免疫学和分子生物学技术在水产动物疾病诊断中的应用

目前,各种免疫学和分子生物学技术的发展和在水产养殖病原微生物检测和诊断中的广泛应用,对水产养殖病害的有效防控起到了巨大的促进作用。论文回顾了主要免疫学技术(单克隆抗体、酶免疫、凝集反应、荧光抗体、胶体金)和分子生物学技术(核酸杂交、基于PCR的分子生物学检测技术、限制性内切酶分析、16 S rRNA、基因芯片)的特点以及其在水产动物疾病诊断中的研究及应用情况,并分析了今后水产动物疾病诊断技术的发展方向。     

犬瘟热病毒快速检测技术研究进展

犬瘟热病毒感染犬、狼、貂、狐等多种动物,发病率、死亡率较高,造成严重危害.因此,快速准确检测该病并及时治疗是防控的有效措施.本文综述了几种犬瘟热病毒的快速检测技术,包括免疫荧光技术、酶联免疫吸附试验、胶体金免疫层析技术、核酸杂交技术、聚合酶链式反应和环介导等温扩增技术.并对犬瘟热病毒快速检测技术进行了评述,为犬瘟热的临床快速准确诊断提供参考,对该病的防治具有重要意义.     

猪伪狂犬病实验室诊断技术研究进展

本文概述了伪狂犬病的生物学试验、血清学诊断技术与分子生物学诊断技术。在生物学诊断技术方面，其诊断方法主要有动物实验、细胞培养等。血清学诊断技术包括补体结合试验、血清中和试验（SN）、凝集试验、免疫扩散试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）、颗粒浓缩免疫荧光试验（PCFIA）、对流免疫电泳（CIE）、放射免疫试验（RIA）等。随着分子生物学的发展，对伪狂犬病的诊断从细胞水平发展到分子水平，国内外相继建立了伪狂犬病核酸杂交、聚合酶链反应（PCR）、核酸序列分析等分子生物学诊断方法。     

鸭圆环病毒检测方法研究进展

鸭圆环病毒病是由鸭圆环病毒感染引起的一种免疫抑制性疾病。本文综述了鸭圆环病毒血清学和病原学检测方法的研究进展,主要包括间接免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验、核酸探针技术、普通PCR、限制性片段长度多态性聚合酶链反应、套式PCR、多重PCR、荧光定量PCR和环介导等温扩增技术等,并对各种方法的优缺点进行了汇总分析,以期为该病的诊断与防控工作提供参考。     

核酸技术在禽病诊断中的应用

近年来 ,随着分子生物学发展 ,禽病诊断水平有了很大提高。禽病的实验室诊断技术已从常规的病毒分离鉴定以及抗原、抗体的免疫学检测 ,进入到可对病原微生物的基因序列和结构直接进行测定的分子生物学水平。核酸技术是分子生物学技术的一部分 ,它包括聚合酶链反应 ,核酸探针及限制性内切酶酶切片段分析和核酸序列测定。核酸技术的核心是根据病原体的遗传物质ＲＮＡ或ＤＮＡ进行鉴别定性 ,其目的是检测病原体 ,同时鉴定血清型、亚型或基因型 ,核酸序列分析定性的水平是其他方法不可比拟的。核酸技术具有高灵敏性、高特异性等优点 ,目前该技术…     

弓形虫病分子诊断技术研究进展

弓形虫病是一种呈世界性分布的人兽共患寄生虫病,严重危害人类健康并给世界各国的畜牧业造成巨大的经济损失,但弓形虫病缺乏特异性临床症状,给该病的诊断带来很大困难。分子诊断技术的迅速发展为弓形虫病的诊断提供了快速、灵敏、特异及稳定的检测方法。笔者从核酸分子杂交技术、聚合酶链反应（PCR）、单克隆抗体（McAb）技术及生物芯片技术几个方面介绍了用于诊断弓形虫病的分子诊断技术的研究进展。     

