哺乳动物细胞的遗传筛选(Ⅰ)

遗传筛选在模式生物系统(如酵母、线虫、果蝇和拟南芥)中一直是一种非常有效的研究手段。由于技术上的难度,遗传筛选在哺乳动物系统中的运用并不广泛。本文主要综述最近在哺乳动物细胞遗传筛选方法的进展,尤其是新型诱变手段在基因改良细胞系方面的应用。     

谭丽玲研究员

谭丽玲研究员谭丽玲研究员，女，广州人，１９３５年１２月生，１９６０年毕业于南开大学生物系，任教一年。１９６１年起在北京中科院遗传研究所从事哺乳动物辐射遗传研究。１９７３年开始哺乳动物胚胎工程研究，是我国最早进行这领域研究的几位学者之一。曾任遗传所２０...     

甘蔗品种的引进、鉴定和利用

从17个国家和地区引进240个甘蔗品种,其中44个是各国80年代新育成或推广的优良栽培品种,14个是世界广为利用的著名新本品种,39个是我国急需的大野后裔和抗病鉴别品种。并应用数量遗传、生理生化和生物技术等手段,对引进品种进行深入系统的研究,在甘蔗数量遗传、生化标记、抗(病、旱)性鉴定、细胞亚无性系筛选和农艺特性及其配     

斑马鱼在人类疾病模型以及药物筛选中的应用

小鼠作为研究人类疾病的动物模型已被广泛使用,然而其在大规模遗传筛选和药物筛选方面受到诸多限制.斑马鱼作为典型的脊椎动物,在器官水平和细胞水平上与哺乳动物相似,而且胚胎和幼体的透明特性为实时观察提供了方便;其基因与人类有很高的同源性且易于进行基因操作,因而成为了研究人类疾病的理想动物模型.本文介绍了斑马鱼在人类疾病模型和药物 筛选中的研究概况.     

转基因动物

<正> 由于建立了将外源基因导入生殖细胞,并使插入基因在机体中成功表达的技术,使得动物的基因操作能以前所未有的规模向前发展。从转基因技术方面得到的资料,几乎涉及包括发育基因的调节、致癌基因的作用。免疫系统以及哺乳动物的发育等现代生物学的各个方面。由于特异的突变能被引进转基因小鼠,因而有可能建立人类遗传疾病的精确动物模型,开始对哺乳动物的基因组,在遗传上进行系统分析。将基因导入哺乳动物的生殖细胞,是生物学最新重大技术进展之一。转基因动物已     

用Ames试验检测苯胺类化合物的致突变性

用Ａｍｅｓ试验检测苯胺类化合物的致突变性兰州医学院环境医学研究室赵晓红Ａｍｅｓ试验是利用一组组氨酸营养缺陷型菌株加入受试物，在有或没有哺乳动物微粒体活化系统条件下发生恢复突变的特性，来鉴定化学物质的致突变活性。此法现已成为全世界初步筛选潜在致癌物的首...     

糖尿病研究与动物模型

糖尿病是一组由遗传和环境因素相互作用而引起的临床综合症。近年来 ,糖尿病发病率上升很快 ,防治糖尿病已成为科学工作者的一个重要课题。合适的糖尿病模型无疑可对人类糖尿病研究提供重要的手段。1　糖尿病研究中动物模型的使用现状由于糖尿病病因不明 ,诱发因素较多 ,因此糖尿病研究所涉及的范围较广 ,而且使用的实验动物种类也较多。主要以哺乳动物为主 ,如灵长类动物主要用于病因学、遗传学、神经系统、细胞生化及药物鉴定等方面研究 ,但因价格昂贵 ,难以得到 ,国内基本未使用。啮齿类动物用量最大 ,以药物筛选和血液生化、病理改变等…     

哺乳动物胚胎干细胞的特性及利用

哺乳动物胚胎干细胞（ES细胞）是由动物早期胚胎发育的内细胞团（ICM）或原始生殖细胞（PGC）分离得到的。人们利用ES细胞所具有的全能性、体外分化以及稳定的遗传性能等特点，展示了ES细胞在建立哺乳动物的早期胚胎体外分化模型、转基因动物模型、器官和组织的修复和移植治疗、克隆动物的生产、发育生物学的研究等方面广阔的应用前景。但是，由于哺乳动物错综复杂的基因调控和环境因素的影响，对于胚胎干细胞的研究还存在诸多问题，还需作更深入细致的研究。     

中草药中胰高血糖素受体拮抗剂的高通量细胞筛选

为筛选胰高血糖素受体拮抗剂，建立了一种高通量筛选胰高血糖素受体拮抗剂的细胞模型.利用PCR方法扩增得到人的胰高血糖素受体 cDNA，并连接到哺乳动物细胞表达载体pCDNA3.1上，构成质粒h glucagons-R/pCDNA3.1，将这种质粒与报告基因质粒(3×CRE/3×MRE/SRE-LUC)共转染到HEK293细胞，通过G418筛选，建立稳定的人胰高血糖素受体拮抗剂筛选细胞株.利用胰高血糖素受体内源激动剂探索和优化了筛选条件，筛选方法合理， Z′因子大于0.6，系统稳定，符合胰高血糖素受体拮抗剂的高通量筛选的要求.     

