雌二醇对大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞增殖和内皮功能的影响

目的 研究雌二醇对血管内皮损伤后血管壁细胞增生和内皮功能恢复的作用。方法 应用球囊导管剥脱大鼠的左颈总动脉,于术前六天和术后两周给予17-β雌二醇,通过形态学分析和免疫组化测定血管内膜增生和血管平滑肌细胞增殖程度,并测定乙酰胆碱诱导的内皮依赖性血管舒张反应。结果 17-β雌二醇显著抑制血管内皮损伤后平滑肌细胞增殖和减少新生内膜面积。内皮损伤后乙酰胆碱诱导的血管舒张反应显著降低,最大为12%±6%;雌二醇能使其显著改善,最大舒张反应为48%±9%(P<0.05)。结论 雌二醇显著抑制血管内皮损伤后平滑肌细胞增殖和促进内皮功能的恢复。     

Fas 配体基因对大鼠颈动脉损伤后血管中层平滑肌细胞密度的影响

目的 探讨腺病毒载体介导Fas 配体(FasL) 基因导入对大鼠颈动脉损伤后血管中层平滑肌细胞密度的影响。方法 实验分治疗组(Ad-FasL 组) 和正常对照组两组(Ad-βgal 组), 每组动物均为6 只。利用重组腺病毒载体分别将Ad-FasL 、Ad-βgal 导入大鼠颈动脉球囊损伤的内膜, 3 、14 d 后观察其对血管中层平滑肌细胞密度的影响。结果 与正常对照组相比较, 通过腺病毒载体介导导入FasL 基因的被球囊损伤的大鼠颈动脉,3 d 后损伤血管中层平滑肌细胞密度降低, 14 d后血管中层平滑肌细胞密度恢复到正常水平。结论 FasL 可抑制血管中层平滑肌细胞密度, 从而抑制球囊损伤后的内膜增生。     

碘化N-正丁基氟哌啶醇抑制兔颈总动脉球囊损伤后血管内膜和平滑肌细胞增殖的作用研究

目的: 探讨碘化N-正丁基氟哌啶醇(F₂)对兔颈总动脉球囊损伤后内膜及平滑肌细胞增殖的影响。方法: 30只新西兰兔随机分为假手术组、模型组、F₂高剂量给药组(2 mg/kg)、 F₂中剂量给药组(1 mg/kg)、F₂低剂量给药组(0.5 mg/kg)。模型组及F₂各给药组行左侧颈总动脉球囊损伤,各组分别于术后 7 d 取颈总动脉段,常规病理切片,HE染色,免疫组化法测定α-actin、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平。结果: 与假手术组比较,模型组术后 7 d 血管内膜厚度、内膜面积、内膜厚度/中膜厚度、内膜面积/中膜面积、血管壁细胞PCNA表达显著增加(P<0.01),F₂剂量依赖地降低上述指标。与假手术组比较,模型组血管壁α-actin阳性染色减少,F₂各给药组可增加血管壁平滑肌细胞中α-actin阳性染色率。结论: F₂能抑制兔颈总动脉机械损伤后血管内膜和平滑肌细胞的增殖。     

