甲基乙二醛诱导牙周膜成纤维细胞基因表达与分析

运用基因芯片研究甲基乙二醛诱导人牙周膜成纤维细胞基因表达谱的变化。原代培养人牙周膜成纤维细胞,诱导组以终质量浓度为0.1 g/L的甲基乙二醛刺激培养细胞,对照组不含甲基乙二醛。24 h后收获细胞,提取mRNA,逆转录cDNA时用Cy3和Cy5荧光染料标记,制备成cDNA探针,与表达谱芯片进行杂交、扫描和分析。芯片检测结果用实时定量聚合酶链反应验证和生物信息学分析。结果共有18条基因显著差异表达,其中上调基因有11条,下调基因有7条,差异性表达的基因按功能可分为程序性细胞死亡、信号转导、细胞因子、代谢酶类、载体蛋白和未知基因等。与程序性细胞死亡、信号转导和细胞因子相关基因的差异表达可能是甲基乙二醛通过线粒体信号通路,诱导人牙周膜成纤维程序性细胞死亡,破坏牙周组织增生,从而导致牙周病发生的机制。     

肥厚性疤痕成纤维细胞的基因芯片分析

用基因芯片分析肥厚性疤痕与正常皮肤成纤维细胞在静息及TGF－beta3刺激下的表达谱的改变,正常成纤维细胞在TGF－beta3刺激前后的表达谱与肥厚性疤痕成纤维细胞在TGF－beta3刺激前的表达谱正相关（r=0.76037),刺激后2种成纤维细胞的表达差异与肥厚性疤痕成纤维细胞TGF－beta3刺激前后的表达谱差异正相关（r=0.826 762),构成以上差异的基因有620条,涉及细胞骨架蛋白,细胞周期蛋白,细胞因子,受体,转录因子及糖,蛋白质和酸代谢的酶类,未发现胶原蛋白I,III的表达水平的改变,结果提示：1,肥厚性疤痕成纤维细胞在静息状态下表现出与正常细胞受TGF－beta3刺激后相似的反应,其可能处于一种应激状态;2．TGF－beta3刺激后2种细胞的反应差异与肥厚性疤痕细胞的异常反应相关,TGF－beta3的作用背景可能是肥厚性疤痕的分子病理学基因之一,3．基因表达变化涉及细胞因子,细胞周期调控,凋亡等,其具备疾病遗传异质性的分子基础。4．胶原表达无明显上升,提示在肥厚性疤痕发病中,胶原纤维及细胞外基质堆积有复杂的分子生物学基础。     

山苍子油对斜纹夜蛾细胞增殖和凋亡的影响

研究山苍子油对离体培养的斜纹夜蛾（Spodoptera litura，SL）细胞的增殖和凋亡的影响，并初步确定山苍子油主要成分柠檬醛对细胞具有毒杀活性，诱导细胞凋亡. 分别采用CCK、MTT法和流式细胞法研究不同浓度的山苍子油抑制SL细胞的活性，利用流式细胞法验证不同浓度的柠檬醛对SL细胞凋亡的影响. 研究结果表明，山苍子油具有抑制SL细胞的增殖的作用，且随着山苍子油浓度的增大和处理时间的延长，SL细胞的存活率降低，当山苍子油浓度增大至0.015%时，SL细胞的存活率显著降低（P<0.01）；当处理时间达到72 h后，SL细胞的存活率同样呈现显著降低. 柠檬醛作为山苍子油的主要活性成分，对SL细胞亦具有明显的抑制增殖的作用，且成剂量正相关，当柠檬醛浓度大于0.015%时，SL细胞的存活率显著降低（P<0.01）. 山苍子油和柠檬醛均具有明显的促进SL细胞凋亡的作用，并呈剂量依赖关系，初步确定了柠檬醛是山苍子油促进SL细胞凋亡的主要活性成分，为山苍子油基新型植物源农药的开发与利用提供依据.     

人牙龈成纤维细胞的体外培养及生长曲线测定

目的:体外培养正常人牙龈成纤维细胞并测定其生长曲线,初步了解该细胞生物学特性.方法:用改良组织块法培养人牙龈成纤维细胞,通过MTT比色法研究细胞的生长曲线.结果:改良组织块法原代培养细胞成活率达80%,培养细胞呈梭形,从第3天呈对数生长,第4-5天进入平台期.结论:改良组织块法能简便快速地获得人牙龈成纤维细胞,初步了解其生物学特性.     

