不同部位灵芝及子实体提取物中总三萜酸含量测定

建立不同部位灵芝及子实体提取物中总三萜酸含量测定方法.灵芝样品用乙醇提取,依次经氯仿、5%碳酸氢钠萃取,酸化后再用氯仿萃取、浓缩至干,称重,即得灵芝总三萜酸量.结果:灵芝子实体总三萜酸为(8.58±0.25)mg/g,孢子粉为(3.48±0.03)mg/g,菌丝体仅为(1.75±0.09)mg/g;菌盖总三萜酸含量为(12.62±0.22)mg/g,菌柄为(7.66±0.08)mg/g.10批次灵芝子实体的总三萜酸含量范围为4.3416.39 mg/g.灵芝子实体提取物中的总三萜酸含量以醇-水提取物的最高为(208.70±5.54)mg/g;碱水提取物的最低,仅为(123.07±4.99)mg/g.HPLC初步分析子实体和孢子及子实体提取物间三萜酸成分大部分相同.本法适用于灵芝子实体及其提取物、灵芝孢子和菌丝体总三萜酸的含量测定,结果可靠,可为灵芝产品质量指标提供依据.     

不同灵芝菌株多糖、三萜化合物比较分析

比较不同灵芝菌株间及同一菌株子实体与菌丝体间多糖、三萜化合物含量差异.研究发现，不同菌株间多糖、三萜含量的差异较大，黄金芝子实体多糖含量最高，达到了5.625％；京大灵芝三萜含量最高，为5.788％；黄金芝、京大灵芝的多糖和三萜总含量最高，分别为7.044％，6.667％.灵芝子实体三萜含量低于菌丝体，而菌丝体与子实体间多糖含量的高低因菌株而异.     

一种快速测定灵芝孢子粉抗氧化性的方法

采用紫外分光光度法,以Fenton反应为基础,建立灵芝孢子粉抗氧化性快速准确测定的新方法.以水杨酸与Fenton反应产生的羟基自由基反应生成的二羟基苯甲酸在530nm处有最大吸收的原理,确立最佳反应条件.在此条件下,以抗坏血酸作为羟基自由基的清除剂,获得了标准曲线和标准对照图,为灵芝孢子粉抗氧性的快速检测提供了标准思路.在此最佳条件下,采用超声波提取法对灵芝孢子粉进行多糖的提取,将多糖提取液或者灵芝孢子粉颗粒加入反应体系中,反应后测其在530nm处的吸光度,即可快速获知其抗氧化性.同时,比较了破壁和未破壁孢子粉提取液和孢子粉颗粒的抗氧化性差异,结果表明破壁后的抗氧化性较未破壁高10%.证明此快速测定方法的实用性.本方法操作简单,所用试剂均无毒副作用,为灵芝孢子粉抗氧化性的快速测定提供一个较快速且准确的方法.     

森林抚育间伐对灵芝活性成分的影响

通过不同抚育方式形成三种不同的抚育样地(即强度透光H-L、中度透光M-L和弱度透光L-L),在各样地内摆放灵芝菌袋并进行常规出菇管理,测定灵芝子实体中蛋白质、多糖、三萜、微量元素等主要成分的含量,通过方差分析和多重比较探讨不同抚育间伐条件下灵芝子实体中活性成分含量的变化。不同抚育条件下的林分孔隙度直接决定着光照量,从而间接影响灵芝子实体中活性成分的含量。灵芝子实体中活性成分的测定表明,不同抚育条件的蛋白质、多糖、麦角甾醇、三萜含量存在显著差异,M-L灵芝子实体中蛋白质含量、多糖含量和三萜含量最高,其中蛋白质含量达到19.71 mg·g~(-1),较L-L增加了42.9%;多糖含量为1.88%,较H-L和L-L分别增加11.2%和27.9%;三萜含量为8.53%,较H-L和L-L分别高10.2%和20.5%。L-L条件下麦角甾醇含量最高为0.75mg·g~(-1),较H-L增加141.9%。矿物质元素分析显示12种测定元素中,H-L条件下4种元素含量较高,ML条件下5种元素含量偏高,综合以上结果,不同抚育条件处理灵芝子实体中主要成分含量不同,中度光照条件下灵芝子实体中含量较为合理。中度光照有利于蛋白质、多糖、三萜等活性成分的积累,弱光有利于麦角甾醇、钠、部分微量元素的增加。     

尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)基因调控不同地源灵芝孢子粉次生代谢产物的差异

目的 探讨不同地源灵芝孢子粉携带尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UDP-glucose pyrophosphorylase,UGPase)基因在转录水平上的差异表达,以及对灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharide,GLP)含量的影响.方法 采集不同地源灵芝孢子粉共7批18份,通过水浸煮-醇沉法提取GLP,应用苯酚-硫酸法计算GLP含量.克隆、测序UGPase基因,荧光定量PCR检测UGPase-mRNA.结果 灵芝孢子粉GLP检测结果显示:吉林产含量为(3.3610±0.0046)％,云南产含量为(2.8870±0.0059)％,××堂孢子粉含量为(2.3990±0.0053)％,差异具有统计学意义(P<0.05);克隆UGPase基因测序结果显示:不同地域灵芝孢子粉携带UGPase基因序列相同,与Genbank中UGPase基因序列(Sequence:KM260167.1)核苷酸同源性达100％.UGPase-mRNA检测结果显示:吉林产灵芝孢子粉为表达量最高.结论 不同地源灵芝孢子粉GLP与UGPase-mRNA相对表达量存在差异.UGPase基因在高多糖灵芝菌株中存在明显的表达优势,与GLP的生物合成呈正相关,该机制为深入研究GLP的生物合成提供了理论依据.     

破壁灵芝孢子中生物碱和脂溶性成分GC/MS分析

采用气相色谱-质谱联用(GC/MS)的方法对破壁灵芝孢子粉中的生物碱和乙醚提取物进行了化学成分的分析.实验中,灵芝孢子粉的乙醚提取物经气相色谱共分离出39个峰,通过谱图检索和谱图解析,鉴定出24种化合物.有4种化合物是通过人工的谱图解析及其特征峰断定为胺醇类化合物.24种化合物中主要为烃、醇、醛、酯、酮等,但其相对含量均较低,绝大多数是脂类物质.对灵芝孢子粉的生物碱的GC/MS分析,没有检测到生物碱的特征峰.     

灵芝抑制肿瘤微环境中Treg细胞功能的机制

为探究灵芝抑制肿瘤的可能机制,分别采用灵芝三萜、多糖及三萜多糖配伍对H22荷瘤小鼠模型进行干预,检测瘤体重量、体积,流式细胞法检测肿瘤组织中Treg细胞比例,RT-PCR法检测趋化因子CCL22、受体CCR4和FOXP3 mRNA表达水平,IHC法检测FOXP3蛋白表达水平,ELISA法检测IL-10、TGF-β1、IL-2含量.结果显示,灵芝能抑制H22肿瘤生长,配伍组抑瘤率(47.8%)明显高于三萜组(21.4%)和多糖组(30.8%);灵芝能降低肿瘤微环境中Treg细胞比例,配伍组比例(1.93%)明显低于三萜组(3.04%)和多糖组(2.18%);灵芝能显著降低相关mRNA的表达、FOXP3和IL-10、TGF-β1水平,增加IL-2水平.因此,灵芝可通过减少Treg细胞向肿瘤组织浸润、抑制其分泌细胞因子,同时增加IL-2水平来促进抗肿瘤免疫,且三萜和多糖合用可能存在协同作用.     

超声-液氮冻融处理对灵芝孢子粉多糖提取的影响

利用苯酚-硫酸法对超声波-液氮冻融处理的灵芝孢子粉多糖含量进行了测试,结果表明采用液氮进行淬冷破壁具有效果好,操作简便等特点;增加冻结-解冻循环次数在一定程度上能提高多糖含量,循环次数以4次左右为宜;将超声波处理法和液氮处理法很好地结合起来,其内容物释放更高,效果更佳,此方法更具实用价值.     

不同灵芝子实体产量与子实体多糖含量的比较

灵芝是一种名贵的药用真菌,现代医学证明,灵芝具有抗癌、抗肿瘤、止喘、改善睡眠、延年益寿、养颜等多种生理活性．采用相同的栽培方式栽培不同灵芝菌株,对几种灵芝品种进行比较研究,不同菌株生物活性多糖的含量由于菌种特性、培养条件的不同其存在差异．结果表明,甜芝子实体产量最高,灵芝G9子实体多糖含量最高．     

灵芝主要有效成分超声提取工艺的优化

目的研究灵芝三萜和灵芝多糖的超声提取工艺.方法采用超声波辅助法,探讨了提取剂的pH(碱醇)、提取剂用量、提取温度、超声时间4个因素对灵芝三萜提取效果的影响,并用无水乙醇做对照实验.探讨超声时间、提取温度、提取剂用量3个因素对灵芝多糖提取效果的影响.结果醇的pH和超声时间对灵芝三萜的提取效果有明显影响,其他两因素影响效果不大;提取时间和提取温度两个因素对灵芝多糖提取效果达到极显著水平.结论灵芝三萜最佳提取条件为:乙醇用量30倍+提取温度60℃+提取时间60 min+碱醇pH8.5,对无水乙醇调pH可以明显提高乙醇提取灵芝三萜的能力;灵芝多糖提取最佳条件为:超声提取时间55 min+提取温度55℃+提取剂用量50倍.     