通心络对兔外周血管球囊损伤后血栓形成及内膜增生的影响

目的 观察中成药通心络对兔腹主动脉及骼动脉球囊损伤后血栓形成及内膜增生的影响。方法 新西兰兔36只, 随机分为3组:通心络组16只, 阿司匹林组11只, 安慰剂组9只。各组服药剂量: 通心络0.38 g·kg^-1·d^-1, 阿司匹林50 mg·kg^-1·d^-1, 安慰剂组服用生理盐水10 ml·d^-1。1 w k 后制作腹主动脉和骼动脉球囊损伤模型, 在模型制作后24h、1 w k 或1 mon 取受损节段血管, 经HE 染色后置显微镜下观察管腔内血栓形成及内膜增生情况。结果 球囊损伤后24 h、7 d 在各实验组均可见部分血管腹主动脉及髂动脉内膜增生, 管腔狭窄5 %~40 %, 术后1 mon 安慰剂组2 只兔腹主动脉及髂动脉内膜增生更为显著, 管腔狭窄50 %~70 %。阿司匹林组血栓形成的血管比例少于另两组, 但无显著差异。通心络组出现内膜增生的血管比例显著少于阿司匹林及安慰剂组。结论 兔腹主动脉和髂动脉球囊损伤模型是研究PTCA 术后再狭窄的理想模型。通心络明显抑制兔外周血管球囊损伤后内膜增生, 提示通心络在再狭窄防治中可能有一定的潜在价值。     

Irbesartanf对大鼠髂动脉球囊内皮剥脱后血管壁增殖的影响

目的 观察Irbesartan对血管损伤后内膜增殖的作用。方法 24只髂总动脉球囊内膜剥脱的Wistar大鼠随机等分为三组,分别于术前上天至术后14天食管内喂饲Irbesartan 30mg/kg,d或蒸馏水。术后14天对损伤血管进行形态学检查。结果 Irbesartan 显著抑制损伤血管壁中细胞计数增加和内膜增厚以及血管平滑肌细胞增殖,并且有量效关系。对新生内膜中细胞密度影响不大。结论 Irbesartan能够抑制大鼠髂总动脉球曩损伤后内膜增殖,Irbesartan 可能是防治血管成形术后再狭窄的有效药物。     

福辛普利对平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因的影响

目的: 探讨血管紧张素II 在不同浓度和不同作用时间下对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因表达的作用, 并研究福辛普利对其的影响。方法: 采用流式细胞技术测定在不同浓度和不同作用时间血管紧张素II 作用下血管平滑肌细胞凋亡率及凋亡调控基因Fas、Bcl-2 表达的变化和福辛普利对其的影响。结果: 血管紧张素II 对血管平滑肌细胞凋亡和凋亡调控基因表达有较明显的诱导作用。福辛普利可抑制AngII 作用, 对细胞凋亡有一定的影响, 同时可影响凋亡调控基因的表达。结论: 血管紧张素II 具有一定的的促进血管平滑肌细胞凋亡作用和调节凋亡调控基因表达的作用, 尤其大剂量作用较明显。而福辛普利可明显抑制AngII 对血管平滑肌细胞的作用。     

川芎嗪对脂多糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖及细胞间粘附因子-1 表达的影响

目的:探讨川芎嗪对脂多糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖及细胞间粘附因子-1 表达的影响。方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞, 经脂多糖诱导后, 分别应用噻唑蓝(MTT) 比色法和流式细胞术检测细胞增殖抑制率和细胞周期的变化, 应用免疫细胞化学法检测细胞表面细胞间粘附因子-1 的表达。结果:川芎嗪呈剂量依赖性的抑制系膜细胞的增殖,并阻止细胞由G₀/G₁ 期进入S 期;使系膜细胞间粘附因子-1 的表达水平明显减少。结论:川芎嗪能抑制大鼠肾小球系膜细胞增殖和降低细胞间粘附因子-1 表达水平。     

