对虾暴发性流行病病原的人工感染研究

用发生暴发性流行病的中国对虾对健康虾进行人工投喂感染。同时，从病虾中分高毒种，毒种液经滤纸、０．４５μｍ和０．２２μｍ滤膜过滤，各滤液对健康中国对虾进行注射、浸泡、和共居感染。结果显示，对虾暴发性流行病的病原可通过投喂和注射感染健康对虾。浸泡和共居的方法均不能感染健康对虾，说明对虾暴发性流行病的传播途径主要为对虾的摄食。病原体对乙醚和５６℃３０ｍｉｎ处理敏感，不易通过０．２２μｍ滤膜。人工感染试验结果证明，对虾暴发性流行病的病原为皮下及造血组织坏死杆状病毒。     

对虾暴发性流行病病原对中国对虾幼体及仔虾的人工感染研究

用对虾暴发性流行病病原（ＨＨＮＢＶ）作为人工感染实验的毒种来源,对中国对虾幼体及仔虾进行了人工感染研究,结果表明ＨＨＮＢＶ通过水体浸浴不能感染健康的中国对虾卵,幼体及仔虾;但可通过投喂感染健康的中国对虾仔虾,使其发病死亡,死亡的进程随着体长的增加而缩短。     

中国对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒（HHNBV）DNA探针的制备及应用

ＨＨＮＢＶ是１９９３年中国对虾暴发性流行病的主要病原之一。从纯化的病毒中提取ＤＮＡ，用ＥｃｏＲｌ限制性内切酶酶切成ＤＮＡ片段，与ＰＵＣ１８体外重组，建立ＨＨＮＢＶＤＮＡ文库。从中筛选出三个重组质粒（５＃、８＃、９＃），它们所插入的片段大小分别为：２．８Ｋｂ、０．８Ｋｂ、１．６Ｋｂ，它们分别用光敏生物素标记成探针，与感染ＨＨＮＢＶ的病虾ＤＮＡ呈阳性反应，以此利用制备的ＨＨＮＢＶＤＮＡ探针的高敏感性和特异性来检测虾病。     

再论对虾养成期虾池的生态效益

再论对虾养成期虾池的生态效益徐启家，赵荣平（山东省海水养殖研究所，青岛２６６００２）１虾病蔓延是生态环境变化的结果虾病是当今国际养虾业的重要研究课题，也是我国养虾业巩固与发展的最大障碍。１９９３年蔓延的暴发性对虾流行病，所造成的损失是难以估量的。近年...     

93‘对虾暴发性流行病的病因和今后对策

９３’对虾暴发性流行病的病因和今后对策我国的对虾养殖业。从１９７８年全国海水养殖会议提出在沿海大面积推广人工养殖以来．１５年来发展突飞猛进、目前，从养虾整个生产和总体技术水平看；对虾养成（商品虾养殖）。人工育苗和亲虾越冬基本都是成功的。对虾病害尽管是...     

养殖中国对虾暴发性流行病病虾现场快速诊断方法研究

通过人工投喂感染试验，观察了中国对虾感染暴发性流行病病原后出现的特殊外观病症，即与健康虾截然不同的空胃和拒食，在现场利用这种外观症状作排外诊断和鉴别诊断，可以简便，快速地判断出池虾群体中有无病虾，同时根据统计发病虾的概率，也可以了解群体的发病进程。     

对1994年对虾养殖的几点建议

对１９９４年对虾养殖的几点建议关忠志，李秋（丹东市水产研究所）关键词：对虾养殖，流行病１９９３年一场暴发性对虾流行病蔓及全国，给我国对虾养殖业以沉重的打击。许多地区遭到了灭顶之灾，造成大面积绝产。丹东地区的损失也比较严重。由于虾病的发生，使目前整个养...     

