酵母聚糖和甘氨酸锌对栉孔扇贝血细胞的影响

采用流式细胞术对栉孔扇贝(Chlamys farreri)血细胞类群百分比的变化进行了研究,以探讨酵母聚糖和甘氨酸锌对贝类免疫防御影响的规律。体内注射酵母聚糖和甘氨酸锌后,分别于6 h、12 h、24 h、48 h、96 h和144 h测定其血细胞各类群的比例的变化。根据前向角散射光(FSC)和侧向角散射光(SSC)强度的不同,栉孔扇贝血细胞可明显地分为透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞3个类群。注射酵母聚糖后,在6 h、12 h、24h和48 h时,实验组透明细胞占总血细胞的比例显著高于对照组,而实验组小颗粒细胞所占比例在6 h、12 h和24 h时显著低于对照组。注射甘氨酸锌后,在12 h、24 h和48 h时,实验组透明细胞所占比例显著高于对照组,而小颗粒细胞所占比例显著低于对照组。说明酵母聚糖和甘氨酸锌对栉孔扇贝血细胞的分群有明显的影响,可显著刺激透明细胞的数量增多,同时颗粒细胞数量减少。     

病毒感染对栉孔扇贝血细胞类型和功能的影响

用从胶州湾大规模死亡栉孔扇贝体内分离出来的球状病毒注射感染栉孔扇贝（Chlamys farreri），分别于病毒感染后8h、24h、48h、72h和128h取血，采用流式细胞仪技术研究了病毒对栉孔扇贝血细胞类型及死亡率的影响，采用荧光显微技术研究了病毒感染的栉孔扇贝血细胞的体外吞噬和包囊化作用的变化。结果表明，病毒感染的扇贝血细胞各类型的比例同对照组相比有显著的差异，在24h、48h和72h，实验组透明细胞比例显著高于对照组，并呈逐渐升高趋势，在8h、24h、48h、72h，实验组大颗粒细胞比例显著低于对照组。在24h、48h、72h和128h，实验组血细胞的死亡率显著高于对照组。病毒感染后，实验组扇贝血细胞的体外吞噬率和包囊化率都显著高于对照组。     

病毒感染对栉孔扇贝血细胞类型和功能的影响

用从胶州湾大规模死亡栉孔扇贝体内分离出来的球状病毒注射感染栉孔扇贝（Chlamys farreri），分别于病毒感染后8h、24h、48h、72h和128h取血，采用流式细胞仪技术研究了病毒对栉孔扇贝血细胞类型及死亡率的影响，采用荧光显微技术研究了病毒感染的栉孔扇贝血细胞的体外吞噬和包囊化作用的变化。结果表明，病毒感染的扇贝血细胞各类型的比例同对照组相比有显著的差异，在24h、48h和72h，实验组透明细胞比例显著高于对照组，并呈逐渐升高趋势，在8h、24h、48h、72h，实验组大颗粒细胞比例显著低于对照组。在24h、48h、72h和128h，实验组血细胞的死亡率显著高于对照组。病毒感染后，实验组扇贝血细胞的体外吞噬率和包囊化率都显著高于对照组。     

毛蚶血细胞分类及吞噬功能研究

通过光镜观察毛蚶血细胞形态和结构,对其分类进行研究,分析不同类型血细胞吞噬能力,并研究温度对血细胞吞噬功能的影响。结果鉴定出毛蚶血细胞中有3种类型:(1)大透明细胞,大小为(12.97±1.22)μm,核质比为0.311±0.016,所占比例为(46.40±8.73)%;(2)颗粒细胞,大小为(9.98±1.85)μm,核质比0.390±0.058,所占比例为(41.48±8.63)%;(3)小透明细胞,大小为(7.60±1.17)μm,核质比为0.499±0.049,所占比例为(12.12±4.00)%。毛蚶血细胞在血淋巴液中的平均密度为(7.69±0.98)×106 cell/m L。体外吞噬活性试验表明,大透明细胞和颗粒细胞对酵母聚糖的吞噬率显著高于小透明细胞,吞噬率分别为(61.77±3.30)%、(61.32±3.62)%、(16.59±3.88)%。于15、20、25、30、35℃温度下进行毛蚶血细胞的吞噬试验,结果表明温度变化对血细胞吞噬能力产生明显的影响,30℃条件下,血细胞的吞噬活性最强,吞噬率达到(51.49±4.22)%。     