口蹄疫检测技术的研究进展与应用

从生物学试验、血清学诊断技术和分子生物学检测技术等方面概述了目前口蹄疫检测技术的研究进展及其应用。其中生物学试验包括动物试验和细胞培养;血清学诊断技术包括补体结合试验、中和试验、凝集试验、酶联免疫吸附试验和免疫胶体金快速检测技术等;分子生物学检测技术包括反转录聚合酶链式反应、核酸探针、核酸序列分析和等电聚焦等。     

分子生物学诊断技术的应用(二)

<正>3核酸扩增技术-聚合酶链反应(PCR)核酸扩增包括聚合酶链反应、连接酶链反应和Qβ复制酶技术等,根据实际应用情况,主要介绍聚合酶链反应。     

多重核酸检测技术在动物疫病诊断和食品安全监测领域的研究进展

核酸检测技术是目前动物疫病诊断和食品安全监测的重要手段。多重核酸检测技术可同时检测多种病原,具有通量高、损耗低的优势,在疫病诊断和食品安全监测等领域的应用越来越广泛。目前已研发出多种多重核酸检测技术,包括聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)多病原核酸检测技术、环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)多病原核酸检测技术、生物芯片多病原核酸检测技术、高通量测序多病原核酸检测技术等。由于检测原理不同,不同方法之间的检测性能存在较大差异。本文通过概述基于PCR/RT-PCR、LAMP/RT-LAMP、生物芯片、高通量测序建立的多重核酸检测技术,全面分析其在动物疫病诊断和食品安全监测领域中的特点和具体应用策略,以期推进病原检测技术的创新和发展,为动物疫病诊断及食品安全监测提供技术支持。     

PCR检测动物疫病样品的种类及处理方法

PCR即聚合酶链反应是利用DNA聚合酶在体外大量扩增两段已知序列之间的某一特定DNA片段(又称模板)的分子生物学技术.这种技术可以利用几乎所有的临床样品探查病原体基因的存在和变异,从而对生物体的状态和疫病作出诊断.因而,如何从被检临床样品中高效、简便地提取核酸作为模板,就成为普及、推广PCR技术检测动物疫病亟待解决的问题.现依据笔者操作和学习体会,将能有效检测动物疫病的样品种类及处理方法介绍如下,以图共同发展PCR检测动物疫病技术.     

RPA技术及其在动物病原检测中的应用

分子检测技术是进行病原检测、鉴定和疾病诊断的重要手段。重组酶聚合酶扩增技术（recombinase polymerase amplification，RPA）是一种新型核酸扩增技术，主要在能结合单链核酸（寡核苷酸引物）的重组酶、单链DNA结合蛋白（SSB）和链置换DNA聚合酶3种酶的作用下等温扩增DNA或RNA，具有操作便捷、特异性强、灵敏度高和反应迅速等优点，可实现对疾病的现场诊断。作者简述了RPA技术的反应体系组成、反应原理、引物和探针的设计以及扩增产物的检测方法等，介绍了RPA技术在动物重要病毒性、细菌性及寄生虫病原检测中的应用，分析了该技术的局限性，并对其发展前景进行了展望。     

动物H7N9禽流感应急处置指南(试行)

一、适用范围 本指南规定了动物H7N9禽流感的阳性确认、处置、紧急流行病学调查和人员防护. 二、阳性确认 H7亚型反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)或荧光反转录-聚合酶链反应(荧光RT-PCR)检测结果阳性的,为H7亚型禽流感病毒感染阳性. 省级动物疫病预防控制机构诊断为H7亚型禽流感病毒感染疑似阳性的,送国家禽流感参考实验室对结果进行复核.国家禽流感参考实验室开展复核和其他相关工作后,进行确诊.农业部根据最终确诊结果,确认H7亚型禽流感病毒感染阳性.     

兽医生物工程技术发展的回顾与展示（续）

兽医生物工程技术发展的回顾与展示（续）彭万强（广东省农业科学院兽医研究所广州５１０６４０）３生物工程技术在诊断畜禽疫病中的应用分子生物学技术在我国兽医领域应用最为广泛的首数诊断方面。如单克隆抗体诊断试剂盒、核酸探针、聚合酶链反应、核酸电泳、印迹技术等...     

