大口黑鲈鱼皮胶原蛋白肽的制备及抗氧化活性研究

目的：探究酶种类对胶原蛋白肽抗氧化活性的影响。方法：从大口黑鲈(Micropterus salmoides)鱼皮中提取胶原蛋白,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶酶解胶原蛋白,得到碱性蛋白酶酶解胶原蛋白肽(APP)、中性蛋白酶酶解胶原蛋白肽(NPP)、木瓜蛋白酶酶解胶原蛋白肽(PP)、胰蛋白酶酶解胶原蛋白肽(TP),比较其总抗氧化活性、还原活性、对DPPH·、·OH 和O-2·清除能力以及亚铁离子螯合能力和脂质氧化抑制活性。结果：4种蛋白酶酶解胶原蛋白肽都具有抗氧化活性,且抗氧化能力与胶原蛋白肽浓度呈正相关,其中APP的抗氧化活性最佳,总抗氧化活性和还原活性分别为1.725和0.958,对DPPH·和O-2·清除率分别为56.35%和38.41%。结论：碱性蛋白酶酶解的胶原蛋白肽抗氧化活性更佳。     

几种酶法从猪皮中提取胶原蛋白的对比研究

研究了用胰酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶从猪皮中提取胶原蛋白。研究发现,猪皮的蛋白质含量约为24.59%,羟脯氨酸含量为2.3%。猪皮经酶解处理后,即得到胶原蛋白粗提取液,粗提液再经过透析、浓缩,最后进行冷冻干燥,可得到纯度较高的胶原蛋白制品。研究结果显示:三种酶处理猪皮,其中以胰酶提取物得率最高,但结构破坏较严重,用胃蛋白酶提取的胶原蛋白制品的结构最完整,色泽最为洁白,但得率最低。     

超声辅助酶法提取中华鳖裙边胶原蛋白及其热稳定性能

以中华鳖裙边为原料,采用单因素试验探讨加酶量、超声时间、超声功率、料液比对胶原蛋白的影响,通过Box-Behnken响应面方法建立数学模型,求得最佳酶提工艺,比较常规酶提和超声辅助酶提胶原蛋白的热稳定性能。结果表明,在提取溶剂为乙酸（0.5?mol/L）、料液比1∶20（g/mL）的条件下,采用超声酶提胶原蛋白的最佳工艺参数为加酶量0.8%、超声时间43?min、超声功率176?W,此条件下胶原蛋白得率为74.50%;差示扫描量热实验结果表明,超声酶提胶原蛋白的热稳定性显著优于常规酶提胶原蛋白。该研究可为中华鳖裙边胶原蛋白的精深加工及其应用提供一定科学依据。     

酶解鱼鳔蛋白制备胶原蛋白肽饮品

通过酶解鱼鳔蛋白制备分子量低于2000 Da的胶原蛋白肽液,并配制成胶原蛋白肽饮品.采用木瓜蛋白酶对鱼鳔蛋白进行酶解,利用响应面优化方法分析酶解温度、酶解时间、加酶量对酶解液中胶原蛋白肽分子量的影响,以相对分子质量低于2000 Da的胶原蛋白肽所占比例为考察指标,确定最优酶解条件,并添加低聚果糖将其配制成胶原蛋白肽饮品...     

酶解大鲵皮胶原蛋白制备抗氧化肽工艺研究

为有效利用大鲵加工副产物大鲵皮,研究了大鲵皮胶原蛋白制备抗氧化肽的工艺条件。采用化学发光法,以羟自由基清除率为评价指标,通过单因素试验法,分别研究了酶的种类、酶添加量、酶解pH、温度和时间对大鲵皮胶原蛋白肽抗氧化活性的影响。在单因素试验的基础上,通过正交试验进一步优化了大鲵皮胶原蛋白制备抗氧化肽的工艺,确定了最适工艺条件:即酶添加量7000U/g,pH 8.5,温度55℃,时间4h,在此工艺条件下,大鲵皮胶原蛋白抗氧化肽清除羟自由基的清除率为83.15%。     

多棘海盘车体壁胶原蛋白肽的制备及其抗氧化活性

以多棘海盘车体壁为材料提取胶原蛋白,制备多棘海盘车胶原蛋白肽(AACPs),并研究其体内、外抗氧化活性。方法:酶法提取胶原蛋白,选取木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶等6种酶,在最适温度和pH下水解胶原蛋白,通过比较各种酶水解物体外清除自由基能力和对兔肝的过氧脂质化的抑制作用,确定多棘海盘车胶原蛋白的适宜水解酶,及酶解工艺,选取体外活性最高的样品进行小鼠体内抗氧化实验(ig,7d),建立小鼠急性乙醇肝氧化模型,测定肝组织中MDA含量及SOD、GSH-Px活力,考察胶原蛋白肽的体内抗氧化活性。结果:木瓜蛋白酶酶解物清除自由基活性最高,对脂质过氧化的抑制作用最明显。中、高剂量AACPs能够显著降低急性酒精肝氧化小鼠肝组织中的MDA含量(P<0.01),显著提高SOD(P<0.05)、GSH-Px活力(P<0.01)。结论:制备多棘海盘车胶原蛋白肽(AACPs)的最佳酶为木瓜蛋白酶,AACPs具有明显的体内外抗氧化作用。     

