郁大鼠血清及脑组织中5-HT、DA以及BDNF、β-EP的含量增加(P<0.05),降低IL-6的水平(P<0.05)。结论:L-茶氨酸和GABA联合干预对CUMS诱发的抑郁症有一定改善作用,且高剂量的作用更为显著。     

海红米米糠对慢性应激诱导小鼠抑郁样行为和异常肠道微生物及神经递质的改善作用

“微生物-肠-脑轴”失常在抑郁症的发病中发挥着重要作用,调节肠道菌群失衡成为最新的治疗方向。海红米皮可发挥益生元作用调控肠道微生物。本实验目的为探究海红米皮改善慢性不可预测温和应激(CUMS)诱导的小鼠抑郁样行为的作用。对照和暴露于CUMS的小鼠接受正常或含5%海红米皮饮食喂养9周,通过糖水偏好实验和悬尾实验分析小鼠的抑郁样行为,实时荧光定量PCR法检测结肠内容物菌群的数量,HPLC测定前额皮层中单胺类神经递质的含量。应激使小鼠糖水偏好度、乳杆菌属和双歧杆菌属的数量、去甲肾上腺素(NE)与其代谢产物、五羟色胺(5-HT)与其代谢产物、多巴胺(DA)与其代谢产物的含量都显著下降,悬尾不动时间和梭菌属的数量都显著升高；海红米皮干预后提高了小鼠的糖水偏好度、乳杆菌属和双歧杆菌属的数量、5-HT与其代谢产物和NE的含量,降低了悬尾不动时间。海红米皮改善CUMS诱导的小鼠抑郁样行为可能与改善肠道菌群失衡及神经递质有关。     

沙棘发酵茶对高脂饮食大鼠血脂和肠道菌群的影响

探究沙棘发酵茶对高脂血症大鼠血脂和肠道菌群的影响。将健康的SD雄性大鼠随机分为4组：对照组(NC,n=8)、模型组(HF,n=8)、沙棘组(HFS,n=8)和发酵组(HFF,n=8)。实验为期8周，最后1周收集粪便进行肠道菌群高通量测序。结束后，收集血清和肝脏进行测定。结果表明，沙棘发酵茶能显著降低高脂饮食大鼠血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白的含量，升高血清中高密度脂蛋白的含量，缓解高脂饮食导致的肝脏损伤。测序结果显示，沙棘发酵茶能显著提高大鼠肠道菌群的丰度和均匀度，有益菌相对丰度升高，致病菌群得到抑制，有效缓解了高脂饮食引起的肠道菌群紊乱。综上，沙棘发酵茶能有效改善高脂饮食引起的大鼠血脂水平、肝损伤及肠道菌群紊乱。     

骆驼乳对慢性酒精性肝损伤小鼠肠道菌群的影响

目的:探究骆驼乳对慢性酒精性肝损伤小鼠肠道菌群多样性及结构的影响。将雄性C57BL/6NCr小鼠随机分为4组:对照组(Con,n=6)、模型组(Et,n=6)、骆驼乳剂量组(EtCM,n=6)和牛乳剂量组(EtNM,n=6);实验期为8周,前4周饲喂Lieber-DeCarli液体饲料(含对照),后4周在饲喂Lieber-DeCarli液体饲料的基础上,灌胃相应的乳或生理盐水。灌胃结束后,按照5 g/kg剂量一次性灌胃31.5%酒精溶液,建立NIAAA模型。检测血清LPS含量,并在无菌条件下取小鼠结肠粪便,进行16S rRNA测序,分析肠道菌群α多样性、β多样性及基于门、属水平的物种结构。血清指标结果显示,EtCM组和EtNM组小鼠血清LPS显著降低(P<0.01)。16S r RNA测序结果表明,骆驼乳和牛乳能显著提高ALD小鼠结肠肠道菌群的丰度和均匀度,更好地调整肠道菌群结构,其中骆驼乳较牛乳显示出更好的α多样性。在门水平上,骆驼乳和牛乳显著提高拟杆菌门的丰度,降低厚壁菌门的丰度。在属水平上,骆驼乳和牛乳显著提高副拟杆菌属、拟杆菌属、阿克曼菌属的丰度,降低瘤胃菌科下的未知属Ruminococcaceae_UCG-013丰度。其中,骆驼乳的有益菌丰度较牛乳高出9%。结论:骆驼乳通过改变ALD小鼠肠道菌群环境,来调节肠道菌群结构,可作为调节肠道菌群的功能性乳制品,可预防慢性ALD引起的肠道屏障功能障碍。     