葫芦巴总皂苷对心肌成纤维细胞转分化的影响及机制的实验研究

目的探讨葫芦巴总皂苷(Trigonella foenum greacum.L Saponin,TFGs)对尾加压素Ⅱ(UrotensinⅡ,UⅡ)诱导体外培养的大鼠心肌间质成纤维细胞(CFs)发生肌成纤维细胞转分化的干预作用及相关分子机制.方法体外培养大鼠心肌间质成纤维细胞,随机分为正常对照组、UⅡ刺激组和TFGs干预组.正常对照组在整个培养过程中未加任何刺激;UⅡ刺激组加入10-8mol/L的尾加压素Ⅱ培养,并分别终止培养于12,24和48 h;TFGs干预组将UⅡ作为刺激因素,分别加入终浓度为0,25,50,100和200 mg/L的TFGs.应用免疫荧光和免疫组化方法检测显示α-SMA的表达,应用RT-PCR和免疫印迹法分别检测结缔组织生长因子(CTGF)的基因及蛋白表达.结果免疫荧光检测显示,培养24 h后,正常对照组细胞胞浆中仅有少量α-SMA表达,而α-SMA表达量在经UⅡ作用后明显增多.尾加压素Ⅱ干预CFs不同时间后(12,24,48 h),免疫组化显示α-SMA表达量逐渐增加.UⅡ的这种诱导CFs发生肌成纤维细胞转分化作用可被含TFGs的培养液所抑制,且呈浓度和时间依赖性.与对照组比较,UⅡ刺激组的CTGF的基因及蛋白表达均明显增高(P<0.01).而TFGs则可以抑制UⅡ诱导的CTGF基因及蛋白表达量的上调(P<0.01).结论尾加压素Ⅱ具有诱导大鼠心肌间质成纤维细胞发生肌成纤维细胞转分化的作用,此作用可能与其促进CTGF的基因及蛋白表达有关.葫芦巴总皂苷能有效地抑制大鼠CFs的转分化,并且下调UⅡ诱导的CTGF的过表达.这进一步明确UⅡ在心肌纤维化发生、发展中的作用,也为临床应用葫芦巴总皂苷防治心肌纤维化提供了实验依据.     

丹参酮ⅡA磺酸钠对培养人肾间质成纤维细胞的影响

探讨丹参酮ⅡA磺酸钠对培养的人肾间质成纤维细胞增殖、凋亡及分泌胶原蛋白的影响,为肾脏疾病的临床防治提供理论依据.体外培养的成纤维细胞第2~4代,经不同浓度的丹参酮ⅡA磺酸钠及不同时间培养后,采用免疫细胞化学技术和TUNEL法检测其PCNA、p27、Ⅲ型胶原蛋白的表达及凋亡情况.丹参酮ⅡA磺酸钠能抑制肾间质成纤维细胞表达PCNA和Ⅲ型胶原蛋白,促进p27蛋白的表达和细胞凋亡,在一定浓度、时间范围内具有量效、时效关系(P＜0.05).丹参酮ⅡA磺酸钠能够在体外发挥抗肾间质纤维化的作用,其机理可能与抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡及减少胶原蛋白的合成等有关.     

高锰酸钾氧化嗅味物质β-环柠檬醛的动力学

采用水处理常用氧化剂高锰酸钾对铜绿微囊藻产生的主要致嗅物质β-环柠檬醛(β-cyclocitral)进行氧化去除和动力学分析,并研究高锰酸钾对铜绿微囊藻细胞的破坏和β-环柠檬醛释出及其降解情况.研究结果表明:高锰酸钾与β-环柠檬醛反应符合准二级动力学模型,在溶液pH=7和温度15℃时其速率常数为107.2 mol-1·L·s-1;溶液pH对反应影响不大;当pH=2～9时,动力学表观速率常数kobs为(0.078±0.016)min-;高锰酸钾的加入造成藻细胞的破裂程度达到90%,使主要存在于胞内的β-环柠檬醛释出并降解;高锰酸钾能将铜绿微囊藻细胞内的β-胡萝卜素氧化成β-环柠檬醛,导致总β-环柠檬醛浓度在氧化过程中先升高后降低.     

