性成熟启动时间不同的母鸡瘦素及其受体mRNA表达的差异

为探讨瘦素（leptin）及其受体在禽类性成熟启动过程中的作用,试验采用120羽60日龄伊莎蛋母鸡,随机均分为2组,分别饲养于光照逐渐延长（以光／暗为8h／16h为起点每周增加0．5h光照,简称长光照组）和恒定的短光照（光／暗为8h／16h,简称短光照组）条件下,记录体重变化与性成熟时间。长光照组和短光照组母鸡分别于136和151日龄时开产。在136日龄时,每组取10只鸡宰杀后取血液、脂肪和下丘脑组织,分别检测血清leptin水平、脂肪leptin mRNA与下丘脑leptin受体mRNA的表达。结果表明：136日龄时,长光照组和短光照组母鸡血清雌二醇（E2）和leptin水平均无显著差异（P〉0．05,n=10）。相对定量RT-PCR结果显示：136日龄时,长光照组母鸡脂肪leptin mRNA表达丰度极显著高于短光照组（P〈0．01,n=10）,但下丘脑leptin受体mRNA的表达水平无显著差异（P〉0．05,n=10）。以上结果提示：15d的性成熟时间差异并不伴随产蛋母鸡血清leptin及下丘脑leptin受体mRNA表达水平的显著变化,而脂肪leptin mRNA表达水平与血清leptin蛋白水平的不一致性则提示循环leptin的其他组织来源。     

蓝塘猪与长白猪正反交F_1代胴体性状和肉品质的比较

【目的】分别以蓝塘猪作为父本和母本与长白猪杂交,比较其F1代胴体和肉品质的差异.【方法】以广东地方品种蓝塘猪与外来品种长白猪为模型,采用正反交试验分别获得杂交F1代,即蓝×长猪和长×蓝猪,并采用相同日粮饲养至180日龄,比较蓝×长猪和长×蓝猪的生长性能.试验结束后每个品种分别选择接近平均体质量的8头肥育猪(公母各半),屠宰测定其胴体性状,并分析背最长肌的肉品质性状和肌球蛋白重链mRNA表达水平差异.【结果和结论】蓝×长猪和长×蓝猪的胴体性状无明显差异.但从肉品质来看,蓝×长猪的肌内脂肪含量显著高于长×蓝猪,而且公猪显著高于母猪(P0.05).蓝×长猪花生四烯酸(C20∶4)的比例显著高于长×蓝猪,但杂交后代肌纤维类型和肌苷酸含量均无显著差异.2品种和性别间MyHC-I、MyHC-IIa、MyHC-IIb和MyHC-IIx基因mRNA表达均无显著差异.由上述结果可知,以蓝塘猪为父本、长白猪为母本得到的杂交F1代肌内脂肪含量和花生四烯酸比例均较高,说明蓝×长猪可能具有更优的肉品质和营养价值.     

猪体内谷胱甘肽过氧化物酶分布及动态变化研究

【目的】全面了解谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)在猪体内的分布和动态变化.【方法】以3个品种的猪为研究对象,测定了不同组织中及不同品种、性别、龄期、健康状态猪血液中的GPx活力.【结果和结论】在26~150日龄,长白猪和蓝塘猪全血中的GPx活力随着龄期的增加而缓慢上升,至150日龄时达到最大值;蓝塘猪各龄期GPx活力高于长白猪GPx活力,30和90日龄GPx活力显著高于长白猪的GPx活力(P0.05);90日龄杜大长公猪GPx活力显著高于母猪的GPx活力(P0.01);90日龄健康杜大长猪GPx活力显著高于病猪的GPx活力(P0.01).对不同组织GPx活力和比活力进行比较,结果发现猪的肾、脾、肝、肺、心和回肠等组织的活力和比活力较高,可作为理想的提取GPx的原材料.     

