TNF-α对3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性的影响及罗格列酮的干预作用

目的观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性的影响及罗格列酮的干预作用。方法采用不同浓度TNF-α(5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)处理3T3-L1脂肪细胞48h、采用20μg/ml TNF-α处理不同时间(6h、12h、24h、48h)及罗格列酮(10μmol/ml)预处理6h的3T3-L1脂肪细胞与20μg/mlTNF-α作用48h;以2-DG摄入法检测细胞对葡萄糖的摄取率。结果与对照组比较,5μg/L、10μg/L和20μg/LTNF-α作用各组分别使葡萄糖摄取率减少了25%(P<0.01)、43%(P<0.01)、58%(P<0.01);20μg/L TNF-α处理3T3-L1脂肪细胞6h、12h、24h、48h使葡萄糖的摄取率分别减少10%(P<0.05)、28%(P<0.01)、40%(P<0.01)、57%(P<0.01),罗格列酮预处理能使20μg/ml TNF-α组脂肪细胞对葡萄糖的摄取率增加37%(P<0.01)。结论TNF-α以浓度和剂量依赖方式导致脂肪细胞胰岛素抵抗;罗格列酮能明显改善此作用。     

汉防己甲素对兔眼角膜基质细胞增殖和凋亡作用的比较研究

目的：探讨汉防己甲素（Tet）对离体兔眼角膜基质细胞抑制增殖作用,及其对增殖率和凋亡率的作用程度比较。方法：选用原代及传代兔角膜基质细胞,实验组加入含不同浓度Tet的培养液,对照组加入含等量PBS的培养液。通过免疫细胞化学技术了解细胞的PCNA表达来枪测细胞增殖情况,计算增殖率并测定变化;流式细胞仪（FCM）测定细胞周期和凋亡率的变化。结果：Tet质量浓度为2μg／ml,3μg/ml,4μg／ml时,作用48h,随着Tet浓度的增大,PCNA阳性细胞数明显减少,角膜基质细胞的增殖率呈递减趋势,存在剂量一效应关系（P〈0．05）;FCM结果显示,随着Tet的浓度增大,实验组G0／G1期细胞增加,细胞删期阻滞在G1期,见细胞凋亡峰,凋亡率也随浓度增大而升高（P〈0．05）;Tet对增殖率影响的曲线斜率绝对值明显大于对调亡率作用的斜率绝对值,结论：Tet对角膜基质细胞的PCNA的表达具有明显抑制作用,随Tet浓度增大,角膜基质细胞的增殖率下降,Tet通过将细胞阻滞在G1期而发挥其抗增殖作用,且存在剂量效应关系;Tet诱导细胞凋亡,且也存在剂量效应关系,随浓度增大,凋亡率增加;在2μg/ml．3μm/ml,4μg／ml的浓度内,Tet对角膜基质细胞同时具有抑制增殖和诱导凋亡作用,但以抑制增殖作用为主.     

ALA联合HPD光动力学治疗对C6胶质瘤细胞细胞内钙离子变化的研究

目的:研究ALA、HPD及ALA联合HPD光动力学治疗对C6胶质瘤细胞细胞内钙离子变化,方法:以不同剂量ALA(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)、HPD(1μg/ml、2μg/ml、3pg/ml、4μg/ml、5μg/ml)及不同剂量组合ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞,应用Fluo-3AM为细胞内钙离子荧光指示剂,以激光共聚焦显微镜测定对照组及光动力学组照光后培养24小时活细胞细胞内钙离子含量,及测定单激光及对照组、光动力学治疗组照光前36秒及照光20分钟至停照光后20-100分钟细胞内钙离子浓度的动态变化,每12秒测定一次.结果:空白对照组、单激光、单加光敏剂组活C6胶质瘤细胞显示钙离子荧光值,在120分钟内变化较小.而光动力学治疗组,初照光5-15分钟内荧光明显慢慢增强,以后就逐渐下降,光敏药剂量大的初5-10分钟内荧光亮度上升很快,以后下降也快,可下降为0,剂量越大变化越明显,且光敏剂ALA较HPD更明显.二光敏剂联合组以上反应更明显,HPDl-2μg/ml联合ALA40-60μg/ml与HPD 5μg/ml组动态图相似.结论:通过本实验可推测光动力学作用后细胞内钙离子超载可能在细胞凋亡及死亡中发挥重要作用.二光敏剂联合可提高疗效,降低HPD光敏剂用量,减少皮肤光毒付反应,HPDl-2μg/ml联合ALA40-60μg/ml是较合适的剂量.     