茶黄素、茶红素与茶褐素对高脂饮食大鼠肠道菌群的影响

以茶黄素、茶红素以及茶褐素为研究对象,研究其对高脂饮食大鼠肠道菌群的影响。即以高脂饮食饲养的方法造模成立营养性肥胖大鼠模型的同时,连续9周灌胃茶黄素、茶红素和茶褐素,其后测定各组大鼠体重、Lee's指数、脂重及血脂水平,通过高通量测序技术,对大鼠肠道内容物肠道菌群进行生物信息学分析。结果表明,和模型对照组相比,灌胃茶黄素、茶红素和茶褐素均可抑制大鼠体重增长(p < 0.05)与Lee's指数(p < 0.01),降低其脂肪重量(p < 0.01或p < 0.05),使其血清内TC、HDL-C、LDL-C、TG含量以及AI指数下降(p < 0.05或p < 0.01),能起到抑制大鼠肥胖效果。进一步分析显示,茶黄素、茶红素和茶褐素能够抑制高脂饮食导致的大鼠肠道内容物肠道菌群丰度及多样性的降低。且从其肠道菌群结构上看,各组大鼠厚壁菌门的相对丰度降低,拟杆菌门的相对丰度得以增加,F/B比值显著降低(p < 0.05)。此外,茶黄素、茶红素和茶褐素还使各组大鼠肠道内属水平上瘤胃球菌相对丰度下降,而乳杆菌、Akkermansia菌和毛螺菌相对丰度存在不同程度回升。即茶黄素、茶红素和茶褐素对高脂饮食大鼠肠道菌群具有正向的调节作用。     

乳酸链球菌L16对感染金黄色葡萄球菌小鼠肠道菌群的调节作用

为研究乳酸链球菌L16对金黄色葡萄球菌感染小鼠肠道菌群结构的恢复情况,采用高通量测序技术,构建小鼠肠道微生物的16S rRNA基因测序文库,通过菌群结构图、等级丰度分布曲线、热图、稀释性曲线图、维恩图等,分析预防组、治疗组、正常组和模型组小鼠的肠道菌群组成和生物多样性。结果:模型组中脱铁杆菌门(12.67%)显著升高,菌群结构异常。预防组中厚壁菌门(49.03%)和拟杆菌门(43.15%)的相对丰度接近正常组(44.75%;42.08%)。结论:乳酸链球菌L16能预防金黄色葡萄球菌感染小鼠肠道,调节肠道菌群结构。     

鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌患病小鼠肠道菌群的影响

结直肠癌是癌细胞不受控制,发生异常增殖而形成的一种恶性肿瘤,它的发生、发展与肠道菌群密切相关。硫酸软骨素是动物组织中主要的多糖类物质,具有许多重要生理功能,尤其是相比于药物治疗和手术治疗,硫酸软骨素具有低毒、低副作用的特点。为探究硫酸软骨素对结直肠癌荷瘤小鼠肠道菌群的影响,本实验通过构建结直肠癌患病小鼠模型,经灌胃鲟鱼硫酸软骨素4周后,对各组小鼠肠道内容物进行了16S DNA测定分析,探究鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌小鼠肠道菌群的调节作用。实验结果表明,鲟鱼硫酸软骨素能够一定程度上调节结直肠癌患病模型小鼠的肠道菌群多样性,增加有益菌(如糖化菌门)相对丰度、降低有害菌相对丰度;其中梭杆菌门相对丰度由模型组的0.008 5%降低到高剂量组的0.001 4%,与正常组(0.001 3%)接近;Bacteroidales S24-7 group相对丰度由正常组的30%降至模型组的18%;Ruminiclostridium 5相对丰度由模型组的2.05%降低到高剂量组的0.41%且明显低于正常组(0.92%)。结论:鲟鱼硫酸软骨素能够减轻结直肠癌细胞侵染引起的肠道菌群的改变,调节肠道微生物多样性,减缓结直肠癌的发展,具有可发展为肠道益生元的潜力。     

