脂肪酶产生菌的筛选及其耐甲醇驯化的研究

从土样中分离出34株脂肪酶产生菌,在维多利亚蓝培养基上初筛出透明圈与菌落直径比值较大的6株菌,复筛出产脂肪酶活性较高的菌株FM-1,其所产脂肪酶主要为胞内酶,产脂肪酶活力为132 U/g cell。通过反复的驯化培养方式将菌株FM-1驯化成耐甲醇的优良菌株。在甲醇质量浓度为11 mg/L的培养基中驯化后的脂肪酶相对活力为35%,而出发菌株在此环境中不能生长。     

低温碱性脂肪酶产生菌的筛选及产酶培养基的优化

以橄榄油为唯一碳源,从渤海湾盐碱地被油污染的土样中分离筛选出1株产低温碱性脂肪酶菌株34-5,初步酶学性质研究表明,该菌所产脂肪酶的最适温度为25℃,最适pH为9．6,该菌的16S rDNA基因序列与伯克霍尔德氏菌（Burkholderia）的同源性为99％摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基为（g／L）;淀粉10,黄豆饼粉20,玉米浆20,K2HPO4 1,聚乙烯醇大豆油乳化液20．其最高酶活为6．87U／mL。     

土壤中产脂肪酶菌株的分离及浓缩培养

从食用油污染的土壤中筛选得到1个产脂肪酶较多的酵母菌株,测得其脂肪酶活力为8.30 U/m L.用正交试验法对该菌株的最佳发酵条件进行了优化.结果表明,最佳培养基成分为:1.50%蛋白胨、1.20%葡萄糖、10.00%橄榄油乳化液、0.5%酵母膏、KH2PO40.65%、K2HPO40.20%、Mg S04·7H2O 0.02%;最佳产酶培养条件为:温度30℃,发酵的初始p H 7.5,接种菌量为2.0%,摇床转速180 r/min,培养20 h后测定脂肪酶酶活力达到33.19 U/m L,是优化前的4倍.在菌株培养20 h时采用微孔滤膜过滤二次培养,结果表明在培养24 h时菌数达到最大;培养28 h后脂肪酶活力达到峰值86.08 U/m L,较未采用微孔滤膜过滤二次培养提高160%,为初始脂肪酶活力的10.4倍,达到浓缩培养要求.     

脂肪酶产生菌的筛选及其酶性质

从５６个土样中分离获得２５３株脂肪酶产生菌,其中ＮＱ２３菌株产酶活性最高,从其形态特征确定为根霉属。对该菌株进行紫外线和硫酸二乙酯诱变,酶活力提高５２％。对该菌的产酶条件及部分酶性质进行了研究后发现该菌株所产脂肪酶具有良好的热稳定性,最适作用温度较高,为５０℃左右。     

产脂肪酶菌株Acinetobacter calcoaceticus UN9的诱变选育

本实验菌株醋酸钙不动杆菌（Acinetobacter calcoaceticus）M1-7的最佳紫外诱变时间为60,s.利用紫外诱变后涂布到添加不同脂肪酶底物和分解产物的分离培养基,筛选出具有抗性的正突变株.其中柠檬酸钠抗性突变菌株UN9最高酶活力达15.960,U/mL,比出发菌株提高了130.97%,远远高于琥珀酸钠、正丁酸、正己酸、三丁酸甘油酯等抗性突变菌株.经5次传代后,菌株UN9遗传性能稳定,平均酶活力为15.866,U/mL.     

果胶酶高产菌株AspT7的分离及筛选鉴定

用3种分离培养基培养供试菌株黑曲霉Ja,分别观察菌落生长情况,通过测量透明圈大小定性比较聚半乳糖醛酸酶活力大小,确定溴酚蓝平板培养基为较好的分离培养基。从土壤样本中通过富集培养、驯化、溴酚蓝平板初筛和摇瓶复筛,筛选出1株高产聚半乳糖醛酸酶的菌株AspT7,产聚半乳糖醛酸酶活力达到了6．5万U／mL,经初步鉴定为黑曲霉,将其命名为Aspergillus niger AspT7。     

BDE-47降解菌的筛选及破乳提高回收率的方法优化

通过污染物质量浓度梯度驯化法、最大污染物质量浓度驯化法及外加碳源辅助驯化法,并从整体驯化和分离单菌后驯化2个角度出发,以期系统地筛选出BDE-47高效降解菌种或菌群.测定降解能力过程中,应用物理和化学破乳方法,解决由于细菌表面的疏水性及其分泌的胞外物导致的液液萃取测定回收率过程中的严重乳化问题.结果表明:采用3种方法整体驯化之后进行菌株的分离,分别得到7、3和11株降解菌株,先分离菌株,再采用3种方法逐级驯化共得到能在以BDE-47为唯一碳源的培养基中生长的14株,为驯化最优组合,且经形态学观察及生理生化鉴定可知,先整体驯化再分离得到的菌株,均可在上述14株中找到相对应菌株;水浴、离心及甲醇共同作用的破乳过程为最优破乳组合,其回收率可高达92.3%;甲醇在整个破乳过程中,对BDE-47的回收起积极促进作用,而NaCl则起抑制作用.     

