西红花酸对晚期糖化终产物诱导内皮细胞晚期糖基化终产物受体表达的抑制作用

目的: 研究西红花酸对晚期糖基化终产物(AGE)诱导牛内皮细胞(BEC)中晚期糖基化终产物受体(RAGE)mRNA表达的抑制作用,并探讨其可能机制。方法: 不同浓度的西红花酸(1、0.1、0.01 μmol/L)预孵BEC细胞12h后,用AGE(100 mg/L)刺激细胞12h,RT-PCR法测定RAGEmRNA的表达水平;ELISA法测定细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达;试剂盒分别检测胞外超氧阴离子和硫代巴比妥酸反应产物(TBARS)浓度;同时,还用2,7-二氯荧光素(DCFH)测定了胞内H2O2的浓度,并用罗丹明123(Rh123)荧光法及MTT法分别检测细胞线粒体膜电位(MMP)水平和其琥珀酸脱氢酶(MSDH)的活性。结果: 与AGE模型组相比,西红花酸能显著抑制RAGEmRNA的表达(P<0.05),降低胞外超氧阴离子和TBARS(P<0.01或P<0.05)及胞内H2O2水平;结果还显示,西红花酸能提高细胞MMP水平和MSDH活性。对ICAM-1蛋白表达也有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性。结论: 西红花酸可能通过清除AGE与RAGE结合产生的活性氧(ROS)来抑制RAGEmRNA的高表达。提示西红花酸对糖尿病血管病变有潜在的治疗价值。     

二氮嗪对大鼠心肌线粒体膜电位及呼吸功能的影响

目的 研究二氮嗪对大鼠心肌线粒体功能的影响, 以探讨其心肌保护作用的可能机理。 方法 以罗丹明123 为荧光探针测定线粒体膜电位, 氧电极法测线粒体呼吸, 观察二氮嗪对正常大鼠心肌线粒体跨膜电位及呼吸的影响。 结果 50 μmol·L^-1 的二氮嗪可引起线粒体膜电位去极化, 此影响可被钾通道阻滞剂消除;二氮嗪100 μmol·L^-1可降低大鼠心肌线粒体琥珀酸链的R3、R4 速率, 但不影响呼吸控制率。 结论 二氮嗪可调节大鼠心肌线粒体功能, 这与其抗心肌缺血保护作用有关。     

五甲基槲皮素预处理对大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤保护作用的机制研究

目的: 探讨五甲基槲皮素(PMQ)预处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤的保护作用及其线粒体功能的影响。方法: 原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,经终浓度分别为10、30、100 μmol/L PMQ预处理 24 h 后,制作A/R损伤,检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、MTT法检测细胞存活率、流式细胞法检测线粒体膜电位和细胞凋亡情况、线粒体肿胀法检测各组心肌细胞线粒体通透性转换孔(mPTP)开放情况。结果: 不同剂量PMQ (10、30、100 μmol/L)预处理 24 h 后可剂量依赖性地降低LDH活性、增加细胞存活率、减少细胞凋亡(P<0.05 或P<0.01);30、100 μmol/L PMQ预处理 24 h 后,线粒体膜电位更为稳定、mPTP开放减少(P<0.05 或P<0.01)。结论: PMQ预处理 24 h 后,可产生药理性延迟保护作用,机制与其稳定线粒体膜电位、抑制mPTP开放,进而减少细胞凋亡有关。     

阿霉素热化疗诱导A549 细胞凋亡及线粒体跨膜电位的变化

目的 探讨阿霉素(adrimycin, ADM) 热化疗诱导人肺腺癌A549 细胞凋亡及对线粒体跨膜电位(Δψm) 的影响。 方法 不同浓度的阿霉素作用于体外培养的A549 细胞, 42.5 ℃ 作用30 min 后, 37 ℃继续培养, 在不同时间内检测。用电镜、MTT 法、流式细胞仪检测。 结果 阿霉素热化疗明显增强对A549 细胞的抑制作用, 细胞内阿霉素的浓度显著高于化疗组(P < 0.01);阿霉素浓度为1.0,2.0 mg·L^-1时, 热化组与化疗组比较, 凋亡率增高,线粒体膜电位下降(P <0.01)。 结论 线粒体跨膜电位下降可能是ADM 热化疗诱导A549 细胞凋亡的关键。     

