“黑生101”大豆子叶节再生体系的建立

以高产、抗病、高蛋白“黑生101”大豆（Glycinemax）为材料,以子叶节（带子叶）为外植体建立了再生体系．研究结果显示：在B5基本培养基基础上附加0．8mg／L6-BA对“黑生101”大豆进行预培养,将能够较好地促进大豆种子的萌发;完整子叶培养,子叶节芽诱导率平均为44．26％,每个子叶节外植体平均出芽数为3．23,略高于以1／2子叶培养的结果,并且丛生芽生根率高达100％．为今后实现以“黑生101”大豆作为受体进行高效表达外源基因,以及将“黑生101”大豆作为生物反应器生产药用蛋白的转基因研究奠定了重要的基础．     

大豆胚芽尖再生体系的建立

以'西豆3号'等3个大豆品种为材料,以胚芽尖为外植体,研究种子萌发时间、植物生长调节剂对不定芽分化的影响以及生长调节剂对不定芽生根的影响,建立高效再生体系.结果表明种子在1/2MS培养基上萌发24 h后,将胚芽尖接种在BM+5 mg/L BA培养基上培养24 h,然后转入BM+0.4 mg/L BA+0.4 mg/L IBA培养基诱导不定芽,出芽率达64.91%～68.89%;将长3～5 cm的不定芽在BM+0.5 mg/L BA+1.5 mg/L IBA培养基中培养7 d后,转入BM基本培养基中生根,生根率达22.22%～26.32%.     

麻疯树根高效再生体系的建立及不定芽起源研究

为了克服现有麻疯树快繁技术的不足,分别以麻疯树胚根和子叶外植体诱导的不定根为外植体诱导不定芽.麻疯树子叶不定根诱导的最佳培养方式为:MS+5 mg/L IBA上培养4天,然后转至MS0培养基上生根.诱导生根率和生根数分别达到93.33%和6.54个/外植体.子叶不定根诱导不定芽的最佳培养基是MS+3.0 mg/L 6-BA+3 mg/L IAA,诱导率达到83.33%.麻疯树胚根的最佳不定芽诱导培养基为MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA,分化率达67.80%,平均出芽数为3.25个/外植体.对麻疯树胚根再生的各阶段进行了石蜡切片观察,明确了不定芽起源于根的薄壁细胞层.与现有技术相比,本方法具有周期短、再生效率高的特点.     

多肉植物黑王子组织培养体系的研究

为快速繁殖多肉植物黑王子(Echeveria‘Black Prince’),建立其组织培养体系,试验采用黑王子叶片为外植体进行离体培养研究.结果表明:黑王子不经过愈伤组织的诱导阶段,即能从外植体上直接诱导分化出不定芽,其最适培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,诱导率高达94.6%;最适的不定芽生根培养基为MS+0.5mg/L NAA,生根率达92.0%;试管苗的移栽成活率为95.0%.本研究建立了黑王子快速、高效繁殖的组织培养体系,为其工厂化生产与利用提供了技术保障.     

一种美味猕猴桃”金魁”快速无性繁殖方法

研究不同植物激素对美味猕猴桃"金魁"成熟叶的不定芽分化、芽增殖与生根的影响以及组培苗的移栽技术.结果表明,TDZ(噻苯隆)比BA(6-苄基氨基嘌呤)更有利于不定芽的诱导,在含1 mg/L TDZ和0.2 mg/L NAA(萘乙酸)培养基上,不定芽诱导率达到90%以上;通过茎段培养,芽在含0.3 mg/L BA和0.5 mg/L GA3(赤霉素)培养基上30 d可以增殖4.5倍;所增殖的芽(2 3 cm长)在含0.7 mg/L IBA(吲哚丁酸)培养基上35 d内可以100%生根.组培苗在温室里炼苗30 d后移到室外自然环境中,生长健壮,移栽90 d后的成活率达到96%.     

皖西食用百合茎尖脱毒培养

选取食用百合卷丹的鳞茎作为外植体,以MS为基本培养基,分热处理和非热处理两组进行茎尖离体培养,探讨不同植物激素组合对不定芽的诱导发生、继代增殖以及诱导生根的影响.结果表明,两个实验组皆以6-BA 1.0 mg/L十NAA 0.2mg/L的激素组合对于不定芽的分化发生为优,热处理组的芽诱导率和不定芽平均分化量分别为88.9％和4.5个,未热处理组的分别为87.5％和4.9个;不定芽增殖培养的最佳激素组合为6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L,芽增殖系数为4.20;不定芽诱导生根的最佳激素组合为6 BA 0.2 mg/L+NAA 1.0 mg/L.     

黑果枸杞组培繁殖培养基选择

以黑果枸杞种子为材料,通过配比不同质量浓度植物生长调节剂的方法,研究在其组织培养快速繁殖过程中培养基的选择.结果表明:MS培养基适合黑果枸杞种子萌发与生长;无菌苗在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA培养基中可以形成较好的愈伤组织;在MS+0.4 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA培养基中不定芽数量较多;适宜生根的培养基为1/2 MS+1.5 mg/L IBA,生根率为98%.组培苗在泥炭土、蛭石、珍珠岩(2∶1∶1)混合基质中移栽成活率高达93%.     

