As2O3联合H22源exosome的抗肿瘤作用研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）联合小鼠肝癌（H22）源exosome对小鼠皮下种植性肝癌（H22）模型的抗瘤作用。方法：超速离心及密度梯度离心法提取exosome,Bradford法蛋白定量;建立BALB／c小鼠皮下荷瘤模型．实验分4组：空白成瘤对照组、As2O3组、As2O3联合exoeome组和exosome组。观察As2O3、exosome、及其联合应用的体内抗瘤效应;监测在体肿瘤的生长情况;计算抑瘤率、生存率：免疫组织化学法检测肿瘤组织中浸润的CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞。结果：与空白成瘤对照组比较,As2O3组、及其与exosome联合组的肿瘤生长明显放缓（P〈0．05）。其抑瘤率分别为44．58％、66．27％。As2O3组及As2O3联合exosome组肿瘤组织中浸润的CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞明显增加（P〈0．05）。结论：As2O3与exosome联合应用对小鼠皮下种植性实体性肝癌（H22）有协同治疗效应。     

醒脑静注射液对呼吸机相关性肺炎患者免疫因子和临床预后的影响

目的：研究呼吸机相关性肺炎（ventilator assoeiated pneunionia．VAP）病人血清C反应蛋白（C roactive protein,CRP）,白细胞介素-6（interleukin-6．IL-6）．肿瘤坏死因子α（Tumor Necrosis Factor-α TNF-α）的变化及其与机械通气（mechanical ventilation,MV）时间的相互关系,探讨醒脑静注射液对VAP患者的治疗作用及其与临床预后的关系。方法：61例VAP病人随机分为两组。治疗组（基础治疗辅助醒脑静注射液治疗组）,对照组（基础治疗组）,治疗前,治疗后第1、3、5、7天测定血清CRP,IL-6,TNF—α的动态变化。比较治疗前,治疗后第3dX线胸片变化。统计MV时间（h）和脱机成功率：结果;61例VAP病人治疗前血清CRP,IL-6,TNF-α较正常水平均明显升高。治疗组血清CRP在治疗后第7d为（31．31±11．52）mg／L,较对照组（56．09±16．82）mg／L明显下降（P〈0.05）。治疗后第5d血清IL-6为（199．68±37.76）ng/L和TNF-α为（53．60±23．22）ng/L,较对照组IL-6（229．67±30．21）ng／L和TNF-α（6775±1761）ng／L,开始下降（P〈0.05）;治疗后第7dIL-6（161.66±22．49）ng/L和TNF—α（36．88±1706）ng/L,较对照组IL-6（212．37±26．84）ng/L和TNF-α（53．56±15．36）ng/L明显p降（P〈0．05）。治疗组MV时间（85．48±20．89）h,较对照组（100．75±28．70）h缩短（P〈0．05）.治疗组3d后x线胸片改善率为92．86％（26／28）,脱机成功率为92．86%（26／28）,均高于对照组（P〈005）,治疗组,治疗后第7d血清CRP,IL-6和TNF—α与机械通气时间呈正相关,结论;醒脑静注射液在辅助VAP综合治疗中,通过抑制过度的炎症反应,部分恢复机体免疫功能,有助于减弱VAP后继发多脏器功能损害,从而缩短MV时间,改善VAP预后,可以在临床中使用。     

缺氧诱导因子1α对大鼠骨髓间充质干细胞核心结合因子α1表达的影响

目的：研究体外低氧实验中缺氧诱导因子1α（HIF-1α）对大鼠骨髓间充质干细胞核心结合因子α1（Cbfα1）表达的影响。方法：将体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞分别置于常氧（含有5％c02的培养箱中）和低氧（含4％02、5％CO2和91％N2的三气培养箱中）中培养,分别于1d、3d、5d和7d用实时荧光定量PCR检测细胞内HIF-1α和CbfalmRNA的表达水平：用siRNA抑制细胞HIF-1αmRNA表达后用Westernblot法检测HIF-1α和Cbfal蛋白表达。结果：与常氧组相比,低氧组细胞HIF-1αanRNA的表达均增加（1d、3d、5d和7d：P〈0．05）,且3d达到最高峰;细胞CbfalmRNA的表达明显下降,3d尤为明显（P〈0．05）：低氧组细胞转染siRNA干扰HIF-1α表达后,能促进细胞内Cbfcd蛋白的表达（P〈0．05）。结论：低氧微环境抑制骨髓间充质千细胞的成骨向分化,细胞内HIF-1α反向调节Cbfal的表达。     

