湖羊繁殖性状相关候选基因的RFLP分析

选择与繁殖性状相关的BMPR-IB、BMP15、GDF9、MTNR1A基因作为候选基因,采用PCR-RFLP方法分析这些基因在湖羊中的多态性。结果发现,GDF9基因的FecGH突变和BMP15基因的FecXI、FecXH突变和FecXG(B2)突变没有被检测到,而BMP15基因的FecXB(B4)突变均为杂合型( B);BMPR-IB基因和MTNR1A基因存在多态,等位基因B频率较高,分别达到0.784和0.676;表明可能与湖羊的繁殖性状存在一定的联系。     

山羊Apaf-3基因的cDNA克隆、序列分析及组织表达研究

对单胎藏山羊和多胎金堂黑山羊Apaf-3基因cDNA克隆、序列分析及组织表达特性研究.采集5只多胎金堂黑山羊和5只单胎藏山羊在发情期的卵巢、垂体等组织样,进行Apaf-3基因的cDNA克隆、序列分析,并采用定量PCR技术对其mRNA进行组织表达量研究.结果,克隆出山羊Apaf-3基因长度为1731bp编码区全长为1245bp,编码414个氨基酸.Apaf-3基因在两种山羊中序列相同,且在5种组织中的表达均无差异.同源性分析表明凋亡基因Apaf-3在动物的进化中保守性低,与山羊多羔性状的相关性需要进一步研究.     

乐至黑山羊催乳素受体基因cDNA克隆及序列分析

根据GenBank中绵羊催乳素受体（PRLR）基因序列（AF041257.1）设计1对引物,以乐至黑山羊脑垂体总RNA为模板,通过RT-PCR技术对乐至黑山羊PRLR基因cDNA克隆测序和序列分析.结果表明：扩增出的乐至黑山羊PRLR基因cDNA序列长为1743bp,编码581个氨基酸.乐至黑山羊与绵羊、牦牛、欧洲牛、野猪和人的核苷酸同源性分别为：98.34％、94.67％、94.27％、77.48％、74.33％.以核苷酸序列构建分子进化树,乐至黑山羊先与绵羊聚为一类,再与欧洲牛和牦牛聚为一类,而后与野猪聚为一类,最后与人聚为一类.     

乐至黑山羊GH和IGF-I基因多态性及其与产羔性状的关联性分析(英文)

生长激素(GH)胰岛素样生长因子I(IGF-I)在卵泡的生长和闭锁中发挥关键作用。研究采用PCR-SSCP技术对157只乐至黑山羊GH和IGF-I进行多态位点的检测。结果发现,GH基因5’侧翼区和第二外显子分别检测到2种基因型,第三外显子检测到4种基因型,第四和第五外显子分别检测到3种基因型;IGF-I基因的第二外显子检测到2种基因型。通过基因测序发现GH基因有14处单核苷酸突变位点(SNPs)—T48C,A55G)(P1引物),T781C(P2引物),G1122A,A1161G,A1171G,C1179T和C1180G(P3引物),T1481C,A1494G,G1549T和C1590T(P4引物),G1942A和G1957A(P5引物);IGF-I基因有1个SNP(G3270C)(P6引物)。关联性分析结果表明,只有GH基因第三外显子BB型乐至黑山羊产羔数比AA型多0.32(p0.05),其余基因型间产羔数差异不显著。研究初步表明GH基因可能与乐至黑山羊产羔数之间存在一定关联性。     

山羊INHA和INHBA基因的cDNA克隆、序列分析及组织表达研究

分别提取处于同一发情周期的5只低繁藏山羊和5只高繁金堂黑山羊的卵巢、垂体的总RNA,并通过RT-PCR技术对INHA、INHBA基因cDNA进行克隆、序列分析,以Real-time PCR技术对其进行组织表达研究.结果表明:藏山羊和金堂黑山羊INHA基因编码区均长1083bp,编码360个氨基酸,两品种基因编码区有7处碱基不同,并导致3处氨基酸的差异;INHBA基因编码区均长1278bp,编码425个氨基酸,两品种基因编码区有4处碱基不同,并导致1处氨基酸的差异.藏山羊INHA基因编码区核苷酸序列与金堂黑山羊、绵羊、牛、野猪、小鼠、褐家鼠、人的同源性分别为:99.4%、98.9%、95.8%、88.6%、81.0%、79.5%和84.8%;藏山羊INHBA基因编码区核苷酸序列与金堂黑山羊、绵羊、牛、野猪、小鼠、褐家鼠、人的同源性分别为:99.7%、99.4%、98.1%、91.7%、88.0%、88.5%和91.2%.INHA和INHBA基因mRNA在两个山羊品种的卵巢、垂体中均有表达,但两品种间无显著性差异(P0.05).说明INHA和INHBA基因在动物进化中比较保守,与山羊多羔性状的相关性有待进一步研究.     

