检测总大肠菌群和大肠埃希氏菌成本分析比较——多管发酵法和DST-酶底物法比较

《生活饮用水卫生标准》GB 5749—2006中对微生物指示菌检测的要求是：当水样检出总大肠菌群时,应进一步检验大肠埃希氏菌。文中分别使用传统的多管发酵法和国标中最新推荐的固定底物（DST）酶底物在检测总大肠菌群和大肠埃希氏菌两个指标时对所需的成本进行分析。结果表明使用固定底物酶底物法的科立得☆试剂在检测这两项指标时不但节省时间和劳动力更能节省检测上的成本。是一项值得作为日常检测微生物指标的方法。     

再生污水的大肠菌群检测方法比较研究

以4个水厂的进、出水水样和一些较洁净水样作为试验对象,进行总大肠菌群、粪大肠菌群3种检测方法(滤膜法、酶底物法、多管发酵法)的对比研究,并对滤膜法中自配培养基和商品培养基的使用效果进行了对比。结果表明:滤膜法与酶底物法在水厂进、出水水样检测中无明显差异,而在某些较干净水样的检测中总大肠菌群、粪大肠菌群的数量有显著差异;滤膜法与多管发酵法在检测总大肠菌群上无显著差异;滤膜法中自配培养基和商品培养基在检测总大肠菌群、粪大肠菌群数量上无显著差异。通过对比可以得出,滤膜法为现阶段大肠菌群检测方法中相对操作简便、结果准确的方法。     

水中菌落总数快速检测方法——酶底物法与平皿计数法的比较

提出水中菌落总数酶底物检测方法,通过实验室间比对、实际水样检测,比较酶底物法与平皿计数法用于水中菌落总数的检测结果。实验结果表明该两种检测方法用于水中菌落总数检测的结果具有一致性,无统计学意义的差别。酶底物法可以用作评价水质微生物污染的标准依据。     

酶底物滤膜法和国标滤膜法检测水中大肠菌群的比较

目的比较酶底物滤膜法和标准滤膜法对水中大肠菌群检测结果的一致性。方法采用《生活饮用水标准检验方法》滤膜法(GB/T 5750.12-2006)以及酶底物滤膜法检测实验室配制加标水样和地表水水样的大肠菌群,对结果进行统计学分析。结果酶底物滤膜法和国标滤膜法,对实验室配制水样检测结果比较P=0.885(P>0.05),对地表水水样检测结果比较P=0.510(P>0.05),两种方法检测结果经配对t检验无统计学差异。结论酶底物滤膜法操作简单、快速,可作为水质大肠菌群指标现场快速检测方法。     

酶底物法和滤膜法检验饮用水中铜绿假单胞菌方法比较

滤膜法为检验饮用天然矿泉水中铜绿假单胞菌的国家标准方法,从检验周期、检验成本、检测精度等方面对酶底物法和膜滤法进行分析比较,结果显示两种方法检验结果无显著性差异,虽然酶底物法检验成本高于滤膜法,但在实验操作、检验周期以及检测准确性和灵敏性方面优于滤膜法,未来可作为评价水中铜绿假单胞菌污染的替代方法。     

应用概率理论拓宽MPN值的计算

应用概率理论拓宽ＭＰＮ值的计算１前言大肠菌群细菌的检验方法有多管发酵法及滤膜法。滤膜法使用的时间、设备和材料比较经济，但仅适用于杂质较少的水样。多管法克服了滤膜法的缺点，从生理生化和镜检两个方面进行检定，检测可靠程度高，适用于淡水及咸水多种水样，还可...     

酶底物法与平皿计数法测定水中菌落总数的比较

利用酶底物法(Sim Plate法)和平皿计数法测定水中菌落总数,对比两种方法的样品处理过程、检测数据的读取以及标准样品和实际水样检测数据的精密度和准确度。结果表明,酶底物法(Sim Plate法)样品处理用时约30 min,细菌菌落在紫外灯下清晰、均匀,标准样品的测得结果在允许误差范围内,相对误差为6.5%,相对标准偏差为1.1%,方法浓度范围为1~738 CFU/m L;平皿计数法样品处理用时2 h,细菌菌落在菌落计数器下大小不同、分布不均,标准样品的测得结果在允许误差范围内,相对误差为2.8%,相对标准偏差为7.8%,方法浓度范围为30~300 CFU/m L。使用以上两种方法测定标准样品,二者的检测结果相关性显著;测定源水时,二者的检测结果无差异。     

检测大肠菌群和大肠埃希氏菌的新方法——固定底物技术酶底物法

由于传统方法在检测水中大肠菌群和大肠埃希氏菌需要48小时左右，且操作过程复杂，难以掌握。现介绍一种快速简便的检测方法，根据生活饮用水国家卫生标准（GB／T5750-2006）中推荐的固定底物酶底物法可购买到市售产品IDEXX公司的Colilert（可立得^TM）试剂。用于检测100ml水样，只需手工操作2分钟，即可在24小时内同时定量检测出大肠菌群和大肠埃希氏菌。此方法大大的减少了工作量，避免了使用多管法的逐级稀释带来的操作误差；也避免了使用滤膜法时肉眼读数的人为误差，所以其假阳性率和假阴性率都比传统方法低。由于24小时内就得到结果，可以很好的用于突发事件应急。     

