从猪胸腺提取胸腺素α1的工艺

为了提高猪胸腺的利用价值,探索猪胸腺素活性物质的提取工艺.选取猪胸腺为原料,采用匀浆、凝胶过滤、离子交换层析和丙酮分级沉淀的方法纯化胸腺素α1, 并用Bradford法检测蛋白含量,用SDS-PAGE电泳测定蛋白纯度.将猪胸腺组织匀浆、三次冻融和80 ℃热变性纯化后,上清采用Sephadex G-50柱填料凝胶过滤,然后进行阴离子交换树脂DEAE-C32离子交换层析和丙酮分级沉淀,通过真空冷冻干燥,最后得到胸腺素α1, 纯度为95%以上, 得率为3.84×10 -5.最终得到提取胸腺素α1的有效工艺.     

黑藻多糖的提取、纯化与组成研究

通过正交实验研究黑藻中多糖的提取方法,并对其纯化鉴定.用热水提取黑藻多糖,经乙醇沉淀,活性碳脱色,Sevage法去蛋白,DEAE-Cellulose离子交换和Sephadex G-25柱层析纯化,电泳鉴定纯度和纸层析分析其组成.最佳提取条件为80℃,20倍体积的水,提取3 h,所得多糖电泳为单一组分,层析证明由D-葡萄糖和D-半乳糖构成.     

二叶葎多糖的研究——1.分离、纯化及其基本性质

二叶葎用沸水抽提,三氟乙酸—正丁醉除蛋白,乙醇沉淀得二叶葎多糖粗品.比粗品进一步通过 CTAB 和 DEAE -纤维素柱层析纯化.其主要成份用 Sephadex G—150分子筛、纸层析、醋酸纤维薄膜电泳和琼脂糖电泳均证明是均一的.用 Sephadex G—200凝胶过滤法测得分子量是79000.纯多糖糖含量以葡萄糖为标准是69%,以半乳糖为标准是156%,以糖原为标准是70.4%.糖醛酸含量是74%.体内试验表明二叶葎多糖对移植 S—130肉瘤细胞具有抑制作用.     

坛紫菜多糖的分离纯化和结构分析(Ⅱ)

对广东产坛紫菜沸水提取多糖采用Sevag法脱蛋白 ,冻干后得粗多糖 ,得率为 8%.在粗多糖溶液中加入CTAB以沉淀除去酸性多糖PP1,超滤以纯化中性多糖PP2 ,PP2经DEAE 纤维素、葡聚糖凝胶G2 0 0进一步纯化 .经纸层析、凝胶过滤及紫外光谱分析鉴定为纯品 .通过红外光谱、气相色谱对PP2进行组成分析 ,再用化学方法测定其总糖 ,3,6 内醚 L 半乳糖及硫酸基的含量 ,分别为 86 .33%、5.4 2 5%和 12 .2 %.最后通过高碘酸氧化 ,Smith降解等方法测定PP2的化学结构 ,结果表明 ,PP2由半乳糖、3,6 内醚 L 半乳糖、甘露糖、葡萄糖、木糖和阿拉伯糖组成 ,具有α ,β型糖苷键 ,连接方式有 (1→ 3)、(1→ 4 )、(1→ 2 ) 3种 .PP1分子量通过凝胶过滤法初步测得为 16 .2万左右 .     

长白山林蛙输卵管糖蛋白的分离鉴定

以长白山林蛙为研究对象, 对其输卵管糖蛋白进行提取分离及鉴定. 长白山林蛙输卵管冲洗液经饱和硫酸铵沉淀, DEAE-Cellulose 52离子交换柱, Sephadex G-100凝胶柱层析纯化, 得到蛋白质和糖的重合峰, 经透析、 冷冻干燥得长白山林蛙输卵管糖蛋白纯品OGP-Ⅰ. SDS PAGE电泳实验结果表明, OGP-Ⅰ是分子量为116 000的均一带. 对其分别进行蛋白和糖染色, 同一位置都出现单一条带; 紫外全扫描OGP-Ⅰ有多糖特征峰和蛋白吸收峰, 表明OGP-Ⅰ是糖蛋白纯品.     

坛紫莱多糖的分离纯化和结构分析（Ⅱ）

对广东产坛紫菜沸水提取多糖采用Sevag法脱蛋白,冻干后得粗多糖,得率为8%。在粗多糖溶中加入CTAB以沉淀除去酸性多糖PP1,超滤以纯化中性多糖PP2,PP2经DEAE-纤维素、葡聚糖凝胶G200进一步纯化。经纸层析、凝胶过滤及紫外光谱分析鉴定为纯品。通过红外光谱、气相色谱对PP2进行组成分析,再用化学方法测定其总糖,3,6-内醚-L-半乳糖及硫酸基的含量,分别为86.33%、5.425%和12.2%。最后通过高碘酸氧化,Smith降解等方法测定PP2的化学结构,结果表明,PP2由半乳糖、3,6-内醚-L-半乳糖、甘露糖、葡萄糖、木糖和阿拉伯糖组成,具有α,β型糖苷键,连接方式有（1→3）、（1→4）、（1→2）3种。PP1分子量通过凝胶过滤法初步测得为16.2万左右。     