ALA联合HPD光动力学治疗对C6胶质瘤细胞影响的研究

目的通过细胞学水平研究确定ALA配合小剂量HPD激光光动力疗法促使肿细胞凋亡及死亡的光敏药用药剂量及与两者单独使用的差别.方法以不同剂量的ALA(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ ml、80μg/ ml、160μg/ ml)、HPD(1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、5μg/ml)、两者联合与C6胶质瘤瘤细胞一起培养,随后以630nm半导体激光200mW/cm2,照射肿瘤细胞,照射20分钟,及与不用光敏剂单照激光、单用光敏剂不照光、不用光敏剂不照激光空白对照组比较.以流式细胞仪及倒置显微镜、电镜观察促使肿瘤细胞凋亡或死亡的差别,寻找促使肿瘤细胞凋亡或死亡的最小合适剂量.结果ALA40μg/ml配合HPD2.5μg/ml与C6胶质瘤细胞同时培养,630半导体激光200mW/cm2,照射20分钟组从倒置显微镜及电镜形态学观察及流式细胞仪测定是能达到较佳的细胞凋亡的最小光敏剂剂量.单纯ALA-PDT组中能达到小鼠C6胶质瘤细胞明显凋亡的最小剂量是ALA(80μg/ml),单纯HPD-PDT组中能达到小鼠C6胶质瘤细胞明显凋亡最小剂量是HPD(5μg/ml).结论ALA40mg/kg配合HPD2.5mg/kg,630半导体激光200mW/cm2,照射20分钟是能达到小鼠C6胶质瘤细胞明显凋亡的最小光敏剂剂量.     

不同浓度的碘化丙啶染色对细胞周期分布的影响

研究不同浓度的碘化丙啶(PI)染色对细胞周期分布的影响。293T细胞经0、2、4、6Gy的X射线照射后,用浓度分别为5、10、20、50μg/ml 的PI染色后,流式细胞仪检测细胞周期的分布情况。0、2、4、6 Gy时,不同浓度PI染色时G1/G0期的比例变化如下：(35.90±0.17)至(37.65±0.42),(18.05±0.40)至(19.08±2.01),(4.24±1.31)至(5.89±1.08),(2.88±0.16)至(4.04±1.06),G2/M 期的比例变化如下：(13.36±0.36)至(15.39±0.33),(54.56±0.34)至(58.98±1.46),(83.92±4.50)至(84.80±1.43),(92.29±1.56)至(92.89±1.49);S期的比例变化如下：(45.63±0.97)至(49.74±0.16),(22.45±0.35)至(27.04±0.36),(10.05±0.79)至(11.29±0.11),(3.71±1.06)至(4.99±1.01)。在同一照射剂量下,不管是G1/G0期、S期还是G2/M期,不同浓度PI染色对细胞周期分布没有明显差异( P>0.05);但不管5、10、20μg/ml还是50μg/ml 的PI染色,随着照射剂量的增加,G2/M期细胞比例明显增加(P<0.01)。随着照射剂量的增加,G2/M期细胞比例明显增加;但对于同一照射剂量,不同浓度PI染色对细胞周期分布没有明显差异,做周期分布实验时选择5μg/ml的PI染色即可。     

油酸在人肝癌HepG2细胞内转化生成9,10-二羟基硬脂酸

目的以人肝癌细胞株HepG2验证油酸转化生成9,10-二羟基硬脂酸(DHSA)途径。方法将HepG2细胞消化传代接种于24孔培养板,24h贴壁后分别加入含50μmol/L和100μmol/L油酸的无血清MEM培养液,培养24h和48h后测定细胞裂解液及上清液中DHSA和油酸(OA)的含量。结果添加50μmol/L和100μmol/L油酸培养24h后,HepG2细胞裂解液中DHSA浓度分别为(3.29±0.38)ng/ml和(6.33±1.99)ng/ml,无油酸对照组为(2.08±0.61)ng/ml;OA含量分别为(645.07±142.81)ng/ml和(1341.6±349.69)ng/ml,对照组为(359.68±12.06)ng/ml;上清液中DHSA和OA含量亦显著高于对照组。培养48h后,油酸组细胞裂解液中OA含量仍高于对照组,DHSA含量仅100μmol/L油酸组高于其他组;细胞上清液中OA含量仅100μmol/L油酸组高于对照组,DHSA含量各组间无显著差异。结论油酸可在HepG2细胞内代谢生成DHSA。     

ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞基因P16及P53变化的研究

目的研究ALA、HPD及ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞瘤基因P16及P53变化.方法以不同剂量ALA(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)、HPD(1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、5μg/ml)及不同剂量组合ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞,以流式细胞仪测试基因P16及基因P53的变化.结果本实验中未作PDT治疗的对照组,肿瘤细胞生长良好,可见P16值小于6.59%.P53值小于4%.而PDT治疗组随着光敏剂剂量的加大P16及P53基因值逐渐上升,是未作PDT治疗组的3-4倍,且两光敏剂混合组,P16及P53基因值大于单纯ALA或HPD-PDT治疗组.HPD1μg/ml联合ALA60μg/ml,HPD2μg/ml联合ALA40μg/ml就能达到HPD5μg/ml PDT治疗组P16基因及P53基因水平.结论推测PDT疗法激活了P16基因及p53基因功能,促使肿瘤细胞凋亡及坏死.联合疗法HPD1μg/ml联合ALA60μg/ml,HPD2μg/ml联合ALA40μg/ml光动力学治疗能达到HPD常规剂量5μg/ml PDT的效果,这样可明显提高ALA-PDT疗效及减少HPD-PDT的皮肤光毒反应.     

激光光敏剂血卟啉衍生物杨州光卟啉作用于癌细胞疗效原理的超微结构研究

以国产血卟啉衍生物—扬州光卟啉为光敏剂,研究它对离体培养的人宫颈鳞状上皮癌细胞克隆(CC—801)的激光光敏的早期效应。实验组分别以8μg/ml及16μg/ml两种不同剂量的扬州光卟啉作用于培养细胞,经不同的光照时间及持续不同的作用时间后立即固定取材,进行透射电镜与扫描电镜的观察,发现给药16μg/ml后光照两分钟细胞内线粒体基质即出现灶性空化,扫描电镜下发现,细胞体积肿大。光照5分钟后,细胞核基质开始有轻度凝聚现象,细胞质膜绒毛突起肿胀,随着作用时间的延长,上述损伤愈加严重,绒毛肿胀呈泡状,继而脱落,细胞裂解8μg/ml     

重组人骨形态发生蛋白9和2体外诱导成骨的活性分析

利用PCR扩增hBMP-9全长序列构建真核表达载体pcDNA4／HisMax—BMP-9,与质粒pSV2-dhfr共转染CHO—dhfr-细胞,以含有100μg／ml博来霉素的1MDM进行选择性培养,筛选抗性克隆,并用MTX扩增,提高rhBMP-9的表达量。经过细胞分离培养,得到稳定表达rhBMP-9的6株单克隆细胞株,ELISA法检测rhBMP-9表达水平,最高可达1．13μg/24h／10^6cells。收集最高表达蛋白的单克隆株培养基上清,经His标签的蛋白纯化柱纯化,冻干法浓缩得到100μm/ml的rhBMP-9。用浓度100μg／ml的rhBMP-9和rhBMP-2分别刺激培养C3H10,各项成骨指标显示rhBMP-9具有-定的体外诱导成骨能力,但不及rhBMP-2。     

小剂量氟尿嘧啶对肝癌细胞HepG2生物学行为的影响与18F-FDG摄取关系的研究

目的研究小剂量氟尿嘧啶处理肝癌细胞HepG2后部分生物学行为与其摄取氟代脱氧葡萄糖(18F-FDG)变化的关系。方法使用低浓度的5-Fu(1μg/ml)培养肝癌细胞系HepG2,持续培养4周期后(第4周期后细胞简称HepG2/4P),观察细胞形态,绘制生长曲线,计算倍增时间;用Western blot检测Ki67的表达;于体外进行18F-FDG细胞放射性核素摄取实验。结果HepG2与HepG2/4P组的倍增时间分别为16.2h、25.2h;Ki67相对表达量分别为0.367±0.005、0.270±0.019,两组差异有统计学意义(P<0.05);HepG2/4P对18F-FDG摄取率较化疗前HepG2摄取降低,但无统计学意义(P=0.093)。结论HepG2/4P细胞与HepG2相比倍增时间延长,Ki67的表达降低,对18F-FDG摄取降低,提示肝癌细胞增殖的差异可能会引起肿瘤糖代谢相应的差异,可能用于监测化疗疗效和预测细胞生物学行为的改变。     