滤膜法和酶底物法检验城市供水中肠球菌的方法比较

对用于检验饮用水中肠球菌的滤膜法和酶底物法进行了系统研究,重点考察比较了两个方法的检验周期、检验成本、结果差异性,结果显示酶底物法检验成本略高于滤膜法,但在检验周期以及结果的准确性和灵敏性方面较滤膜法有显著优势。     

透视窗式乳糖胆盐发酵培养基管检测饮水中大肠菌群

目的验证应用透视窗式乳糖胆盐发酵培养基管野外现场检测生活饮用水中大肠杆菌的可行性。方法参照《生活饮用水标准检验方法》(GB/T 5750.12-2006)中多管发酵法,用透视窗式乳糖胆盐发酵培养基管与小导管式乳糖蛋白胨培养液对实验室配置的加标水样和野外环境采集的水样进行比较。结果经统计分析,两种培养液对加标水样和环境水样检测结果无统计学差异,其中加标水样的统计结果为P=0.539(P>0.05)、环境水样的统计结果为P=0.772(P>0.05)。结论透视窗式乳糖胆盐发酵培养基管操作简便实用,稳定性好,可以用于生活饮用水样品的检测,尤其适合在野外现场应用。     

酶联免疫吸附测定法与免疫胶体金技术在沙眼衣原体检测中的应用比较

目的:探讨酶联免疫吸附测定法与免疫胶体金技术在沙眼衣原体检测中的应用情况。方法:选取2012年1月-2014年1月来本院就诊的90例疑似沙眼衣原体感染患者作为研究对象,所有患者均采用酶联免疫吸附测定法、免疫胶体金技术和细胞培养方法检测沙眼衣原体感染情况,对比酶联免疫吸附测定法和免疫胶体金技术的检测结果,并以细胞培养方法作为金标准计算两种方法的灵敏度和特异度。结果:酶联免疫吸附测定法与免疫胶体金技术在检测女性患者沙眼衣原体阳性率方面比较差异无统计学意义(P>0.05),在检测男性患者沙眼衣原体阳性率方面比较差异有统计学意义(P<0.05);两种方法在检测沙眼衣原体阳性率的灵敏度和特异度上比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:酶联免疫吸附测定法与免疫胶体金技术对于沙眼衣原体检测均有效,但是前者对男性沙眼衣原体的检出率明显高于后者,因此应根据实际情况,灵活应用。     

固定底物技术酶底物法检测上海地表水中肠球菌

将固定底物技术酶底物法应用于检测地表水中肠球菌的含量,并对上海7个样点的地表水进行检测。结果表明,黄浦江水从上游至下游5个样点肠球菌平均含量分别为66.4,166.2,302.6,1 436.5和3 899.0 MPN/100 m L,长江水2个样点为12.0和4.1 MPN/100 m L,黄浦江水肠球菌含量远高于长江水,所得结果均符合要求,能够用于地表水的检测。     

古代三合土灰浆中蛋清的酶联免疫检测研究

蛋清灰浆三合土(简称蛋清灰浆)是中国古代广泛应用的一种重要建筑灰浆,了解其成分不仅是研究中国建筑科技史的需要,对于濒危文物建筑的维修加固等也具有十分重要的意义.利用抗原-抗体免疫反应的高特异性和灵敏度,采用酶联免疫吸附法(ELISA),首次实现了蛋清灰浆中微量蛋清成分的准确检测,最低检出浓度(质量分数)可达0.003%,同时解决了灰土本身的颜色干扰问题,为研究古代蛋清类灰浆的成分提供了有效检测技术.     

酶底物法检测水中总大肠菌群/大肠埃希氏菌的影响因素

为保证现场监测结果的准确性和可操作性,对酶底物法(51孔定量盘法)测定水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌过程中的环境因素、培养温度、培养时间和培养方式等因素对检测结果的影响进行了研究。结果表明,温度和培养时间对检测结果有显著影响,而环境因素和培养方式对检测结果的影响不明显;总大肠菌群和大肠埃希氏菌的培养温度需控制在35~37℃,检测培养时间分别控制在22~28、24~28 h条件下可获得准确结果;此方法与传统的滤膜法比较,检测结果无显著性差异。     

手性磷酸催化己内酯的动力学拆分

以动力学拆发的方式得到手性己内脂的方法多以脂肪酶为催化剂,而酶催化具有单一的底物范围且价格较为昂贵的缺点,所以发展其他催化方式仍旧需要探究。报道了首例以手性磷酸作为催化剂,甲苯为溶剂,苄醇为亲核试剂在0℃下对6-取代七元环内酯进行动力学拆分,能够以中等的对映选择性得到手性己内酯,并且具有较广泛的底物范围。该方法具有反应条件简单温和的优点,弥补了酶催化底物范围窄且催化剂昂贵的缺点。     

