乙胺丁醇的合成

对手性抗结核药物盐酸乙胺丁醇的关键中间体———乙胺丁醇的合成进行了系统研究。以1 丁烯、氯气和乙腈为原料,合成了(R,S) 2 氨基丁醇,收率50 7%;选用L (+) 酒石酸拆分(R,S) 2 氨基丁醇,得到酸式(S) 2 氨基丁醇的L (+) 酒石酸盐,收率94 3%;滤液经处理后,得到酸式(R) 2 氨基丁醇的L (+) 酒石酸盐,收率99 0%;将两种酸式2 氨基丁醇的L (+) 酒石酸盐分别进行水解,得到(S) 2 氨基丁醇和(R) 2 氨基丁醇,收率均达85 0%以上;最后,以(S) 2 氨基丁醇和1,2 二氯乙烷为原料,合成了乙胺丁醇,收率81 3%。此外,选用骨架镍催化剂,对(R) 2 氨基丁醇进行了消旋化反应,收率72 7%;将水解得到的酒石酸钠晶体用于L (+) 酒石酸的回收,收率82 5%。     

谷氨酸脱羧酶工程菌的发酵工艺及酶学性质

对谷氨酸脱羧酶(GAD)工程菌DM201的发酵及转化条件进行优化,分析了发酵过程中异丙基-β-D-巯基半乳糖苷(IPTG)诱导条件、转化体系pH、底物浓度和金属离子等因素对谷氨酸脱羧酶活力的影响。发酵过程中最佳IPTG诱导条件为:浓度0.4mmol/L、时间5h、温度30℃;转化温度45℃,pH=4.0,ρ(L-谷氨酸)≈110g/L,镁离子在50mmol/L和5mmol/L浓度时对谷氨酸脱羧酶酶活有稳定作用,铜锌离子对其酶活的抑制作用显著。     

不透明红球菌生产谷氨酸氧化酶发酵过程优化

优化了用不透明红球菌FMME1-41所产谷氨酸氧化酶(LGOX)转化L-谷氨酸产α-酮戊二酸(α-KG)的工艺条件.结果表明,最佳发酵培养基为酵母粉6 g/L,大豆蛋白胨2 g/L,(NH_4)_2SO_4 0.8 g/L,葡萄糖25 g/L,KH_2PO_4 3 g/L,MgSO_4 0.6 g/L,MnSO_4 0.3g/L,L-谷氨酸2.5 g/L,在其中发酵30 h,LGOX酶活达6.12 U/mL;在7.5 L发酵罐中优化发酵放大和补料策略,发酵40 h后LGOX酶活达21.5 U/mL;在2 L发酵罐中转化L-谷氨酸生产α-KG,产量达92.0 g/L,摩尔转化率为92.6%,生产强度为9.2 g/(L·h).     

用迭氮法工艺合成L-(一)-4-氨基-2-羟基丁酸

L-(一)-4-氨基-2-羟基丁酸(以下简称L-HABA)的制备,文献报导有多种途径。本文选择迭氮法工艺路线,采用谷氨酸与这氮化钠反应制得L(+)-d,γ-二氨基丁酸半硫酸盐即DABA1/2H_2SO_4;该产物再与亚硝酸反应就可生成L-HABA,该工艺较文摘报导简化,从转化率,产品质量看都优于文摘报导。同时讨论对比了反应条件。     

碳源对假单胞菌NX-1产生L-天冬氨酸β-脱羧酶的影响

比较了假单胞菌 NX- 1在各种糖类物质、有机酸和氨基酸培养基上生长和合成 L -天冬氨酸β-脱羧酶(ADL )的情况 ,结果表明用不同的碳源培养基 ,NX- 1的生长和产酶表现出明显的差异。 NX- 1能利用糖类物质生长 ,但 ADL合成受阻遏。三羧酸循环中间体是 ADL合成的良好的碳源 ,谷氨酸是 ADL酶合成最好的诱导剂 ,其诱导合成的 ADL是富马酸为碳源时的 2倍。对 L -谷氨酸 (L - Glu)刺激 ADL酶生成的机理进行初步分析 ,认为 L - Glu通过自身 (而不是由 L - Glu衍生出的任何代谢物 )和 ADL合成的有关基因作用强烈诱导 ADL合成     

