黄毛草莓愈伤组织诱导条件优化

本研究分别以黄毛草莓叶片和茎尖生长点为外植体进行愈伤组织的诱导,并通过比较茎尖愈伤组织在不同培养基以及不同植物激素组合下的生长情况,为建立黄毛草莓高效快速的繁殖体系,筛选愈伤组织诱导的最适培养基奠定基础.结果表明,与1/2MS培养基相比,MS培养基作为基础培养基(0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA条件下)诱导的愈伤组织效果最佳;以MS为基本培养基,通过4因素3水平L9(34)正交实验研究不同浓度组合的4种植物激素对黄毛草莓愈伤组织诱导率的影响.结果表明2,4-D对黄毛草莓叶片愈伤组织的诱导影响最大.黄毛草莓叶片愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA;NAA对黄毛草莓茎尖愈伤组织的诱导影响最大,黄毛草莓茎尖愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+0.6 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.6 mg/L NAA.     

香根草愈伤组织的诱导和快速繁殖

为了寻找大批量快速繁殖香根草的有效办法,以香根草的茎段、茎节为实验材料进行愈伤组织的诱导和快速繁殖的实验.用不同浓度的6-BA、IAA、2,4-D对其不同的外植体进行试验.结果表明:在愈伤组织诱导实验中,MS培养基附加6-BA 0.5mg/L 2,4-D 2.0mg/L的激素组合对茎段愈伤组织诱导效果最佳;将产生的愈伤组织团转入分化培养基中,诱导不定芽,其最适分化培养基为MS附加6-BA 3.5mg/L IAA 0.2mg/L;再生苗在MS培养基附加6-BA 3.0mg/L IAA 0.5mg/L的培养基上,进行生根培养效果较好.可见,茎段和茎节均可作为外植体.考虑到茎段数量较大,易取材,且效果明显优于茎节,认为茎段是香根草组培快繁的理想外植体.     

外源激素对龙葵愈伤组织形成和器官发生的影响

龙葵不同部位的外植体在愈伤组织形成过程中所需的外源激素浓度不同。茎尖外植体在附加6—BA0.1—2.0(mg/L)、NAA0.1—2.0(mg/L)的Ls培养基上可高频率地诱导出愈伤组织。培养基中只加6—BA(2.0mg/L)或NAA(2.5mg/L)一种外源激素也可诱导出愈伤组织,但诱导所需的时间较长。较高的6—BA浓度(2.0mg/L)有利于子叶外植体形成愈伤组织,较高的NAA(2.0mg/L)有利于胚轴形成愈伤组织。器官分化过程决定于诱导愈伤组织时培养基中的激素成分。     

日本结缕草茎节和愈伤组织再生体系的优化

分别以日本结缕草的成熟胚和茎节为外植体,建立并优化了2套组培再生体系.实验结果表明:利用成熟胚诱导愈伤组织,适宜诱导培养基为MS基本培养基添加2 mg/L 2,4-D配合0.2 mg/L 6-BA,诱导率为42.5%;继代培养可改善愈伤组织状态,增加胚性,其中增加培养基渗透压,并适当添加ABA(0.2 mg/L),可明显提高胚性愈伤组织比率;继代2次后的愈伤组织在3种细胞分裂素6-BA,KT,ZT适当配比的分化培养基上,分化率可达到50%~75%.在以茎节为外植体的组培体系中消毒处理和预培养是比较关键的环节;预培养时MS培养基效果优于1/2 MS,在MS基本培养基中添加0.25 mg/L KT,1.0 mg/L ZT和0.1 mg/L NAA为比较适合的芽诱导培养基,诱导率可达37.9%.同时,比较了两套再生体系的优缺点,为日后日本结缕草的遗传转化奠定基础.     

薄荷愈伤组织诱导与分化研究

本文研究了薄荷愈伤组织诱导与分化的影响因素。以薄荷茎段为外植体,研究培养基、激素水平对愈伤组织诱导、增殖培养的影响;以叶片为外植体,探讨叶片的愈伤组织诱导;以茎段、叶片和叶柄为外植体材料,比较不同外植体的愈伤组织诱导率。实验结果表明:MS比1/2 MS、B5培养基更适于茎段的诱导培养,诱导率达80%;叶片愈伤组织的诱导率为100%,以MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L KT+0.5 mg/L NAA为最佳诱导培养基;幼叶是不同外植体中诱导效果最好的,以MS+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L NAA为最佳诱导培养基。     