Cu~(2+)对栉孔扇贝外套膜组织培养的影响

[目的]了解重金属对栉孔扇贝的毒理效应。[方法]在DMEM培养液中分别添加质量浓度为0.05、0.10、0.20、0.40 mg/L的Cu2+,以细胞迁出时间和组织块增殖状况为评价指标,研究Cu2+对栉孔扇贝外套膜组织培养的影响。[结果]栉孔扇贝外套膜在DMEM培养液中贴壁良好。培养至72 h时,Cu2+质量浓度为0.05 mg/L的实验组有游离细胞迁出,且组织块增殖情况良好。培养至89 h时,Cu2+质量浓度为0.10 mg/L的实验组有游离细胞迁出,且组织块增殖情况较差。随着Cu2+质量浓度的增大,细胞迁出所需的时间越长,组织块增殖情况越差。Cu2+质量浓度为0.40 mg/L的实验组,培养96 h时并没有游离细胞迁出。[结论]Cu2+质量浓度大于0.10 mg/L时对栉孔扇贝外套膜的组织培养有一定的抑制作用。     

Ca^2＋对栉孔扇贝外套膜组织培养的影响

[目的]了解重金属对栉孔扇贝的毒理效应。[方法]在DMEM培养液中分别添加质量浓度为0．05、0．10、0．20、0．40mg／L的Cu^2＋。以细胞迁出时间和组织块增殖状况为评价指标,研究Cu^2＋对栉孔扇贝外套膜组织培养的影响。[结果]栉孔扇贝外套膜在DMEM培养液中贴壁良好。培养至72h时,Cu^2＋质量浓度为0．05mg／L的实验组有游离细胞迁出,且组织块增殖情况良好。培养至89h时,Cu^2＋质量浓度为0．10mg／L的实验组有游离细胞迁出,且组织块增殖情况较差。随着Cu^2＋质量浓度的增大,细胞迁出所需的时间越长,组织块增殖情况越差。Cu^2＋质量浓度为0．40mg／L的实验组,培养96h时并没有游离细胞迁出。[结论]Cu^2＋质量浓度大于0．10mg／L时对栉孔扇贝外套膜的组织培养有一定的抑制作用。     

溶藻弧菌对华贵栉孔扇贝体内几种酶活性的影响

对华贵栉孔扇贝（Chlamys nobilis）注射不同密度的溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）,于注射后6,12,18,48,72h测定体内过氧化氢酶（CAT）、超氧化物岐化酶（SOD）、碱性磷酸酶（ALP）和酸性磷酸酶（ACP）的活力。结果表明：5×107cell.mL-1,5×108cell.mL-1组血淋巴中CAT活性均有升高趋势,其中5×108cell.mL-1组在18h极显著增加（P≤0.01）,24h显著增加（P≤0.05）。5×108cell.mL-1组SOD活性最初表现为抑制,在12h和18h显著低于对照组（P≤0.05）,24h后明显升高,5×107cell.mL-1组与对照组相比差异不明显。肝脏中ALP活性在18h与对照组相比,5×108cell.mL-1组极显著升高（P≤0.01）,5×107cell.mL-1组显著升高（P≤0.05）。注射后ACP活性有明显升高的趋势,5×108cell.mL-1组在12h和18h显著高于对照组（P≤0.05）,且在注射后24h5×107cell.mL-1,5×108cell.mL-1组活性均达到最高。     

背角无齿蚌(Anodonta woodiana)血细胞的分类

用光学显微镜和透射电子显微镜对背角无齿蚌血细胞进行观察.结果发现,体长6～12cm的背角无齿蚌血细胞浓度为(2.42±0.38)×106/mL.根据细胞质内颗粒出现情况,将该蚌血细胞分为两大类,即颗粒细胞和无颗粒细胞.颗粒细胞明显的特征是细胞质中存在许多颗粒,无颗粒细胞的特征是细胞质中不含有或含有少量颗粒.根据颗粒细胞的体积和胞质内颗粒的大小还可以将其分为大颗粒细胞和小颗粒细胞(分别占4.28%和59.28%).根据无颗粒细胞的大小和核质比的不同将其分为透明细胞和淋巴样细胞(分别占27.74%与8.70%).4种类型的血细胞对Wrights染料有不同的亲和性,大颗粒细胞表现为嗜酸性,小颗粒细胞与透明细胞均呈现嗜酸性和嗜碱性两种,淋巴样细胞表现为嗜碱性.     