对甲苯磺酰-L-谷氨酸配合物的合成及其催化性能研究

合成了基于镍(II)盐与对甲苯磺酰谷氨酸(L)的手性配合物Ni L(1)(H2L=(+)-N-对甲苯磺酰-L-谷氨酸)。采用元素分析、红外光谱、圆二色谱(CD谱)表征了其组成。此外,研究了配合物的热稳定性和催化性能。结果表明该配合物具有较强的选择性,是很有潜力的手性催化剂。     

手性除草剂中间体R(+)2-(4-羟基苯氧基)丙酸的合成研究

文献报道了一种合成苯氧丙酸类除草剂重要中间体R(+)-2-(4羟基苯氧基)丙酸[1](即R(+)-(PE)的合成方案,我们此次试验采用的L一乳酸为起始原料,通过定向合成法而得到此产物,第一酯化合成L-乳酸乙酯,然后与对甲苯磺酰氯反应制备L-对甲苯磺酰乳酸乙酯,再与对苯二酚缩合获得R(+)-2-(PE,产品的总产率为62.5%。通过元素分析和IR光谱测定,确定了所合成的R(+)(PE的化学结构和纯度;由旋光度的测定,确定了所合成的R(+)-(PE的光学纯度为94.4%。此种中间体制得的除草剂效果好,对环境污染小,市场经济效益良好。     

酶法分离制备γ-氨基丁酸和L-天冬氨酸

以L-谷氨酸(L-G lu)和L-天冬氨酸(L-Asp)两种混合酸性氨基酸〔m(L-G lu)∶m(L-Asp)=1∶1〕为原料,利用大肠杆菌菌体内脱羧酶对L-谷氨酸的专一脱羧作用,酶法分离制备了γ-氨基丁酸和L-天冬氨酸。考察了转化体系温度、pH等影响L-谷氨酸脱羧酶活力的主要因素,实验表明,最佳工艺条件为:温度35℃,转化体系pH=5.0,ρ(菌体)=6 g/L,ρ(Tween80)=0.15 g/L,菌龄16 h,ρ(底物)=60 g/L。L-谷氨酸脱羧酶在最适转化条件下比酶活高达15 036 U。1 g湿菌体可重复使用3次共转化L-谷氨酸和L-天冬氨酸混合物30 g,其中L-谷氨酸完全转化为γ-氨基丁酸。γ-氨基丁酸及L-天冬氨酸的总收率可分别达到理论收率的88%和90%。     

留兰香油中葛缕酮的测定

<正> 葛缕酮(Carvone)又称藏茴香酮、香芹酮,结构式为:其来源主要从伞形花科植物?蒿(Carumcaryi L.)种子挥发油及唇形科植物留兰香(Menta arvensis L.)油中分离得到,前者得(-)-葛缕酮,后者得(+)-葛缕酮。留兰香原产日本、朝鲜和我国东北各省,栽培历史悠久。现在我国自北至南均有分布,     

有机介质中包衣菌体催化合成c9,t11-共轭亚油酸

以3种脂肪醇(正辛醇、月桂醇和肉豆蔻醇)为原料,合成得到3种谷氨酸二烷基酯核糖醇(2C8GE、2C12GE和2C14GE),比较了不同谷氨酸二烷基酯核糖醇及其浓度和所用溶剂种类,以及缓冲液pH、包衣时间、温度和干燥方式对包衣Lactobacillus helveticus L7菌体酶活的影响。确定了制备包衣菌体的条件为:表面活性剂为谷氨酸双十二烷基酯核糖醇(2C12GE),将其配制成质量分数为1.0%的丙酮溶液;菌体用pH 5.8的磷酸盐缓冲液重悬;在4℃下处理4h经冷冻干燥而成包衣菌体。亚油酸经包衣菌体催化18h后,其转化率为95.3%,c9,t11-共轭亚油酸的产量为1906 mg/L。包衣菌体在有机溶剂中重复使用5次仍然具有较高的催化活性。在以亚油酸为底物时,包衣菌体中亚油酸异构酶的米氏常数(Km)为35.7 mmol/L,最大反应速度(Vmax)为5.6 mmol/h。经包衣处理后,菌体中亚油酸异构酶和底物的亲和力有所降低。     