重组酶聚合酶扩增技术及其在动物病原快速检测中的应用

建立动物疫病的快速诊断,对于我国养殖业疫病的预防及控制、进出口检疫、动物食品安全卫生等方面具有重大意义。重组酶聚合酶扩增技术(RPA)是近几年出现的1种有望替代PCR的新的核酸扩增技术。该技术主要依赖于3种酶:能结合单链寡核苷酸引物的重组酶、单链DNA结合蛋白和DNA聚合酶。反应过程中不需要模板链的热变性,可以在恒定的低温条件下快速扩增DNA或者RNA。具有特异性强、灵敏度高、快速、操作简便、适用于现场快速诊断等特点,在动物疾病早期诊断、实地检测、进出口快速检疫等方面具有巨大的应用前景和市场。本文对RPA技术进行综述,以期为相关研究提供参考。     

PCR技术在动物疾病检验中的应用概况

聚合酶链反应(PCR)由美国Cetus公司人类遗传研究室的KaryMullis于1985年发明,首次应用于人类基因遗传变异的研究。随着Taq酶的普遍应用及自动化扩增仪的发展,逐渐成为分子生物技术实验室中的首选方法之一,并在动物疫病诊断和检验中得到广泛的应用。因其具有特异性高、针对性强的特点,既可检测正在繁殖的病原     

重组酶聚合酶扩增技术及其在病毒性猪病快速检测中的应用

重组酶聚合酶扩增技术是近年来建立起的一种新的核酸恒温扩增技术,具有操作简单、灵敏度高、特异性强、可在短时间内快速扩增出目的片段等优点,在动物疾病早期诊断、现地检测、进出口快速检疫等方面具有良好的应用前景。通过综述RPA技术及其在病毒性猪病快速检测中的最新应用研究进展,以期为更好地防控猪病提供参考。     

IBDV逆转录—聚合酶链反应和核酸杂交检测方法的研究

以建立的传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和核酸杂交检测方法，检测了细胞培养物、病理组织、粪便和饲料中的ＩＢＤＶ，并与ＩＢＤＶ夹心ＥＬＩＳＡ、琼脂扩散试验（ＩＤ）和病毒分离方法进行了平行比较试验。结果表明，ＲＴ－ＰＣＲ和核酸杂交检测方法具有高度的敏感性和特异性，是深入研究ＩＢＤ流行病学，特别是传播途径的新手段     

PCR技术在动物疫病检验中的应用概况

聚合酶链反应(PCR)由美国Cetus公司人类遗传研究室的KaryMullis于1985年发明,首次应用于人类基因遗传变异的研究.随着Taq酶的普遍应用及自动化扩增仪的发展,逐渐成为分子生物技术实验室中的首选方法之一,并在动物疫病诊断和检验中得到广泛的应用.     

重组酶聚合酶扩增技术及其在病毒性猪病快速检测中的应用

重组酶聚合酶扩增(RPA)技术是近年来建立起来的一种新的核酸恒温扩增技术,具有操作简单、灵敏度高、特异性强、在短时间内快速扩增出目的片段等优点,在动物疾病早期诊断、现地检测、进出口快速检疫等方面具有良好的应用前景。文章综述了RPA技术及其在病毒性猪病快速检测中的最新应用研究进展,以期为更好地防控猪病提供参考。     

猪δ冠状病毒病原检测方法研究进展

猪δ冠状病毒(Porcine deltacoronavirus, PDCoV)是导致猪肠道疾病的重要病原之一,可引起猪呕吐、严重腹泻和脱水等症状,新生仔猪表现出较高的死亡率。PDCoV常与其他肠道病毒混合感染猪群,给养猪业带来严重的经济损失。因此,快速、高效和特异的检测技术是有效防控PDCoV的关键环节。论文主要对当前国内外应用的PDCoV病原学检测技术进行总结,包括病毒分离培养鉴定、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、逆转录-环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP)、重组酶聚合酶扩增技术(RPA)和基因芯片技术等,并分别介绍了各方法的优缺点,以期为PDCoV的快速诊断方法的研发和疫病的有效防控提供参考。