大鼠中重度创伤性脑损伤后β-EP、CD4^＋、CD8^＋和IL-2的变化及其意义

目的：通过观察大鼠创伤性脑损伤后血浆β-EP、CD4^＋、CD8^＋和IL-2的动态变化,了解脑创伤后机体细胞免疫变化。方法：（1）采用气体冲击致大鼠中重度脑损伤模型;（2）流式细胞术检测血浆中CD4^＋、CD8^＋的含量;放射免疫法（RIA）测定血浆中β-EP的含量;酶联免疫吸附试验（ELISA）测血浆中IL-2的含量。结果：CD4^＋与IL-2含量在TBI后6h显著降低,CD4^＋和IL-2分别于1d、3d达到谷值;β-EP、CD8^＋6h显著升高,分别于6h、1d达到峰值。CD4^＋与IL-2呈直线正相关性;CD4^＋和IL-2降低,β-EP和CD8^＋升高,引起免疫平衡紊乱,表现为细胞免疫功能抑制。     

FTY720抑制小鼠植骨气囊模型中聚乙烯磨损颗粒诱导的骨溶解效应

目的：在小鼠植骨气囊动物模型中,观察外源性FTY720（Hngolimod,芬戈莫德）对骨溶解的抑制作用。方法：构建小鼠植骨气囊模型,将构建好气囊模型的小鼠分成4组：空白组（气囊内注人生理盐水、腹腔注射DMSO）,FTY720组（气囊内注入生理盐水、腹腔注射FTY720）,聚乙烯颗粒组（气囊内注入聚乙烯颗粒、腹腔注射DMSO）,聚乙烯颗粒＋FTY720组（气囊内注入聚乙烯颗粒、腹腔注射FTY720）。4周后处死小鼠后取气囊组织进行HE染色观察炎症反应和炎症细胞渗出情况,取组织匀浆行Elisa法检测气囊组织中IL-6和TNF-α浓度、取骨组织行电镜扫描观察骨片吸收情况,取组织匀浆行RT—PCR检测破骨细胞相关基因抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）mRNA表达水平。结果：①HE染色后炎症细胞渗出量,聚乙烯颗粒＋FTY720组（4892±457）与聚乙烯颗粒组（4931±572）比较无统计学差异（P〉0．05）,[TY720组（2013±375）与空白组（2151±310）比较无统计学差异（P〉0,05）;含有聚乙烯颗粒组高于无聚乙烯颗粒组（P〈0．05）。②Elisa法检测炎症因子（IL-6、TNF-α）浓度,聚乙烯颗粒＋FTY720组[（130．13±3．22）、（129．22±5．02）]与聚乙烯颗粒组[（149．22±6．09）、（140．52±2．68）]比较无统计学差异（P〉0．05）;FTY720组[（68．24±2．83）、（82．88±5．34）]与空白组[（69．51±2．31）、（74．15±4．64）]比较没有统计学差异（P〉0．05）;含有聚乙烯颗粒组高于无聚乙烯颗粒组（P〈0．05）。③扫描电镜检测骨片吸收面积与视野面积百分比,聚乙烯颗粒＋FTY720组[（10．21±1．78）％]低于聚乙烯颗粒组[（17．79±2．56）％],FRY720组[（1．82±1．37）％]低于空白组[（6．27±2．11）％];并且含有聚乙烯颗粒组高于无聚乙烯颗粒组（P〈0．05）。④破骨细胞相关基因TRAPmRNA表达量,聚乙烯颗粒＋FTY720组（0．53±0．04）低于聚乙烯颗粒组（0．74±0．05）,FTY720组（．22±0．03）低于空白组（0．38±0．04）;而含有聚乙烯颗粒组高于无聚乙烯颗粒组（P〈0．05）。结论：在小鼠植骨气囊动物模型中,FTY720能有效抑制聚乙烯颗粒诱导的局部骨溶解作用。     

中医气虚血虚模型与造血干／祖细胞衰老

目的：构建中医“气虚血虚”模型,探讨造血干／祖细胞（HSC／HPC）衰老及检测相关生物学指标,为阐释中医“气虚血虚”的现代生物学机理和探讨“补气生血”药物的作用提供理论与实验依据。方法：6．5Gy的X射线一次性全身辐射C57小鼠,辐射6h内腹腔注射盐酸苯肼40mg/kg,建立“气虚血虚”模型（即骨髓抑制与贫血模型）,分别在第3、7、14、28d观察小鼠的行为学变化、外周血象、骨髓单个核细胞总数、免疫磁性分选法分离鉴定小鼠Sca-1＋HSC／HPC、检测骨髓单个核细胞数（MNCs）与造血干／祖细胞（Sca-1^＋HSC／HPC）数量、衰老SA-β-半乳糖苷酶染色检测Sca-1^＋HSC／HPC阳性率、Sca-1^＋HSC／HPC细胞周期分布、脾指数与脾脏病理变化。结果：与对照组相比,在各时间段上模型组小鼠均表现出精神萎靡,行为迟缓,进食量下降等中医“气虚血虚”症候、外周血象各项指标降低,MNCs数下降,Sca-1^＋HSC／HPC数下降、SA—β-半乳糖苷酶染色阳性百分率（11．82±3．24）％,高于对照组[（2．07±2．21）％,P〈0．05]、细胞周期G1期阻滞,G0／G1期比例为（86．70±3．79）％,高于对照组[（69．31±3．07）％,P〈0．05],S期比例减少、脾指数降低和脾脏退行性变化显著。结论：辐射和盐酸苯肼并用法可成功的建立中医“气虚血虚”动物模型,并导致造血干／祖细胞衰老。     

