耐盐乳酸菌的筛选和鉴定

本实验从酱油厂提供的酱油原醅中分离筛选出耐盐乳酸菌,该菌在18%以上NaCl浓度的条件下能够正常生长代谢,初步鉴定其为四联球菌属,可用于高盐稀醪酱油酿造.目前国内尚无耐盐度达18%的乳酸菌种, 该菌种的成功选育为国内首创.     

耐受乙醇乳酸菌诱变的研究

以面包乳杆菌（Lactobacillus crustorum D2-5）和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum D5-5）为研究对象,分别选取不同浓度乙醇胁迫处理后,进行诱变育种,探究经乙醇胁迫后乳酸菌诱变育种的耐受性;根据最佳诱变剂量的条件,确定最佳诱变方法;以乙醇胁迫处理后乳酸杆菌的生长曲线,验证乙醇胁迫后乳酸菌诱变菌株的耐受性。结果表明：添加与乳酸菌悬浮液等体积的1%硫酸二乙酯（DES）化学诱变效果最佳,最适诱变时间为40 min,乙醇胁迫过程中诱变菌株的生长速率有所提高,以体积分数8%乙醇胁迫为例,24 h时,D2-5菌落总数的对数值由6.2提高至7.3,D5-5菌落总数的对数值由6.9提高至7.1。说明诱变育种有助于乳酸杆菌乙醇胁迫耐受性的提高,并获得乙醇耐受特性较好的菌株D2-5。     

新疆地区自然发酵辣椒酱中耐盐乳酸菌的筛选鉴定

以新疆地区自然发酵的辣椒酱为材料,在厌氧条件下采用富集培养法、溶钙圈法对产酸乳酸菌进行初筛;通过测定菌株的产酸能力和NaCl耐受能力进行复筛;通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对耐盐乳酸菌进行鉴定。结果表明,筛选得到7株产酸乳酸菌,其中,3株产酸能力强、耐盐性能好,分别为菌株B、SS、T,均可耐受7%NaCl。菌株B、SS及T均被鉴定为植物乳酸杆菌（Lactobacillus plantarum）。耐盐性乳酸菌的筛选对提高自然发酵辣椒酱的品质起着重要作用。     

耐胆酸盐、降胆固醇乳酸菌的筛选

从乳酸发酵制品和发酵菌剂中分离纯化获得了25株菌，通过显微镜形态观察、革兰氏染色反应和石蕊牛奶试验证实其中10株为乳酸菌。进一步比较了这些菌株和Streptococcus thermophilis，Lactobaccillus bulgaricus的胆酸盐耐受能力以及对牛奶中胆固醇的作用效果。结果表明，多数乳酸菌可耐受低质量分数(0．1％)的胆酸盐，可以不同程度的降低牛奶中的胆固醇含量；但在含有质量分数为0．3％胆酸盐时，只有少数乳酸菌对牛奶中降胆固醇的能力有所提高。     

乳酸菌胆酸盐耐受性及降胆固醇能力研究

研究了分离自内蒙古传统稀奶油的四株乳酸菌的胆酸盐耐受性和降胆固醇能力。结果表明,供试菌株对牛磺胆酸钠的耐受性与对照菌株相比差异显著(P<0.05),其中屎肠球菌KLDS6.0330的耐受性最强;粪肠球菌KLDS6.0335呈现胆酸盐促进其生长的现象。菌株间胆固醇去除能力不同,在恒定pH5.5条件下去除能力更强(P<0.05);其中KLDS6.0330在不恒定pH和恒定pH5.5条件下分别达到58.47%和61.92%。四株供试菌株均具有共沉淀作用、吸收作用和降解作用。其中,干酪乳杆菌KLDS1.0344以共沉淀作用为主,KLDS6.0330以吸收作用和降解作用最为显著。      

耐盐乳酸菌的筛选及其在剁辣椒发酵中的应用

采用稀释平板法对各种高盐发酵制品进行耐盐乳酸菌的筛选,并对乳酸菌的培养条件进行优化,获得混合发酵剂发酵鲜红辣椒制备剁辣椒产品。结果表明:获得两株乳酸菌L1和L2,能在含盐24%的基质中正常生长,而且在最优配方为3%葡萄糖、1.5%牛肉膏、0.3%K2HPO4、15%番茄汁的培养基中生长好。将L1和L2按2∶1比例混合,以6%接种量接种至含盐为11%~16%的红辣椒中,在28℃发酵9d,制成的剁辣椒酸味柔和、味道鲜美、质地爽脆,具有农家风味剁辣椒的特殊香气,筛选出的乳酸菌能运用于剁辣椒工业化生产中。     

产γ-氨基丁酸乳酸菌的分离筛选与微波诱变育种

选择益力多乳酸饮料作为样品,从中筛选出能产γ-氨基丁酸的乳酸菌,初步鉴定为乳酸乳球菌乳酸亚种,γ-氨基丁酸产量为2.11 g/L.对该出发菌株进行微波诱变(700W,脉冲频率2450MHz)处理,得到1株突变菌株,γ-氨基丁酸产量达5.78g/L,经过多次传代稳定性较好.     