藏红花愈伤组织诱导和褐化抑制

对藏红花的球茎、无菌芽和幼叶的愈伤组织诱导条件进行研究,同时探讨愈伤组织诱导过程中的褐化和污染问题.结果表明:与球茎相比,以无菌芽和幼叶为外植体,愈伤组织诱导率较高,诱导时间较短,但形成的愈伤组织易褐化.较大球茎(≥20 g)也是藏红花愈伤组织诱导较好的外植体,愈伤组织诱导速度随球茎储藏时间的增加而升高.含有2.0 mg/L 2,4二氯苯氧乙酸(2,4D)和0.5 mg/L 6苄氨基嘌呤(6BA)的MS(Murashige and Skoog)培养基有利于球茎愈伤组织的诱导,30 d愈伤组织诱导率可达70%以上.在愈伤组织诱导过程中,连续转接外植体至新鲜培养基可以有效降低褐化率,而在培养基中添加活性炭(AC)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)不能有效抑制褐化.表面灭菌前采用流水冲洗过夜可有效减少球茎表面附生菌,明显降低污染率.     

泓森槐茎段愈伤组织形成及继代增殖的研究

探索激素对泓森槐茎段组织培养的影响。方法以当年生泓森槐枝条为外植体试材,通过不同激素配比,对泓森槐愈伤组织形成、芽分化的影响。结果,愈伤组织在诱导阶段,不同的激素配比对愈伤组织的形成不同,最适宜泓森槐茎段愈伤组织形成的培养基配方是MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7.0 g/L,愈伤诱导率为87.33%,当NAA的浓度为1mg/L,6-BA的浓度0.5-1.5mg/L范围,不定芽的分化率和愈伤组织的诱导率随着6-BA的浓度增加而增加。结论激素对愈伤组织芽的增殖分化也有着不同程度的影响,当NAA的浓度为0.3mg/L,6-BA为1mg/L时,诱导愈伤组织分化形成不定芽数最多,成芽率为76%。     

金线莲组培苗快速培养研究

通过筛选金线莲外植体诱导愈伤组织、不定芽诱导分化和无根苗壮苗生根的最佳培养基配方,建立金线莲组培苗快速繁育体系．结果表明,在5种外植体中,叶柄和茎两部分外植体能诱导出愈伤组织;叶柄诱导愈伤组织的最佳培养基配方为1/2 MS+NAA 0.6 mg/L+ZT 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,培养50 d后统计...     

红松成熟胚愈伤组织诱导外植体选择及培养条件优化

【目的】通过培养条件的优化和适宜外植体类型的筛选,解决红松成熟胚愈伤组织诱导中存在的愈伤组织诱导率低、生长状态差、褐化率较高等问题,为建立红松成熟胚体胚发生体系奠定基础。【方法】用5种培养基类型、3种蔗糖浓度和9种植物生长调节剂组合,选择8种来源于成熟种子不同部位的外植体,对愈伤组织诱导的培养条件和适宜外植体类型进行优化和筛选。【结果】① 在5种培养基中,DCR培养基上愈伤组织诱导率高于其他培养基、生长状态好于其他培养基; ② 添加在DCR中的3种蔗糖浓度中,35 g/L时的愈伤组织诱导率最高(92.01%)、褐化率最低(17.01%); ③ DCR添加35 g/L蔗糖情况下,9种植物生长调节剂组合中NAA 2.0 mg/L + 6-BA 1.5 mg/L组合的愈伤组织诱导率最高、褐化率最低、生长状态最佳; ④ 在选出的优化培养条件下,8种来源外植体中,从裸胚上切离的下胚轴的愈伤组织诱导率高、褐化率低,且增殖能力强,具备胚性愈伤组织的形态解剖特征。【结论】红松成熟胚愈伤组织诱导的优化培养条件为DCR +蔗糖35 g/L + NAA 2.0 mg/L+ 6-BA 1.5 mg/L,适宜外植体裸胚上切离的下胚轴。     