河水添加对栉孔扇贝生理和免疫指标的影响

为探究河水注入养殖海域对栉孔扇贝的影响,挑选山东省荣成市爱莲湾海域的养殖扇贝为试验对象,研究其在毗邻河水(0、10％、20％、30％、50％)添加后存活率、耗氧率、排氨率、SOD活性及重金属含量的变化.在试验过程中,0、10％、20％河水添加组存活率均≥95％,30％河水添加组存活率为91％,50％河水添加组栉孔扇贝于120 h时全部死亡;在1～48 h间,10％、20％、30％河水添加组栉孔扇贝的耗氧率、排氨率和闭壳肌SOD活性均呈现先下降后上升的趋势,并在120 h后逐渐趋于稳定.50％河水添加组栉孔扇贝的耗氧率、排氨率和闭壳肌SOD活性持续最低(P<0.05).在试验结束(336 h)时,10％河水添加组耗氧率显著高于其他试验组(P<0.05),排氨率和闭壳肌SOD活性略高于0、20％河水添加组(P>0.05).30％河水添加组耗氧率、排氨率和闭壳肌SOD活性显著低于其他试验组(P<0.05);试验结束时,各试验组栉孔扇贝体内的Pb、Cr、Hg、As含量均有提高,显著高于无(0)河水添加组.     

氯氰菊酯和氰戊菊酯对栉孔扇贝的急性毒性

研究了氯氰菊酯和氰戊菊酯对栉孔扇贝Chlamys farreri的急性毒性作用和不同农药浓度对栉孔扇贝鳃ATP酶的影响。结果表明：氯氰菊酯和氰戊菊酯对栉孔扇贝的96 h LC50分别为0.240、1.742mg/L，安全浓度分别为2．40、17．40 μg／L，栉孔扇贝对氰戊菊酯的敏感性低于氯氰菊酯；不同浓度的氯氰菊酯和氰戊菊酯均使栉孔扇贝鳃Na^＋／K^＋-ATP、Ca^2＋-ATP、Mg^2＋-ATP酶的活性有不同程度的提高，这是扇贝对农药作出的一种急性应急反应。     

有机-无机复合污染对扇贝积累石油烃的影响

[目的]研究有机-无机复合污染对扇贝积累石油烃的影响。[方法]在实验室模拟条件下研究石油烃与Cu、Pb复合污染对栉孔扇贝积累石油烃的影响。[结果]单一石油烃污染条件下,石油烃在栉孔扇贝体内的积累量随暴露时间的延长及石油烃浓度的增大都有明显增大趋势;复合污染条件下,石油烃在栉孔扇贝体内的积累量随暴露时间及污染物种类及浓度的变化发生着动态变化,且不同浓度处理组间差异很大,当石油烃浓度固定为0.6 mg/L时,不同处理浓度组的Cu、Pb及Cu与Pb组合都促进了栉孔扇贝对石油烃的积累,但低处理浓度组的Cu、高处理浓度组的Pb、低处理浓度组的Cu与Pb组合更有利于促进栉孔扇贝对石油烃的积累。[结论]石油烃与Cu、Pb复合污染条件下,石油烃在栉孔扇贝体内的积累状况比单一石油烃污染条件下要复杂得多。     