紫苏全生长期16种无机元素的分布规律

测定不同生长期紫苏(Perilla frutescens)根、茎、叶部位中16种无机元素的含量变化,分析其分布规律.对紫苏进行人工栽培,分期采收,采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)冷焰模式和CCT模式测定紫苏中16种无机元素含量.结果表明,16种元素总体上都随生长天数增加而含量呈下降趋势,有8种元素在紫苏茎中的含量都高于根、叶部位.研究发现紫苏中含有丰富的常量元素如K、Mg、Na、Fe、Al,以及Mn、Zn等人体必需的微量元素;毒害元素As、Cd、Pb的含量均符合中国药典的限度要求.幼苗期各种元素的含量最高,多种元素在茎中含量高于根、叶.     

灵芝饼茶降脂作用研究及总三萜含量的测定

将KM小鼠随机分成6组,除空白对照组外,其余各组高脂饲料喂养造模,连续28d.同时除模型组外,其余组灌胃相应药物,给药期间称量小鼠体重,最后测定各组小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的变化.以灵芝酸A为对照品,分光光度法测定灵芝饼茶中总三萜的含量.结果表明,与高脂模型组比较,灵芝饼茶提取物均能不同程度的抑制高脂饲料引起的小鼠体重增加(P<0.05或P<0.01);与高脂血症模型组小鼠比较,灵芝饼茶提取物组小鼠血清TC、TG、LDL-C水平均显著降低(P<0.05或P<0.01).灵芝饼茶中总三萜的含量为1.5%.灵芝饼茶具有降血脂作用,其总三萜的含量控制在1.5%以上.     

灵芝主要营养成分的测定分析

分析了灵芝（ＧａｎｏｄｅｒｍａＬｕｃｉｄｕｍ,ｅｘｆｒ．）及紫芝（ＧａｎｏｄｅｒｍａｊａｐｏｎｉｃｕｍＦｒ．Ｌｉｏｇｄ）的子实体、菌丝体中所含的主要营养成分的种类及其相对含量．结果表明,（１）菌丝体中蛋白质的净含量和总糖含量都高于子实体;（２）３种子实体均含有１８种氨基酸,其中人体必需氨基酸的相对含量高于５０％,比一般食用菌约高１０％;（３）子实体中还含有Ｍｎ,Ｃｒ,Ｃｕ,Ｆｅ,Ｃａ,Ｍｇ,Ｚｎ,Ｓｅ,Ｇｅ等多种微量元素．     

藏药木藤蓼中20种无机元素质量分数测定

通过测定木藤蓼药材中无机元素的种类和质量分数,比较不同地区木藤蓼药材中无机元素的异同点.采用微波消解法消解木藤蓼药材,采用ICP-OES法测定铝(Al),硼(B),钡(Ba),钙(Ca),铁(Fe),钾(K),锂(Li),镁(Mg),锰(Mn),钼(Mo),钠(Na),磷(P),锶(Sr),钛(Ti),铜(Cu),锌(Zn)等16种元素的质量分数;采用原子荧光光谱法测定汞(Hg)和砷(As)两种元素的质量分数;采用原子吸收光谱法测定铅(Pb)和镉(Cd)两种元素的质量分数;采用聚类分析法分析不同地区木藤蓼中无机元素的差异性.结果表明:药材中20种元素质量分数最高的是K; Li和Mo两种元素在11批药材中均未检出;第9,10批药材中不含B元素.Hg, As, Cu, Pb, Cd等5种重金属元素质量分数测定结果显示,第7批药材Cu质量分数超标,其他批次药材的重金属元素质量分数均符合国家标准.不同批木藤蓼药材中无机元素的种类和质量分数存在差异性,重金属元素的超标可提示用药的安全性.     