新疆多花蔷薇根中熊果酸的提取及分离纯化工艺研究

通过超声-微波辅助法提取了多花蔷薇根中的熊果酸,并对其进行分离、纯化,确定了最优提取及分离纯化条件.采用响应面法优化熊果酸的提取工艺,经脱脂、脱色、酸碱沉淀、凝胶柱层析等方法得到了分离纯化熊果酸的最佳条件,用紫外光谱(UV),红外光谱(IR),核磁共振氢谱(~1H NMR),核磁共振碳谱(13C NMR)对产品进行鉴定.结果表明:在超声功率50 W,微波功率310 W,提取时间2.4 min,液固比20:1 mL/g,微波浸提时间15 min,浸提温度55℃的提取条件下,熊果酸的得率可达2.64%.当石油醚用量为提取液体积的0.2倍,脱脂2次,活性炭用量0.04 g/mL,脱色3次,碱沉淀p H值为12,酸沉淀p H值为4,熊果酸粗品用葡聚糖凝胶LH-20分离洗脱2次时,重结晶后的熊果酸纯度在97%以上,达到较好的分离效果.     

鸡腿菇子实体多糖分离纯化和光谱分析

从鸡腿菇子实体中提取纯化多糖,鉴定其纯度并测定其结构.利用水浴浸提、乙醇沉淀多糖、TCA法去除蛋白质等工艺提取粗多糖;将得到的粗多糖通过DEAE-52柱层析和Sephadex G-200柱层析进行分离纯化,收集得到4个糖组分Ccp-Ⅰ-A、Ccp-Ⅰ-B、Ccp-Ⅱ-C和Ccp-Ⅱ-D;采用紫外分光光度计、红外光谱仪对多糖结构进行初步的光谱分析.     

沙棘叶水溶性多糖SJ21的分离纯化及组成分析

本文的目的是研究沙棘叶中的多糖组分.采用热水提取乙醇沉淀获得沙棘叶水溶性粗多糖的方法,用酸性乙醇和DEAE_SephdexA_25进行分离纯化,红外光谱鉴定多糖,纸层析及气相色谱分析其单糖组成.结果证明:纯度鉴定表明SJ21为纯多糖,分子量约为70KD.SJ21红外光谱中有典型的多糖和β型糖苷键吸收峰.纸层析及气相色谱分析其单糖组成为Xyl、Ara、Man、Glc、Gal,摩尔比为1.0∶2.1∶2.9∶5.3∶3.7.SJ21为首次从沙棘叶中提取获得.     

沙蒿多糖分离纯化和理化分析

利用水提醇沉法从白沙蒿子中提取多糖;Sevage 木瓜蛋白酶法脱蛋白,ultrahydrogelTM500(7.8×300 mm)凝胶柱层析进行分离纯化;琼脂糖电泳进行纯度检查;苯酚-硫酸法测定总糖含量;UV法及IR法检测多糖性质;自动旋光仪测定旋光度;离子色谱鉴定多糖的单糖组分.结果表明,沙蒿多糖为均一组分,纯度为96.5%,比旋光度为 90°,还原性多糖.经离子色谱分析,沙蒿多糖由阿拉伯糖、木糖、来苏糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,且物质的量之比为1∶4.98∶1.69∶27.86∶3.76∶13.92.     

正己酸-低温乙醇沉淀法纯化小鼠腹水IgM类单抗的研究

用不同有机酸-低温乙醇纯化腹水,确定纯化效果最好的有机酸为正己酸,纯化的IgM纯度可达95％,收率将近90％;用正己酸沉庭法配合低温乙醇沉淀法分别纯化不同抗原免疫的三种IgM型单抗,对多数IgM类抗体纯度可达到85％以上,IgM回收卒大于85％,表明这种纯化方法适用于多数IgM类单抗的纯化;用硫酸铵沉淀法及正己酸-低温乙醇沉淀法纯化相同的抗体,对活性都不影响,但正己酸-低温乙醇沉淀法纯化的抗体纯度远高于硫酸铵沉淀法、因此正己酸-低温乙醇沉淀法是一种简单、快速、温和的从小鼠腹水中纯化IgM方法,可满足一般实验的要求、     

人型结核杆菌H_(37)Rv株菌体特异性抗原TB4单克隆抗体的纯化

采用硫酸铵法、辛酸二步法、ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ５０ 离子交换柱层析法,从杂交瘤小鼠腹水中纯化人型结核杆菌Ｈ３７Ｒｖ 株特异性抗原ＴＢ４ 的单克隆抗体,从回收率、纯度和活性３ 个方面进行比较。结果显示,硫酸铵法回收率最高,层析法纯度最高,３ 种方法对单抗的活性均无大的影响。认为：辛酸二步法可有效地去除白蛋白,适用于大量腹水中单抗的提取、纯化,具有简单、省时等优点;柱层析法适用于小量腹水单抗纯化及分析用途     

超滤法分离浮萍多糖的工艺

探索超滤法分离浮萍中免疫活性成分浮萍多糖的工艺.通过煎煮、超滤、脱蛋白、乙醇沉淀等步骤对浮萍多糖进行提取分离,硫酸-苯酚法和硫酸-蒽酮法测定提取液和样品中的总糖含量,考马斯亮蓝G250比色法测定其蛋白质含量.得到浅褐色粉末,纯度53.5%,蛋白质含量1.2%,收率6.43%.该方法可以简单、快速、有效地对浮萍多糖进行分离.     

