金叶含笑叶片基因组DNA提取方法的比较

以金叶含笑叶片为实验材料,分别采用CTAB法、改良CTAB法、简易提取方法、高盐沉淀法和SDS法5种方法提取金叶含笑叶片的基因组DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计及ISSR扩增3种方法对所提取的DNA样品进行检测.DNA纯度、含量比较以及扩增结果表明:5种方法中简易提取法和SDS法提取的DNA纯度较高.高盐沉淀法得到的DNA产量较高.5种方法提取的DNA用于ISSR扩增,其扩增结果基本一致.简易提取方法操作简单.省时省力,是用于ISSR扩增的金叶含笑基因组DNA提取的最佳选择.     

油菜线粒体DNA提取纯化方法研究

以油菜为实验材料,探讨了植物线粒体DNA提取纯化过程中的影响因素,构建了一套快捷、经济、高效的植物线粒体DNA提取纯化方法.该方法结合差速离心和密度梯度离心分离得到线粒体,酶消化处理去除其他基因组的污染,用SDS与蛋白酶裂解线粒体,通过高盐沉淀,有机溶剂抽提,最后再用CTAB纯化得到mtDNA.用该方法提取的油菜线粒体DNA,经紫外分光光度计测定其纯度、限制性内切酶进行酶切.结果表明,此提取方法得到的mtDNA,其纯度可以满足后续遗传学分析.该法适用于不同植物材料mtDNA的提取纯化.     

白草种子基因组DNA五种提取方法的比较

用5种方法 (传统CTAB法、改良CTAB法、高盐低p H法、改良SDS法、试剂盒法)对白草种子基因组DNA进行提取,分别用紫外分光光度计法、琼脂糖凝胶电泳法、PCR扩增检测提取的DNA的质量。结果表明,传统CTAB法提取的DNA浓度低,含有较多杂质,抑制PCR反应;改良SDS法和改良CTAB法提取的DNA纯度低,不符合检测要求;高盐低pH法和试剂盒法提取的DNA纯度高、完整性好,但试剂盒法成本高、DNA得率低。所以高盐低pH法为5种方法中最经济、效果最好的白草种子DNA提取方法。     

试剂盒法提取山杨基因组DNA的条件优化

利用DNA提取试剂盒提取山杨叶片DNA,对其过程进行改良优化,从而获得一种快速、简便的提取山杨高质量基因组DNA的方法.在原试剂盒的操作基础上,对异丙醇是否冰预冷、消化时间、洗脱液用量、材料用量等条件进行了优化,并对所提取的基因组DNA的浓度、纯度进行了检测.优化后的方法提取到了较高质量的山杨基因组DNA.     

不同提取方法的铁线莲属叶片总DNA提取效果

以铁线莲属植物的叶片为材料,采用CTAB-SDS法、简易CTAB法、改良CTAB法等3种提取方法,比较耗时、纯度、得率、浓度和质量等指标,以期为铁线莲属植物叶片总DNA的提取筛选适宜方法.结果表明,在纯度和浓度方面CTAB-SDS法＞简易CTAB法＞改良CTAB法,在节省提取时间方面改良CTAB法＞CTAB-SDS法＞简易CTAB法.以CTAB-SDS法所提取的9种铁线莲DNA为模板,进行PCR扩增,CTAB-SDS法提取的DNA得率高、质量好,PCR扩增成功率也较高.综合比较,采用CTAB-SDS法进行铁线莲属叶片总DNA提取效果更佳.     

