非小细胞肺癌淋巴转移与nm23—H1基因突变及mRNA表达异…

目的 观察非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）组织中ｎｍ２３－Ｈ１基因的存在状况及其转录表达水平，分析肺癌恶性转移与该基因异常的关系。方法 采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和半定量ＲＴ－ＰＣＲ方法，以正常癌旁组织及正常肺组织为对照，观察了３１例原发性ＮＳＣＬＣ中ｎｍ２３－Ｈ１基因的突变和ｍＲＮＡ表达情况。结果 ３１例肺癌中未发现１例存在ｎｍ２３－Ｈ１基因突变。在２０例具淋巴结转移的ＮＳＣＬＣ中ｎｍ２３－Ｈ１基因ｍＲＮＡ     

nm23—H1与CD44V6在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 通过检测ｎｍ２３－Ｈ１与ＣＤ４４Ｖ６在ＮＳＣＬＣ中的表达,探讨抑癌基因与转移相关基因在ＮＳＣＬＣ中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化法检测１４７例ＮＳＣＬＣ ｎｍ２３－Ｈ１、ＣＤ４４Ｖ６的表达情况。结果 ｎｍ２３－Ｈ１阳性９２例（６２．６％）。Ⅰ、Ⅱ期阳性率６５．３％（６２／９５）,Ⅲ、Ⅳ期为５７．７％（３０／５２）,两组比较ｘ＾２＝０．２０。Ｐ〉０．０５。高、中分化组阳性８３例（６８．６％）,与低分化组阳性（３４．６％）比较ｘ＾２＝１０．５５,Ｐ〈０．０１。腺癌中ｎｍ２３－Ｈ１阳性５２例（７８．８％）,鳞癌中阳性３２例（５０．８％）,两类型肺癌比较ｘ＾２＝１１．１２,Ｐ〈０．０１。ＣＤ４４Ｖ６阳性率６４．６％（９５／１４７）。在Ⅰ、Ⅱ期中阳性表达率６６．３％（６３／９５）,Ⅲ、Ⅳ期阳性表达５９．６％（     

肝细胞癌p53及nm23-H1 mRNA表达的意义

目的探讨ｐ５３,ｎｍ２３Ｈ１与原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）发生发展的关系．方法运用原位分子杂交技术对４９例ＨＣＣ中ｐ５３和ｎｍ２３Ｈ１基因ｍＲＮＡ进行检测,并结合临床病理特征进行分析．结果ｐ５３ｍＲＮＡ杂交阳性２３例,占４６９％;ｐ５３ｍＲＮＡ过表达与肿瘤的肝内转移．包膜侵犯及Ｅｄｍｏｎｄｓｏｎ分级相关（Ｐ＜００５）;ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ阳性表达２７例,占５５１％;ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ表达与肿瘤肝内转移及ＴＮＭ分期呈负相关（Ｐ＜００５）;同时发现ｐ５３ｍＲＮＡ过表达和ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ低表达在ＨＣＣ肝内转移中具有协同作用．结论ｐ５３和ｎｍ２３Ｈ１参与ＨＣＣ的发生发展,ｐ５３过表达及ｎｍ２３Ｈ１低表达提示ＨＣＣ肝内转移．     

原发性非小细胞肺癌的P~(16)基因缺失及其临床意义

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对３１例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）标本进行了Ｐ１６基因纯合性缺失检测,以了解Ｐ１６基因缺失与ＮＳＣＬＣ组织病理类型、临床分期的关系。１　资料与方法１１　标本来源　３１例ＮＳＣＬＣ标本为山东省立医院、山东省肿瘤防治院、山东医科大学附属医院住院患者的手术切除标本,并经病理证实。获取标本后１小时内用液氮冷却,保存在－７０℃冰箱中备用。应用常规方法提取肿瘤细胞基因组ＤＮＡ,紫外分光光度计测定ＤＮＡ浓度和纯度,取少量ＤＮＡ以备ＰＣＲ扩增。１２　根据已知Ｐ１６基因序列,在第…     

mdr-1、CD44v、和nm23-H1基因产物与肝癌侵袭及转移的关系

为探讨ｍｄｒ－１,ＣＤ４４ｖ和ｎｍ２３－Ｈ１基因产物蛋白与肝癌侵袭,转移预后的关系。用免疫组织化学技术检测４６例肝癌患者ＣＤ４４ｖ和ｎｍ２３－Ｈ１和ｍｄｒ－１基因蛋白的表达。结果 显示肝癌组织ｍｄｒ－１,ＣＤ４４ｖ和ｎｍ２３－Ｈ１（６０．０８％）,明显高于正常组织和癌旁组织（Ｐ〈０．０５）;肝癌转移组的ｍｄｒ－１,ＣＤ４４ｖ阳性表达率高于ｎｍ２３－Ｈ１阳性表达率,差异显著（Ｐ〈０．０５）;肝癌非转     