狭苞橐吾离体培养再生体系的建立

为了建立简单、高效的狭苞橐吾组织培养再生体系，本研究以狭苞橐吾的子叶作为外植体，探究不同种类、不同浓度的植物生长调节剂组合对狭苞橐吾离体组织培养的影响。研究结果显示，不同浓度的6-BA与2,4-D组合均能诱导狭苞橐吾子叶产生愈伤组织。当2,4-D浓度为3.0 mg/L、 6-BA浓度为1.0、2.0、4.0 mg/L时，愈伤组织诱导率较高，诱导率均在90%以上。适宜诱导不定芽的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,诱导率为48.00%。在MS+TDZ 1.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L培养基中，丛芽的诱导效果较好，诱导率为98.67%。适宜的生根培养基为1/2MS+IAA 0.5 mg/L,其生根率为95.56%,平均生根条数为9.36条，平均长度约为10.48 cm。     

沙枣叶片愈伤组织诱导研究初报

以沙枣叶片作为外植体,以MS为基本培养基,用两种不同浓度激素的组合,筛选5组培养基进行继代愈伤组织及增殖诱导.结果表明,沙枣叶片诱导愈伤组织的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 1 mg/L kT1 mg/L 2,4-D 2 mL 25 g蔗糖 6 g琼脂(pH=5.5),诱导率达86.67%;以MS 6-BA 0.5 mg/L NAA0.5 mg/L kT1 mg/L 2,4-D 2 mL 25 g蔗糖 6 g琼脂(pH=5.5)作为愈伤组织增殖培养较理想.     

云南小叶种茶树叶片和茎段愈伤组织诱导及继代培养

为探究不同消毒方法对茶苗发芽率及消毒效果的影响,以云南小叶种茶树"十里香"种子为试验材料,采用种子萌发的无菌试管苗叶片及茎段为外植体,研究不同培养基类型、激素种类及浓度对愈伤组织诱导、增殖的影响。结果表明:4%次氯酸钠10 min+75%酒精30 s的消毒效果最好,污染率最低;叶片愈伤组织诱导培养基和叶片愈伤组织继代培养基的适宜配方均为B5培养基+0.5 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+0.1 mg/L激动素(KT);茎段愈伤组织诱导培养基和茎段愈伤组织继代培养基适宜配方均为MS培养基+1.5 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.2 mg/L萘乙酸(NAA)。研究结果为云南小叶种茶树组织培养及遗传转化体系的建立提供了科学依据。     

青钱柳愈伤组织不定芽诱导技术

以青钱柳成熟种子培养无菌苗,再用无菌苗叶和茎段为外植体进行组织培养,观察了愈伤组织形成及再分化形成不定芽的过程,分析了不同培养基和生长调节物质对青钱柳愈伤组织及不定芽发生的影响。结果表明:(1)MS、WPM和B5培养基均能诱导出愈伤组织,茎段和叶片的诱导率最高分别达到90.00%和86.70%;(2)激素及其浓度对愈伤组织诱导均有显著影响。当加入TDZ质量浓度为0.5 mg/L时,叶愈伤组织诱导率达95.00%;而加入TDZ质量浓度为0.1 mg/L时,茎段诱导率达92.85%;(3)叶愈伤组织在WPM+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA的培养基上,不定芽的诱导频率最高,达53.85%,这实现了青钱柳由愈伤组织分化形成不定芽和萌发增殖的过程,但萌发率较低。     

青钱柳愈伤组织不定芽诱导技术

以青钱柳成熟种子培养无菌苗,再用无菌苗叶和茎段为外植体进行组织培养,观察了愈伤组织形成及再分化形成不定芽的过程,分析了不同培养基和生长调节物质对青钱柳愈伤组织及不定芽发生的影响。结果表明:(1)MS、WPM和B5培养基均能诱导出愈伤组织,茎段和叶片的诱导率最高分别达到90.00%和86.70%;(2)激素及其浓度对愈伤组织诱导均有显著影响。当加入TDZ质量浓度为0.5 mg/L时,叶愈伤组织诱导率达95.00%;而加入TDZ质量浓度为0.1 mg/L时,茎段诱导率达92.85%;(3)叶愈伤组织在WPM+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA的培养基上,不定芽的诱导频率最高,达53.85%,这实现了青钱柳由愈伤组织分化形成不定芽和萌发增殖的过程,但萌发率较低。     

青钱柳幼胚愈伤组织的诱导

以青钱柳幼胚为外植体,研究了不同幼胚期、基本培养基种类、植物生长调节剂种类及其浓度配比对愈伤组织诱导的影响。结果表明,不同发育期的幼胚诱导出的愈伤组织在形态上差异较大,青钱柳种子发育至子叶胚中期较适合愈伤组织的诱导。青钱柳幼胚愈伤诱导时基本培养基以改良DKW效果最佳,诱导率达到了88.89%,且无褐化现象;含2,4-D与KT组合的培养基较适宜愈伤组织的诱导,其中2,4-D(0.5 mg/L)+KT(2.0 mg/L)和2,4-D(1.0 mg/L)+KT(1.0 mg/L)的组合对青钱柳幼胚诱导愈伤组织效果最佳,诱导率分别为80.00%和78.33%。     

