固定酶法催化合成生物柴油Ⅰ.大孔树脂固定化脂肪酶的制备

研究了用于生物柴油酶催化的大孔树脂固定化脂肪酶的制备过程,考察和优化了脂肪酶固定化方法及条件。结果表明,采用大孔树脂D3520作载体,以载体涂布法固定化脂肪酶的最适固定化条件为:酶用量为酶∶树脂=0.16∶1(质量比),吸附时间1~3 h,pH值范围为9.0~9.4,固定化温度40℃。酶活力可达91.49 U/g,酶活回收率约为54%。     

树脂吸附法固定Candida rugosa脂肪酶

Candida rugosa脂肪酶具有优良的催化性能,对其进行固定化可以很方便地实现酶的回收和再利用。采用南开大学化工厂生产的4种阴离子交换树脂和4种大孔吸附树脂为载体,对来源于Candida rugosa的脂肪酶进行了吸附固定化,结果表明,以大孔吸附树脂AB-8为载体的固定酶比活性最高。固定化酶制备过程中缓冲液的最适宜pH值为7.2,最佳固定化时间为1 h,载体和酶的最佳质量配比为10∶1。与游离酶相比,固定化后酶活损失大约30%,但稳定性平均约提高60%。     

改性硅藻土固定化脂肪酶催化蓖麻油制备生物柴油

采用改性硅藻土做为载体,用吸附法对脂肪酶进行固定化,对固定条件进行优化,利用固定化脂肪酶催化蓖麻油制备生物柴油,考察反应时间、温度、醇油比及酶用量对转化率的影响和固定化脂肪酶催化合成生物柴油的稳定性。研究表明,硅烷化试剂添加量0.4%、温度30℃和时间4~6 h时固定化脂肪酶的活性最高,在醇油比为9:1,固定化酶用量为蓖麻油质量的4%,温度为60℃,反应时间为10 h的条件下,生物柴油的产率最高,经过3个批次的反应后,其产率都在40%以上,该固定化酶催化合成生物柴油有良好的工业化前景。     

表面活性剂包衣的固定化脂肪酶在有机介质中催化酯化反应

以大孔吸附树脂为载体,将来源于Candidarugosa的脂肪酶用吸附法固定化后用谷氨酸双十二烷基酯核糖醇进行包衣,用于在有机溶剂中催化月桂酸和月桂醇的酯化反应。结果表明,AB 8型大孔吸附树脂为最佳载体,最适有机溶剂为异辛烷,酶固定化后再包衣,酶的比活较未包衣前提高了60%—90%。     

固定化黄孢原毛平革菌木素过氧化物酶的研究

用大孔吸附树脂进行黄孢原毛平革菌来源的木素过氧化物酶固定化试验,筛选出固定化效果较好的XAD7HP大孔树脂,研究了其固定化条件。结果表明,当树脂1.0g,酶液pH4.5,加酶量87.2U,吸附温度25℃,吸附4h,戊二醛质量分数0.2%,戊二醛处理时间120min,可获得最佳的固定化效果,固定化酶活力可达到16U/g(对载体)。     

溶胶-凝胶包埋固定化酶的研究

介绍了溶胶-凝胶(sol-gel)包埋法制备固定化酶的基本过程和影响因素,着重论述了S iO2、有机改性硅胶和有机/无机杂化硅胶三类溶胶-凝胶基质材料制备固定化酶的特性和在催化反应中的应用,对溶胶-凝胶包埋法制备高性能固定化酶的发展前景予以展望。     

膜材料的亲疏水性对固定化脂肪酶的影响

用吸附法固定脂肪酶时,膜材料的亲疏水性对固定化酶的量、比活力和活力稳定性等有很大影响.今以柱状假丝酵母脂肪酶和猪胰脂肪酶为研究对象,选取了8种亲疏水性不同的膜材料(醋酸纤维素、聚丙烯腈、聚酰胺、聚砜、聚醚砜、聚偏二氟乙烯、聚丙烯和聚四氟乙烯)作为固定化载体,用吸附法制备了固定化脂肪酶膜.研究结果表明,强疏水性聚四氟乙烯和聚丙烯膜对两种酶的吸附量都比较大,且固定化酶的比活力和活力回收率比较高,聚四氟乙烯固定化柱状假丝酵母酶比游离态酶的半衰期提高了6倍以上.强亲水性醋酸纤维素膜对猪胰脂肪酶的吸附量比聚四氟乙烯高,但是固定化酶的比活力、活力回收率比强疏水性膜低,而接触角在40°～50°的聚酰胺膜和聚砜膜的吸附量最小.因此吸附法制备固定化脂肪酶膜,选择聚丙烯膜和聚四氟乙烯膜是合适的,制备的优化条件为吸附温度25℃,酶溶液的pH为7.5,吸附时间10 h.     