不同比例酸枣仁-茯苓水提物对大鼠焦虑样行为的影响

目的：观察不同比例酸枣仁-茯苓混合后水提物的抗焦虑作用并探讨其机制。方法：64只SD大鼠随机分成8组：正常对照组、模型组、帕罗西汀组、酸枣仁组、茯苓组、酸枣仁-茯苓1:1组、酸枣仁-茯苓2:1组、酸枣仁-茯苓3:1组。28 d慢性束缚加孤养方法建立大鼠焦虑症模型,动态观察动物基本形态及体质量变化,造模第8 d起连续给药21 d。高架十字迷宫及旷场实验评价大鼠焦虑样行为;酶联免疫吸附法及荧光实时定量PCR检测大鼠血清、海马及杏仁核组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量及m RNA表达的相对量。结果：与模型组相比,不同比例酸枣仁-茯苓均能有效改善大鼠形态、体质量、焦虑样行为并调节血清及组织炎症因子水平（P<0.05,P<0.01）。其中酸枣仁-茯苓3:1复配使用可极显著提高动物造模28 d后体质量（P<0.01）,提高高架十字迷宫总穿臂次数、进入开放臂次数比例、开放臂停留时间比例（P<0.01）,提高旷场水平运动次数、垂直运动次数（P<0.01）,降低大鼠血清、海马及杏仁核组织中炎症因子TNF-α、...     

绞股蓝茶饮对高脂血症大鼠脂质代谢和肠道菌群的影响

目的:探讨绞股蓝茶饮对实验性高脂血症大鼠脂质代谢和肠道菌群的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为正常对照组(基础饲料+蒸馏水)、高脂模型组(高脂饲料+蒸馏水)、6 g/L和9 g/L绞股蓝茶饮组(高脂饲料+6 g/L或9 g/L绞股蓝茶饮),每组10只。用绞股蓝茶饮灌胃65 d后,检测大鼠脂质代谢相关指标和肠道菌群丰度。结果:与高脂模型组相比,6 g/L或9 g/L绞股蓝茶饮组大鼠血清总胆固醇(TC)与低密度脂蛋白胆固醇(LDLC),肝脏甘油三酯(TG)与TC水平均显著下降(P0.05),血清超氧化物歧化酶(SOD)活力显著上升(P0.05),血清丙二醛(MDA)含量显著降低(P0.05);肠道细菌中厚壁菌门与拟杆菌门的比例和梭菌属XI丰度显著降低(P0.05),梭菌属XIVa和普氏菌属丰度显著增加(P0.05),而拟杆菌属丰度变化不明显。结论 :口服绞股蓝茶饮能够有效改善高脂血症大鼠的脂质代谢紊乱,且可能与其对肠道菌群的调节作用有关。     

速溶枣粉加工工艺优化及其改善睡眠作用评价

以酸枣仁为试材,对酸枣仁黄酮的提取工艺、枣和酸枣仁浓缩液与其他配料的最佳配比、沸腾制粒后产品的助眠功效进行了研究。以黄酮含量为指标,通过单因素实验及响应面优化试验,研究酸枣仁黄酮提取工艺,得到最佳提取工艺为:炒制温度140 ℃、炒制时间6 min和料液比1:30（w : w）,在此条件下,酸枣仁黄酮含量为6.69 mg/g。以感官评价为指标,通过单因素及正交试验得到了睡眠友好型速溶枣粉的最佳配方:麦芽糊精20%,酸枣汁浓缩液10%,白砂糖15%,奶粉4%。经过沸腾制粒获得速溶枣粉。经过活性试验表明,该速溶枣粉可以延长戊巴比妥钠诱导小鼠的睡眠时间,缩短阈下戊巴比妥钠小鼠睡眠潜伏期。     

酸枣仁饮片功能性及生产过程中风险评估分析

酸枣仁(Semen Ziziphi Spinosae)由鼠李科乔木酸枣成熟果实去果肉、核壳,收集种子,干燥而成。酸枣仁含有多种功能性成分,如酸枣仁皂苷、黄酮类、生物碱等,具有镇静催眠、抗惊厥、抗心肌缺血、降血脂、抗肿瘤及增强免疫系统功能的作用。在酸枣仁饮片的生产过程中,由于炮制工艺不规范、生产标准不统一、质量监管疏漏,致使酸枣仁饮片的质量存在一些问题,因此建立生产过程中的质量评估风险体系,一方面可有效控制酸枣仁饮片在生产过程中的质量安全问题,另一方面可以为酸枣仁饮片炮制工艺标准化研究奠定基础。本文主要对酸枣仁饮片的功能性成分、保健功能作用和在生产过程中的风险评估分析进行了概述。     