乳酸菌胆酸盐耐受性及降胆固醇能力研究

研究了分离自内蒙古传统稀奶油的四株乳酸菌的胆酸盐耐受性和降胆固醇能力。结果表明,供试菌株对牛磺胆酸钠的耐受性与对照菌株相比差异显著(P<0.05),其中屎肠球菌KLDS6.0330的耐受性最强;粪肠球菌KLDS6.0335呈现胆酸盐促进其生长的现象。菌株间胆固醇去除能力不同,在恒定pH5.5条件下去除能力更强(P<0.05);其中KLDS6.0330在不恒定pH和恒定pH5.5条件下分别达到58.47%和61.92%。四株供试菌株均具有共沉淀作用、吸收作用和降解作用。其中,干酪乳杆菌KLDS1.0344以共沉淀作用为主,KLDS6.0330以吸收作用和降解作用最为显著。     

高产胞外多糖乳酸菌的诱变育种及其益生特性

筛选高产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)的乳酸菌菌株,对其进行紫外诱变以期获得EPS高产突变菌株,考察突变菌株及原始菌株对酸、胆盐、人工模拟胃肠液的耐受性,并测定其EPS的体外抗氧化活性。筛选出1株乳酸片球菌L15,其EPS产量为175. 88 mg/L,对其进行二轮紫外诱变,得到1株高产EPS突变菌株L15U2-26,EPS产量可达232. 34 mg/L。L15、L15U2-26耐酸性较强,在pH为3. 0的环境下培养3 h后,存活率分别为123.49%、132. 40%;经含3. 0 g/L胆盐培养基处理24 h后,其活菌数均从107CFU/mL下降至105CFU/mL;经人工模拟胃、肠液处理后,最终活菌数分别为104、105CFU/mL。L15 EPS质量浓度为0. 50～8. 00 mg/mL时,对DPPH自由基、ABTS自由基、羟自由基、超氧阴离子的清除率分别为18. 38%～76. 88%、12. 87%～71. 79%、29. 70%～44.16%、8. 11%～15. 38%,L15U2-26的EPS的清除率则分别为17. 35%～72. 41%...     

耐盐乳酸菌的筛选和鉴定

本实验从酱油厂提供的酱油原醅中分离筛选出耐盐乳酸菌，该菌在18％以上NaCl浓度的条件下能够正常生长代谢，初步鉴定其为四联球菌属，可用于高盐稀醪酱油酿造。目前国内尚无耐盐度达18％的乳酸菌种，该菌种的成功选育为国内首创。     

酸汤中乳酸菌的鉴定及其耐酸、耐胆盐和抗氧化活性

采用16S rDNA基因序列对从酸汤中分离出的6株乳酸菌进行鉴定,并研究6株菌的耐酸和耐胆盐能力;同时以清除1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和羟基自由基为指标,探究其体外抗氧化活性.结果 表明,6株菌均为植物乳杆菌(Latctobacillus p...     

自然与乳酸菌强化发酵过程中红酸汤品质变化

利用红酸汤为原料,以总酸、亚硝酸盐、pH、还原糖、可溶性固形物、水分、抗坏血酸为检测指标,分析不同发酵时间自然与乳酸菌强化发酵的红酸汤品质变化规律。结果表明,在整个发酵过程中,自然与乳酸菌强化发酵的红酸汤中还原糖、抗坏血酸、可溶性固形物均呈逐渐下降的趋势;总酸含量和pH均在第6天达到峰值,分别为10.11 g/kg和3.04与10.26 g/kg和2.84;水分含量在第6天达到最低,分别为84.83%与84.18%;亚硝酸盐含量最高分别为0.052 2 mg/kg与0.030 4 mg/kg,未超标。因此,与自然发酵相比,乳酸菌强化发酵明显减少亚硝酸盐含量,缩短了红酸汤发酵周期,但自然发酵红酸汤品质更好。     

丹江镇辣椒红酸汤细菌菌群多样性分析及抗食源性致病菌乳酸菌筛选

以贵州丹江镇传统辣椒红酸汤为研究对象,采用Illumina MiSeq高通量测序技术进行细菌菌群多样性分析,结合微生物纯培养技术和双层平板法从中分离优势乳酸菌,通过分子生物学技术对其进行菌种鉴定,并筛选抗食源性致病菌乳酸菌。结果表明,辣椒红酸汤样品中的优势细菌门为厚壁菌门（Firmicutes）和变形菌门（Proteobacteria）;优势细菌属为乳杆菌属（Lactobacillus）。从辣椒红酸汤样品中共分离得到17株乳酸菌,经鉴定,11株为干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）、3株为副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）、1株为副干酪乳杆菌亚种（Lactobacillus paracasei subsp.）、1株为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）、1株为乳酸杆菌（Lactobacillus sp.）,其中4株乳酸菌具有较好的产酸和抑菌性能,且干酪乳杆菌ST7-14的抑菌能力最好,对蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）ST2-1和阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae）ST2-6的抑菌圈直径分别为37.0 mm和31.5 mm。     