姜黄素防治慢性低O2高CO2大鼠肺动脉高压与c-Jun、c-Fos的关系研究

目的: 研究姜黄素对慢性低O₂ 高CO₂ 大鼠肺动脉高压及肺动脉管壁(c-Jun和C-Fos表达的影响。方法: 36只SD大鼠随机分为正常对照组、低O₂高CO₂,组、低O₂高CO₂+姜黄素组(简称姜黄组)。采用围像分析、免疫组化和组织原位杂交技术等方法观察姜黄素对慢性低O₂ 高CO₂ 大鼠肺动脉压力、血管显微结构及肺动脉管壁原癌基因c-Jun和c-Fos表达影响。结果: 血流动力学检测显示姜黄素组mPAP较低O₂高CO₂ 组明显降低(P<0.01),组间mCAP比较差异元显著性。光镜下姜黄素组肺细小动脉内弹力板扭曲、中膜平滑肌细胞增生及管腔狭窄程度均明显轻于低O₂高CO₂ 组。电镜下姜黄素组大鼠肺细小动脉内皮细胞结构基本正常,中膜平滑肌细胞增生较轻,胶原少见;外膜胶原纤维较低O₂高CO₂ 大鼠明显减少。免疫组化法发现肺细小动脉c-Jun和c-Fos平均吸光度值低O₂ 高CO₂ 组明显高于正常对照组( P<0.01 ),姜黄素组明显低于低O₂高CO₂ 组( P<0.01 );原位杂交法显示肺细小动脉管壁e-JunmRNA平均吸光度值姜黄素组显著低于低O₂,高CO₂组(P<0.01)。结论: 姜黄素有抑制慢性低O₂高CO₂性肺动脉高压和改善肺血管结构重建的作用,下调c-Fos,c-Jun及其基因的表达,抑制血管平滑肌细胞的增殖可能是其重要作用机制。     

马齿苋总黄酮对血小板源性生长因子致家兔血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的: 研究马齿苋总黄酮(Portulaca total flavone,PTF)对血小板源性生长因子-BB型(PDGF-BB)致血管平滑肌细胞(Vascular smoothmuscle cell,VSMC)增殖的影响并探讨其机制。方法: 采用组织贴壁法培养家兔胸主动脉血管平滑肌细胞,细胞计数法观察PTF(8、24、72 mg/L)对PDGF-BB所致的VSMC增殖作用的影响;氚-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入方法测定VSMC DNA的合成;流式细胞仪分析增殖细胞周期,荧光分光光度计测定VSMC内 [Ca²⁺]_i。结果: PTF以浓度依赖方式抑制PDGF-BB诱导的VSMC增殖、DNA合成,血管平滑肌细胞处于G₁/G₀ 期的细胞数增多,而G₂/S期的细胞数显著减少(P<0.01);能抑制高K⁺诱导的VSMC内[Ca²⁺]_i升高(P<0.01)。结论: PTF可明显抑制PDGF-BB诱导的VSMC增殖,其作用机制可能与其降低VSMC内高钙浓度[Ca²⁺]_i有关。     

中华眼镜蛇毒F组分对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 研究中华眼镜蛇毒F 组分对血管平滑肌细胞增殖的影响。 方法 用体外培养的血管平滑肌细胞, 观察F 组分对20 %小牛血清引起的细胞对氚标胸腺嘧啶核苷酸(H³-TdR) 掺入的影响, 用蛋白质免疫印迹法(Western blotting) 测定F 组分对20 %小牛血清引起的细胞内原癌基因、核增殖抗原(Proliferationcell nuclear antigen, PCNA) 表达的影响。 结果 F 组分呈浓度依赖性抑制20 %小牛血清引起的细胞对H³-TdR 掺入率和细胞内C-myc、PCNA 的表达, 其中30、100 mg·L^-1给药组与对照组比较有显著差异(P <0.05)。 结论 中华眼镜蛇毒F 组分通过影响细胞内原癌基因C-myc、PCNA 的表达, 抑制血管平滑肌细胞的增殖。     

