天然烟酰胺辅因子再生体系及其人工类似物研究进展

氧化还原酶可以催化具有特定区域选择性、化学选择性、立体选择性的反应,反应条件温和且催化效率高,因此在有机化学和制药领域发挥着日益重要的作用。绝大多数氧化还原酶依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD(H)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADP(H)为酶促反应提供氧化还原当量。NAD(H)/NADP(H)由于价格昂贵、稳定性差导致无法化学计量投入。经过几十年研究,形成了4种经典的NAD(H)/NADP(H)再生方法:酶法、化学法、电化学法和光化学法,与此同时,一系列稳定性好、活性高且廉价的人工烟酰胺辅因子m NAD(H)s尤其是1,4-二氢吡啶类烟酰胺辅因子的开发和利用为NAD(H)/NADP(H)工业化运用提供了新的思路。     

天然烟酰胺辅因子再生体系及其人工类似物研究进展

氧化还原酶可以催化具有特定区域选择性、化学选择性、立体选择性的反应,反应条件温和且催化效率高,因此在有机化学和制药领域发挥着日益重要的作用。绝大多数氧化还原酶依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD（H）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADP（H）为酶促反应提供氧化还原当量。NAD（H）/NADP（H）由于价格昂贵、稳定性差导致无法化学计量投入。经过几十年研究,形成了4种经典的NAD（H）/NADP（H）再生方法：酶法、化学法、电化学法和光化学法,与此同时,一系列稳定性好、活性高且廉价的人工烟酰胺辅因子mNAD（H） s尤其是1,4-二氢吡啶类烟酰胺辅因子的开发和利用为NAD（H）/NADP（H）工业化运用提供了新的思路。     

手性NAD类似物合成及其辅酶应用

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）是生命体中必不可少的氧化还原辅因子。NAD具有β-NAD和α-NAD两种差向异构体,而大多数NAD依赖酶偏好β-NAD。近年来,已合成大量结构简化的NAD类似物,并探索其作为氧化还原辅因子应用于生物催化反应。通常认为酶天然具有立体选择性,而很多结构简化的NAD类似物不含手性中心,暗示有必要合成手性NAD类似物以评估其性能。本研究拟设计合成手性NAD类似物,并初步探讨部分氧化还原酶利用它们作为辅酶的催化性能。以商品化光学纯的氨基-3-苯基丙酸为手性原料,合成了两对NAD类似物对映体,并用来源于巨芽孢杆菌的突变型细胞色素P450单加氧酶（P450 BM3 R966D/W1046S）和来源于硫化叶菌的突变型葡萄糖脱氢酶（SsGDH I192T/V306I）,测试这些NAD类似物作为辅酶的催化活性。结果发现,P450 BM3 R966D/W1046S利用还原型S构型NAD类似物的催化效率高于对应的R构型NAD类似物;而SsGDH I192T/V306I则对NAD类似物对映体均没有活性。研究初步表明,氨基酸可作为手性原料制备立体构型明确的NAD类似物,而氧化还原酶表现出偏好特定手性NAD类似物的现象,也提示需要合成更多的手性NAD类似物,并系统测试和匹配氧化还原酶及其突变体,以创建出基于辅酶依赖型氧化还原酶的新催化体系。     

保护剂对大肠杆菌重组NAD激酶热稳定性的影响

为了提高烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)激酶的稳定性,研究了几种糖类(葡萄糖、麦芽糖、蔗糖)、醇类(甘油、乙醇、山梨醇)和表面活性剂类(吐温20和司盘20)对NAD激酶热稳定性的影响,通过正交实验得到了一种复合保护剂,并研究了复合保护剂对NAD激酶热稳定性、最适反应温度、p H及储存稳定性的影响。结果表明:麦芽糖、甘油、乙醇、吐温20均能显著提高NAD激酶热稳定性。复合保护剂配方为w(麦芽糖)=0.6%、φ(甘油)=8%、φ(乙醇)=8%、φ(吐温20)=0.6%。55℃时,添加复合保护剂后,NAD激酶半衰期由1.1 h提高到18.4 h,提高了16.7倍;最适反应温度由35℃提高到50℃;p H稳定范围由6.0~9.0扩大到5.5~9.5;在4℃储存28 d后,酶活保留率提高31%。     