马身猪和大白猪背最长肌Rac1基因发育性表达研究

[目的]探究Rac1基因mRNA和蛋白质在马身猪和大白猪背最长肌组织中的发育性表达规律,揭示Rac1基因与猪肌肉发育之间的关系。[方法]采用qRT-PCR和Western blot技术检测马身猪和大白猪从1日龄到180日龄(1、30、60、90、120、150和180日龄)阶段背最长肌中Rac1基因的表达规律。[结果]Rac1基因mRNA在大白猪1日龄、120日龄和180日龄时表达量较高,与其他日龄相比差异极显著(P0.01),其他日龄表达量均维持在较低水平;马身猪60日龄时Rac1 mRNA表达量最高,极显著地高于其他日龄(P0.01),90日龄次之,其他日龄表达水平较低,且日龄间表达量无显著差异。在蛋白质水平上,从1日龄到180日龄,大白猪Rac1表达量整体呈先降低后升高的趋势,在1日龄时表达量最高,120日龄表达量最低;马身猪整体呈先升高后降低的趋势,60日龄时表达量最高,极显著高于其他日龄(P0.01),随后几个月龄的表达量处于较低水平,显著低于1日龄和30日龄(P0.05)。品种间比较,马身猪Rac1蛋白表达量始终高于大白猪,且在1日龄和60日龄,差异极显著(P0.01),在120日龄和150日龄,差异显著(P0.05)。[结论]猪背最长肌中Rac1基因mRNA和蛋白质的表达量与猪的年龄及遗传背景有关。     

长白和蓝塘猪印记基因 IGF2 和 H19 的时空表达研究

运用实时荧光定量PCR技术,检测 IGF2和H19 印记基因在长白猪和蓝塘猪中的表达水平.测定了1日龄和180日龄2个阶段的基因在各组织中的转录表达水平,按照生长性状分组,对组间的表达差异进行了比较分析.分析不同日龄长白、蓝塘猪各组织中 IGF2、H19 的表达量.结果显示,仔猪初生体质量大的组肝脏组织中 IGF2 基因表达水平显著高于初生体质量轻的组;180日龄猪皮脂厚的组脂肪组织的 IGF2 基因表达量高于皮脂薄的组;1日龄仔猪肝脏、肌肉和胃组织中 IGF2 表达量高于其他测定组织和180日龄的各组织;180日龄蓝塘猪肾脏组织中的 H19 表达量显著升高.     

金华猪与长白猪脂肪组织中HSLmRNA丰度的差异研究

运用半定量RT-PCR法对不同生长阶段的金华猪和长白猪背部脂肪组织中激素敏感脂肪酸酶(HSL)基因mRNA的表达丰度进行测定.结果表明:两品种在35、80和125日龄时均检测到了HSL mRNA,两品种猪背部脂肪组织中HSL基因的表达随日龄增加无显著性变化.金华猪HSL mRNA丰度在80日龄时比长白猪低24.24％ ...     

早期和后期限饲对肉鸡采食量及下丘脑POMC、NPY和瘦素受体mRNA转录的影响

采用隔日限饲方式对0～2周龄(早期)和7～9周龄(后期)三黄肉鸡进行限饲处理,分别于2和9周龄时各组随机选取10羽肉鸡宰杀后采样.结果显示:与对照组相比,早期限饲组鸡体重极显著降低(P＜0.01,n=40),后期限饲组鸡8周龄时体重显著降低(P＜0.05,n=20),9周龄时无显著差异(P＞0.05,n=10);早期限饲组鸡的平均日采食量低于对照组,而后期限饲组鸡平均日采食量升高;限饲期间肉鸡料重比增加,而自由采食期间无差异.Real-time PCR测定结果显示:肉鸡下丘脑神经肽Y(NPY)、阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)和瘦素(leptin)受体mRNA转录丰度均随日龄增加而显著升高(P＜0.05,n=10);早期限饲仅引起下丘脑POMC基因转录的显著下调(P＜0.05,n=10),后期限饲对下丘脑NPY、POMC和leptin受体mRNA无显著影响(P＞0.05,n=10).以上结果提示:早期2周的隔日限饲显著减少了肉鸡的采食量,从而最终导致体重的显著下降.下丘脑POMC、NPY和leptin受体基因在转录水平上表现出对慢性限饲的适应现象且差异不显著.     