黄芪和当归配伍对大鼠血管内膜增生血管平滑肌细胞增殖的影响

目的: 探讨黄芪和当归不同配伍对大鼠血管内皮损伤后血管内膜增生中血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化、细胞周期和磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号途径的影响。方法: 雄性大鼠制备腹主动脉球囊导管损伤血管内皮模型，设计黄芪和当归单用及不同比例配伍，对内皮损伤模型大鼠灌胃给药，干预14 d后取腹主动脉，检测腹主动脉增生内膜中VSMC表型转化、细胞周期相关蛋白表达和PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达。结果: 球囊导管损伤主动脉内皮后，可引起VSMC表型转化及VSMC增殖从而导致血管内膜增生。当归、黄芪、黄芪-当归1∶1配伍、黄芪-当归5∶1配伍可增强血管增生内膜中平滑肌α肌动蛋白（SM α-actin)表达，抑制增生内膜中增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达。当归、黄芪、黄芪-当归1∶1配伍、黄芪-当归5∶1配伍可抑制血管组织中cyclin D1、cyclin E表达的增高，抑制增生内膜中p-PI3K和p-Akt蛋白表达的升高。结论: 黄芪当归配伍对血管内皮受损后内膜增生具有抑制作用，其作用可能与其通过抑制血管内皮受损后PI3K/Akt信号通路激活，进而抑制VSMC表型转化和细胞增殖，从而发挥抗VSMC增殖的作用有关。     

一氧化氮藕联的塞曲司特衍生物抗哮喘活性的研究

目的: 研究与一氧化氮供体(NO)藕联的塞曲司特衍生物(SDF-1、SDG-1、SDG-3)的抗哮喘活性。其中F-1 为呋咱氧氮类化合物,G-1、G-3 为羟基胍类化合物,SDF-1 为F-1 和塞曲司特连接而成的藕联化合物,SDG-1 为G-1 和塞曲司特的藕联化合物,SDG-3 为G-3 和塞曲司特的藕联化合物。方法: 以豚鼠乙酰胆碱-组胺引喘法观察其整体抗哮喘作用;以Griess 法测定其体外NO 释放量;以离体豚鼠气管条法测定其舒张气管作用。结果: 在1.25mg·kg^-1的剂量下,SDF-1 的引喘潜伏期与塞曲司特有极显著差异(P<0.01),SDG-1 和SDG-3 与塞曲司特有显著差异(P<0.05)。SDF-1、SDG-1 体外NO 释放量高于其前体药物F-1、G-1,SDG-3 则低于其前体G-3 。在卡巴胆碱作为收缩剂时,SDF-1 和SDG-1 舒张离体豚鼠气管平滑肌的半数有效浓度和最大舒张率均与塞曲司特及相应前体有极显著差异(P<0.01),SDG-3 的半数有效浓度和最大舒张率与塞曲司特有极显著差异(P<0.01)。在磷酸组胺作为收缩剂时SDF-1、SDG-1 和SDG-3 舒张豚鼠离体气管平滑肌的半数有效浓度和最大舒张率均与塞曲司特及相应前体有极显著差异(P<0.01)。结论: 新化合物较两种前体—塞曲司特及单一的NO 供体具有更强的抗哮喘活性。     

不同浓度丹参酮对大鼠脑片缺氧缺糖损伤的保护作用

目的: 探讨不同浓度丹参酮对大鼠脑片缺氧缺糖损伤的保护作用及其机制。方法: 建立大鼠脑片缺氧缺糖损伤模型, 设立对照组、缺氧缺糖损伤组、丹参酮20 mg·L^-1组和丹参酮200 mg·L^-1组。利用2, 3, 5-三苯基氯化四氮唑(TTC) 染色定量比色、乳酸脱氢酶(LDH) 、免疫组化、电镜评价不同浓度丹参酮对脑损伤的保护作用。同时激光共聚焦显微镜测定脑片胞内钙变化。结果: 不同浓度丹参酮(20 、200 mg·L^-1) 抑制脑片OGD 损伤所致的TTC 染色降低, 减少LDH 释放, 减轻神经元凋亡, 改善神经元超微结构的病理损伤。OGD 损伤增加bax 和bcl-2 蛋白表达和胞内钙离子浓度。不同浓度丹参酮(20 、200 mg·L^-1) 进一步上调bcl-2 蛋白表达, 降低bax 蛋白表达, 同时抑制胞内钙离子浓度。与丹参酮20mg·L^-1相比, 丹参酮200 mg·L^-1作用较强。结论: 不同浓度丹参酮具有脑保护作用, 能够抑制缺氧缺糖损伤导致的大鼠脑片神经元损伤及其凋亡过程, 且丹参酮对于胞内钙离子的调控可能是其发挥保护作用的重要机制之一。     