草鱼鱼鳞胶原蛋白提取及活性肽制备研究

以草鱼鱼鳞为原材料,探讨其胶原蛋白酸-酶组合提取工艺,并进一步研究相应抗氧化活性肽和血管紧张素转换酶抑制(ACEI)活性肽的制备方法。结果表明,草鱼鱼鳞胶原蛋白提取的最优工艺为:乙酸浓度0.3 mol/L、乙酸提取固液比1∶15(g/m L)条件下低温下提取24 h;离心后剩余残渣再按1∶10(g/m L)的比例浸入浓度为2%的胃蛋白酶溶液中低温下提取48 h;在该条件下鱼鳞胶原蛋白提取得率可达49.58%。以草鱼胶原蛋白粗提液为原料,制备抗氧化活性肽的最优工艺为:控制胶原蛋白浓度12.5 mg/m L,按10∶1(体积比)的比例加入浓度为4%的木瓜蛋白酶,60℃下酶解75 min,所得酶解液对ABTS~+自由基的抑制率可达45.7%;制备ACEI活性肽的最优工艺为:控制胶原蛋白浓度20 mg/m L,pH值调节为4.0,每10 m L加入6 000 U的酸性蛋白酶,37℃酶解3 h,所得酶解液对血管紧张素转换酶(ACE)的抑制活性可达98.8%。本研究结果,有望为水产品加工副产物的资源化利用提供参考。     

大鲵皮胶原蛋白肽的抗原反应特性研究

目的 探讨用酶法提取大鲵皮胶原蛋白肽,并确定大鲵皮胶原蛋白肽的抗原性,为进一步研究大鲵皮胶原蛋白肽的生物相容性提供依据。方法 采用酶法提取获得大鲵皮胶原蛋白肽,并对得到的胶原蛋白肽进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）分析确定其分子量分布范围。将得到的胶原蛋白肽与弗氏佐剂混合乳化后经免疫程序免疫ICR小鼠,采用抗体酶联免疫试剂盒检测小鼠血清中IgG、IgA、IgM以及IgE含量。结果 所得到的大鲵皮胶原蛋白为I型胶原蛋白,酶解后的胶原蛋白肽分子量均小于10 kDa,多数肽分子量集中在2000~5000 m/z,检测血清中IgA、IgG、IgM和IgE 4种免疫球蛋白的浓度范围分别是71.63~85.90 μg/mL、705.19~857.04 ng/mL、71.63~85.90 ng/mL与224.54~261.0 μg/mL。结论 大鲵皮胶原蛋白肽对ICR小鼠呈现出较弱的抗原性。     

牛骨胶原蛋白酶解工艺优化及结构特性分析

为研究前期纯化的特异性降解牛骨胶原蛋白的胶原蛋白酶(BSC)对牛骨胶原蛋白的酶解工艺,以水解度为响应值,在单因素试验基础上通过五元二次正交旋转组合试验,确定最佳酶解工艺为:反应温度46℃、牛骨胶原蛋白添加量5.14g/100mL、BSC添加量0.42g/100 mL、反应时间6h、pH 6.5,该工艺条件下水解度为34.98%。采用紫外光谱(UV)、荧光光谱(FS)、傅里叶红外光谱(FT-IR)、扫描电镜(SEM)对牛骨胶原蛋白及其产物进行结构特性分析。通过UV分析表明BSC酶的降解作用破坏了牛骨胶原蛋白的三股螺旋结构,游离出大量的氨基酸;FS分析表明牛骨胶原蛋白分子表面C═O、CONH_2、COOH逐步增多,胶原蛋白肽中生色基团分布也随之发生变化;FT-IR分析可知牛骨胶原蛋白经降解后的胶原蛋白肽的肽链上—NH_2~+—排斥作用逐渐减弱,主要以β-转角为主;SEM表明酶破坏了牛骨胶原蛋白的表面分子结构,使其变得疏松。     

酶解鱼皮胶原蛋白制备抗氧化肽工艺研究

酶解鱼皮胶原蛋白制备小分子量的肽。分别研究酶用量、酶解时间、酶解温度及pH值对酶解产物分子量的影响。研究结果确定了最适酶解工艺:木瓜蛋白酶用量0.75‰(m/m),时间2h,温度50℃,pH为6。抗氧化活性试验表明,小分子量胶原蛋白清除自由基能力从原胶原蛋白的26%提高到74%。     