荧光免疫层析法降钙素原检测试剂盒临床性能评估

目的评估荧光免疫层析法试剂盒检测降钙素原的性能。方法参照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)EP5-A和EP6-A文件方法,对荧光免疫层析法试剂盒(TEBSUN)检测降钙素原的精密度、线性、方法学比对、相对灵敏度和特异性进行评估。结果荧光免疫层析法试剂盒检测降钙素原精密度较好,低浓度和高浓度样本精密度的变异系数分别为8.3%和4.7%;线性验证试验结果显示,在试剂盒标示的检测范围内具有良好的线性梯度关系(r=0.9989);方法学比对结果显示,荧光免疫层析法试剂盒与梅里埃VIDAS酶联免疫荧光法分析系统的降钙素原试剂盒检测结果一致性良好(r=0.9770);在0.5和2.0 ng/ml两个浓度水平,荧光免疫层析法试剂盒相对于酶联免疫荧光法试剂盒的灵敏度和特异性均大于86%,与其测定结果的总体符合率为93.75%。结论荧光免疫层析法试剂盒检测降钙素原的精密度、线性、方法学比对、相对灵敏度和相对特异性等性能评价较好,适用于临床标本检测。     

饮用水中大肠菌群检测方法研究进展

检测大肠茵群的常规方法有耗时长、灵敏度低、特异性差和难于检测到低活性或活的非可培养茵等缺点,为此对基于酶学、免疫学、PCR、FISH、rRNA膜杂交等新检测方法进行了综述,这些方法虽具有灵敏度高、特异性强、检测快捷等优势,但相应的检测仪器有待开发。     

军团菌双重荧光定量PCR检测方法的建立与应用

目的建立一种特异、快速、敏感,同时能区分嗜肺和非嗜肺军团菌的荧光定量PCR方法,用于检测临床和环境样品。方法利用军团菌属特异性23S rRNA基因和嗜肺军团菌种mip基因的保守序列,设计引物和TaqMan探针。提取嗜肺军团菌标准菌株(LP1)DNA,分别构建2个含有目的基因的标准质粒作为阳性模板。优化荧光PCR反应条件和反应体系,对方法的特异性、敏感性、重复性进行评价。并对环境水样及80份临床痰样进行检测。结果该方法检测灵敏度达10标准质粒拷贝数/反应,具有高度特异性、稳定性。整个过程约需2 h。对35份环境水样进行检测,检出3株嗜肺军团菌和3株非嗜肺军团菌,所有水样经传统分离培养法和普通PCR法检测均显示为阴性。对临床80份随机痰液标本进行检测,2份嗜肺军团菌阳性。结论 TaqMan探针荧光定量PCR双管检测是一种可同时区分嗜肺与非嗜肺军团菌的特异、敏感、稳定的方法,可用于基层医院对环境标本及临床痰样的检测。     

生物法制备平台化合物乙偶姻的最新研究进展

乙偶姻(3-羟基-2-丁酮)作为一种应用广泛的食用香料和重要的平台化合物,具有广阔的工业应用前景。与传统的化学合成方法不同,高效、环保的乙偶姻生物制备方法,可以减轻资源和环境压力,促进我国低碳经济的发展。近来,生物法制备平台化学品乙偶姻取得了丰硕的研究成果。总结了最近几年国内外在该领域最新的研究热点及方向,简述了发酵法生产乙偶姻的优势菌株概况,重点综述了以糖类物质为底物生产乙偶姻的最新策略及研究成果、将微生物改造为生产手性乙偶姻的高效细胞炼制工厂以及将2,3-丁二醇或双乙酰作为发酵底物的研究趋势,并介绍了乙偶姻的分离纯化工艺。使用非致病性的安全菌株,高效率地利用廉价底物,并采用经济、简单、环保的分离纯化方式,从而生产具有高附加值的食品级或高手性纯度乙偶姻,是生物法制备乙偶姻产业化发展的可靠保障。     

牛羊细粒棘球蚴病现场快速检测方法的建立及应用

建立了一种基于恒温隔绝PCR(Insulated isothermal PCR,ii PCR)技术现场检测牛羊包虫病的方法.结果显示,该方法只能检出细粒棘球绦虫,对多房棘球绦虫、肝片吸虫、细颈囊尾蚴、前后盘吸虫、日本血吸虫、金黄色葡萄球菌、伪结核杆菌无关病原不检出;检测下限为100个拷贝,重复性好.对55份牦牛源包囊样本和70份羊源包囊样本的检出率分别为61.8和4.3%,与文献报道的检测方法的符合率分别为100%;本研究建立的ii PCR方法特异性好、灵敏度高、重复性好,从核酸提取到报告检测结果仅需1小时,操作方便,可现场使用,为牛羊包虫病的现场快速诊断提供有力的工具.