一氧化氮诱导 PC12 细胞凋亡及芍药苷的保护作用

目的: 探讨一氧化氮诱导PC12细胞凋亡及芍药苷保护作用的可能机制。方法: MTT和乳酸脱氢酶活性测定细胞存活率,DNA凝胶电泳观察DNA的断裂情况,流式细胞仪测定细胞凋亡率、检测线粒体跨膜电位。结果: 500μmol·L^-1硝普钠(SNP)可诱导PC12细胞凋亡,细胞线粒体跨膜电位明显下降。预先经过0.1、1和10μmol·L^-1等浓度芍药苷处理后,SNP诱导的PC12细胞凋亡明显减少,同时明显减弱一氧化氮对线粒体跨膜电位的影响。结论: 芍药苷可抑制一氧化氮诱导PC12细胞凋亡,其作用机制可能与其稳定细胞线粒体跨膜电位有关。     

西红花酸对溃疡性结肠炎大鼠模型的作用及其机制研究

目的: 研究西红花酸(crocetin)对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇诱导的大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)的作用及可能机制。方法: 采用TNBS/乙醇混合复制溃疡性结肠炎模型,用不同剂量的西红花酸进行干预。观察大鼠结肠组织形态变化;检测髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;ELISA法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)含量;实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测Toll样受体4(TLR4)和核转录因子-κBp65(NF-κBp65)基因的表达;免疫组化分析TLR4和NF-κBp65蛋白的表达。结果: 西红花酸能改善UC大鼠结肠形态及组织病理学变化;西红花酸能抑制MPO活性、降低MDA含量、提高SOD活性;西红花酸能下调TNF-α和IL-1β的含量;西红花酸能降低TLR4和NF-κBp65基因与蛋白的表达。结论: 西红花酸能有效改善溃疡性结肠炎大鼠的结肠炎症反应, 其作用机制与抗氧化、抑制TLR4/NF-κB信号通路等有关。     

甲基黄酮醇胺对阿霉素诱导的小鼠心肌损伤的保护作用及其机理

目的: 研究甲基黄酮醇胺(methylflavonolamine, MFA)对阿霉素诱导的心肌损伤的保护作用及机理。方法: 用阿霉素(adriamycin, ADR)1.5 mg·kg^-1, 隔日1 次ip, 共10 d, 诱导小鼠心肌损伤。所有受试动物给药前均描记肢体导联心电图,心电图异常的动物剔除。观察各组动物的心电图J点抬高、QRS 时间和Q-T 间期延长的程度、血清磷酸肌酸激酶(CK)、血清乳酸脱氢酶(LDH)和心肌脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化。血清磷酸肌酸激酶、血清乳酸脱氢酶用比色法测定, 超氧化物歧化酶用羟胺法测定, 丙二醛用硫代巴比妥酸(TBA)法测定。结果: 阿霉素可使小鼠的心电图J 点异常抬高,QRS 时间和Q-T 间期延长, 小鼠血清CK 、LDH 含量增加, 表明阿霉素可引起小鼠心肌细胞广泛损伤, 阿霉素诱导小鼠心肌损伤模型成立。甲基黄酮醇胺能逆转ADR 效应, 能减轻小鼠急性心肌损伤时ECG 的异常变化, 降低血清LDH 与CK 含量, 使心肌损害减轻。同时, 阿霉素可以降低心肌组织中SOD 的活性, 增加心肌组织中MDA 的含量, 而甲基黄酮醇胺能增加心肌组织SOD 活性, 降低心肌组织中MDA 含量, 表明ADR 的心脏毒性是由于诱导心脏产生自由基所致, 而甲基黄酮醇胺则通过清除氧自由基和抗脂质过氧化作用来保护心肌细胞免受损伤。结论: 甲基黄酮醇胺可明显减轻由阿霉素所致的小鼠急性心肌损伤的程度。甲基黄酮醇胺的作用机制可能与其清除氧自由基及抗脂质过氧化等作用有关。     

牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机理。方法 采用在体大鼠冠脉结扎后再通的方法,观察牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注后心肌梗塞的范围,血清和心肌中SOD活性、MDA和NO含量的影响。结果 牛磺酸可明显减少大鼠心肌缺血再灌后的心肌梗塞范围(P<0.05,0.01),提高大鼠心肌缺血再灌注后血清和心肌中的SOD活性(P<0.01),降低心肌和血清中MDA和NO含量(P<0.05,0.01)。结论 牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,可能与其提高血清和心肌组织中SOD 活性、降低MDA和NO含量有关。     

盐酸阿霉素对大鼠心肌损伤的分子机制研究

目的: 初步研究盐酸阿霉素(adriamycin,ADR)对大鼠心肌损伤的分子机制及机体急性修复的机理。方法: 将雄性SD 大鼠40 只随机分成4 组(每组10只):正常对照组,ADR 低剂量组(10 mg·kg^-1), ADR中剂量组(20mg·kg^-1),ADR 高剂量组(40 mg·kg^-1),对后3 组分别一次性腹腔注射不同剂量的ADR, 制备大鼠心肌损伤模型。采用硫代巴比妥酸(TBA) 荧光分光光度法测大鼠血清丙二醛(malondialdehyde,MDA) 含量;采用黄嘌呤氧化酶法测定铜锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn-SOD) 活性;采用二硫代二硝基苯甲酸直接显色法测定谷胱苷肽过氧化物酶GSH-Px 活性;运用RT-PCR 方法分析相关基因的表达。结果: ADR中、高剂量组大鼠血清中MDA 含量高于对照组(P<0.05, P<0.01);实验组Cu-Zn-SOD 和GSH-Px 的酶活性均较对照组降低, 并与其基因表达的减弱呈密切的相关性;FN 、P105 mRNA 在不同剂量模型组呈不同程度的高表达。结论: 抗氧化酶基因表达的改变可能是ADR 导致心肌损伤的分子机制之一, 而纤连蛋白和核转录因子可能通过一系列的信号转导参与了机体损伤后急性期的修复。     

葡萄糖酸镁对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的: 观察葡萄糖酸镁对心肌缺血再灌注损伤的影响, 探讨葡萄糖酸镁心肌保护作用及其机理。方法: 采用改进了的整体大鼠急性心肌缺血再灌注损伤模型, 检测组织内 Na⁺-K⁺ -ATPase 活力及丙二醛(MDA) 和 Ca²⁺ 含量, 并测定由ADP 诱导的血小板5 min 最大聚集率 AGG(M)。结果: 与假手术组相比, 缺血再灌注组心肌组织内 Na⁺ -K⁺ -ATPase 活力显著下降(P<0.01), MDA 和Ca²⁺ 含量明显升高(P<0.01), AGG(M) 升高(P<0.05)。与缺血再灌注组比较, 葡萄糖酸镁 3 个不同剂量保护组心肌组织内Na⁺ -K⁺-ATPase 活力明显升高(P<0.01), MDA和Ca²⁺ 含量明显降低(P<0.05 或 P <0.01), AGG(M) 也明显降低(P<0.01), 且各作用均随用药剂量的增加而更加显著。结论: 葡萄糖酸镁对心肌缺血再灌注损伤有保护作用, 其保护作用机制与增加Na⁺ -K⁺-ATPase 活性 、减轻钙超载和抑制脂质过氧化反应以及血小板聚集有关。     

黄芪总甙的抗炎作用及其作用机制探索

目的 探索黄芪总甙(AST) 的抗炎作用及其作用机制。方法 采用大鼠角叉菜胶气囊炎症模型, 测定渗出液量、中性白细胞游出数、蛋白质、PGE₂、IL-8、NO、PLA₂含量以及$\mathop{{O}}_{2}^{{\mathop{}_{\ ·}^{-}}}$的生成量。结果 AST40、80 mg·kg^-1 可使角叉菜胶诱导大鼠气囊炎症的渗出液量、中性白细胞游出数、蛋白质含量显著减少, 降低渗出液及中性白细胞中PLA₂活性,减少渗出液中IL-8 含量及中性白细胞$\mathop{{O}}_{2}^{{\mathop{}_{\ ·}^{-}}}$的生成。AST 也可明显减少渗出液中PGE₂、NO 的含量。结论 AST 的抗炎作用机理与其降低血管通透性和抑制白细胞游出、降低PLA₂活性、减少IL-8、PGE₂、NO 等炎症介质的产生与抑制氧自由基生成有关。     