孕期微量染镉对雄性胎鼠性腺分化发育影响的研究

目的：探讨孕期微量染镉对胎鼠睾丸分化发育的影响及作用机制。方法：SD孕鼠16只,随机分为镉组（A组）、己烯雌酚组（B组）、镉加他莫静酚组（C组）和正常对照组（D组）,每组4只。A组于孕期第9、11、13天腹腔注射氯化镉1．5H影（kg．d）,B组于妊娠第9至17天皮下注射已烯雌酚10％g／（kg．d）,C组注射氯化镉的同时给予雌激素受体拮抗剂他莫昔酚50mg／（kg．d）,D组注射与镉等体积生理盐水。妊娠第18天,削商产取雄性胎鼠睾丸作光、电镜观察;免疫组化测定各组胎鼠睾丸间质细胞类固醇激素合成急性调节蛋白（StAR）表达水平;RT—PCR法测定曲勒氏管抑制物（MIS）表达量。结果：光镜下A组和B组睾丸生精小管内支持细胞排列紊乱,间质成分增生,C组未见明显的形态学改变;电镜下A组和B组均可见支持细胞、生殖母细胞及间质细胞线粒体肿胀、内质网扩张以及间质细胞内脂滴堆积,C组超微结构退变轻于A组和B组;A组和B组间质细胞中StAR阳性产物表达均显著低于D组（P〈0．01）,C组StAR阳性产物表达虽低于D组,其差异没有统计学意义（P〉0．05）,但却明明显高于A组（P〈0．05）;各组间MIS表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：孕期微量镉暴露可影响雄性胎鼠性腺的分化与发育,且镉具有雌激素样作用．     

低强度激光照射对吸毒者β-EP及血浆皮质醇含量的影响

本研究着重观察低强度激光血液疗法对生理脱毒后稽延性症状患者β-EP（β-内啡肽）及血浆皮质醇含量的影响。方法：应用RIA法测定患者（60例，实验组，分三组）分别在治疗前（生理脱毒后7d-15d）和治疗后测定血清中β-EP及血浆皮质醇的含量，并将实验组分别与对照组比较，观察激光治疗与常规治疗的疗效的差异。结果：（1）对照组治疗后其血清中β-EP的含量无显著变化（P〉0．05）：激光血管内照射组停照后血清中β-EP的含量较照前均显著增加（P〈0．01）：鼻腔照射组β-EP的含量较照前也有较显著增加（P〈0．05）但不如激光血管内照射组。（2）治疗后对照组血浆皮质醇较治疗前无明显变化（P〉0．05），而实验组1较治疗前显著降低（P〈0．01），实验组2较治疗前也有较明显降低P〈0．05）但不如实验组1。     

单倍型异基因造血干细胞-脐带间充质干细胞联合移植治疗1例急性白血病

目的研究急性粒细胞白血病异基因造血干细胞-人脐带源间充质干细胞（hUG—MSC）联合移植效果。方法急性髓性白血病-M2,供者为其胞兄,HLA单倍型相合,移植物为经粒细胞集落刺激因子（Granulocyte Clony—Stimulating Factor,G—CSF）动员的骨髓以及外周血造血干细胞,加入分离、扩增的hUC—MSC。移植物抗宿主病（Graft—Versus—Host Disease,GVHD）预防采用环孢菌素A＋ATG^＋霉酚酸酯＋短程甲氨喋呤和CD25单抗。结果输注供者的MSC总数和CD34细胞数分别为7．92×10^8/L和3．78×10^6／L。中性粒细胞大于0．5×10^9／L和血小板大于20×10^9／L的时间分别为14d和15d。24d嵌合体100％,40d左右出现Ⅰ度aGVHD,治疗后好转,未出现其他严重并发症。结论异基因造血干细胞-人脐带源间充质干细胞（hUC—MSC）联合移植安全简便,可加速造血功能恢复。     

低强度激光血液疗法对吸毒者细胞免疫的影响

为了观察低强度激光血液疗法对吸毒者细胞免疫的影响，我们对郑州市戒毒所60例吸毒戒断者进行了临床观察，测定其红细胞免疫功能和细胞免疫功能。结果显示：低强度激光血液疗法能使吸毒者细胞免疫功能明显增强，C3h受体花环率和CD4^＋细胞百分率明显增高（P〈0．01）。     