厚皮甜瓜黄河蜜植株再生研究

利用厚皮甜瓜黄河蜜3号子叶及下胚轴进行植株再生实验研究.结果表明:子叶不定芽分化率高于下胚轴,适合子叶不定芽分化的培养基为MS 6-BA1.5 mg/L NAA0.2 mg/L,分化率为60%,每个外植体平均分化芽数9.4个.适合下胚轴不定芽分化的培养基是MS 6-BA 1.75 mg/L NAA0.1 mg/L,分化率为9%,每个外植体平均分化芽数8.5个.对不定芽黑暗处理2天后用1/2 MS IAA0.2 mg/L诱导生根,生根率达91.12%,平均根数为12条.200 mg/L的NAA对无根苗处理20 min后移入1/2河沙 1/2蛭石基质中,1/2 MS营养液浇灌,试管外生根率为52%.     

福建山樱花的组织培养及植株再生

以春季萌发的福建山樱花嫩枝为外植体诱导丛生芽。在 1 /4MS +BA1 .0mg/L +IBA0 .0 1mg/L的培养基上 ,其丛生芽诱导率达 87.5 % ;在继代培养中选择MS +BA1 .0mg/L +IBA0 .1mg/L +GA30 .3mg/L或KT1 .0mg/L +NAA0 .1mg/L +GA30 .3mg/L培养基 ,不定芽增殖较快。赤霉素对其不定芽的伸长有明显效果 ,当芽伸长至 3～ 4cm时 ,切下置于生根培养基 1 /2MS +NAA1 .0mg/L +IBA1 .0mg/L +BA0 .75mg/L中 ,生根率达 90 %以上 ,移栽成活率达 95 %。     

常绿杨植株再生体系的建立

以水培常绿杨(Populus deltoides60/160×P.nigra'chile')枝条得到的叶柄为外植体,探讨了常绿杨植株再生的方法.结果表明:在MS BA0.3 mg/L NAA0.1 mg/L培养基上,不定芽的分化率最高,为82.5%;不定芽在MS BA0.2 mg/L NAA0.05 mg/L培养基上的继代增殖系数为7.2;在继代增殖培养基中添加0.4 mg/L GA3时,对不定芽的增殖和伸长有显著效果;在生根培养基1/2MS NAA0.05 mg/L上,生根率达到96.5%.     

香石竹茎段无性系的建立

以香石竹无菌茎段为外植体成功获得再生植株，并建立快速无性繁殖系，茎段愈伤组织的诱导及芽点的分化最佳培养基是1／2MS BA1 2，4mg／L-D0．4mg／L，芽增殖的最佳培养基是MS BA0．5mg/L NAA0．5mg／L，根诱导最佳培养基是1／2MS IAA0．2mg／L，最佳移栽基质是炉碳渣。     

铁线莲‘朱卡’组织培养技术及再生体系的建立

【目的】以铁线莲‘朱卡’(Clematis ‘Julka’)的带芽茎段为起始材料,通过组织培养方法建立再生体系。【方法】利用腋芽诱导—不定芽增殖—生根和愈伤组织诱导—增殖—分化—生根两种途径,建立该品种的组织培养再生体系,形成铁线莲‘朱卡’完整植株。【结果】铁线莲‘朱卡’组织培养最适宜灭菌条件为质量分数10%次氯酸钠溶液灭菌12min;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+IBA 0.20 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+GA₃ 0.2 mg/L;带芽茎段诱导愈伤组织最适培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织增殖最适培养基为MS+NAA 0.20 mg/L +6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织分化最适培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 3.0 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L。【结论】首次用两种器官发生方法建立了稳定高效的铁线莲‘朱卡’再生体系。直接形成不定芽时增殖倍数可达5.52。诱导愈伤组织途径的器官发生中,愈伤组织分化率可达76.7%,分化不定芽平均数超过3。两种途径诱导生根率都在90%以上。     

落叶型冬青雌、雄株茎段的组织培养技术

【目的】建立落叶型冬青(Ilex verticillata L.)雌雄株的组织培养快繁体系。【方法】以落叶型冬青优良雌株和雄株的幼嫩茎段为材料, 通过添加不同浓度的6-BA、IBA、NAA、氯吡苯脲(CPPU)等植物生长调节剂,对外植体消毒时间、诱导培养基、增殖及生根培养基进行了优化。【结果】落叶型冬青雌株、雄株茎段外植体腋芽诱导最好的培养基分别为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA和MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,诱导率分别为93.3%和83.3%; 雌株和雄株丛芽增殖效果最好的培养基分别是MS+1.0 mg/L CPPU+0.2 mg/L NAA和MS+1.0 mg/L CPPU+0.1 mg/L NAA,增殖系数分别达3.48和1.25; 落叶型冬青在1/2 MS+0.4 mg/L NAA培养基上雌、雄株的生根率分别为26.7%和20.0%; 添加一种促根剂后,雌、雄株的生根率可达66.7%和46.7%。【结论】该组织培养体系特别是雄株组培体系的建立可为落叶型冬青苗木的快速繁殖提供技术支持。     