西红花酸对心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的: 探讨西红花酸(crocetin)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ, AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts, CFB)增殖和胶原合成的影响及其作用机制。方法: 体外培养新生SD大鼠CFB,建立AngⅡ诱导新生大鼠CFB纤维化模型;MTT法检测CFB的增殖;羟脯氨酸测定检测CFB胶原含量;流式细胞分析仪测定细胞周期;实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白、间质胶原酶(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、转化生长因子β₁(TGF-β₁)的基因表达;蛋白免疫印迹(Western Blot)检测细胞P27^kip1 (P27)蛋白的表达。结果: (1)在一定浓度范围里,crocetin能抑制AngⅡ引起的CFB增殖和胶原合成,并呈剂量依赖;(2)CFB G₀/G₁期百分率随crocetin浓度增加而增加,S期、G₂/M期百分率和增殖指数随crocetin浓度增加而减少,与AngⅡ组相比差异有统计学意义(P<0.05 或P<0.01);(3)Crocetin能明显降低Ⅰ型、Ⅲ型胶原、TIMP1、TGF-β₁的表达,提高MMP-2的表达;(4)Crocetin能增加P27蛋白表达。结论: Crocetin通过抑制AngⅡ诱导的CFB增殖和胶原合成起到抗心肌纤维化作用,其机制可能与细胞因子分泌和对基质金属蛋白酶的调节有关。     

西红花酸对乙醛诱导的肝星状细胞增殖和胶原合成的影响

目的: 探讨西红花酸(Crocetin)对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cell, HSC)增殖和胶原合成的影响及其作用机制。方法: 培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,建立乙醛诱导的HSC纤维化模型;用不同浓度的西红花酸(10^-6、10^-7、10^-8 mol/L)对乙醛刺激的HSC-T6进行处理,MTT法检测细胞增殖;羟脯氨酸测定检测HSC-T6胶原含量;流式细胞分析仪测定细胞凋亡;Western blot检测细胞ERK1/2、Bax、Bcl-2蛋白的表达;RT-PCR检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白、间质胶原酶(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的基因表达。结果: 在一定浓度范围里,西红花酸能抑制乙醛引起的HSC增殖和胶原合成; 西红花酸诱导乙醛刺激的HSC细胞凋亡;西红花酸能增加Bax蛋白表达,降低乙醛刺激升高的ERK1/2、Bcl-2蛋白表达;西红花酸能明显降低Ⅰ型、Ⅲ型胶原、TIMP-1的表达,提高MMP-2的表达。结论: 西红花酸通过抑制乙醛诱导的HSC增殖和胶原合成以及促进活化的HSC凋亡起到抗肝纤维化作用,其机制可能与ERK信号传导通路和对基质金属蛋白酶的调节有关。     

Detailed Structures and Formation Mechanisms of Well-Known Al_(10)RE_2Mn_7 Phase in Die-Cast Mg-4Al-4RE-0.3Mn Alloy

The detailed structures and the corresponding formation mechanisms of the well-known Al_(10)RE_2Mn_7 phase in the conventional die-cast Mg–4Al–4RE–0.3Mn alloy were thoroughly investigated using transmission electron microscopy(TEM). The results indicate that the Al_(10)RE_2Mn_7 phase ordinarily contains both normal (111) twins and orientation twins.Both detailed TEM observations and density functional theory calculations indicate that the Al_(10)RE_2Mn_7 phase is transferred from the Al_8REMn_4 phase following an orientation relationship as [010]_(Al_8REMn_4)//[101]_(Al_(10)RE_2Mn_7) and (101)_(Al_8REMn_4)//(110)_(Al_(10)RE_2Mn_7). Moreover, forming orientation twins in the Al_(10)RE_2Mn_7 phase is attributed to the blurry regions at incoherent twin boundaries in the Al_8REMn_4 phase. Finally, these formed orientation twins result in the (111) twins in the Al_(10)RE_2Mn_7 phase.     