乳酸菌对酸汤挥发性物质的影响

用嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、植物乳杆菌(L.plantarun)以及两种菌种的混合菌发酵酸汤和传统的自然发酵酸汤进行比较,采用蒸馏萃取法提取酸汤中产生的挥发性物质,分别用GC-MS分析了挥发性成分。结果表明:四个处理样品中的挥发性化合物有92种,其中自然发酵、La、Lp、混合处理分别为55、65、58和52种,这些化合物包括醇(20)、酸(6)、酯(17)、醛(5)、酮(2)、烯(29)、含硫化合物(1)、烷烃(4)、其他化合物(6)等9类。以混合处理组总挥发物含量最高,为96.273%,其次为嗜酸乳杆菌组,再次为自然发酵组,最少为植物乳杆菌组,但四种处理都以酸含量为最高,说明酸汤产品主体风味是酸类物质。     

L-乳酸高产菌株的诱变育种

对L-乳酸细菌(Lactobacillus casei FH2)进行诱变,得到产酸量高的突变株FH2-8-9,并与出发菌株FH2的性能进行比较,结果表明:①FH2-8-9的产酸速率明显高于FH2,且维持时间较长,具有更高的耗糖速率和糖转化率;②突变株FH2-8-9对乳酸的耐受性好,进入对数生长期的时间短,能保持更长的对数生长期,最终菌体浓度高于出发菌株FH2,FH2-8-9的菌体密度比FH2高55%.     

牛肉酸汤配方优化及其挥发性风味物质分析

目的 以辣椒和牛肉为原料,研究牛肉酸汤的最佳配方,并分析其挥发性风味物质.方法 通过单因素和正交试验,研究辣椒品种、牛肉预处理方法、姜蒜比例、葡萄糖乳糖比例对牛肉酸汤色差、总酸及感官评分的影响,得到牛肉酸汤最佳配方;利用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用(headspace solid-phase microextr...     

柳州酸笋中降亚硝酸盐乳酸菌的筛选及鉴定

为了获得适用于柳州酸笋发酵的降亚硝酸盐乳酸菌,利用MRS培养基对柳州酸笋中的乳酸菌进行分离、纯化及鉴定,并探讨影响菌株降解亚硝酸盐能力的因素。结果表明,共分离获得22株乳酸菌,用盐酸萘乙二胺法对这22株乳酸菌进行降亚硝酸盐能力测试,得到一株降解能力较强的乳酸菌LC-3-3,经分子生物学鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum);该菌株在以葡萄糖为碳源(20 g/L)、蛋白胨为氮源(10 g/L)、接种量为6%、pH值为6.0、温度为37℃的条件下,亚硝酸盐的降解率为76.58%,降解效果较好。     

生物胺降解乳酸菌的筛选与特性研究

为筛选出高效降解生物胺的优良乳酸菌,该研究以实验室前期筛选的41株乳酸菌作为研究对象,运用显色培养、高效液相色谱（HPLC）法对菌株生物胺产生和降解能力进行筛选,并对筛选出的菌株进行耐盐及耐酸实验。结果表明,筛选得到5株高效降解生物胺菌株,其中以植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）30的生物胺降解能力最好,其对尸胺、组胺、酪胺的降解率分别为62.42%、74.32%、89.97%。植物乳杆菌30能在含盐量0～9%和pH为4.5～8.5环境中较好的生长繁殖,该菌株无生物胺生成活性,并同时具备生物胺降解能力和耐盐耐酸能力,可作为蛋白质类发酵食品的发酵剂运用于食品中降低生物胺毒性。     

酸笋中高产乳酸乳酸菌的筛选、鉴定及发酵条件优化

为获得酸笋中高产乳酸乳酸菌,以柳州传统发酵酸笋为原料,利用MRS培养基对乳酸菌进行分离纯化,然后通过溶钙圈法和高效液相色谱（HPLC）法对高产乳酸乳酸菌进行筛选,并采用形态观察及分子生物学技术对其进行菌种鉴定,最后优化该菌种产乳酸的发酵条件。结果表明,分离并筛选得到一株高产乳酸的乳酸菌菌株LB-1-23,并鉴定其为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,该菌株发酵产乳酸的最适条件为接种量2.6%,pH值5.5,发酵温度32 ℃,发酵时间30 h,葡萄糖为碳源,细菌学蛋白胨为氮源。在此优化条件下,乳酸产量为12.74 g/L。该研究为酸笋来源乳酸菌发酵产生乳酸的应用奠定了理论基础。