ALA光动力学治疗对C6胶质瘤细胞凋亡的影响

目的:通过细胞学水平研究不同剂量ALA光动力学治疗对C6胶质瘤细胞细胞凋亡的影响。方法:以不同剂量的ALA(10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)与C6胶质瘤细胞一起培养,随后以630nm半导体激光200mW/cm2,照射肿瘤细胞,照射20分钟,及与不用光敏剂单照激光、单用光敏剂不照光、不用光敏剂不照激光空白对照组比较。以流式细胞仪及倒置微镜、电镜观察促使肿瘤细胞凋亡或死亡的差别,寻找促使肿瘤细胞凋亡或死亡的最小合适剂量。结果:对照组没有细胞凋亡,ALA-PDT组随着剂量的增加细胞凋亡数增加。尤其晚期凋亡数明显增加,用药剂量增加至40μg/cc才能达到活细胞少于50%,即使剂量增加到160μg/cc,还是有19.7423的活细胞存在。结论:单纯用ALA激光PDT治疗不能达到完全将肿瘤细胞杀灭,ALA40mg/kg激光光动力学治疗才能得到明显的治疗效果。     

白藜芦醇对兔动脉粥样硬化基质金属蛋白酶表达的影响

目的探讨白藜芦醇对实验性动脉粥样硬化兔基质金属蛋白酶(MMP)表达的影响。方法选择新西兰纯种雄性大白兔50只随机分为三组,正常对照组10只,模型组20只,白藜芦醇组20只。采用液氮冻伤术建立动脉硬化模型,造模2个月后采用液氮冻伤术激发动脉硬化斑块破裂,模后2个月及激发试验后48h后分别对三组动物测定MMP-1、9的浓度。结果模型组造模后2个月MMP-1、9的浓度分别为(50.74±5.49)ng/ml和(337.69±8.98)ng/ml,同期白藜芦醇组MMP-1、9的浓度分别为(41.33±9.58)ng/ml和(309.83±10.59)ng/ml(P<0.01),激发试验48h后模型组MMP-1、9的浓度分别为(100.35±6.58)ng/ml和(869.56±12.37)ng/ml,同期白藜芦醇组MMP-1、9的浓度分别为(61.68±11.69)ng/ml和(411.24±15.74)ng/ml(P<0.01)。结论白藜芦醇能够降低MMP-1、9的浓度,从而预防和延缓动脉硬化的发生。     

畅销产品透视

特点 高速 140MHz带宽(30dB,G=+1) 120MHz带宽(3dB,G=+2) 35MHz带宽(0.1dB,G=+2) 转换速率2500V/μs 达0.1％建立时间25ns(2V阶跃) 达0.01％建立时间65ns(10V阶跃) 优良的视频性能(R_L=150Ω) 微分增益0.01％,微分相位0.01° 电压噪声1.9nV/Hz~(1/2) 低失真:在10MHz处THD=-74dB 输入失调电压最大3mV 规定在±5V和±15V电源电压工作 输出摆幅±2.3V(75Ω负载,Vs=±5V)     

采用电脑激光肾病治疗仪治疗慢性肾炎及慢性肾功能不全的临床疗效观察

电脑激光肾病治疗仪与常规药物治疗结合 ,治疗慢性肾小球肾炎、肾病综合征、慢性肾功能不全 ,共 30例 ;并与单用常规药物治疗对照。结果 :慢性肾小球肾炎组 ,2 4小时尿蛋白由治疗前的 1.34± 0 .82 g/日 ,下降至0 .85± 0 .61g/日 ,与对照组相比 ,有显著性差异 ( P<0 .0 5) ;治疗组 2 4小时尿量由治疗前的 184 6.67± 356.69ml/日 ,增加至 2 0 78.33± 4 30 .0 5ml/日 ,与对照组相比 ,有显著性差异 ( P<0 .0 5)。提示 :该治疗仪对肾小球肾炎等慢性肾病有一定疗效     

吸入煤尘颗粒对大鼠体内肺泡区噬细胞的影响

肺泡区噬细胞(AM)是大气污染的靶细胞。在体外试验中业已证明,煤尘颗粒损伤AM。本试验目的是在模拟生产性粉尘现场的条件下,使大鼠吸入煤尘,观察对体内AM的影响。24支Wistar大鼠分为正常组,染尘3个月及8个月组。每周染尘18小时,煤粉尘浓度80-120mg/m~3,染尘时鼠芨转动,强迫大鼠跑动加深呼吸,促进煤尘吸入。收集各组动物肺灌洗液①进行细胞计数;②离心收获AM,按常规制备超薄切片,透射电镜观察;③离心所得上清液,进行乳酸脱氩酶(LDH)与酸性磷酸酶(ACP)测定。主要结果:①肺灌洗液中肺泡巨噬细胞增加,染尘8个月组(13.4±0.3 10~5/ml)明显高于正常组(4.85±0.25 10~5/ml),P<0.01。3个月变化不大;②肺灌洗液酶活性:染尘8个月大鼠LDH(4540±     