福建柏总DNA的快速简便提取和鉴定

本文介绍了福建柏Fokieniahodginsii(Dunn)HenryetThomas总DNA的提取介质组成分 ,建立了一个快速、简便且高效提取和鉴定福建柏鲜叶、干叶、种子总DNA的方法。该方法所提DNA的产率分别为 :1 5 0～ 2 5 0 μg/g鲜叶 ,1 0 0～ 1 5 0 μg/g干叶和 1 4 0～ 1 6 0 μg/g种子 ;绝大多数粗提总DNAOD2 6 0 /OD2 80 =1 .80±0 .0 2 ;提取的鲜叶、种子和单种子胚乳总DNA皆为 4 8kb,而干叶总DNA为 5 0Kb ,都适于限制性酶切和RAPD反应 ;一般实验时间为 4h。该方法既不需氯化铯梯度离心和柱层析纯化 ,也不需氯仿 :异戊醇抽提 ,粗提的总DNA样品不经RNase消化即可用于RAPD反应或经RNase消化用于限制性酶切 ,因此 ,具有高产率、高纯度、高质量和快速简便等优点。尤其是它所提取的干叶DNA ,适于限制性酶切和PCR反应 ,解决了取材上的不便。实验中还发现 :( 1 )提取DNA之前去除叶绿素与否 ,对提取福建柏总DNA无明显影响。 ( 2 )只有去除RNA的福建柏总DNA样品 ,才能被限制性内切酶完全切开。 ( 3)RAPD模板中含RNA及一定量的蛋白质 ,均不影响扩增效果。 ( 4 )同一个体的鲜叶、干叶、种子总DNA样品 ,皆可得到完全一致的扩增产物。     

漾濞核桃叶片基因组DNA的两种提取方法效果比较

以漾濞核桃不同生长期的叶片为材料，采用高盐低pH法和改良CTAB法作提取其基因组DNA的效果比较实验。通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计和RAPD扩增对所提取的DNA样品进行检测，比较所得DNA的产量、质量，认为从漾濞核桃不同发育时期叶片中获得DNA的提取效果不同。4种叶样以冬芽和新叶的效果为好，老叶最差；用两种提取方法从叶片中得到的DNA产量和质量有所不同，高盐低pH法提取的DNA纯度高，但是产量较低；而改良CTAB法则相反，产量高，纯度低。     

不同提取方法对厚朴叶片总DNA提取效果的影响

以厚朴(Magnolia officinalis Rehd.et Wils)叶片为材料,采用SDS-CTAB结合法、高盐低pH值法、CTAB法、SDS法等4种方法分别对2种方法保存的样品及对照样(鲜叶)进行了基因组DNA提取效果的比较,并进行ISSR-PCR检测。结果表明:4种方法均能从厚朴叶片中获得高质量的DNA,其中以SDS-CTAB结合法所得的DNA纯度最高,高盐低pH值法次之,CTAB法提取的厚朴叶片DNA纯度最低;高浓度NaAc的引入及相应的冻融,可以提高所得厚朴基因组DNA的纯度;硅胶干燥和-70℃超低温保存的样品与鲜叶相比,所提DNA的质量无明显差异,均能满足PCR扩增的要求。     

槭属树种DNA提取方法比较研究

采用3种DNA提取方法对8种槭属树种基因组DNA进行质量、浓度和纯度对比研究,结果表明,3种方法提取的基因组DNA差异较大,浓度由高到低依次为改良CTAB法TIANGEN试剂盒法改良SDS法;提取的基因组DNA纯度为TIANGEN试剂盒法CTAB法SDS法。3种方法中TIANGEN试剂盒法提取的槭属树种基因组DNA含有的杂质最少,但成本较高;改良CTAB法提取的基因组DNA质量、浓度和纯度均优于改良SDS方法,适用于槭属树种的后续研究。     

柿属植物叶绿体DNA提取方法优化

利用Percoll密度梯度离心法,对4种柿属植物君迁子D.lotus L.、油柿D.oleifera Cheng、浙江柿D.glaucifolia Metc.、金枣柿D.kaki spp.进行叶绿体DNA(cp DNA)提取方法的优化,结果显示优化后的柿属植物cp DNA提取方法具有高效、简便、重复性好、稳定性高的特点;经检验,利用此方法提取的cp DNA质量好,浓度与纯度均较高,能够满足后续叶绿体PCR扩增、基因组测序等分子生物学试验。     

马尾松针叶DNA抽提

经多次实验改良的CTAB法抽提马尾松针叶DNA,其浓度和纯度符合RAPD实验的要求,个别有明显杂质的样品提纯后经凝胶电泳检测,DNA纯化效果良好。     

CTAB法抽提香榧种子胚乳DNA的改进

香榧种子胚乳DNA抽提是RAPD和AFLP分子标记构建遗传图谱的基础性工作。经多次实验，我们对CTAB法抽提香榧种子胚乳DNA进行了改进，即先将胚乳冷冻，抽提时加入β－巯基乙醇，抽提过程中用高盐TE重悬DNA－CTAB沉淀，最后用异丙醇沉淀DNA。OD260／OD280比值检测结果为平均1．824，而且DNA得率也较高，证明用此法抽提的DNA能完全满足RAPD和AFLP的分析的要求。     