中国对虾病虾体内同工酶表型变化的初步研究

应用对流免疫电泳及核酸探针检测技术筛选感染病毒的中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）病虾,采用不连续的聚丙烯酰胺凝胶电泳研究病虾体内同工酶的表型变化。用分光光度仪对电泳带扫描分析表明,病虾体内４种同工酶—酯酶（ＥＳＴ）、苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）、谷草转氨酶（ＧＯＴ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的表型与健康虾比较存在显著差异。其中,ＭＤＨ、ＥＳＴ、ＧＯＴ的变化分别反映病虾体内糖类、脂类、氨基酸等３大物质代谢明显紊乱,ＳＯＤ活性下降,显示病虾免疫防御机能明显衰退。对虾体内同工酶表型变化规律稳定,重复性好,可作为对虾病害检测与诊断的生理生化指标     

聚合酶链反应（PCR）检测养殖对虾的白斑病病毒（WSSV）感染

对虾ＷＳＳＶ病是亚洲对虾养殖业中的一个棘手问题。本研究采用Ｋｉｍｕｒａ引物，用ＰＣＲ技术对不同生长期的中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）进行了ＷＳＳＶ的检测，同时也检测了对虾发病时养殖池中多见的野生厚蟹（Ｈｅｌｉｃｐ ｓｐ．）和柔尾棘虾虎鱼（Ａｃａｎｔｈｏｇｏｂｉｕｓ ｈａｓｔａ）。检测结果表明：分别在检测的５尾亲虾中的１尾，６尾仔虾中的１尾，５尾稚虾中的３尾及所检测的５尾病虾和２只厚     

我国对虾健康养殖技术

一、对虾健康养殖管理的要求我国目前在对虾病毒性暴发流行病防治研究方面已取得明显进展 ,虾病防治的实践 ,也使人们认识到健康养殖管理 ,不但可以避免暴发性流行病发生 ,而且它也是对虾养殖可持续发展的重要环节。通常我们认为健康养殖管理 ,可概括为如下主要内容。１．培育和使用健康虾苗 :其主要技术关键是在苗种培育中 ,避免使用携带可引起暴发性流行病病原的亲体。当前主要是检疫ＨＨＮＢＶ（亦称白斑综合症病毒）及ＭＢＶ（斑节对虾杆状病毒）等病毒。对亲体的遗传特性应作严格选择。例如育苗单位使用人工培育亲体时 ,应避免使用同一…     

患肌肉溃烂病中华倒刺鲃血清生化指标变化

采集嘉陵江网箱养殖中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis Bleeker)病鱼和健康鱼,测定二者血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、血糖(GLU)、肌酐(CREA)、尿素(UREA)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血清氯(Cl-)、血清钙(Ca2+)等指标并进行对比。结果显示,相对于健康鱼,病鱼ALT、AST、Cl-和Ca2+显著升高(P<0.05);AKP、TP、ALB显著降低(P<0.05);TG、GLU、CREA和UREA虽未体现显著差异(P>0.05),但两组间有较大差别。整体而言,肌肉溃烂病引起中华倒刺鲃肌肉、肝、肾等多种重要组织器官病变,相应血清指标出现明显变化。     

Effects of surgically implanted dummy ultrasonic transmitters on physiological response of bighead carp Hypophthalmichthys nobilis

The study assessed the effects of surgically implanted dummy ultrasonic transmitters on physiological response of bighead carp Hypophthalmichthys nobilis in April 2011. Before the surgery, 15 blood samples were extracted randomly from 195 bighead carp samples, and then the rest of the fish were divided into three groups: (1) control group, handing but no tagging, (2) sham group, surgical procedure without implantation of transmitter and (3) surgery group, surgical implantation of transmitters. In 3 h, 24 h, 7 days and 14 days after surgery, 15 fish were extracted randomly from the three groups, respectively, for sampling. Then the plasma samples were analyzed, and physiological measures of stress response (cortisol, glucose), tissue damage [alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST)] and nutritional status [total protein, globulin, albumin, triglyceride, cholesterol, and alkaline phosphatase (ALP)] were compared. The result showed that there was no significant difference between sham and surgery groups in 3 h, 24 h, 7 days and 14 days after surgery. When compared to the control group, there were significant increases in concentrations of plasma cortisol, glucose, ALT, AST, total protein and globulin of sham and surgery groups in 3 h after surgery. After 24 h, the levels of plasma cortisol, ALT, AST, total protein, globulin and ALP were elevated in both sham and surgery groups, whereas the levels of plasma glucose had declined to normal level and plasma albumin, cholesterol and triglyceride were significantly decreased in both sham and surgery groups. After 7 days, the levels of plasma glucose, albumin and cholesterol continued to decline, while the level of plasma ALT, globulin and ALP had declined but still remained higher for sham and surgery groups than control group; however, the plasma total protein level had returned to normal. After 14 days, there was no significant difference between the three groups. The above results showed that surgical implantation of ultrasonic transmitters had indeed caused significantly negative effects on the physiological response of bighead carp. However, all the negative influences on stress response, tissue damage and nutritional status had disappeared in 14 days after surgery, and the presence of transmitters had no significant negative impact. Therefore, the bighead carp should be temporary cultured at least 14 days for the recovery of physiological response and then released into the free water for the ultrasonic telemetry research.     