大肠癌组织nm23-HI p53 PCNA的表达

目的研究大肠癌组织ｎｍ２３ＨＩ，ｐ５３，ＰＣＮＡ的表达意义及其与肿瘤浸润转移的关系．方法１９９１年３月～１９９６年５月采用免疫组织化学方法检测７４例（男３９例，女３５例，平均年龄５３２岁，术前未做化疗及放疗）大肠癌组织（石蜡切片，厚４μｍ）中ｎｍ２３Ｈ１，ｐ５３，ＰＣＮＡ以及Ⅳ型胶原的表达情况．结果大肠癌ｎｍ２３Ｈ１，ｐ５３，ＰＣＮＡ的阳性率分别为７１６％、５２７％和８１１％．ｎｍ２３Ｈ１低表达与淋巴结转移有关（Ｐ＜００５），在Ⅳ型胶原表达不同的肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１的表达无明显差异；ｐ５３和ＰＣＮＡ过表达与浸润程度和淋巴结转移有关（Ｐ＜００５）．结论ｎｍ２３ＨＩ低表达可作为预测大肠癌转移的较好指标．ｐ５３过表达在浸润转移过程及细胞增殖中均起重要作用．     

胃癌组织5q微卫星不稳定性与APC/MCC基因杂合性缺失的研究

目的探讨５ｑ微卫星不稳定性（ＭＳＩ）与ＡＰＣ／ＭＣＣ基因杂合缺失（ＬＯＨ）的关系。方法应用ＰＣＲ－ＳＳＬＰ及ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术分析５２例手术切除胃癌组织中ＭＳＩ及ＡＰＣ／ＭＭＣ基因ＬＯＨ。结果５ｑＭＳＩ检出率为３４．０％（１６／４７）,ＡＰＣ／ＭＣＣ基因ＬＯＨ率为３１．４％（１１／３５）。早期胃癌５ｑＭＳＩ阳性率为６６．７％（２／３）,ＡＰＣ／ＭＣＣＬＯＨ率为５０％（１／２）;进展期分别为３１．８（１４／４４）,３０．３％（１０／３３）。两组间无显著差别（Ｐ＞０．０５）。ＭＳＩ及杂合缺失与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移及临床分期无关。粘液（印戒）细胞癌ＡＰＣ／ＭＣＣＬＯＨ率（５５．６％）显著高于高、中分化管状腺癌（Ｐ＜０．０５）。胃、肠两型胃癌５ｑＭＳＩ及ＡＰＣ／ＭＣＣＬＯＨ差异无显著性及５ｑＭＳＩ与ＡＰＣ／ＭＣＣＬＯＨ无相关性（Ｐ＞０．０５）。结论染色体５ｑＭＳＩ有ＡＰＣ／ＭＣＣ基因ＬＯＨ在两型胃癌的早期发生及发展中起一定作用。染色体５ｑ可能是胃癌的易感部位。     

转化生长因子-β1在肝细胞性肝癌中表达增强

目的转化生长因子－β１（ＴＧＦβ１）在细胞生长的负性调节上有重要作用,是肝细胞生长和增殖的强抑制物但肝癌（ＨＣＣ）患者肝组织中ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达高．现检测ＨＣＣ患者外周血中ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达,血清ＴＧＦβ１水平,以及肝组织中ＴＧＦβⅡ型受体（ＴＧＦβＲⅡ）的表达．方法ＨＣＣ患者外周血分离单个核细胞（ＰＢＭＣ）,提取总ＲＮＡ,用反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）技术扩增ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ．血清ＴＧＦβ１水平测定用Ｐｒｏｍｅｇａ公司产的试剂盒．肝组织ＴＧＦβＲⅡ表达的分析用原位杂交法．结果ＨＣＣ患者２０例ＰＢＭＣＴＧＦβ１ｍＲＮＡ用ＲＴＰＣＲ检测阳性率达７０％,对照组阴性．ＨＣＣ患者４０例血清ＴＧＦβ１水平（２７５８ｍｇ／Ｌ±８１０ｍｇ／Ｌ）明显高于对照组（８２７ｍｇ／Ｌ±３７２ｍｇ／Ｌ）．原位杂交表明,ＴＧＦβＲⅡ在ＨＣＣ细胞的胞质中有弱表达．结论ＨＣＣ患者ＴＧＦβ１基因在转录水平和翻译水平上均显示表达增强．ＰＢＭＣ有可能代替肝组织用以检测ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ的表达应用于基础与临床的研究．     