氨氧化法生产烟酰胺

介绍烟酰胺的生产与消费情况，阐述氨氧化法生产烟酰胺及其工艺技术。     

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸与氢氧化铝联合佐剂对HBsAg诱导小鼠体液免疫应答的影响

目的研究烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)与氢氧化铝联合佐剂对HBsAg诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法将NAD与氢氧化铝按不同剂量联合后,与不同剂量的HBsAg混合,分别经肌肉注射免疫ICR小鼠1针或2针(间隔2周),每只注射0.2 ml,并设阴性对照组(生理盐水)、单纯抗原对照组、单纯铝佐剂对照组和单纯NAD对照组,共23组,每组6只。分别于末次免疫后2、4、6、8、10、12周采血,分离血清,采用ELISA法检测小鼠血清中抗HBsAg IgG水平;试验期内,观察小鼠是否发生异常状况;14周后,取最佳剂量免疫组及阴性对照组小鼠心、肝、脾、肺组织做组织切片,进行病理分析。结果阴性对照组在各时间点均未检测到抗HBsAg IgG抗体,除联合佐剂12组外,其余各组血清抗HBsAg IgG抗体水平均在末次免疫后第6周达峰值,随着时间的延长,抗体水平呈下降趋势;联合佐剂14组(HBsAg 2μg+氢氧化铝100μg+NAD 2.5μg)产生的抗体水平最高,且持续时间较长,其对HBsAg的体液免疫增强效应显著优于单纯抗原对照组、单纯铝佐剂对照组及单纯NAD佐剂对照组(P<0.05)。试验期内,各组小鼠均未出现异常反应;最佳剂量免疫组(14组)及阴性对照组组织切片观察结果显示,均为发生病变。结论 NAD与氢氧化铝联合佐剂能显著增强HBsAg诱导的小鼠特异性体液免疫应答,在免疫剂量范围内,联合佐剂安全性良好。     

聚瓜氨酸修饰电极测定烟酰胺

通过电聚合的方法在玻碳电极表面形成聚瓜氨酸膜(PCit/GCE),制备了聚瓜氨酸玻碳电极，用于测量烟酰胺(NA),建立了测定烟酰胺的新方法。结果表明，利用PCit/GCE测定烟酰胺有较高的灵敏度，还原峰电流明显增强，烟酰胺检出浓度4.0×10^-7 mol/L。烟酰胺浓度还原峰电流在4.00×10^-6～1.00×10^-4 mol/L范围内有良好的线性关系，线性方程式为i_pc(A)=5.32×10^-7+0.36c(mol/L),相关系数R为0.993 9。PCit/GCE修饰电极测定护肤品和奶粉中的NA,回收率分别为96.1%、97%。     

来那度胺-烟酰胺共晶的制备与表征

采用溶剂研磨法制备了难溶性药物来那度胺与烟酰胺的共晶,并使用差示扫描量热分析(DSC)、热重分析(TGA)、X射线粉末衍射(PXRD)和红外光谱(IR)对其进行了表征。此外,采用密度泛函理论(DFT)和B3LYP/6-31G(d)基组,通过高斯计算对来那度胺和烟酰胺之间的作用力进行了理论分析。计算和实验结果均表明了来那度胺与烟酰胺之间可形成共晶(1∶1)。     

小胶质细胞在AD中的作用机制研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种慢性神经退行性疾病,发病机制复杂,近些年来小胶质细胞介导的慢性神经炎症反应越来越受到人们的重视。小胶质细胞表达范围广,是一种中枢神经系统的免疫细胞,能够识别内源性或外源性中枢神经系统的损伤,从而引发免疫反应。AD患者中β淀粉样蛋白(Aβ)大量沉积也能够诱发小胶质细胞的激活,过度活化的小胶质细胞一方面可以吞噬病原体,另一方面也表达或释放具有细胞毒性的细胞因子和炎症介质,是加重AD的重要原因。本文就小胶质细胞在AD发病机制中的作用及其调控机制作一综述。     