鸭IgG纯化方法比较试验

用辛酸-硫酸铵法提取鸭IgG并与硫酸铵法和DEAE纤维素层析法进行比较．结果表明，辛酸-硫酸铵法与DEAE纤维素层析法提取的IgG纯度较高，且辛酸-硫酸铵法简便、快速、节约试剂，所获IgG活性较DEAE纤维素层析法高，适于从大批量样品中提纯IgG。     

2-甲基-3-羟基苯甲酸合成方法的改进

以2-甲基-3-氨基苯甲酸为原料,经重氮化、水解反应合成目标产物2-甲基-3-羟基苯甲酸,确定了合成条件,改进了其它方法繁琐的后处理工艺及昂贵的设备,并对产物结构进行了表征.     

槐米中芦丁提取工艺的比较研究

对常用的几种槐米中芦丁提取工艺进行比较．取槐米,分别采用碱提酸沉法,热水提酸沉法,热水提20％、40％及60％醇沉除杂法5种方法提取槐米中的芦丁,提取液浓缩干燥为固形物,测定固形物干重及芦丁与总黄酮含量,计算芦丁收率．实验结果发现,传统的碱提酸沉法芦丁提取率为最高,热水提20％乙醇除杂法获得的固形物芦丁纯度最好．因此,碱提酸沉法与热水提20％乙醇除杂法适于槐米中芦丁的提取．     

非直接接触式金属热还原制备金属钛的酸洗分离

主要探讨酸洗条件对非直接接触式金属热还原后产物中杂质的洗除效果.研究表明,采用醋酸盐酸联合酸洗方案可去除金属热还原产物中的杂质(CaO,Ca,CaTiO3),达到提纯金属Ti的目的;Ti不与醋酸反应,但能溶于浓盐酸,故盐酸酸洗时间不能过长,否则金属Ti溶解,造成Ti损失,影响Ti收得率;酸洗过程中酸体积浓度越大,酸洗时间越长,金属Ti的纯度越高.综合考虑酸耗、酸洗效率和Ti的溶损等因素,采用体积浓度50%醋酸酸洗6 h和体积浓度20%盐酸酸洗0.5 h的联合酸洗方案效果最好.     

高山红景天苷的初步纯化

通过正交实验和对比实验,找出较优的红景天苷初步纯化的方法。以纯化后样品的红景天苷得率为考察指标,采用乙酸铅沉淀法正交实验和乙醇沉淀法正交实验,确定较优化的工艺参数。1.乙酸铅沉淀法的最佳方案即乙酸铅浓度为5%,沉淀时间为50min,温度为4℃,红景天苷含量为7.58%;2.乙醇沉淀法的最佳方案即乙醇浓度为70%,沉淀时间为24h,温度为4℃,红景天苷含量为20.69%。结论醇沉法和乙酸铅沉淀法均能提高红景天苷的纯度,醇沉法优于乙酸铅沉淀法。     

响应曲面法优化鸡冠中透明质酸提取工艺条件

对乙醇浸泡鸡冠并提取其中透明质酸的方法进行研究,通过单因素和相应曲面实验考查了提取时间、乙醇体积分数、料液比对透明质酸得率的影响,确定了乙醇处理鸡冠中透明质酸的最佳工艺条件为:提取时间为25.70 h、乙醇体积分数90.00%、料液比100∶177(g/mL),在此条件下制备透明质酸的得率为27.31%.通过对该物质进行紫外光谱检测,显示该提取物质与标准品出峰位置一致,确定该提取物质是透明质酸.     

固定化青霉素G酰化酶活性的X射线微区分析(Ⅰ)———捕捉剂的选择

为了能对固定化青霉素G酰化酶进行X射线微区分析 ,筛选了能捕捉酶活的合适的底物与捕捉剂的体系 ,青霉素G钠作为底物 ,FeCl3 作为捕捉剂 ,底物经固定化青霉素G酰化酶水解产生苯乙酸 ,后者与捕捉剂反应生成沉淀 ,可以确定固定化青霉素G酰化酶的催化活性部位 ;还对捕捉剂与底物、固定化青霉素G酰化酶与载体以及载体与底物之间的相互作用进行了研究 ,找到了可用于对固定化青霉素G酰化酶活性进行X射线微区定位的捕捉剂.