肥羔型黑山羊肌肉滴水损失率的分析研究

对雌雄预成年和雌性成年肥羔型黑山羊(自贡型)肌肉的滴水损失率进行测定,为今后肥羔型黑山羊肉质的评定提供理论参考.结果表明:预成年雌性肥羔型黑山羊背最长肌、股二头肌和臂三头肌的滴水损失率分别是1.46%、1.29%和1.33%,雄性的滴水损失率分别是2.76%、1.59%和1.95%;成年雌性羊分别是1.44%、1.30%和1.35%,肌肉的滴水损失率在不同部位之间的差异显著(P0.01).所以得出肥羔型黑山羊肌肉的滴水损失率,背最长肌最高,臂三头肌次之,股二头肌最低,且均比较低,反映出肥羔型黑山羊优良的肉质.同时也发现不同性别之间滴水损失率的差异和在不同年龄阶段失水率可能无明显变化,需进一步实验来证明.     

四川黑山羊品种(群体)的RAPD标记研究

从5组24个随机引物中筛选出16个重复性好的多态引物,对四川9个黑山羊品种(群体)共计572只个体,进行随机扩增多态DNA(RAPD)标记研究.结果表明,16个引物扩增出125条带,其中102条带呈现多态,多态率为81.61%.不同引物扩增出的DNA片段在各品种(群体)中的分布频率不同.9个黑山羊品种(群体)间相似系数为0.7533～0.9642,遗传距离指数为0.0358～0.2467.引物OPQ-06(序列为GAGCGCCTTG)未在乐至黑山羊中扩增出900bpDNA片段,而在其他8个黑山羊品种(群体)中出现率均为1,可作为区分乐至黑山羊和其他8个黑山羊品种(群体)的分子遗传标记.引物OPK-03(序列为CCAGCTTAGG)未在江安黑山羊扩增出550bpDNA片段,在其他8个黑山羊品种(群体)中出现率均为1,可用于区分江安黑山羊和其他8个黑山羊品种(群体)的分子遗传标记.     

兔BMP15基因单核苷酸多态性及其与产仔性能的相关性研究

为探究BMP15基因多态性与兔产仔数之间的关系,采用PCR-SSCP结合测序的方法检测了BMP15基因在3个品种兔(安哥拉兔、新西兰白兔和美系獭兔)中的多态性,共发现2个SNPs 位点,分别为70位点处碱基突变(A→G),导致缬氨酸转变为丙氨酸;和109位点处碱基突变(C→T),导致甘氨酸转变为谷氨酸.3个兔品种中均存在AA、AB和BB三种基因型.不同基因型与产仔数的关联分析显示,安哥拉兔群体中,BB型个体平均产仔数显著高于AA和AB两种基因型;在新西兰白兔和美系獭兔中不同基因型之间的平均产仔数差异均不显著.结果表明:BMP15基因对安哥拉兔的产仔数有一定的影响,对新西兰白兔和美系獭兔的影响不显著.     

山羊ZP3基因的cDNA克隆、序列分析及组织表达研究

对高繁金堂黑山羊和低繁藏山羊ZP3基因cDNA进行克隆、序列分析,并采用Real-time PCR技术对其在发情前期母羊卵巢组织的表达进行研究.结果表明:山羊ZP3基因编码区全长为1269bp,共编码422个氨基酸,两品种间有2处碱基差异,但未导致氨基酸的差异.山羊的ZP3基因在卵巢表达量高,与其他组织差异极显著(P＜0.01),但两个品种间差异不显著(P＞0.05).说明ZP3基因主要在卵巢中表达,但可能不是影响山羊多羔性状的主基因.     

金堂黑山羊血液蛋白遗传多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）研究了金堂黑山羊血液运铁蛋白（Tf)、后白蛋白(Pa）及白蛋白(Alb)三个基因座的遗传多态性,并计算了金堂黑山羊与成都麻羊、湘东黑山羊等七个山羊群体的欧氏遗传距离。结果表明：金堂黑山羊群体中Tf和Pa两个基因座均表现出多态性、Alb基因座呈单态;Tf和Pa两个基因型分布均符合Hardy-weinberg定律;金堂黑山羊群体内的基因一致度高、基因多样度低、平均等位基因有效数少,是宝贵的山羊遗传资源。     

三个山羊品种(类群)的RAPD分析

采用RAPD方法分析了藏山羊、安哥拉山羊、建昌黑山羊的巴普类群，得到清晰且多态性丰富的条带，其扩增条带总数共40条，其中22条有多态，多态频率为55．0％．对3个山羊品种(类群)的基因组DNA进行多态性和亲缘关系研究，结果表明：3个山羊品种(类群)间的多态性大于品种(类群)内的多态性，藏山羊与安哥拉山羊之间亲缘关系较近，巴普类群与安哥拉山羊之间亲缘关系较远．     