WAXD和DSC法计算β-PP中β晶相对含量的对比研究

采用β成核剂对3种实验室自制的聚丙烯(PP)分别进行熔融共混制成含β晶的PP(β-PP)试样,并经相同的结晶条件对试样进行处理,分别用广角X射线衍射(WAXD)仪和差示扫描量热(DSC)仪计算试样中的β晶相对含量。利用分峰软件Peakfi t对WAXD衍射峰进行处理,根据α晶和β晶的衍射峰强度计算了β晶相对含量;利用TA Universal Analysis软件对DSC熔融曲线进行分析,根据α晶和β晶的熔融峰面积计算了β晶相对含量。计算结果显示,用WAXD法计算的3种β-PP的β晶相对含量分别为48%,43%和18%,而用DSC法计算的分别为27%,11%和5%。用WAXD法测试结晶度时,试样无需受热,而用DSC法时,β晶在加热过程中容易发生β–α转变,导致β晶数量减少、α晶数量增加从而引起计算的β晶相对含量较实际值偏低。     

氨酯的制备

由2－氨基磺酰胺－N，N－二甲基烟酰胺（简称“磺酰胺”）为原料，用热法代替冷法制备烟嘧磺隆的直接中间体2－乙氧基羰基氨基磺酰基－N，N－二甲基烟酰胺（简称“氨酯”）得到较满意的结果。     

萘乙酰胺在碳糊电极上的伏安行为及动力学

采用循环伏安法(Cyclic voltammetry,CV)、计时电流法(Chronoamperometry,CA)和计时电量法(Chronocoulometry,CC)对萘乙酰胺(Naphthaleneacetamide,NAD)在碳糊电极(Carbon paste electrode,CPE)上的电化学行为进行了研究,并求解了相关的电化学动力学参数。实验结果表明,NAD在CPE上的电极过程为一不可逆氧化过程,氧化峰电位(Ep)为0.995 V。在10~1000 m V·s~(-1)扫速范围内,其氧化峰电流与扫速的二分之一次方(ν1/2)呈良好的线性关系,表明了在CPE上NAD的伏安行为是一受扩散控制的过程。同时测定了反应动力学参数:电子转移数n为2、扩散系数D为4.797×10-9cm~2·s~(-1)、电极反应速率常数kf为2.009×10~(-5)s~(-1)。     

测定燕麦β-葡聚糖含量的方法比较

β-葡聚糖含量的检测方法主要有酶试剂盒法、苯酚-硫酸法、刚果红法和荧光法。对比了前三种测定燕麦β-葡聚糖含量的检测方法,通过试验数据的比较,最终采用酶试剂盒法测定β-葡聚糖的含量,平行测定的RSD〈1%,方法的专一性和准确性良好,适合于测定化妆品原料中的β-葡聚糖的含量。     

沉淀聚合法制备烟酰胺分子印迹聚合物微球

以烟酰胺为模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,偶氮二异丁腈为引发剂,乙腈为溶剂,采用沉淀聚合法制备了烟酰胺分子印迹聚合物,通过静态平衡吸附和色谱分析对印迹聚合物进行表征,结果表明,印迹聚合物对烟酰胺分子具有很好的吸附能力和特异识别性。     

新型非水分散体涂料的研究

一、前言非水分散体涂料(简称NAD涂料)的制造是一种独特的技术,目前只有英、美、日等少数几个国家可以生产。分散稳定剂是NAD涂料技术的核心,成败的关键。按分散稳定剂的种类不同,国外的NAD涂料大致分为聚十二羟基硬酯酸型、聚甲基丙烯酸十二烷基酯型等。为了适应当前节约能源和减少污染的需要,我们开展了NAD涂料的研究工作,从一九八一年四月起,经探索和对比,终于初步试验成功了具有自己特点的NAD涂料。     