太原城区大气醛酮化合物的污染特征

通过DNPH衍生剂采样-高效液相色谱法分析,研究了太原市秋冬两季的醛酮污染物的浓度水平,变化规律及来源分析。结果表明:醛酮化合物的浓度变化为秋季(20. 78±6. 34μg·m~(-3))冬季(17. 08±9. 50μg·m~(-3)),其中甲醛、乙醛和丙酮是大气中含量最丰富的三种物质,在秋冬季共占醛酮化合物总浓度的79. 99%和78. 75%.日变化和C1/C2值分析显示太原市大气醛酮化合物浓度水平与碳氢化合物的光化学反应以及车辆尾气排放有关。除此之外,煤及生物质等燃烧源的影响也不容忽视。     

天津及渤海大气中醛酮化合物的检测

采用2,4-二硝基苯肼HPLC法在2007年9月和11月分别测定了天津及渤海大气中的醛酮类化合物.天津市大气中主要醛酮类化合物是丙酮、甲醛、乙醛和丁醛,它们平均质量浓度分别为(25.58±5.96)μg/m3、(15.93±4.49)μg/m3、(15.71±7.50)μg/m3、(15.68±3.65)μg/m3(n=25),大气醛酮质量浓度日变化趋势及工作日与休息日对比表明,机动车尾气排放和光化学反应是天津大气醛酮类化合物的重要来源.渤海大气中醛酮类化合物质量浓度显著低于城市大气浓度,但高于其他海域,其中乙醛、丙酮和甲醛平均质量浓度分别为(4.12±1.38)μg/m3、(3.79±1.89)μg/m3、(2.45±1.10)μg/m3(n=16),这3种化合物占渤海大气醛酮总量的70%以上.气团后向轨迹图分析结果表明,陆域大气迁移扩散是渤海大气醛酮化合物的重要来源,另外航行船只排放的尾气也是不可忽略的来源.与其他城市和海域比较,天津和渤海大气醛酮污染较高.     

高糖诱导ADTIQ的生成和多巴胺的代谢失衡

 2 型糖尿病患者比正常人更容易患帕金森病(PD),而新内源性神经毒素1-乙酰基-6, 7-二羟基-1, 2, 3,4-四氢异喹啉(ADTIQ)可能成为2 型糖尿病并发PD 的一个关键因素,ADTIQ 是由丙酮醛与多巴胺反应合成,但是其在多巴胺能神经元中的生成条件,以及在糖尿病情况下ADTIQ 的生成是否影响多巴胺代谢尚不清楚。本研究以SH-SY5Y 细胞为模型,研究ADTIQ 在细胞模型中的生成条件,发现ADTIQ 是在葡萄糖代谢旺盛的条件下,丙酮醛内源性产生与神经元内的多巴胺反应生成。研究揭示,高糖条件下,SH-SY5Y 细胞和2 型糖尿病的大鼠模型中外周多巴胺的质量浓度减少,而与多巴胺合成和转运相关的酪氨酸羟化酶和多巴胺转运体合成增加。可见,高糖能诱导SH-SY5Y 细胞内ADTIQ 的生成和多巴胺代谢的失衡,ADTIQ 的生成可能成为糖尿病并发PD 的关键因素。     

制造网格安全研究综述与展望

阐述了制造网格安全的基本概念和相关知识,给出了一种安全体系结构,并分析了当前典型的制造网格安全技术,提出了制造网格安全中存在的问题,指出了未来制造网格安全研究的主要方向,为制造网格的应用研究提供了参考．     

基于黏弹性模型的牙周膜生物力学研究

同时使用人体牙周膜的1组单轴拉伸和1组简单剪切的试验数据,对现有的几种超弹性应变能函数进行了参数拟合,结果表明Ogden模型比其他模型能更好地拟合实验数据.基于生物力学的原理,对实验获得的归一化应力松弛函数进行了分析推导,并转化为基于Ogden应变能函数的黏弹性模型;利用获得的牙周膜本构模型,对上颌的第一前磨牙的牙周膜使用线性黏弹性模型,对正畸初始阶段的受力情况进行了仿真模拟,研究分析了黏弹性对正畸过程中牙周膜力学响应仿真结果的影响.研究结果表明:Ogden模型可以较好地拟合人体牙周膜试验的2组数据;使用不可压缩的Ogden模型与使用线弹性模型获得的牙周膜力学响应有较大差别,牙周膜组织上各处的黏性响应与其位置有关.     

基于表面吸附固定法构制孔雀石绿免疫传感器的研究

提出一种基于石蜡电极表面吸附孔雀石绿抗体的电化学免疫传感器,通过竞争型免疫检测法测量水体中残留孔雀石绿。对免疫传感器构制参数——电极表面预处理、抗-MG溶液pH、抗-MG溶液浓度和抗-MG抗体吸附时间进行了研究;对传感器测量过程参数进行了优化,传感器对孔雀石绿检测的线性范围为1.5～780μg/L,检测孔雀石的回收率在93%～116%。     

Global organization of metabolic fluxes in the bacterium Escherichia coli

Cellular metabolism, the integrated interconversion of thousands of metabolic substrates through enzyme-catalysed biochemical reactions, is the most investigated complex intracellular web of molecular interactions. Although the topological organization of individual reactions into metabolic networks is well understood, the principles that govern their global functional use under different growth conditions raise many unanswered questions. By implementing a flux balance analysis of the metabolism of Escherichia coli strain MG1655, here we show that network use is highly uneven. Whereas most metabolic reactions have low fluxes, the overall activity of the metabolism is dominated by several reactions with very high fluxes. E. coli responds to changes in growth conditions by reorganizing the rates of selected fluxes predominantly within this high-flux backbone. This behaviour probably represents a universal feature of metabolic activity in all cells, with potential implications for metabolic engineering.     