Generation of bioactive prolyl-hydroxyproline (Pro-Hyp) by oral administration of collagen hydrolysate and degradation of endogenous collagen

Hydroxyproline-containing di- and tripeptides increase in human blood plasma after ingestion of collagen hydrolysate in a dose-dependent manner. Prolyl-hydroxyproline (Pro-Hyp) and hydroxyprolyl-glycine (Pro-Gly) are the main food-derived collagen peptides present in human blood plasma. Pro-Hyp increases the number of fibroblasts migrating from the mouse skin and enhances the growth of fibroblasts attached to the collagen gel. Pro-Hyp is also generated from endogenous collagen in the granulation tissue in mice skin and ear with dermatitis, while it does not increase in the normal tissues of the same animal. However, Hyp-Gly does not increase in all tissues. These facts indicate that Pro-Hyp is generated by the degradation of endogenous collagen to activate cells involved in tissue reconstruction. Orally administered Pro-Hyp is deposited in animal organs even after clearance of Pro-Hyp from blood. Thus, the endogenous bioactive peptide can be provided by ingestion of collagen hydrolysate.     

胶原蛋白在食品中的应用

胶原蛋白是哺乳动物体内含量最高的蛋白质，起着支撑器官、保护机体的作用。近年来，随着胶原蛋白提取技术的发展和其结构、性质等的深入研究，其水解产物和多肽的生物功能也逐渐被广泛认识，胶原蛋白的应用成为生物、医学、食品、化妆品等领域一具新的研究热点。本文概述了胶原蛋白的组成和结构特点，并详细介绍了胶原蛋白在功能保健食品、食品添加剂、食品包装材料等食品领域中的广泛应用。     

利用猪副产物酶法制备胶原多肽

近年科学研究发现,人体摄取蛋白质经酶消化后,并非主要以氨基酸形式吸收,而以肽的形式吸收;一些肽不仅能提供人体生长发育所需营养物质,同时还具有多种生理功能。猪副产物中含有丰富的胶原蛋白,利用蛋白酶水解胶原蛋白生产胶原多肽,对促进猪副产物的精深加工发展具有积极作用。本文介绍目前酶法制备胶原多肽研究进展,讨论影响酶解效果的因素,阐述了胶原多肽生理功能及发展前景。     

Tenderizing Effect of High Hydrostatic Pressure on Bovine Intramuscular Connective Tissue

ABSTRACT:  The effect of high-pressure treatment on bovine intramuscular connective tissue was investigated under various pressures (0.1 to 500 MPa) at 8 °C for 5 min. Shear force value, heat solubility of collagen, and structural changes of pressurized intramuscular connective tissues were evaluated. High hydrostatic pressure tenderized bovine intramuscular connective tissue as well as meat. The heat solubility of collagen increased ( P < 0.05) with high pressure, which indicates a reduction of collagen thermal stability. However, high pressure could not degrade collagen molecules by sodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis analysis. Collagen-derived peptide analysis also suggested that high pressure could not degrade the molecular structure of collagen, but could dissociate the collagen fibers or fibrils into fibrils or molecules. Histological study showed that high pressure induced structural weakening of intramuscular connective tissue, especially perimysium.     

胶原蛋白的结构和消化吸收特性及营养价值评价进展

胶原蛋白是胶原水解后的产物,是一类具有丰富营养价值和生理调节功能的多肽混合物。本文围绕近几年一直在争论的关于补充胶原蛋白“有用”或“无用”的问题,对胶原蛋白及其结构组成和功能特性进行了阐述,对近几年已在食品和医疗保健品领域得到应用的胶原蛋白产品进行了综述,着重对胶原蛋白的消化吸收、营养价值和生理调节功能进行了讨论,对胶原蛋白的未来前景和发展重点进行了展望,为将来有关胶原蛋白的开发利用提供参考。     

Effects of amla extract and collagen peptide on UVB-induced photoaging in hairless mice

Amla (Emblica officinalis Gaertn.) is a rich dietary source of vitamin C, minerals and amino acids, and also contains a wide variety of phenolic compounds. Amla has also been used as a principal constituent of many preparations of Ayurved, the Indian system of traditional medicine. Gelatin hydrolysate, also known as collagen peptide as a functional ingredient, is obtained from animal hide or fish scales. Ingestion of gelatin or collagen peptide affects various functions of the body, including bone, the achilles tendon, and skin. However, there are few data on the effects of amla extract and collagen peptide on photoaging in vivo. In the present study, therefore, we administered amla extract and/or collagen peptide to hairless mice that were repeatedly exposed of UVB irradiation, and examined the resulting effects on photoaging. Amla extract and collagen peptide suppressed the formation of 8-OHdG-positive cells and epidermal hyperplasia, and controlled skin hydration, thus reducing skin wrinkle formation in the mice. Collagen peptide, but not amla extract, also enhanced the production of collagen. We demonstrated that amla extract and collagen peptide exerted an additive effect in ameliorating skin dehydration and wrinkle formation, suggesting that they were able to attenuate photoaging effectively in UVB-irradiated hairless mice.     