酸枣仁-茯苓-党参水提物对小鼠睡眠的改善作用及机制研究

目的:探究酸枣仁-茯苓-党参水提物（质量比1:1:1）对小鼠睡眠的改善作用,并探讨其潜在作用机制。方法:120只雄性昆明小鼠中选取60只随机分为6组,进行自主活动实验及戊巴比妥钠诱导睡眠实验,分为正常组、溶剂对照组、酸枣仁-茯苓-党参低、中、高剂量组（14、28、56 g/kg）、阳性药组（地西泮,2.5 mg/kg）;另外60只小鼠进行对氯苯丙氨酸诱导失眠实验,分为正常组、模型组、酸枣仁-茯苓-党参低、中、高剂量组、阳性药组,每组10只,灌胃剂量为10 mL/（kg·d）,不间断给药30 d。通过记录小鼠自主活动,分析水平得分与活动距离,评价酸枣仁-茯苓-党参水提物对正常小鼠及对对氯苯丙氨酸建立的失眠小鼠的的影响;通过戊巴比妥钠诱导睡眠实验,记录小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间,评价酸枣仁-茯苓-党参水提物的促进睡眠及延长睡眠时间的作用。ELISA检测失眠实验中各组小鼠下丘脑、皮层中5-羟色胺（5-HT）及色氨酸羟化酶（TPH）的含量;小鼠海马、皮层中谷氨酸（Glu）及γ-氨基丁酸（GABA）的含量,探讨酸枣仁-茯苓-党参水提物相关作用机制。结果:酸枣仁-茯苓-党参水提物能够显著减少小鼠睡眠潜伏期,延长睡眠时间,降低失眠小鼠自主活动能力,减少正常小鼠水平得分与活动距离（P < 0.05,P<0.01）;高剂量酸枣仁-茯苓-党参水提物能够增强下丘脑5-HT合成关键酶TPH的活性,提高5-HT含量（P<0.05）;能够调节海马Glu与GABA含量,维持Glu/GABA平衡（P<0.05）。结论:酸枣仁-茯苓-党参水提物对睡眠起到一定的改善作用,作用机制与调节小鼠脑内血清素系统和Glu/GABA稳态有关。     

酸枣仁油理化特性及脂肪酸组成分析

酸枣仁油用正己烷提取、经甲酯化法处理,GC-MS联用对其脂肪酸组成成分进行了分析和鉴定.经DB-1柱分离出23个峰,鉴定了其中20种化合物,占脂肪酸总含量的98.10%.其中饱和脂肪酸占31.55%,主要是棕榈酸及硬脂酸;不饱和脂肪酸占66.56%,主要是油酸及亚油酸.     

一种酸枣仁提取物、茶氨酸、γ-氨基丁酸配方产品改善睡眠作用研究

目的:探讨一种酸枣仁提取物、茶氨酸、γ-氨基丁酸配方产品改善睡眠作用。方法:180只健康雄性Balb-c小鼠按体重随机分为三个大组,每个大组60只小鼠分别随机分为空白对照组和低、中、高3个剂量组,每组15只。酸枣仁提取物、茶叶茶氨酸和GABA配方产品按照低、中、高3个剂量(95、190、285 mg/kg·bw)通过直接睡眠、延长戊巴比妥钠睡眠时间、戊巴比妥钠阈下催眠剂量和巴比妥钠睡眠潜伏期实验,研究酸枣仁提取物、茶氨酸、γ-氨基丁酸复合配方对小鼠睡眠的影响。结果:酸枣仁提取物、茶氨酸与γ-氨基丁酸配方产品无直接催眠作用。与对照组相比,低、中、高剂量组小鼠戊巴比妥钠睡眠时间分别延长14.53%、17.12%、23.80%,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。各剂量组小鼠30 min内小鼠阈下剂量实验均为阳性,小鼠睡眠发生率增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。各剂量组小鼠巴比妥钠睡眠潜伏期时间分别缩短12.48%、24.19%、24.07%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:酸枣仁提取物、茶氨酸、γ氨基丁酸配方产品具有缩短小鼠睡眠潜伏期,延长小鼠睡眠时间,同时增加小鼠入睡发生率的作用,具有改善睡眠的功效。     