不同强度脉冲电磁场对去卵巢大鼠股骨骨密度的影响

目的：建立去卵巢大鼠骨质疏松模型,通过采用不同治疗强度脉冲电磁场（PEMFs）干预去卵巢大鼠,观察各组大鼠的股骨骨密度的变化,初步确定治疗骨质疏松的最适的治疗强度。方法：按随机的分组原则用密闭信封法将雌性3月龄sD大鼠50只分为5组：SHAM对照组10只、OVX对照组10只、OVXⅠ组10只、OVXⅡ组10只、OVXⅢ...     

高压氧联合神经阻滞治疗带状疱疹后遗神经痛

目的:观察高压氧联合神经阻滞治疗带状疱疹后遗神经痛(post-herpetic neuralgia,PHN)的疗效.方法:100例PHN患者随机分为对照组50例(单纯神经阻滞治疗+约物治疗),治疗组50例(高压氧+神经阻滞治疗+药物治疗);治疗3个疗程后,观察两组患者一般状态及其积分;并采用视觉模拟评分法(VAs),分...     

局部糖皮质激素联合氦氖激光对急性化脓性中耳炎的疗效观察

目的:观察局部糖皮质激素联合氦氖激光治疗急性化脓性中耳炎的临床疗效。方法:将临床确诊的81例(81耳)急性化脓性中耳炎患者随机分成实验组和对照组。其中,实验组(40例)在给予左氧氟沙星滴耳液5ml+与布地奈德混悬液2ml混合均匀后滴耳的同时配合氦氖激光局部照射及全身抗生素治疗;对照组(41例)则仅给予左氧氟沙星滴耳液滴耳并联合氦氖激光局部照射及全身抗生素(同实验组)治疗。10日为一疗程,观察两组疗效。结果:1、实验组总有效率为95%,对照组总有效率为82.8%,两组间有统计学意义。2、两组治愈时间分别是7.6±1.5天和10.6±1.6天,经统计学分析,两组间有统计学意义(P0.05)。结论:局部糖皮质激素联合氦氖激光治疗急性化脓性中耳炎较常规治疗方法有更好的疗效,且可明显缩短病程。该治疗方法简单可行,疗效高,值得推广和应用。     

纳洛酮对大鼠中重度创伤性脑损伤后细胞免疫功能影响的实验研究

目的：通过观察大鼠创伤性脑损伤（traumatic brain injury,TBI）后纳洛酮治疗前后血浆β-EP、CD4＋、CD8＋和IL-2的动态变化,探讨纳洛酮对大鼠TBI后细胞免疫功能变化的影响及作用机制。方法：采用气体冲击致大鼠中重度脑损伤模型;流式细胞术、RIA、ELISA检测血液中CD4＋、CD8＋、β-EP、IL-2的变化。结果：TBI大鼠经纳洛酮治疗后,血浆中CD4＋和IL-2含量升高,β-EP和CD8＋则降低。大、小剂量纳洛酮治疗在相应时间点比较有显著性差异（P〈0.05）。结论：纳洛酮可通过降低TBI大鼠血浆中β-EP,调节TBI后应激紊乱,竞争性抑制β-EP对免疫细胞受体的作用,从而使CD4＋、CD8＋和IL-2水平趋于正常,恢复免疫平衡,起到治疗与保护作用。     

初探糖尿病伴发抑郁症患者的护理对策

目的：初步建立糖尿病伴发抑郁症患者的心理护理干预方案。方法：①将患者随机分为干预组20例和对照组22例;②按已定的干预方案对干预组患者给予8周的护理干预,对照组患者接受常规护理;③入院时、8周时、随访6个月时,分别用简易应对方式问卷（SCSQ）、抑郁自评量表（SDS）来评价干预组和对照组患者的抑郁状态、生活质量和应对方式。结果：干预前2组患者抑郁、生活质量评分差异无显著性（P〉0.05）,干预8周、随访6个月后干预组患者抑郁评分低于对照组（P〈0.01）。结论：以支持性心理护理和认知治疗为基础的护理干预能减轻糖尿病伴发抑郁症患者的抑郁状态,改善应对方式,提高生活质量。     

系统性红斑狼疮患者血液中PRDM1和CD138＋浆细胞表达的研究

目的;探讨系统性红斑狼疮（SiE）患者和正常人之间PRDM1和CD138＋浆细胞的差异。方法：40例SLE患者血液标本,30例健康体检血液标本,抽取RNA、利用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术研究PRDM1基因表达;收集外周血单个核细胞,利用流式细胞技术研究CD138＋浆细胞量的差异。结果：SLE患者组血液中的P...