淮南猪与长白猪脂肪代谢酶及脂联素的发育差异

为探明淮南猪与长白猪脂肪代谢酶及血清中脂联素的发育差异,对45日龄、90日龄、135日龄和180日龄健康长白猪和淮南猪进行血清中脂联素含量、肌内脂肪含量及脂肪代谢酶测定。结果表明:相同品种猪的肌内脂肪含量随着猪日龄的增加而增加;相同日龄不同猪种间肌内脂肪含量淮南猪显著高于长白猪(P0.05);同一品种猪血清中脂联素的含量随日龄增加而增加,135日龄和180日龄分别与45日龄间差异显著;淮南猪和长白猪脂肪组织中的脂肪酸合成酶(FAS)和激素敏感脂酶(HSL)含量随日龄的增加而增加,均以180日龄最高;脂联素及脂肪代谢酶变化趋势均随日龄的增加而增加,具有强脂肪沉积能力。     

瘦蛋白对犊牛肝细胞PC mRNA表达及其活性的影响

取单层培养72 h生长良好的犊牛肝细胞,采用单因素重复试验,分别添加0,2.5,5.0,10.0,50.0,100.0 ng/mL的牛重组牛瘦蛋白(Leptin),每个处理3个重复(每重复2孔)。再培养12 h后分别提取RNA并制备细胞上清液。应用荧光定量PCR方法检测外源leptin对肝细胞糖异生关键酶丙酮酸羧化酶(Pyruvate car-boxylase,PC)基因表达的影响,同时用比色法检测其对肝细胞PC活性的影响。结果表明:一定浓度的Leptin显著抑制了肝细胞PC mRNA表达,降低了PC活性。     

瘦素在妊娠小鼠子宫着床点与非着床点中的表达研究

目的:探讨瘦素在妊娠小鼠子宫着床点与非着床点中的表达规律。方法:性成熟雌性NIH小鼠与成熟雄鼠自然交配,在妊娠5,6 d分别脱臼处死小鼠取其子宫,然后进行以下实验:1.分别提取总RNA,检测胚胎着床点和非着床点子宫瘦素mRNA表达规律;2.分别进行石蜡包埋,切片,然后进行免疫组化试验,检测瘦素蛋白的表达规律。结果:妊娠5,6 d小鼠子宫着床点与非着床点中均有瘦素mRNA和蛋白表达,蛋白主要定位于腔上皮和腺上皮,着床点mRNA水平比非着床点显著增强。结论:瘦素在着床点与非着床点子宫组织中的表达差异提示瘦素在胚胎着床中的生理作用。     

leptin及其受体的研究进展

leptin是肥胖基因（obese gene,OB基因）的蛋白产物，具有广泛的生物学功能。据现有研究发现，leptin具有参与调节摄食，能量代谢，激素分泌，生物，生殖和免疫等过程的功能。leptin通过其受体发挥调节作用。笔者综述了leptin的受体。生物学功能。调控动物体重的作用机理及leptin抵抗。     

Leptin介导的SOCS3信号通路研究进展

 Leptin介导的SOCS3信号通路是由leptin,leptin受体,SOCS3,IRS和FAS组成的,leptin与其受体结合后经过一系列信号转导最终导致FAS的表达量增加,由FAS催化脂肪酸的合成,因此,对本信号转导通路的调节可以调控动物机体的脂肪代谢。本文主要介绍近年来关于leptin介导的SOCS3信号通路的组成、调节和作用机制的最新研究进展。     

奶牛Leptin及其受体研究进展

Leptin是由肥胖基因OB编码,由白色脂肪组织合成分泌的蛋白质类激素,主要参与调节体质量、采食量以及妊娠和分娩过程,在生殖、神经等组织器官中都有较高水平的表达。Leptin在血浆中的浓度是能量代谢过程中最明显的生理学指标之一。主要综述了letpin基因及其受体(Ob-R)在奶牛机体代谢过程中生理作用的研究进展。     