饥饿对养殖鲈鱼血液生理生化指标的影响

设定不同饥饿时间研究养殖鲈鱼（Lateolabrax japonicus)血液生理和生化指标的变化，实验进行4周，每周取样，结果表明，血液中红细胞数，血红蛋白和红细胞比容分别在饥饿2周，2周和4周开始显著下降，而红细胞脆性和沉降率则分别在饥饿1周和3周显著上升，血糖浓度在饥饿第1周显著下降，以后几周则较为恒定，总蛋白，白蛋白和球蛋白在饥饿1周和2周时均有上升，3周后开始下降，甘油三脂和总胆固醇均在饥饿3周开始显著下降；Na^ 和Cl^-浓度在饥饿3周显著上升，谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力分别在饥饿2周和1周时显著下降，饥饿对K^ ,Ca^2 浓度和碱性磷酸酶活力没有影响，各项生理生化指标和饥饿时间的回归分析表明，均以3次多项式的R2值为最大，其中又以白蛋白和血红蛋白的R2值最大，分别为0．922和0．902，建议血红蛋白含量可作为鲈鱼饥饿评价的指标。     

柱形病对黄颡鱼血液生化指标的影响

为探究柱形病对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)生理机能的影响,随机选取患病和健康黄颡鱼各10尾,采集其血液,静置后离心分离血清以测定血液生化指标如皮质醇、乳酸(LD)含量,乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)活性,葡萄糖、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、尿素氮(BUN)、总胆固醇(TCHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)含量,谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性。结果显示:患病黄颡鱼血清皮质醇浓度和LDH、AST活性均极显著高于健康鱼,LD含量和ALT活性显著高于健康鱼。与健康鱼相比,患病黄颡鱼血清葡萄糖含量极显著降低,而HDLC、LDLC、TCHO、ALB、TP、BUN浓度和ALP活性无显著差异。健康鱼肝细胞呈近圆形,形状较规则,细胞界线清晰,细胞核多位于细胞中央,呈圆形或椭圆形,肝细胞以中央静脉为中心形成放射状排列。患病鱼肝细胞出现局部坏死、空泡化,形成坏死灶,伴有大量中性粒细胞、淋巴细胞浸润。结果表明:柱状黄杆菌感染可引起黄颡鱼鱼体显著的应激反应,并引起鱼体肝脏损伤。     

几种植物提取物对异育银鲫生长性能和血液生化指标的影响

用分别在基础日粮中添加了黄霉素(4 mg/kg)和3种植物提取物(皂树皂甙150 mg/kg、茶多酚50 mg/kg、水飞蓟素100 mg/kg)的饲料饲喂异育银鲫(Carassius auratus gibelio)56 d后,测定各组鱼生长性能,并于实验结束时尾静脉采血,测定血液生化指标。结果表明:与对照组和黄霉素组相比,3种植物提取物组间的增重率(WGR)和蛋白质效率(PER)无显著性差异(P>0.05);其中皂树皂甙能显著提高血清白蛋白(ALB)的含量(P<0.05);茶多酚能显著提高血清碱性磷酸酶(AKP)的含量(P<0.05),降低血清尿素氮(BUN)含量(P<0.05);水飞蓟素能显著提高血清碱性磷酸酶的含量(P<0.05),降低血清丙二醛(MDA)的含量(P<0.05)。     

栉孔扇贝大规模死亡致病病原的研究

对2000-2002年山东沿海6个疫区患病栉孔扇贝进行电镜观察，在消化腺、外套膜、肾和肠的结缔组织细胞和间质细胞中发现一种球形病毒．并引起相直的病理学变化。该病毒具囊膜，直径为130～170nm，核衣壳直径为90～140nm。病毒分离纯化后．观察到的病毒囊膜表面覆有长20nm的纤突。病毒在细胞质中的囊泡样结构内完成装配，其内未发现包涵体存在。从发病疫区栉孔扇贝组织中分离出病毒毒种对键康扇贝进行人工感染。结果显示，各感染实验组发病扇贝表现出与自然海区发病扇贝相同的临床症状。病毒注射组死r二率为?5％，病毒浸浴组死亡率为68．7％．灭活病毒注射组和空白对照组死亡率皆为12．5％。病毒注射、浸浴组与灭活病毒注射组、空白对照组死亡率差异显著。电镜复检结果显示，各感染实验组发病扇贝组织中分布有大量病毒粒子，与自然海区发病扇贝组织所观察到的病毒粒子在形态特征和病理学特征上完全一致。以上结果证明，病毒是导致栉孔扇贝大规模死亡的直接病原。     