CALB脂肪酶的固定化及其拆分2-辛醇的研究

以AB-8、HZ-841、HZ-802三种大孔树脂做载体,采用物理吸附法,制备出固定化南极假丝酵母脂肪酶(CALB),并用其进行了拆分2-辛醇的研究。其中AB-8树脂做载体拆分效果最佳,其蛋白吸附量为37.94 mg/g树脂,吸附率94.86%,转酯化酶活3 000 U/g固定化酶,对映体选择性E=104。单因素优化实验得到的最佳拆分条件为:温度40℃,加酶量2.67 g/L,底物醇浓度3.76 mol/L。在该条件下,产物转化率可达50%,e.ep为97.8%。固定化pH在5.0~9.0内对拆分效果无显著影响。     

Biodiesel production using immobilized enzyme-current state and future perspective

近年来由于化石燃料的全球性短缺、原油价格的过度上涨和环境问题的加剧致使生物柴油的生产迅速增长。生物柴油生产的关键反应是化学或生物催化的转酯反应,酶催化的转酯反应与化学催化相比有相对节能、副产物甘油易回收及适合高含量游离脂肪酸油脂作为底物等明显优势。本文综述了固定化脂肪酶生产生物柴油的现状及最新进展,包括生物柴油的原料、脂肪酶的来源、酶的固定化技术、甲（乙）醇及甘油对脂肪酶的失活作用,展望了固定化脂肪酶生产生物柴油的未来前景。     

生物酶法制备生物柴油研究现状及展望

就生物酶法制备生物柴油的研究现状进行了扼要的综述,探讨了固定化脂肪酶法、液体酶法和全细胞催化法制备生物柴油应用基础研究的进展及发展前景,指出影响生物酶法生产生物柴油产业化的因素及解决措施.     

辣根过氧化物酶固定化方法的探索及分析应用

1前言固定化酶是20世纪60年代开始发展起来的一项新技术，是酶工程的主要内容，它的发展很快。近年来人们已开始转向固定化酶在工业、医学、化学分析、环境保护、能源开发等方面的应用研究。目前，国际上采用的酶的固定化方法包括：吸附法、健合法、包埋法和交税法等。吸附法制备的固定化酶会导致酶的较大程度的失活。为了克服酶的流失、渗漏，提高酶的活性收率，本实验设计出了两种新的固定化方法：氧化铝吸附一海藻酸钠包埋法及氧化铝吸附-戊二醇交联一海藻酸钠包埋法，以辣报过氧化物酶（HRP）制备固定化酶，并应用于混样中L－Tyr和雨…     

多孔玻璃珠固定化脂肪酶及其催化合成生物柴油

以多孔玻璃珠为载体,采用共价法对假丝酵母99-125脂肪酶进行了固定,对比了固定化酶与游离酶的最适反应温度、pH值以及热稳定性.并以所制备的固定化酶为催化剂,在微水体系中利用菜籽油合成生物柴油,考察了溶剂量、体系水含量、甲醇等因素对固定化酶催化性能的影响,研究了固定化酶的操作稳定性.     