黄渤海水域栉孔扇贝加工废弃液中的营养及功能成分分析

[目的]明确黄渤海水域栉孔扇贝加工废弃液中的营养及功能成分。[方法]取山东烟台的栉孔扇贝废弃液为材料,采用83550型氨基酸自动分析仪和分光光度法分析栉孔扇贝废弃液的浓缩液中的有关营养功能成分。[结果]山东烟台栉孔扇贝加工废弃液中含有8种人体必需氨基酸,牛磺酸含量为1.97%,蛋白质和总糖的平均含量分别为11.82%和12.68%。[结论]扇贝煮汤营养物质含量丰富,且含有大量的鲜味物质,是加工调味品的理想原料。     

聚肌胞苷酸刺激对鳜免疫因子活性及干扰素基因表达的影响

【目的】比较聚肌胞苷酸（Poly I:C）刺激对鳜（Siniperca chuatsi）免疫因子活性及干扰素系统相关基因表达的影响,为判断和指导鳜养殖过程中病原刺激后免疫应答和病毒监测提供参考依据。【方法】采用Poly I:C模拟病毒刺激,比较注射后不同时序（0、3、6、12、24、36、48和72 h）鳜白细胞组成百分比,以双抗体夹心酶联免疫法检测补体蛋白水平变化,荧光PCR相对定量检测免疫相关基因表达变化。【结果】血液白细胞百分比中,血栓细胞>单核细胞>淋巴细胞>嗜中性粒细胞,其中,与对照组比较,处理组6~72 h单核细胞百分比极显著提高（P<0.01,下同）,且于48 h达峰值后恢复至初始水平,嗜中性粒细胞占比均有明显提升,淋巴细胞、血栓细胞占比均呈下降趋势。处理组血清补体C3含量在3 h高于初始,6 h低于初始,与对照组差异显著（P<0.05,下同）;补体C4含量处理组3 h显著高于对照组,6、24、48 h显著低于对照组。与初始0 h相比,处理组肾脏、胸腺、脾脏和肝脏IRF7基因表达量分别从3和6 h开始极显著上调,且胸腺表达量最高;处理组肾脏和肝脏IFNh基因表达量3~12 h极显著上调,胸腺IFNh基因表达量于6 h达峰值,12 h后恢复下降,脾脏IFNh基因表达在各时段均低于初始;处理组肾脏、胸腺、肝脏、脾脏IFNc基因表达量于12 h极显著上调,然后逐渐下降,分别于72、72、48和72 h达最低水平。【结论】鳜受Poly I:C模拟病毒刺激后,血细胞中各类白细胞、血清酶补体C3和C4含量有不同变化,干扰素在不同时序显著影响各组织中的表达变化。     

中国对虾血细胞及其吞噬活力的电镜研究

对中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）血细胞及其吞噬活力进行了电镜研究．结果表明，中国对虾血细胞有三种类型：①颗粒细胞，无吞噬功能，胞浆内充盈大电子致密颗粒；②半颗粒细胞，胞浆内颗粒较颗粒细胞少而小，富含线粒体；③透明细胞，胞浆内无颗粒．透明细胞和半颗粒细胞都具有吞噬功能．三类血细胞经金黄色葡萄球菌处理后发生形态学改变     

盐度变化对锯缘青蟹Scylla serrata免疫因子的胁迫影响

在实验室条件下测定了在盐度5.0,10.0,17.5,25.0,35.0胁迫0,12,24,48,72和96 h,锯缘青蟹血细胞总数(THC)、血细胞吞噬能力及其血清中溶菌酶(LZM)、超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、过氧化物酶(POD)、酚氧化酶(PO)、溶血素等免疫相关因子的活力变化。结果表明：各梯度盐度胁迫下THC明显下降,其他免疫指标均在12至24 h出现一个峰值变化,而后趋于平稳。在12 h盐度5.0和35.0组吞噬百分比(PP)、吞噬指数(PI)值高于对照组,盐度10.0和25.0组的LZM,PO活力显著高于对照组,除盐度5.0组以外的ACK,APK活力均高于对照组;POD、溶血素活力在盐度10.0和25.0组显示随时间的延续而增高,分别在72和24 h达到最大值,且极显著高于对照组;SOD的变化不显著。说明盐度突变对锯缘青蟹各相关免疫因子均有影响,低浓度短时间的盐度胁迫能引起应激反应,适当提高其免疫力,而大幅度长时间的盐度胁迫可显著影响锯缘青蟹的抗病力。