基于HPLC 指纹图谱和定量分析法评价酸枣仁质量

目的：建立中药酸枣仁高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,为科学评价不同产地酸枣仁药材质量提供新方法。方法：采用UltimateTM C18 柱 (250mm × 4.6mm,5μm),乙腈- 超纯水梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长210nm,柱温30℃。通过夹角余弦法和相关系数法计算17 批样品的相似度,并对其进行聚类。结果：聚类分析表明,17批不同规格样品被聚为3 类,即主产区、一般产区和次品。主产区酸枣仁相似度均高于0.9239,酸枣仁皂苷A 含量范围为0.8123～1.1109mg/g。结论：采用HPLC 法建立指纹图谱并结合指标成分定量分析的方法可作为酸枣仁质量评价的参考依据。     

基于近红外光谱的酸枣仁不同伪品掺假检测

本文采用近红外光谱技术对酸枣仁及其三种常见伪品理枣仁、枳椇子和兵豆进行定性定量检测研究。分别制备不同伪品掺杂质量分数为1%~90%的单种掺杂物实验样品,以及多种伪品同时掺杂的样品,采集800~2500 nm范围的近红外光谱数据。首先利用主成分分析（principal component analysis,PCA）对酸枣仁及三种伪品进行初步定性鉴别。对于单一掺假物样品,采用五种不同预处理方法对光谱数据进行去噪。利用偏最小二乘回归（partial least squares regression,PLS）方法,建立PLS1模型定量预测掺假物含量,并采用连续投影算法（successive projection algorithm,SPA）挑选最优波长,优化定量模型。结果表明,理枣仁掺假建立的3波长检测模型的预测集决定系数R2_p为0.9659,均方根误差（root mean square error,RMSEP）为6.1910%。枳椇子掺假建立的8波长检测模型的预测集决定系数R2_p为0.9491,均方根误差（RMSEP）为7.6232%。兵豆掺假建立的5波长检测模型的预测集决定系数R2_p为0.9666,均方根误差（RMSEP）为6.1437%。对于多掺杂物样品,建立了PLS2模型同时对不同成分进行定量预测,酸枣仁效果最好,R2_p≥0.7115,枳椇子预测效果最差,R2_p≥0.2007。研究表明,利用近红外光谱技术可以实现酸枣仁不同伪品掺假的快速无损检测。所建方法为后续酸枣仁及其他种子类中药材便携式无损检测仪器的开发提供了理论基础与参考依据,对保证中药材质量安全具有重要社会意义。     

酸枣仁蛋白的不同蛋白酶酶解产物功能特性及抗氧化活性分析

以酸枣仁为原料,采用碱提酸沉法对酸枣仁蛋白进行提取,用三种不同蛋白酶（碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶）对酸枣仁蛋白进行酶解,得到三种酶解物,研究不同酸枣仁蛋白酶解物的功能特性和抗氧化活性。结果表明,与酸枣仁蛋白相比,不同酸枣仁蛋白酶解物的溶解性、持油性、起泡性及其稳定性、乳化性及其稳定性均具有不同程度地提高,其中,木瓜蛋白酶解物的溶解性、持油性、起泡性和乳化性最强,碱性蛋白酶解物的起泡稳定性和乳化稳定性最强;体外抗氧化研究表明,相比于酸枣仁蛋白,不同蛋白酶所得酶解产物的抗氧化活性均明显提高,其中,碱性蛋白酶酶解物的DPPH清除能力、羟基自由基清除能力、超氧阴离子清除率和ABTS自由基清除能力均高于其他酶解产物,当质量浓度为2.5 mg/mL时,DPPH自由基清除率最高为95.87％、超氧阴离子自由基率为44.77％、ABTS自由基清除率为90.84％、羟基自由基清除率为47.77％。本研究表明,酸枣仁蛋白酶解物具有较好的食品加工性能,其抗氧化活性明显增高,可以作为一种潜在的蛋白质资源应用到食品中,为酸枣仁蛋白酶解物在食品行业中的应用提供理论依据。