α-环糊精葡萄糖基转移酶菌株的筛选与鉴定

从富含淀粉的土样中,初筛出22株产α-环糊精葡萄糖基转移酶菌株,然后用透明圈法筛选出3株酶活力较高的菌株,最后绘制酶活力曲线,得到一株酶活力为0．64U／mL的菌株N1．通过菌落形态、显微观察和生理生化特性,鉴定N1为肠杆菌科的产酸克雷伯氏菌．     

产纤维素酶霉菌的筛选及初步鉴定

在长期有腐烂植物的潮湿处采集8种样品,用羧甲基纤维素液体培养基富集培养,分离得到34株产纤维素酶的霉菌。利用刚果红染色法对所得菌株进行染色并以水解圈/菌落直径大小为筛选标准进行初筛,得到11株菌。再用DNS法测定初筛所得菌株发酵液中纤维素酶的活力,得到两株纤维素酶活性较高的菌株wx0503、wx1005,其发酵液纤维素酶活力分别可达31.31 U/mg、47.46 U/mg。此外,用苏丹混合液染色法对初筛所得到的产纤维素酶菌株染色,镜检观察其产油脂情况,得到2株产油量较大的纤维素酶产生菌株wx0403、wx1007。     

产低温碱性脂肪酶菌株Acinetobacter johnsonii LP28的鉴定及发酵条件优化

从实验室保藏的49株碱性脂肪酶产生菌中筛选出产低温碱性脂肪酶菌株LP28,初步酶学性质研究表明,该脂肪酶的最适作用温度为30℃,最适作用pH为9．0,粗酶液在室温条件下处理48h仍具有93．78％的残余酶活．该菌经16SrDNA鉴定为约氏不动杆菌（Acinetobacter johnsonii）,同源性为99％．摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基为（g/L）：淀粉10,牛肉膏20,K2HPO41,PvA-大豆油20．最高酶活为3．06U／mL．     

碱性脂肪酶生产菌假单孢菌4631菌株的筛选

从３２个土样中分离获得碱性脂肪酶产生菌１６６株，其中４６３１号菌株产酶能力最高，达到９．１ＩＵ／ｍｌ。初步鉴定为假单孢菌属。对研究结果统计分析表明，Ｄ／ｄ值与ＬＡ呈线性相关关系。     

Production and characterization of alkaline extracellular lipase from newly isolated strain Aspergillus awamori HB-03

A strain HB-03 to produce alkaline extracellular lipase was isolated from oil-rich soil samples and identified as Aspergillus awamori.The growth conditions and nutritional factors for lipase production by strain HB-03 were optimized,and the maximum lipase production of (45.9±2.3) U/mL was obtained at 30 °C and pH 7.0 after 36 h using olive oil (1%) and sucrose (0.5%) as carbon sources and combination of peptone (2%),yeast extract (0.5%) and ammonium sulfate (0.1%) as nitrogen sources.The lipase was purified...     

凝集型酵母X的酒精发酵和分类学研究

本文对二株凝集性好，酒精发酵力强的菌株进行了分类学研究，该菌在麦芽汁琼脂培养基上，菌落呈乳白色，稍具光泽·在麦芽汁液体培养基中有较薄的菌环，细胞圆形，卵形及椭圆形，多边芽殖，营养细胞为（８～８）×（５～１６）ｕｍ·在玉米琼脂培养基上不形成典型假菌丝，可直接形成子囊，内生子囊孢子２～４个，圆形光面·能发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、密二糖、半乳糖及全部棉子糖，并能同化上述糖·不利用硝酸盐·需要多种维生素，不形成类淀粉物质，不液化明胶，不含脂肪酶，含尿酶，产酸，产酯，可形成类胡罗卜，生长最适ｐＨ３．０～４．５，该酵母为酵母属菌株。     

紫外诱变原生质体提高脂肪酶活力

以粗壮假丝酵母CJ－1为出发菌株．对其进行原生质体紫外诱变选育,筛选得到10株脂肪酶活力比出发菌株高的突变侏。其中菌株CJ－1－09的酶活达35．78U／mL,比CJ－1提高了4．58倍,突变株CJ－1－09经10次传代,其脂肪酶活性保持稳定。     

高效降解废弃蓖麻基润滑油降解菌的分离筛选及特性研究

从内蒙古某蓖麻榨油厂排污口采样,分离筛选出10株能降解废弃蓖麻基润滑油菌株,其中T-9菌株降解润滑油的能力较强,该菌株最适降解pH值为5.0,降解温度30℃,在1%～5%的NaCl中能较好生长.通过菌落形态与生理生化实验,初步鉴定该菌株为假单胞菌属（Pseudomonas）.在润滑油质量浓度为10 g/L,初始pH值为5.0,180 r/min,30℃下培养7 d后,采用改进的CEC-L-33-A-93方法测得其对废弃蓖麻基润滑油的降解率为72%.采用GC/MS对降解产物进行分析,测得其对废弃蓖麻基润滑油降解率为80%,该菌株具有良好的蓖麻基润滑油降解能力.     

固态降解农作物秸杆纤维素菌株⒇分离筛选方法的研究

研究了降解作物秸杆纤维素菌株分离筛选方法。菌株初筛以刚果红纤维素粉琼脂为主,辅以滤纸条培养基,再经过以稻草或玉米秸为主的发酵培养基复筛,初步得到较高酶活菌株２株。其ＣＭＣ酶活为７３８５．３μ,ＦＰ酶活为３４８．８μ