小鼠胚胎附植前后瘦素水平与胃瘦素长型受体相关性研究

为了对小鼠胚胎附植前后瘦素与脂肪细胞变化的相关性进行研究,本研究采用ELISA方法对小鼠生殖周期不同阶段的血清中的瘦素浓度进行了检测,皮下脂肪组织冰冻切片用苏丹(Ⅲ)染色计量脂肪细胞数量和大小的变化,用免疫组织化学染色法对胃瘦素长型受体进行定位分析。结果显示:妊娠期血清瘦素浓度高于间情期,且瘦素浓度从间情期到妊娠4日龄,呈上升趋势,妊娠5日龄稍下降,然后随妊娠日龄逐渐增加,与单位面积内脂肪细胞数量的变化趋势一致。妊娠7日龄,单位面积内脂肪细胞比间情期少,单个细胞面积大。胃底腺中下部部分胞质和细胞核有棕褐色阳性颗粒且阳性率随妊娠日龄的增加而增加。表明小鼠胚泡附植前后脂肪组织越多血清瘦素水平越高,瘦素及其长型受体可能通过影响胃的消化吸收达到调节机体能量平衡的目的。     

鸡瘦蛋白基因克隆中的若干问题研究

根据GenBank中鸡的LeptinmRNA序列(AccessionNo.AF012727)设计12对引物,用RT-PCR方法从不同品种(系)、不同时期及不同处理鸡的脂肪、肝脏和卵巢组织总RNA中没有扩增出鸡的Leptin基因片段;根据鸡的EST数据库中查到的一条鸡Leptin基因前体序列设计4对引物,用RT-PCR方法在包括卵巢在内的多个组织的cDNA中没能扩增出正确序列。为提高鸡Leptin基因的表达水平,通过给鸡注射胰岛素,利用RT-PCR方法对肝脏、卵巢和脂肪组织的总RNA进行扩增,没有得到目的序列。根据已发表的哺乳动物的Leptin基因序列设计兼并引物对鸡基因组DNA和脂肪、肝脏组织的cDNA进行PCR,结果没有特异性扩增条带,但在小鼠的基因组中可以获得稳定的扩增条带。用扩增长片段LATaq酶从鸡基因组DNA中也没有扩增出Leptin基因片段,而从小鼠的基因组DNA中,可扩增出小鼠Leptin基因片段;以小鼠LeptincDNA片段为探针,对鸡脂肪组织和肝脏组织来源的总RNA进行NorthernBlot分析,并未获得杂交信号;以猪的LeptincDNA片段为探针,对鸡基因组DNA进行SouthernBlot分析,并未获得特异性的结果。研究结果表明,在鸡的脂肪、肝脏和卵巢组织中不存在与小鼠Leptin基因同源性如此高的mRNA序列,在鸡的基因组中也不存在与小鼠、猪等哺乳动物Leptin基因序列同源性如此高的基因?     

Regulation of leptin in involution of mammary gland

Leptin,a protein hormone produced and secreted predominantly by white adipose tissue,has a critical role in the regulation and coordination of energy metabolism.Leptin is produced in the mammary gland by the fat tissue or by the mammary epithelium.In vitro study has shown that leptin triggers apoptosis in mammary epithelial cells.Mammary gland involution is characterized by extensive apoptosis of the epithelial cells.At the onset of involution,STAT3 is specifically activated.Various studies show that leptin act as a paracrine and autocrin factor to influence mammary epithelial cell proliferation and differentiation.This paper reviewed the function of leptin to the involution of mammary gland.     

瘦素与乳腺发育和泌乳

瘦素是一个可由乳腺脂肪垫和腺泡上皮细胞产生的自分泌和旁分泌因子。近年来,越来越多的研究发现它对乳腺的发育、泌乳和退化都有一定的影响。文章就瘦素在乳腺中的研究进展作一综述。