胶原蛋白肽对凝固型酸奶品质的影响

为提高酸奶的品质和营养价值,以及定量评估胶原蛋白肽对凝固型酸奶品质影响,以牛乳为原料,通过添加不同量(0、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、2.0%、3.0%、4.0%、5.0%)胶原蛋白肽,制备了胶原蛋白肽酸奶,并对其相关质量指标进行了测定。结果表明:胶原蛋白肽的添加显著提高了酸奶的持水能力、pH,降低了酸奶的硬度、粘性、胶着性、咀嚼性、滴定酸度,延长了酸奶的发酵时间,但对酸奶的弹性和内聚性无影响。胶原蛋白肽对酸奶品质的影响程度与其添加量有关,添加量≤ 0.6%时,随添加量的改变酸奶品质变化明显,添加量>0.6%时,随添加量的改变酸奶品质变化不明显。酸奶品质的变化与胶原蛋白肽对酸的发酵影响有关,发酵影响了酸奶网络结构的形成。本研究为定量评估胶原蛋白肽对酸奶品质的影响,建立了持水性、pH、酸度、硬度、粘性、胶着性、咀嚼性随胶原蛋白肽添加量变化的经验模型,为实际生产胶原蛋白肽酸奶奠定理论基础。     

鸡膝软骨胶原蛋白肽的超声辅助酶提工艺优化及抗氧化性

研究超声波辅助酶提取鸡膝软骨胶原蛋白肽的工艺,确定最佳实验用酶为碱性蛋白酶。以料液比、超声功率和酶提时间为试验因素,胶原蛋白肽得率为响应值,利用Box-Behnken试验和响应面法分析试验,确定最佳提取工艺条件。结果表明：最佳提取工艺参数为料液比1∶26（m/V）、超声功率253 W、酶提时间4 h,此时鸡膝软骨胶原蛋白肽得率可达到42.83%,与模型理论预测值（43.32%）较为接近,相对误差仅为0.49%;对经过优化工艺得到的鸡膝软骨胶原蛋白肽成品进行抗氧化性能测定,其2,2’-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基清除能力和羟自由基清除能力的半抑制质量浓度分别为8 mg/mL和8.5 mg/mL,还原能力低于VC,但具有较好的金属离子螯合能力。     

响应面法优化超声辅助酶法制备无骨鸡爪胶原蛋白肽

采用超声辅助酶解法从无骨鸡爪（鸡爪剔骨）中提取胶原蛋白肽,以胶原蛋白肽得率为指标,从五种商业用酶中（木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶）筛选出碱性蛋白酶作为实验用酶,在此基础上以料液比、超声功率、超声时间和酶解时间四个因素进行单因素实验,选取影响酶解效果显著的三个因素,以胶原蛋白肽得率为响应值,采用响应面分析法进行三因素三水平试验。结果表明:各因素对得率的影响大小为料液比>酶解时间>超声功率,确定的最佳提取工艺为:料液比为1:26（g/mL）、超声波功率为250 W和酶解时间为4.0 h,最终胶原蛋白肽得率为49.24%±0.98%。在此工艺下得到的无骨鸡爪胶原蛋白肽的溶解度较好,在90%以上。可将其用于加工工业中,为扩大肉鸡副产物胶原蛋白的市场应用提供一定的理论支撑。     

响应面优化藏羊皮胶原蛋白肽超声辅助提取工艺及其体内抗氧化活性分析

为明确超声辅助提取对藏羊皮胶原蛋白肽含量及功能活性的影响。试验采用响应面法研究了料液比、超声功率和超声时间3个因素,确定了胶原蛋白肽最佳超声辅助提取工艺;并对藏羊皮胶原蛋白肽进行了抗氧化能力分析,模拟消化过程中的还原力和·OH清除能力研究。结果表明：超声辅助处理能明显提高胶原蛋白肽含量,最佳超声提取工艺为料液比1:18、超声功率220 W,超声时间27 min,藏羊皮胶原蛋白肽含量为30.21%±1.67%。超声波辅助提取后胶原肽的还原力和·OH清除率为0.49和83.2%,与超声前的胶原肽相比分别提高了4%和38.3%,经胃肠消化后还原力和·OH均有一定程度的下降,但仍然具有较好的抗氧化活性。超声辅助提取藏羊皮胶原蛋白肽具有提高胶原蛋白肽含量和增强体内抗氧化活性的优势,为功能性产品的开发提供了数据参考。