桉属植物叶片DNA抽提

对植物组织DNA抽提是在分子水平上对植物进行系统分析与研究的基础性工作。我们使用改良CTAB法抽提桉属植物叶片中总的DNA获得了成功，其纯度和得率完全能满足常规分子生物学操作的要求。与DNA得率有关的几个问题在此一并探讨。     

快速微量提取竹子叶片DNA的方法

介绍了一种快速微量提取角竹叶片DNA的方法。该方法简便易行，操作简单，所需材料少，提取的DNA纯度较高，OD260/OD280。一般在1．9左右，可满足一般的RAPD、SSR、转基因植株的PCR检测为基础的实验需要。     

一种改良的CTAB法提取马尾松基因组DNA

以马尾松针叶为试验材料,利用改良的CTAB法抽提基因组DNA,其浓度和纯度符合PCR实验的要求,经凝胶电泳检测,DNA纯化效果好。     

思茅松大配子体DNA的提取及ISSR反应体系的建立

为建立思茅松大配子体ISSR分子标记的反应体系,以思茅松种子样本作为供试材料,比较不同思茅松胚乳DNA提取方法的效果,通过紫外分光度计、DNA琼脂糖电泳和PCR扩增分别予以检测并比较。结果表明SDS法优于CTAB法。同时,通过单因子分析法对ISSR-PCR反应体系中的模板DNA用量,Taq DNA聚合酶用量,Mg2＋浓度,dNTP浓度、引物浓度等主要影响因子进行优化,确立适用于思茅松的ISSR分子标记反应体系。对该体系进行稳定性检验,结果表明该反应体系适合思茅松ISSR-PCR扩增。     

华山松胚乳不同提取方法比较

以华山松（Pinus armandi）种子胚乳为实验材料,分别采取经典CTAB法、简易CTAB法和SDS法微量法提取华山松基因组DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计分析、标准差和标准误、卡方检验和SPSS软件显著性分析,将它们在DNA产量、质量和方法稳定性等方面的优缺点进行总结。得出结论：通过对数据进行卡方检验,所有数据都是差异是由方法所引起的,不是偶然误差所引起的;相比于经典CTAB法,SDS微量法和简易CTAB法的（OD260-OD320）/（OD280-OD320）标准差和标准误相差不大,数据相对精确,结果相对精确;通过SPSS软件分析分析,简易CTAB法和其他2种方法相比存在显著差异性,SDS微量法与经典CTAB法的P〉0.05,差异不显著,提取效果相差不大。综上所述：相比于简易CTAB法,SDS微量法与经典CTAB法的（OD260-OD320）/（OD280-OD320）都接近2.0,可能存在RNA污染污染,DNA的浓度也相对较低,SDS微量法与经典CTAB法不适合华山松胚乳DNA提取。简易CTAB法的（OD260-OD320）/（OD280-OD320）比率很接近1.80,不存在蛋白质和RNA污染,DNA纯度也最好,DNA浓度最高,比较适合华山松胚乳DNA提取。     

用过氧化物同功酶分析鉴定松属种子的真实性

对松属６个树种种子过氧化物同功酶谱带进行分析研究，结果表明，其过氧化物同功酶谱带的数量及相对迁移率都具有特异性．对于这类种子以及幼苗形态相似而不易区别的树种，这种方法，可以作为鉴定种子真实性的指标．     

DNA Extraction from Eriocaulon Plants and Construction of RAPD System

There have been many arguments on the classification of Eriocaulon Linn. by morphology so far, and little is known about the use of molecular marker for genetic for genetic diversity of Eriocaulon plants. To apply the technique of molecular marker to the research of genetic diversity of Eriocaulon plants, the study of the extraction method of DNA from the Eriocaulon plants and the RAPD system are essential for researchers. In this paper, the extraction of genome DNA from the silica-gel-dried leaves of several species of Eriocaulon distributed in China was studied, and the best RAPD analysis technique condition of Eriocaulon plants was analyzed.