Metabolomic investigation of pathogenesis of myxosporean emaciation disease of tiger puffer fish Takifugu rubripes

Serum biochemical analysis was undertaken to study the pathophysiological details of emaciation disease of the tiger puffer fish Takifugu rubripes (Temminck and Schlegel). Serum parameters were measured by biochemical analysis using automated dry chemistry and gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS). Serum concentrations of albumin, amylase, calcium, creatinine, glucose and total protein were significantly lower in the emaciated fish when compared with those of normal fish. Regression analyses found close correlation between concentrations of total protein, albumin, amylase, glucose and progress of the disease. In contrast, serum alanine aminotransferase increased significantly in emaciated fish indicating liver function disorder. Further, GC/MS metabolic profiling of the puffer serum showed that the profile of the emaciated fish was distinct to that of non‐infected control. The serum content of amino acids including glycine, 5‐oxo‐proline and proline, and ascorbic acid, fumaric acid and glycerol increased significantly in serum in moderately emaciated fish. The serum glucose, linolenic acid and tyrosine level decreased significantly in the late phase of the disease. Our results clearly show that prolonged intestinal damage caused by myxosporean infection impairs absorption of nutrients, resulting in extreme emaciation.     

光照颜色对虹鳟行为反应、血浆皮质醇和生化指标的影响

光照是影响鱼类行为、生理以及生长的主要环境因子之一。为研究光照颜色对虹鳟行为反应、血浆皮质醇、生化指标的影响,实验根据鱼类行为学研究方法,分别将白、红、黄、蓝和绿5种光照颜色灯带铺设在室内试验水槽中央底部,将虹鳟放置在水槽同一侧,观察虹鳟在水槽中穿越灯带尾次数及行为反应;根据行为生理学研究方法,分析比较在不同光照颜色下虹鳟血浆皮质醇、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)的含量差异。结果显示:5种光照颜色下虹鳟穿越灯带尾次数均低于空白组,其中黄光、白光条件下穿越灯带尾次数均显著低于空白组和其余3种光照颜色,红光、蓝光、绿光和空白组之间无显著差异。黄光条件下血浆皮质醇浓度显著高于空白组和其余4种光照颜色,空白组和其余4种光照之间无显著差异。5种光照颜色下总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)均具有显著差异。研究表明,虹鳟比较适应蓝光和绿光,对黄光和白光有一定的趋避反应,且黄光的趋避效果最强;虹鳟可通过自身生理调节以适应不同的光照颜色变化。     

中国对虾糠虾幼体病原哈氏弧菌的鉴定及毒力基因检测

2011年春季对江苏连云港某对虾育苗场中国对虾Fenneropenaeus chinensis病死糠虾幼体分离到优势生长菌,对分离菌进行致病性、形态与生理生化特征及16S rRNA和gyrB基因同源性与系统发育分析。结果显示,引起糠虾幼体大量死亡的病原为哈氏弧菌Vibrio harveyi,菌株kx1对中国对虾仔虾和日本对虾仔虾的半数致死量LD50分别为2.0×106CFU/ml和7.0×105CFU/ml。为进一步明确分离菌株毒力基因的携带情况,进行了分离鉴定的4株病原菌对群体效应调节基因(luxR)、毒力调控基因(toxR)、溶血素基因(vhhA和vhhB)、金属蛋白酶基因(vhpA和vhpB)、毒力相关基因(toxS)、鞭毛结构基因(flaA)及锌金属蛋白酶基因(pap6)共9种毒力基因的检测,结果表明,4株病原菌均可检测到luxR、toxR、vhhA、vhhB和pap6毒力基因,扩增片段大小分别为679、390、1324、216和355 bp,其他4种毒力基因未检测到。分离鉴定的4株病原哈氏弧菌携带相同的毒力基因,这些毒力基因可作为检测致病性哈氏弧菌的生物学标记。