烟酰胺的市场、用途与生产

烟酰胺,别名为尼克酰胺,烟碱酰胺,3—吡啶甲酰胺,烟碱胺,维生素 PP。是白色结晶粉末,用苯重结晶的烟酰胺为针状晶体,无臭或接近无臭,带苦味。烟酰胺广泛地应用于食品业、饲料业、医药业、农业和工业上,市场价格、生产和销售量都在不断地增加。一、市场情况烟酰胺和烟酸一样分三个等级销售:医药级(USP、NF,Ph.Eur(欧洲医药级)),食品     

2-氯-3-氰基吡啶的合成

烟酰胺与双氧水在冰醋酸中反应生成N-氧化烟酰胺(1),适宜的反应条件是烟酰胺∶双氧水=1∶1.5(mol/mol),冰醋酸的用量为50 ml(烟酰胺用量5.0 g),反应时间为4h,收率80.6%;化合物1再与五氯化磷和三氯氧磷反应合成了2-氯-3-氰基吡啶(2),适宜的反应条件为N-氧化烟酰胺∶五氯化磷∶三氯氧磷=1∶1.7∶5.0(mol/mol),反应时间为2.0h,收率48.9%。     

β-萘硼酸的合成与表征

以β-溴萘为原料,采用格氏试剂法合成了β-萘硼酸,并通过红外、核磁和液相色谱等分析手段对产物进行了表征和分析。考察了格氏试剂和β-萘硼酸合成反应条件,得出格氏试剂法制备β-萘硼酸的较佳条件为:格氏试剂反应时间为3h,反应温度为40℃,硼化试剂为硼酸三甲酯,原料配比n(β-溴萘)/n(硼酸三甲酯)为1/2,亲核取代温度为-20～-22℃,亲核取代时间为3h,反应收率可达80.7%。     

烟酰胺与茶多酚复配对抑制PIG1细胞黑色素的影响

研究了烟酰胺及其与茶多酚复配组分对黑色素生物合成及转运机制的作用,以促黑素细胞激素（α-MSH）诱导黑色素高表达的正常人皮肤黑色素细胞（PIG1细胞）为研究模型,通过NaOH裂解比色法测定PIG1细胞黑色素含量,多巴氧化比色法测定PIG1细胞内酪氨酸酶活性,免疫印迹法（Western blot）检测PIG1细胞内调节黑色素生物合成及转运关键受体酪氨酸酶相关蛋白1(TRP-1)、酪氨酸酶相关蛋白2(TRP-2)、黑皮质素受体1(MC1R)及Rab27a蛋白表达情况。结果表明,当2 g/L烟酰胺+0.5 g/L茶多酚、3 g/L烟酰胺+0.3 g/L茶多酚、3 g/L烟酰胺+0.5 g/L茶多酚复配组合时,对α-MSH诱导黑色素高表达的PIG1细胞中黑色素含量、细胞内酪氨酸酶活性、TRP-1、TRP-2、MC1R及Rab27a蛋白均存在极显著的抑制作用,并强于5 g/L烟酰胺,而当烟酰胺质量浓度为2 g/L时仅对细胞内酪氨酸酶活性存在抑制作用,即复配组合具有更显著的抑制PIG1细胞中黑色素生物合成及转移的作用。     

烟酰胺连续离子交换纯化工艺技术研究

采用3-氰基吡啶化学催化法水解生成烟酰胺,常会产生少量产物烟酸胺,浓缩制粒后生成烟酸,会影响烟酰胺的品质。传统树脂提纯工艺因涉及树脂饱和再生人工操作复杂,难以连续生产,影响分离效率,增加生产成本。运用连续离子交换系统分离纯化烟酰胺水溶液,考察系统水耗、碱耗、酸耗、收率、树脂处理量、产品纯度等最佳参数,验证连续离子交换法替代固定床工艺的可行性,寻找最佳生产配比,为工业系统设计作参考。