生物柴油制备方法的应用研究进展

生物柴油以其优良的环境友好性和可再生性引起广泛关注,但较高的生产成本是其商业化生产和应用的障碍之一。综述了生物柴油的化学转酯化法和以游离脂肪酶、固定化脂肪酶、全细胞为催化剂的生物转酯化法的工业研究进展,同时还指出了采用生物转酯化法制备生物柴油时面临的一些问题。     

固定化生物印迹假丝酵母脂肪酶的制备研究

将生物印迹和固定化酶方法结合,简化了印迹酶的制备流程,优化了固定化印迹脂肪酶的制备条件,筛选了最优印迹分子橄榄油,探讨了印迹最适pH值、印迹分子橄榄油的用量、印迹时间和载体离子型树脂的种类等影响因素对固定化印迹脂肪酶酯化效果的影响,得到了其制备的最佳工艺:印迹pH值8.0,橄榄油100 mg,1 mL乙醇为助溶剂,100 mg吐温20为表面活性剂,加入2 g 214型离子交换树脂,印迹时间为20 min。此工艺条件下制备得到的固定化印迹脂肪酶在反应中的酯化效果最高,固定化印迹酶的酯化效果是游离酶的4.35倍,固定化印迹酶催化酯化反应合成L-抗坏血酸棕榈酸酯后,最大产物浓度约为15.58 g?L~(-1),最佳转化率可达63.3%。     

海藻酸钠明胶协同固定化黑曲霉脂肪酶

以海藻酸钠明胶为复合载体,采用包埋法制备固定化黑曲霉脂肪酶,考察了海藻酸钠、明胶浓度等因子对固定化效果的影响,比较固定化酶和游离酶对温度、pH等条件的稳定性。结果表明,制备固定化黑曲霉脂肪酶的最优条件为:海藻酸钠、明胶浓度分别为1.25%和0.5%,CaC l2浓度为10%,给酶量为450 IU/g;固定化酶最适温度为35℃,最适pH为9.0,常见有机溶剂和金属离子对固定化酶的活力影响较小。     

大孔树脂D380固定化硫酸软骨素裂解酶

目的以大孔树脂D380为载体,戊二醛为交联剂,进行硫酸软骨素裂解酶(ChSase)的固定化,并考察固定化酶的酶学性质。方法分别考察加酶量、吸附温度、吸附时间、吸附pH值、戊二醛交联浓度、交联时间及交联温度对ChSase固定化效果的影响,并分析该固定化酶的最适反应温度、最适反应pH值、米氏常数(Km)及其操作稳定性。结果ChSase的最佳固定化条件为:加酶量150U/g树脂,吸附温度15℃,吸附时间6h,吸附pH值7.0,戊二醛交联浓度0.01%,交联时间3h,交联温度4℃。以此条件制备的固定化酶,其酶结合效率可达79.1%。该固定化ChSase的最适反应温度为45℃;最适反应pH值为7.0;Km达1.46×10-1g/L,较游离酶高;具有较好的操作稳定性。结论以大孔树脂D380为载体固定化ChSase是可行的,所得固定化酶有较高的使用效率和稳定性,适合于工业化生产。     

固定化脂肪酶催化酯交换制备生物柴油的研究进展

生物酶法生产生物柴油具有化学催化法不可比拟的优越性,是工业化生产的发展方向。介绍了固定化脂肪酶在催化油脂酯交换制备生物柴油方面的应用,对影响酯交换反应的脂肪酶源、底物摩尔比率、酰基受体、水含量、反应温度、副产物等因素进行了综述。     

固定化酶与离子交换树脂

本文介绍了酶的固定化方法、酶与载体之间可以共价、吸附、包埋、交联及形成微胶囊等多种方式进行结合。离子交换树脂可作为多种酶的载体。为提高固定化酶的活性及稳定性,可将离子交换树脂进行改性。     

脂肪酶催化非食用植物油制备生物柴油的过程优化

以麻疯树油、亚麻油、乌柏油为原料油,采用固定化脂肪酶Lipozyme TL IM,在3.0 g油、1 mL正己烷、醇油摩尔比为3.5∶1、固定化酶质量为油质量20%的条件下进行生物柴油的制备,通过脂肪酸甲酯产率和组成分析,以考察生物柴油制备的影响因素,进行反应时间优化.结果表明,酶的催化作用对脂肪酸组分不存在选择性,且...     

脂肪酶固定化及催化酯化反应

本研究报道了利用吸附法和化学键合法将白地霉脂肪酶固定化于五种载体上，用吸附法固定化的脂肪酶保持了高的活性。在有机溶剂中，固定化酶催化了长链脂肪酸与醇的酯化反应，酯化率可达９４％。固定化过程并未改变脂肪酶的选择性。固定化脂肪酶可重复使用。