大豆种子萌发和幼苗生长对锑胁迫的响应

为研究锑（Sb）对大豆种子萌发及幼苗生长的影响,采用水培方法,进行了锑胁迫大豆种子发芽和根伸长观察实验,并对大豆2周幼苗的根部和茎叶部的锑含量用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分别进行了测定。结果表明：0~200 mg/L浓度范围内,Sb对大豆发芽势和发芽指数的作用呈现为整体促进、低强高弱的趋势,即各实验浓度组发芽势均高于空白组,在15 mg/L浓度时达到最大值;对发芽率无影响;对根伸长有抑制作用,且随锑浓度的增大而增大;15 mg/L时,其对大豆的活力指数的促进作用最为明显;15~50 mg/L浓度范围内茎叶部测得Sb含量较高,测定最高值出现在50 mg/L组为2.45 mg/kg,各组根部均未检出。     

农杆菌介导的大豆反义fad2-1基因转化烟草研究

以烟草无菌苗叶片为外植体,通过根癌农杆菌介导法,将大豆反义油酸脱饱和酶基因导入烟草中,经梯度卡那霉素筛选,获得可在含75mg/L卡那霉素选择生根培养基上再生的抗性植株75株,其中67株抗卡那霉素植株的PCR分析扩增出目的片段;RT-PCR分析表明该基因在烟草中表达.结果表明大豆反义油酸脱饱和酶基因在烟草基因组中整合和表达.这为大豆反义油酸脱饱和酶基因转入大豆和表达奠定基础,也为烟草基因工程育种提供了依据.     

金富猕猴桃离体培养与植株再生的优化研究

以“金富”猕猴桃的单芽茎段为外植体进行离体培养和植株再生的优化研究.结果表明,以MS 6-BA1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L作增殖继代培养基为宜,以1/2MS NAA 0.3 mg/L作生根培养基为宜.适当浓度的6-BA对猕猴桃的不定芽增殖有明显的促进作用,而对茎伸长却有抑制作用,6-BA和NAA配合使用可促进芽苗主茎伸长,对改善猕猴桃植株组培苗质量有较好的作用.炼苗移栽成活率达到94%以上.     

栝楼的组织培养研究

本文对栝楼的快速繁殖,愈伤组织的诱导与再分化,不定根尖分化出不定芽进行了初步研究。结果表明:栝楼的腋芽在MS 6-BA 0.5mg/L培养基上可以快速繁殖。无根苗转移至MS NAA 0.2mg/L培养基上可以100%生根;栝楼茎段很容易诱导出愈伤组织,在MS NAA 1.0mg/L 6-BA 0.5mg/L培养基形成的愈伤组织通过继代培养35d后,形成茁壮的绿苗; 将栝楼长约1cm的不定根尖培养在MS 6-BA5-7mg/L的培养基上,均可以诱导出大量的不定芽。     

旱柳体外培养与直接分化再生系统的建立

给出了旱柳体外培养的方法:9月份至12月份采集1~2 a生枝条上带腋芽的茎段,经过筛选确定MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA为最佳诱导培养基,平均每个芽点产生的不定芽数量为3.5个,20 d后苗高为1.8 cm;不定芽在MS+0.1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基中继代增殖及生长较好,为适宜的增殖培养基;在形成的不定芽中有些不定芽起源于单株苗的切口基部,因此,初步建立了旱柳的直接分化再生系统,可为旱柳的遗传转化等研究奠定基础.经过壮苗处理的幼苗在MS+0.2 mg/L NAA培养基上的生根率达100%,且生根量多,幼苗生长健壮.生根苗移栽至V(草炭土)V(河沙)为3 1的混合基质中,60 d后成活率为90%左右.     

苜蓿不同品种愈伤组织诱导、分化和再生能力的比较研究

以新疆大叶、甘农1号、甘农3号和陇东4个苜蓿品种的下胚轴、子叶和子叶节为外植体,比较了不同苜蓿品种及外植体愈伤组织诱导、分化及再生能力的差异,研究了不同浓度及配比的植物生长调节物质对愈伤组织诱导和芽分化再生的影响。结果表明,4个苜蓿品种再生能力依次为新疆大叶>甘农3号>甘农1号>陇东苜蓿,下胚轴外植体在愈伤诱导培养基(MS 2mg/L2,4-D 0.2mg/LZT)上出愈率分别为94%,83%,71%和58%,胚性愈伤组织在分化培养基(MS 0.2mg/LZT 50mg/L谷氨酰胺)上分化率分别为15.8%,9.2%,7.1%和4.5%;下胚轴再生能力优于子叶节和子叶;丛生芽在生根培养基(1/2MS)上生成完整的根;各品种的再生苜蓿植株均成功移栽到土壤中,成活率100%。上述4个苜蓿品种分化再生能力的阶段性研究结果为今后通过基因工程方法改良苜蓿奠定了基础。