激光设备及器件

北京世纪桑尼科技有限公司名称:TS8720型光学扫描振镜系统SD-900伺服驱动板技术指标:电源电压:±24V,最大±30V,模拟信号输入阻抗:100K±1%Ω(单端输入),位置信号输出阻抗:1K±1%Ω,模拟位置信号输入范围:±10V/±5V/±3V(可选),位置信号输入比例系数:0.5V/°,位置信号输出比例系数:0.5V/°,工作温度:0℃～40℃,伺服控制板尺寸:96.9mm×71mm×37mm。马达的电气与机械特性:小步长阶跃响应时间:0.7ms,线性度:99.9%,范围±20°,比例漂移:最大40PPM/℃,零漂移:最大10μRad,重复精度:8μRad,平均工作电流:2A,峰值电流:15A,线圈电阻:2.1Ω…     

维甲酸及三尖杉酯碱对人早幼粒白血病细胞诱导分化的超微结构研究

我院药物所研制合成的维甲酸(RA)及三尖杉酯碱(H)经实验证明可以阻断某些化学的,物理的,以及病毒等致癌因子的诱癌作用。通过细胞化学方法发现它们可以逆转某些癌前或癌细胞。本文用RA(0.3μg/ml)及H(0.1μg/ml)分别作用于体外培养的人早幼粒白血病细胞林(HL-60),从超微结构水平研究其诱导分化的     

普鲁卡因对光动力作用的影响

目的:1)体外观察光敏剂CPD5对人胰癌细胞(Hs766T)的光动力效果;2)观察普鲁卡因对CPD5光动力作用的影响.方法:浓度为1×105/ml的胰癌细胞,加到96孔培养板中,每孔100 μl,然后再加入不同浓度的CPD5,培养24 h弃旧液,更换新鲜培养液.普鲁卡因组加普鲁卡因,CPD5光动力对照组加生理盐水.670 nm半导体激光器,光剂量10 J/cm2,逐孔照射3 min.继续培养24 h后,用细胞排染试验测细胞存活率.结果:1)CPD5浓度为2.5μg/ml时,PDT后胰癌细胞存活率为2.0%;2)加入普鲁卡因(20 μg/ml)后,CPD5(浓度为2.5μg/ml)光动力效果是胰癌细胞存活率97.0%.结论:普鲁卡因可明显地淬灭CPD5光动力作用.     

5G7650使用中应注意的问题

5G7650是采用 CMOS工艺制作的第四代集成运算放大器,又称斩波稳零运算放大器。一、5G7650简介 5G7650的特点是:1.极低的输入失调电压(1μV);2.极低的温漂(0.01μV/℃);3.极高的输入阻抗(≥10~(12)Ω);4.极高的共模抑制比(>120dB);5.较快的转换速率(2.5V/μs);6.在输入输出端只有极微小的斩波尖峰泄漏;7.工作电源电压范围为±3V～±8V;8.低成本。它的管脚排列如图1所示。图1(α)为8脚引出线TO-5型封装,图1(b)为14脚双列直插封装。图1(α)各引出脚说明如下:脚1为C_A,脚2为反相输入,脚3为同相输入,脚4为负电源,脚5为空脚,脚6为输出,脚7为正电源。脚8为C_B;     

2Gbps GaAs单片4bit数模转换器的设计与实现

详述了单片超高速2G bps G aA s 4b it数模转换器(DAC)的设计、制造及测试。在南京电子器件研究所标准76 mm G aA s工艺线采用0.5μm全离子注入M ESFET工艺完成流片。芯入输入输出阻抗实现在片50Ω匹配。4 b it DAC的微分非线性(DN L)为±0.22最低有效位(LSB),积分非线性(IN L)为±0.45LSB,达到5.2 b it的转换精度。该单片电路提供差分互补输出,长周期输出特性无漂移。其最高转换速率可达2 G bps,建立时间小于250 ps,电路核心部分功耗为110 mW。