应用PCR－SSCP银染技术检测消化系统肿瘤的P53基因突变

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术，初步研究了肝细胞癌、胃癌和大肠癌中Ｐ５３基因的第６和第７外显子的分子结构改变。对来自癌组织ＤＮＡ和正常组织ＤＮＡ的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ电泳带迁移作对比分析，发现３０例肝癌病人中，６例肝癌样品电泳带迁移异常；２６例胃癌病人中，４例胃癌样品电泳带迁移异常；２９例大肠癌病人中，６例大肠癌样品电泳带迁移异常。依据ＤＮＡ单链构象与分子电泳迁移的关系，研究结果表明：该三组病人中，Ｐ５３基因第６、７外显子的突变率分别为２０．０％，１５．４％和２５．０％。同时，也间接提示了Ｐ５３基因突变可能是肝细胞癌、胃癌和大肠癌中一种较多见的分子结构改变。     

猪骨形态发生蛋白15基因的分子克隆及分析

骨形态发生蛋白15(Bone Morphogenetic Portein-15,BMP15)由卵母细胞特异表达,在卵母细胞发育与成熟过程中起重要调控作用.本文以长白猪为研究模型,克隆BMP15基因cDNA全长并探究该基因组织表达图谱.研究显示,家猪BMP15基因cDNA全长1298bp,编码具402个氨基酸的前体蛋白.依赖RT-PCR技术,家猪Bmp15基因被发现特征性表达于家猪卵巢中.在本研究中,还分离到家猪BMP15基因潜在启动子区(3279bp),针对该启动子区,部分转录因子结合位点获得预测.这些研究结果为探究BMP15基因的表达调控机制及其对家猪卵泡发育影响奠定基础.     

金堂黑山羊与白玉黑山羊生态特征的比较研究

采用生态地理比较方法研究金堂黑山羊与白玉黑山羊的生态特征,结果表明,金堂黑山羊与白玉黑山羊在生态地理条件、饲养管理、外貌特征和生长性能等方面存在较大的差异.金堂黑山羊的产肉性能高,繁殖性能好,是一个优良的地方肉用山羊品种.白玉黑山羊产绒性能较好.     

藏山羊微卫星DNA多态性研究

选用10个SSR标记,经PCR扩增、9%非变性聚丙烯酰胺电泳和银染法显色,对高原型藏山羊、山谷型藏山羊进行遗传多态性研究,并以白玉黑山羊、建昌黑山羊、美姑山羊和新疆山羊作对照.结果表明,10个SSR标记在高原型藏山羊、山谷型藏山羊、白玉黑山羊、建昌黑山羊、美姑山羊和新疆山羊群体的平均H、PIC、Ne分别为0.673/0.631/4.3、0.680/0.649/4.7、0.777/0.660/4.3、0.797/0.716/5.1、0.793/0.561/3.2和0.680/0.629/4.6.高原型藏山羊与山谷型藏山羊(D=0.063)聚为1类;建昌黑山羊和美姑山羊(D=0.026)聚为1类后,再与白玉黑山羊聚为1类;最后两类与新疆山羊聚为1大类,与各群体的来源和生态地理分布一致.     

Isolation of a cDNA clone corresponding to an X-linked gene family (XLR) closely linked to the murine immunodeficiency disorder xid

The striking number of human and murine immunodeficiency disorders which map to the X chromosome suggests that genes localized on this chromosome must have important roles in lymphocyte development. At least seven distinct disorders in the human and two in the mouse disrupt lymphocyte maturation, particularly that of B cells, at characteristic stages. As functional genes mapping to the X chromosome in one mammal are found on the X chromosome in all other mammals, the same genes regulating lymphocyte development are expected to be found on the X chromosome in mouse and man. Investigations into the possible mechanisms of these X-linked disorders have been hampered by the lack of molecular probes for the genes or gene products affected; because of this, and the possibility of correlating one or more of the several hundred B- or T-cell-specific genes with a specific mutation, we surveyed 15 different B- and T-cell-specific cDNA clones for localization to the X chromosome. We report here the characterization of one of these murine cDNA clones, which hybridizes with a large, X-linked gene family, designated XLR (X-linked, lymphocyte-regulated). We show that the XLR gene family is closely linked to the X-linked immunodeficiency described in the CBA/N mouse strain (xid), by restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis of DNA from mice congeneic for xid. This finding, together with data on the expression of the XLR locus in B cells, indicates that this gene family either includes the locus defined by the xid mutation or is adjacent to it in a gene complex which may be important in lymphocyte differentiation.