微生物谷氨酰胺转胺酶的研究进展

谷氨酰胺转胺酶(蛋白质-谷氨酸-γ-谷氨酰胺转胺酶EC2．3．2．13,TG)能催化蛋白质分子内或分子间的酰基转移反应,通过形成交联键改善蛋白质的功能性质。其酶活测定方法采用比色法,荧光法、偶联法、放射标记法目前只用于动物TG酶的活性测定;MTG(微生物谷氨酰胺转胺酶)作为胞外酶,从其发酵液中分离纯化MTG主要是用离子交换、凝胶层析、高效液相色谱、超滤等方法;MTG可用于肉食品、大豆蛋白和小麦制品等的加工。     

γ-羧基谷氨酸的研究概述

羧基谷氨酸(Gla)是一种羧基化修饰的非蛋白氨基酸,它比谷氨酸多一个羧基。Gla主要存在于凝血因子,一些哺乳动物的骨组织蛋白以及芋螺睡眠肽中。维生素K依赖的蛋白质如凝血酶原、骨钙蛋白等的谷氨酸残基经γ羧化,使其谷氨酸侧链末端再接上羧基而形成。本文主要对Gla的形成机制、分布和作用机制做下概述。     

基于PLS-LSSVM的谷氨酸发酵产物浓度预测建模

针对谷氨酸发酵过程关键生化参数难以在线检测给发酵优化控制带来困难问题,基于谷氨酸5 L发酵罐发酵过程,建立基于偏最小二乘(PLS)和最小二乘向量机(LSSVM)相结合的谷氨酸浓度预测模型;利用PLS对输入变量进行特征提取降低维数和消除相关性,以简化模型和提高模型精度。为确定谷氨酸发酵最佳预测模型,简化后的预测模型与发酵动力学模型进行比较;实验结果表明,简化后的耦合模拟退火(coupled simulated annealing,CSA)对参数进行优化的LSSVM模型具有最好预测性能,相对PLS预测模型和发酵动力学模型具有明显优势,均方根误差分别为1.597、8.49和2.934,可以为谷氨酸发酵过程操作及时调整及优化控制提供有效指导。     

L-谷氨酸发酵的变温控制工艺研究

以黄色短杆菌GDK-9为供试菌株,首先考察了不同的培养温度(30~36℃)对L-谷氨酸摇瓶发酵的影响。结果发现,在34℃条件下菌体生长情况最好,且L-谷氨酸产量最高,可达86g/L。基于上述结果,研究了3种变温控制模式下L-谷氨酸摇瓶发酵过程。得出如下结论:0~6h发酵温度为34℃,6h后每隔6h提高1℃,并采用这种温度控制方式进行5L自控发酵罐试验,36h后可积累L-谷氨酸130g/L,比同类研究的产量(102 g/L)提高了27%。     