哺乳动物热习服中循环系统的变化

哺乳动物遭受热胁迫时，体热从体核向体表的转运主要是由心血管系统来完成的，以此实现对体温的调节，讨论了哺乳动物在热习服过程中的心血管系统的变化特征，主要综述了散热与脱水对循环系统的综合效应，热习服对心输出（cardiac output,CO)现分配的影响及热协迫下哺乳动物局部循环的控制机理，旨在为研究哺乳动物对特殊环境（热环境）的适应机制提供理论基础。     

简评《中国哺乳动物种和亚种分类名录与分布大全》

多年以来，分类学者对中国现生哺乳动物的种数说法不一。由于中国哺乳动物的分类方法、原则以及种和亚种的界定等都存在不同，从而造成分类学上的一些混乱。这对中国哺乳动物学的研究不利，尤其是对一些初学者在工作上会有诸多不便。为尽快改善这种现状，中国科学院昆明动物研究所研究员王应祥在精心收集、认真查阅近两个多世纪以来国内外学者对中国哺乳动物研究的报告和著作共５２０篇（部）的基础上，结合自身数十年对中国哺乳动物分类学研究，对中国哺乳动物种和亚种分类名录和分布加以系统整理、修订和补充，最后编纂成书，名为《中国哺…     

转几丁质酶基因烟草后代的遗传分析

本论文采用分子检测(PCR扩增、PCR-Southern杂交)与表型检测(接真菌实验、酶活力测定)相结合的手段，对花粉管通道法及载体法导入几丁质酶基因烟草后代的遗传表现进行研究。结果证明通过不同方法导入受体细胞基因组中的外源基因均能遗传给后代，并能在转化受体当代及后代中高效表达。但采用花粉管通道法导入的外源基因虽然能够遗传给后代，但分离比复杂，遗传规律性较差。而载体法导入的外源基因T1代x^2检测符合3：1的遗传分离比，遗传稳定性要好于DNA直接导入。因此，建立良好的遗传转化系统是外源基因稳定遗传和表达的前提。     

筛选差异表达基因的方法进展

植入前胚胎差异表达基因的筛选是分离、鉴定发育相关基因的关键 ,是克隆动物发育分子机理研究的基础 .哺乳动物植入前胚胎和克隆胚胎材料的获得十分不易 ,使得筛选差异表达基因的方法在该领域的应用均受到较大的限制 .以DDRT -PCR为基础的单胚mRNA差异表达技术的建立 ,为克隆植入前胚胎发育相关基因及哺乳动物克隆胚胎发育分子机理研究提供有力的工具 ,本文将在多年研究基础上对该技术及目前筛选差异表达基因的方法进行综述 .     

走近哺乳动物的冬眠世界

蜇眠是动物的一种生存手段．是进化出来的一种策略。变温动物在寒冷的季节潜入地下．单纯地依赖外界环境的变化睡去、醒来。这个过程对于哺乳动物来说要复杂很多，如果彻底解开哺乳动物冬眠的秘密．说不定我们人类在需要时也能“一眠不起”。[编者按]     

酵母双杂交技术的发展

自酵母双杂交系统创建以来，已经成为研究蛋白质相互作用的重要手段，被广泛用于各个生物学研究领域，揭示了大量未知蛋白质之间的相互作用。近年，在经典的酵母双杂交系统基础上，针对其局限性，相继提出许多新的研究方法，如：双（多）筛选法，SOS富集系统，哺乳动物细胞双杂交系统，三杂交系统，单杂交系统，逆向双杂交系统，等等。本将对上述方法进行详细叙述。酵母双杂交及其衍生系统已经成功地运用于蛋白质之间，蛋白质与DNA、PNA、配体之间的相互作用的研究。     

表观遗传调控滇重楼内生真菌活性物质的合成

提出化学表观筛选——分子遗传平台策略,利用表观遗传理论调控滇重楼内生真菌抗菌活性物质的合成。化学表观遗传筛选是对真菌进行高通量化学表观抑制剂的筛选,旨在经济快捷地获得抗菌活性物质合成受到表观调控的菌株;建立分子遗传平台是根据同源基因克隆真菌的相关表观遗传酶类基因,靶向改变表观遗传酶类的表达,旨在获得遗传稳定性高的改良菌株。     

小型猪近交系鉴定研究进展

本文综述了国内外小型猪近交系鉴定方法的研究进展,包括：异体皮肤移植鉴定、基因组水平鉴定、生理生化标记、同工酶蛋白质鉴定、DNA遗传标记、SNP分析等分子遗传学的方法。综合分析,异体皮肤移植技术是大型哺乳动物近交系最佳鉴定方法。该技术将为我国创新资源近交系猪培育和开发利用奠定科学基础,为大型哺乳动物近交系鉴定提供科学的检测技术和方法,并使我国大型哺乳动物近交系研究处于国际领先地位。     

银鲫人工杂交试验中雄核发育现象的RAPD实验证据

以随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术为手段，对生野鲫，雄性异育银鲫及其杂交ＦＩ代（选择性状接近父本的５％Ｆ１代），父本回交Ｆ１你进行了遗传多态分析，从１５０个随机序列引物中筛选得到９种引物，并用它们可得到３６个用作遗传标记的ＲＡＰＤ多态性条带，其中的２２条父本显性条带均遗传子代，而１４条母本性条带则均未被遗传子代，对两亲本和子代中的ＲＡＰＤ标记条带的分布情况及相似系数分析，以及聚类分析结果均支持     

哺乳动物细胞适应无血清培养的改造

哺乳动物细胞是目前最成功的医学制品表达宿主细胞.但在大规模培养中哺乳动物细胞会面临着对无血清培养基的适应性差、贴壁性差以及细胞凋亡等很多难题.对哺乳动物细胞本身进行改造已成为优化哺乳动物表达系统的新的热点.     

TLR9基因遗传多态性与疾病关系的研究进展

近年来对TLRs的研究主要集中在人类的TLRs的遗传多态性在各种疾病中的免疫学作用等方面的研究。对其他哺乳动物TLRs的免疫学研究还不是很多。本文综述TLR9基因的遗传多态性与几种疾病关系的研究最新进展。