三种切花单头菊试管苗口t片植株的再生

选用3个切花单头菊品种,以试管苗叶片为外植体,通过愈伤组织途径和直接诱导芽途径建立再生体系,探讨叶片不同部位、激素种类及浓度、基因型对再生率的影响.结果表明:3个品种中"贵"诱导愈伤组织能力和分化芽能力最强,MS+NAA 1 mg/L+6-BA 2～3 mg/L.为诱导愈伤组织的适宜培养基,MS+6-BA 1 mg/L+IAA 0.3～0.5 mg/L为分化不定芽的适宜培养基.     

大通鸡腿葱未受精子房愈伤组织诱导研究

以大通鸡腿葱未受精子房体为试验材料,研究了不同部位的外植体种类、培养基、生长调节剂以及碳源对未受精子房离体培养的影响。结果表明:顶部花蕾即将开放时,以中部花蕾子房体接种后愈伤组织诱导效果明显,诱导率为3.7%;通过对基本培养基筛选,MS基本培养基诱导效果最佳,诱导率为3.26%;最佳愈伤组织诱导培养基生长调节剂水平为MS+2 mg/L 2,4-D+3mg/L 6-BA,愈伤组织诱导率为7.97%;应用蔗糖的效果优于麦芽糖,蔗糖浓度为75 g/L时,愈伤组织诱导率最高为8.71%。不同培养条件对提高愈伤组织诱导率有一定的作用。     

甘肃康县地方茶树愈伤组织诱导研究

以康县地方茶树的茎、叶为外植体诱导愈伤组织,比较了不同激素组合对茎、叶诱导愈伤组织的影响。结果表明,以幼叶和幼茎作为外植体能获得较多的愈伤组织;幼叶外植体的适宜培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L,幼茎外植体的适宜培养基为6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L。     

中华芦荟愈伤组织的诱导

以中华芦荟幼苗茎段为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同浓度的生长素、细胞分裂素或两者组合,以及添加Vc或活性炭(共350种组合),研究中华芦荟愈伤组织的诱导及生长情况.结果表明, 在单独使用不同种类的生长素时,不同浓度的生长素诱导的愈伤组织频率差异明显,且愈伤组织的生长状态也各异;单独使用细胞分裂素时,愈伤组织的诱导率极低.当组合不同浓度和种类的生长素和细胞分裂素时,愈伤组织诱导频率差异显著;同时发现在减轻愈伤组织褐化的效果上,Vc较活性炭好.通过对愈伤组织诱导结果的比较,MS 2.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D 10 mg/L Vc为中华芦荟愈伤组织诱导的较好培养基,愈伤组织诱导率达到91.4%,且愈伤组织生长较旺盛.     

番茄花药培养愈伤组织诱导及不定芽形成的研究

为了建立番茄花药愈伤组织诱导及分化的实验体系,通过花药离体培养并设计不同的试验处理,以6个番茄品种的花药为试材,研究了植物生长调节剂、蔗糖浓度、硝酸银浓度、基因型和培养基对番茄花药培养愈伤组织诱导率及不定芽形成的影响.结果表明:培养基中添加1.0mg/L的2,4-D和0.5mg/L的KT,里格尔87-5和石番9号愈伤组织诱导率都达最高;培养基中加入30g/L的蔗糖,里格尔87-5的愈伤组织诱导率达20.24%;培养基中加入10μmol/L的硝酸银,花药组织褐化率较对照降低了70.59%,当浓度超过50μmol/L,褐化率增高,出愈率略有降低;不同基因型愈伤组织发生率明显不同,相同培养条件下,里格尔87-5的诱导率高达21.43%,而粉B二号的诱导率仅有0.46%;培养基中加入175g/L的马铃薯汁、0.1%的活性炭,6个材料的愈伤组织平均诱导率较对照分别降低了35.14%、95.48%.番茄花药愈伤组织在MS+6-BA 2mg/L+ZT 0.5mg/L+IAA 0.1mg/L培养基上可再分化成不定芽,不定芽诱导率达15.15%.