亮氨酸拉链结构蛋白基因的合成及其表达

为探讨亮氨酸拉链蛋白与DNA的结合机理,设计了含有GCN4亮氨酸拉链蛋白基区结合DNA的必需的35个氨基酸的折叠片段,并将其克隆到Escherichia coli BL21表达.以ZG1(+)、ZG1(-)、ZG2(+)、ZG2(-)、ZG3(+)、ZG3(-)寡聚核苷酸片段在PCR自动热循环系统连接得到亮氨酸拉链蛋白基因片段,将此片段克隆到pET3b质粒中,酶切后用2%琼脂糖电泳检测证明克隆成功,将这种重组质粒转化到E.coli DH5α,发现pET3b重组体在E.coli DH5α中表达成功,从转化子中分离得到重组质粒pET3b,序列分析证明插入序列为合成的亮氨酸拉链蛋白基因;将重组质粒pET3b在E.coli BL21于5 mL含有50 μg*mL-1氨苄青霉素和34 μg*mL-1氯霉素的LB液体培养基中以IPTG为诱导剂,37℃下表达,10%SDS-PAGE检测到外源基因蛋白质分子量为4000 Da左右;重组体在10 L含氨苄青霉素和氯霉素的LB液体培养基中、28℃时能大量表达.     

氯吡格雷的中间体的拆分方法研究

以外消旋的邻氯苯甘氨酸为起始原料,通过酯化得到外消旋的邻氯苯甘氨酸甲酯,再用(L)-(+)-酒石酸拆分,丁酮作为溶剂,拆分消旋同步进行得到(S)-(+)-邻氯苯甘氨酸甲酯,总体收率在95%以上。     

g-聚谷氨酸产生菌的筛选及发酵条件

从土壤中筛选分离到一株高产g-聚谷氨酸的菌株PGAN-12,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),在含谷氨酸钠和葡萄糖的培养基中可生成大量g-聚谷氨酸,缺少谷氨酸钠和碳源均不能合成g-聚谷氨酸. PGAN-12合成g-聚谷氨酸的合适碳源为葡萄糖,而TCA循环中的有机酸包括柠檬酸均不能使PGAN-12合成g-聚谷氨酸. 最适氮源是酵母膏. PGAN-12是谷氨酸依赖型的g-聚谷氨酸产生菌,在谷氨酸钠浓度为70 g/L时,g-聚谷氨酸取得最大产量18.32 g/L,但在谷氨酸钠浓度为30 g/L时,获得了最大的表观转化率62.1%,此时生成g-聚谷氨酸为14.2 g/L.     

聚谷氨酸的保湿功效及安全性评价

通过CM825型皮肤水分测试仪和皮肤斑贴试验,研究聚谷氨酸的保湿功效及安全性。结果表明:不同分子量和质量分数的聚谷氨酸在保湿特性上差异较大,其中分子量为1 200 k Da的聚谷氨酸在质量分数为0.1%时,保湿效果最好;受试者涂抹该受试物2和4 h后皮肤水分含量的变化率分别为(103.9±0.2)%和(112.2±0.2)%,接近现在广泛使用的保湿剂透明质酸钠的(114.0±0.3)%;皮肤斑贴试验结果表明聚谷氨酸对皮肤安全、无刺激性。     

S-3308L对映异构体的杀菌活性和植物生长调节作用

研究了具有杀菌和植物生长调节活性的(E)-1-(2,4-二氯苯基)-4,4-二甲基-2-(1,2,4-三唑-1-基)-1-戊醇-3(S-3308L),该化合物有R(-)、S(+)两种异构体。营养琼脂培养基上的试验表明,R(-)异构体对子囊菌亚门、担子菌亚门和半知菌亚门的活性较S(+)异构体活性高,但他对卵菌纲的防治效果不象对其他真菌的防效那样高,两种异构体在杀菌力上无明显差异。在盆栽试验中,以保护性和治疗性喷雾时,R(-)异构体能防治植物的主要病害,而S(+)异构体活性较低。R(-)的气雾剂和内吸剂也具有保护活性,而S(+)异构体对黄瓜苗的抑制活性较R(-)异构体强烈。     

聚-L-氯乙基谷氨酸酯的合成与表征

以L－谷氨酸单体为原料，经γ-羧基和氯乙醇成酯反应，再与三光气反应制备L－氯乙醇基谷氨酸酯的N－羧酸酐，由三乙胺引发聚合得聚－L－氯乙基谷氨酸酯。最后通过IR、^1HNMR、元素分析对其进行表征。