三种利巴韦林的药动学和相对生物利用度

目的: 测定利巴韦林血药浓度及其在健康人体内的相对生物利用度和药动学。方法: 18 名男性健康受试者, 单剂三交叉口服两种利巴韦林被试制剂和标准参比制剂各 600 mg 后, 采用 HPLC 法测定不同时间血浆中的药物浓度, 数据经3P97 软件处理计算药代动力学参数。结果: 三者药-时曲线均符合一房室模型, 标准参比制剂和两种被试制剂峰浓度(C max) 分别为 0.76 ±0.37、0.72 ±0.22 和 0.75 ±0.40 mg°L^-1, 达峰时间(T_max) 分别 2.07±0.89、1.67±0.49 和 1.86±0.41 h, 消除半衰期(T_1/2ke) 分别为22±3、24±4 和 22 ±4 h, $AUC^{t}_{0}$ 分别为 12 ±4、14±4和12±4 mg°h°L^-1, $AUC^{∞}_{0}$ 别为 16±5、18±5 和 15±5 mg°h°L^-1。两种被试制剂的相对生物利用度分别为(112 ±21) %和(100 ±18) %。结论: 两种被试制剂与标准参比制剂具有生物等效性。     

四甲吡嗪对人类白细胞呼吸爆发氧代谢的影响1

目的 研究四甲吡嗪(川芎嗪, Lig) 对白细胞呼吸爆发期间氧消耗和过氧化物的影响。方法 采用电子自旋共振自旋捕集技术, 自旋探针氧测定法和化学发光法检测白细胞呼吸爆发期间氧消耗和活性氧自由基。结果 Lig 对白细胞呼吸爆发期间的氧消耗无明显影响(P >0.05), 但能明显抑制其产生的化学发光(P <0.01), 这是Lig 清除$\mathop{{O}}_{2}^{{\mathop{}_{\ ·}^{-}}}$和OH·的结果。结论 Lig 可以不抑制白细胞氧化代谢的功能而通过清除氧自由基防止白细胞对组织的损伤。     

ATP敏感性钾电流与蛋白激酶关系的研究1

目的 观察蛋白激酶A(PKA)及蛋白激酶C(PKC)抑制剂和蛋白脱磷酸化物质对大鼠心室肌细胞ATP敏感性钾电流($I_{KATP}$)的影响,探讨克罗卡林(cromakalim)开放ATP敏感性钾通道的作用机制。方法 采用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞$I_{KATP}$。结果 在37℃时克罗卡林(1μmol·L^-1)可阻断ATP的抑制作用,诱导出$I_{KATP}$。PKA抑制剂PKI(6~22)amide(1μmol·L^-1),可模拟克罗卡林的作用,激活$I_{KATP}$;而PKC抑制剂calphosticC无此作用。同时还观察到蛋白脱磷酸化物质butanedioemonoxime(BDM,5mmol·L^-1)也可诱发出$I_{KATP}$。结论 克罗卡林开放$I_{KATP}$机制与抑制PKA的活性有关,而与PKC无关。     

太子参醇提物的抗脂质过氧化作用

目的: 研究太子参醇提物的抗脂质过氧化作用。方法: 用自然衰老模型大鼠, 同时灌胃给予生药量2.16、4.32、8.64 g·kg^-1·d^-1的醇提物, 观察其对自然衰老模型大鼠抗氧化系统的影响。结果: 生药量2.16、4.32、8.64 g·kg^-1·d^-1的太子参醇提物能使自然衰老模型大鼠血清、肝、肾组织中MDA 不同程度下降, 而SOD 及GSH-PX 活力有不同程度提高。结论: 太子参醇提物有显著清除氧自由基、活性氧及抗脂质过氧化作用。