海南橡胶林下不同栽培方式对赤芝多糖和灵芝酸含量的影响

为了充分利用橡胶树林下的闲置空间,本研究进行了橡胶树林下赤芝的仿野生栽培。同时采用赤芝段木菌棒不埋土、半埋土、全埋土三种不同的栽培方式,对其多糖和灵芝酸含量进行测定。研究结果表明,橡胶树林下仿野生栽培的赤芝子实体,其多糖含量较高,且栽培方式对子实体多糖和灵芝酸的含量没有显著影响。研究结果为橡胶-赤芝复合栽培模式的构建提供了基础数据。     

灵芝三萜提取工艺的优化

以灵芝孢子粉为原料,使用体积分数为70%的乙醇为提取剂,采用酶解与超声辅助提取相结合的方法,将不同液固比、超声时间、酶解时间和酶用量设定为4个因素,进行单因素试验并设计响应面试验,以确定最优提取方式及其影响因素.利用大孔树脂层析法对灵芝三萜进行分离纯化,通过优化分离纯化工艺,确定最佳洗脱树脂、洗脱液体积分数、上样液流速以及上样液质量比.采用高效液相色谱法分析灵芝总三萜的组分差异.通过预实验分析,与单一提取法相比,酶+超声辅助提取更高效.采用乙醇为提取剂提取灵芝中三萜类化合物可提高三萜的纯度.最优条件下可实现对三萜含量的快速、精确测定,为灵芝三萜的分离纯化提供理论依据.     

不同产地灵芝中16种矿物元素的TXRF测定

了解不同产地灵芝中K、Ca、Ti、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、As、Se、Rb、Sr和Pb 16种矿物元素的含量。灵芝样品经粉碎后,微波消解处理,采用全反射X射线荧光分析法(TXRF)同时测定灵芝粉中16种矿物元素。仪器检出限(LLD)在0.001~0.011 mg/L之间,方法检出限(LDM)在0.003~0.143 mg/kg之间。各元素加标回收率在92.0%~105.5%之间。灵芝中K、Ca、Zn和Se等元素含量非常丰富,K和Ca元素平均含量分别在2 000 mg/kg和1 000 mg/kg左右。山东和四川产地的Mn略高于其他产地,山东产地的Sr低于其他产地。结论:微波消解-全反射X射线荧光分析(TXRF)法可以应用于测定灵芝中的多种矿物元素。不同产地的灵芝均含有所测的16种矿物元素,这16种元素的含量差异性不显著(p0.05),这些微小差别可能和产地、气候以及采摘期有一定的关系。     

ICP-MS测定中药萝芙木中微量元素的含量及形态分析

采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定了中药萝芙木中9种微量元素的含量及形态分析.样品采用去离子水浸提,HNO3-H2O2电炉加热消解,电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定,用茶叶标准物质对测定方法的准确度进行验证,初步探究微量元素的存在形态.结果显示萝芙木中9种微量元素的总含量大小为ZnMnPbFeCuCrAsNiCd,水提液中各元素的含量大小为ZnMnAsNiCrPbCd,Fe和Cu未检出.水提残渣态中各元素的含量为0.014~9.643μg/g,水提液中Zn、Mn、Cr、As、Ni元素都存在可溶有机态和可溶无机态,有机态与无机态的比率值在28.12%~264.55%之间,其中Zn、Cr、Ni的有机态大于无机态,比值大于166.67%;颗粒吸附率在7.69%~125%之间.萝芙木中9种微量元素是以多种形态共存的复杂体系.     

蛹虫草的研究Ⅳ．蛹虫草与冬虫夏草化学成分比较

人工蛹虫草与野生冬虫夏草的子实体经测定分析，二者都含有蛋白质、糖、脂肪、多种无机元素和维生素、１８种氨基酸、虫草菌素、虫草酸、虫草多糖和ＳＯＤ等化学成分，在含量上基本相似，有些成分含量高于冬虫夏草．蛹虫草可以替代冬虫夏草食用或药用     

银川盆地土壤重金属元素的含量及污染状况分析

通过对银川盆地土壤有害重金属元素As、Cd、Cr、Hg、Pb含量变化和污染状况的分析,结果表明：银川盆地土壤中5种重金属元素含量不高,呈不连续点状零星分布,总体来看银川盆地是一片“净土”。除As和Cd的平均含量略高于全国背景值外,其余3种均低于全国背景值;Cd超国家土壤环境质量二级标准的超标率为16.12％,其次为As、Hg、Pb和Cr,超标率分别为2．22％、032％、032％和0．14％;不同土地利用类型超标率为水田〉建设用地〉旱田〉林地〉草地;不同区域土壤污染程度是石嘴山市〉银川市〉青铜峡市。