光Fenton体系氧化降解水中孔雀石绿的研究

进行了光Fenton体系催化氧化降解染料孔雀石绿(MG)水溶液的研究,考察了光、pH值、Fe2+和H2O2投加量等因素以及阴离子的存在对MG降解率的影响。结果表明,室温（20 OC）下,pH=3.5±0.1、[Fe2+]0=0.25mmol/L、[H2O2]0=0.5mmol/L的条件下,经氙灯（λ > 290 nm）照射30 min后,MG水溶液（15 mg/L）的降解率达到95%以上。Cl-的存在对MG在光Fenton体系中的降解有阻碍作用,SO42-的存在对反应基本没影响,而NO3-促进了MG的氧化降解速率。     

中国人重症肌无力的遗传易感性研究

重症肌无力与ＨＬＡⅡ类基因关联性在不同人种和民族中具有不同遗传易感性。为探讨中国人重症肌无力（ＭＧ）与ＨＬＡ－ＤＱ分子关联性，采用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法，分析了５０例中国正常人及４９例重症肌无力患者的ＨＬＡ－ＤＱＡ１和－ＤＱＢ１座位的基因型。结果：共检出正常人ＤＱＡ１等位基因８种，ＤＱＢ１等位基因１０种，重症肌无力患者ＤＱＡ１等位基因８种，ＤＱＢ１等位基因９种。结果分析表明ＤＱＡ１＊０５０１与ＭＧ成负相关，ＤＱＢ１＊０３０２与ＭＧ成正相关。从基因水平首次用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法得出中国人重症肌无力ＤＱ分子的易感基因型。     

PCR技术检测泌尿生殖道生殖支原体(MG)感染的研究

目的采用PCR检验技术,对吉林地区部分非淋菌性尿道(宫颈)炎(NGU)高危人群泌尿生殖道分泌物标本进行分离鉴定,以探讨MG感染在STD的作用和地位.方法吉林地区NGU高危人群受检者141例,宫颈或尿道口内拭子分泌物标本用PCR技术进行DNA扩增,并与对照组65例进行比较,结果141例标本MG-DNA扩增出26例,阳性率为18.4%,正常对照组65例MG-DNA扩增出3例,阳性率为4.62%(3/65),差异显著(x2=5.933,P=0.014 9＜0.05).结论1)吉林地区STD高危人群有较高的MG感染率,是NGU的病因之一2)PCR技术具有敏感、快速、特异性强特点,可以用来研究MG感染现状,流行情况及致病机制.     

根霉脂肪酶催化合成单甘酯的研究

采用聚氨酯类材料为载体固定化根霉BUCT-11发酵生产脂肪酶.对根霉BUCT-11游离脂肪酶催化反应的工艺条件进行了优化,采用双温程等手段以后,产物中单甘酯质量分数可达47.5%.固定化细胞简单处理后,用于甘油解反应,在最佳条件下双温程后,单甘酯质量分数达到35.5%.文中实现了根霉BUCT-11发酵产物的综合利用,降低了单甘酯合成中酶的成本,因而具有良好的工业应用前景.     

磨碎玻璃纤维/聚氨酯/环氧灌封材料的形态结构与力学性能

采用真空灌注工艺,制备磨碎玻璃纤维(MG)／聚氨酯(PU)／环氧(EP)灌封材料,并对其力学性能和微观结构进行研究。研究结果表明:随着PU含量的增加,PU／EP共混聚合物的拉伸和冲击强度呈先升后降的变化趋势。当PU含量为15％时,共混聚合物的综合力学性能最佳,拉伸强度为60．57 MPa,冲击强度为23．56 kJ／m2,与EP相比分别提高32．77％和115％。为进一步提高材料的强度,并保持良好韧性,采用添加MG的方法来增强PU／EP。当MG与EP的质量比为1:1时,材料的拉伸强度达到79．72 MPa,与PLJ／EP相比提高31．95％,而冲击强度为17．83 kJ／m2,仍保持较高水平;同时,与相同含量的活性硅微粉相比增强PU／EP材料的拉伸强度和冲击强度分别提高18．91％和11．51％。