国产盐酸氮䓬斯汀抗组胺作用的实验评价

目的 评价国产盐酸氮卓斯汀的抗组胺作用。 方法 皮内注射组胺增加豚鼠皮肤通透性;静脉注射组胺诱导豚鼠休克;组胺诱导离体豚鼠回肠平滑肌收缩。 结果 盐酸氮卓斯汀(0.05, 0.15,0.45 mg·kg^-1, ig) 可剂量依赖性地抑制组胺所致皮肤血管通透性增加;盐酸氮卓斯汀(0.05, 0.1,0.2 mg·kg^-1, ig) 可剂量依赖性地降低休克的反应程度, 延长休克的潜伏期, 降低豚鼠的死亡率。盐酸氮卓斯汀(10^-8, 3 ×10^-8, 10^-7, 3 ×10^-7 mol·L^-1) 可剂量依赖性拮抗组胺所致离体回肠平滑肌收缩, 使组胺量效曲线平行右移(pA2 值为8.55)。 结论 国产盐酸氮卓斯汀具有较好的抗组胺作用。     

复方山菊对自发性高血压大鼠主动脉损伤的保护作用及机制

目的: 探讨复方山菊对自发性高血压大鼠(SHR)主动脉的保护作用及可能机制。方法: SHR 35只,随机分为SHR(蒸馏水 5 mL·kg^-1·d^-1,n=7)模型组、复方山菊高、中、低(0.45、0.15、0.05 g·kg^-1·d^-1,n=7)剂量组、卡托普利(0.03 g·kg^-1·d^-1,n=7)阳性对照组,另设WKY(蒸馏水 5 mL·kg^-1·d^-1,n=7)阴性对照组,连续灌胃给药16周,每天1次。尾袖法每两周测定大鼠动脉血压。16周后,HE染色观察主动脉病理组织学变化;Masson染色观察主动脉胶原纤维变化;免疫组化法观察主动脉内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、转化生长因子-β₁(TGF-β₁)蛋白的表达。结果: 随着复方山菊剂量的增加, 主动脉的病理损伤得到不同程度的改善,主动脉中膜胶原面积逐渐减小,胶原纤维沉积逐渐减轻;主动脉TGF-β₁蛋白表达逐渐减少,eNOS蛋白表达逐渐增加。结论: 复方山菊可明显减轻主动脉的病理损伤,减少主动脉胶原纤维沉积,下调TGF-β₁及上调eNOS蛋白的表达,对SHR主动脉具有一定的保护作用。     

KATP通道开放剂吡那地尔对兔肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的: 研究吡那地尔(pinacidil, Pin) 对内皮素-1(ET-1) 诱导培养的兔肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响。方法: 内皮素-1 刺激培养兔PASMC 增殖模型;以氚-胸腺嘧啶核苷([³H]-TdR) 掺入法观察细胞增殖及脱氧核糖核苷酸(DNA) 合成;流式细胞仪技术检测兔PASMC 细胞周期。结果: 吡那地尔可剂量依赖性的抑制内皮素-1 所致的[³H]-TdR 掺入量增多, 阻止兔PASMC 由静止期(G₀/G₁ 期) 进入DNA 合成期(S 期) 和有丝分裂期(G₂/M 期) 。ATP敏感性钾通道(K_ATP) 阻断剂格列本脲可拮抗吡那地尔对[³H]-TdR 掺入的抑制作用。结论: 吡那地尔可能通过激活K_ATP通道抑制内皮素-1 诱导兔肺动脉平滑肌细胞的增殖, 可望用于治疗肺动脉高压时所致的肺动脉重构。