胃癌抗转移癌基因nm23_H1mRNA的表达意义

目的探索ｎｍ２３＿Ｈ１ｍＲＮＡ在胃癌中的表达程度与转移及预后的关系．方法应用原位分子杂交（ＩＳＨ）技术，检测胃癌组织１１２例（男８４例，女２８例，年龄２９岁～７０岁）中ｎｍ２３＿Ｈ１ｍＲＮＡ的表达，并结合临床资料进行分析．结果胃癌肿瘤区、移行区及癌旁区ｎｍ２３＿Ｈ１ｍＲＮＡ阳性表达率分别为４２９％，２７６％和１８％，阳性表达呈梯度下降趋势；无淋巴结转移的胃癌ｎｍ２３＿Ｈ１ｍＲＮＡ表达阳性为８７２％（４１／４７），有淋巴结转移的胃癌为１０８％（７／６５）；随访８８例中，≥３年生存者中６８６％（２４／３５）ｎｍ２３＿Ｈ１ｍＲＮＡ表达阳性，＜３年生存者中３７９％（１１／２９）ｎｍ２３＿Ｈ１ｍＲＮＡ表达阳性，故ｎｍ２３＿Ｈ１ｍＲＮＡ阳性表达在胃癌患者的淋巴结转移、非转移中差异显著（Ｐ＜００１）．结论ｎｍ２３＿Ｈ１ｍＲＮＡ表达率的升高与淋巴结的转移呈负相关性，与胃癌患者生存期呈正相关性     

nm23-H1基因在结肠癌组织中的表达及其意义

目的探讨ｎｍ２３－Ｈ１信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）基因在结肠癌发展中的作用及其与临床有关资料的关系。方法用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ法对１０例正常结肠组织、６例结肠息肉及２０例结肠癌中该基因的表达水平进行检测分析。结果２０例结肠癌及４例结肠息肉中ｎｍ２３－Ｈ１基因明显高于正常结肠组织，且与肿瘤的大小及分期有关，但此基因与患者的性别、年龄及肿瘤的分化程度无关。结论ｎｍ２３－Ｈ１基因在结肠癌的局部损害及转移中发挥作用     

155例肺癌中P53基因突变的研究

目的 探讨Ｐ５３基因突变与人肺癌临床病理特征及预后、复发转移之间的关系。方法 应用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）检测１５５例原发肺癌手术标本中Ｐ５３基因５－８外显子的突变。结果 非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中Ｐ５３基因突变率为５３．８％（７８／１４５），小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）为８０％（８／１０）。近一半的临床早期ＮＳＣＬＣ患者有Ｐ５３基因突变（４２．５％），晚期Ｐ５３基因突变率     

肝癌组织中三种糖基转移酶基因表达水平

一、资料与方法 １．标本：１３例正常肝组织来自尸检标本；１５例ＨＣＣ组织和１５例ＨＣＣ癌旁组织取自手术患者。 ２．方法：Ｎ－乙酰氨基葡萄糖转移酶Ｖ（ＧｌｃＮＡｃＴ－Ｖ）、Ｎ－乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅲ（ＧｌｃＮＡｃＴ－Ⅲ）、（１，６核心岩藻糖转移酶（α１－６ＦｕｃＴ）和β－肌动蛋白（β－ａｃｔｉｎ）四种扩增基因引物由Ｐｒｉｍｅｒ３引物设计程序设计。以β－ａｃｔｉｎ为内标，采用ＲＴ－ＰＣＲ法检测以上三种基因ｍＲＮＡ的表达情况。ＰＣＲ产物经琼脂糖凝胶电泳后用ＩｍａｇｅＭａｓｔｅｒ ＶＤＳ图像分析系统处理并…     

胃癌组织中生长抑素Ⅱ型受体基因低表达与淋巴结转移

目的　恶性肿瘤的发生和转移机制尚未完全明确，我们旨在研究胃癌癌灶（Ｃ） 、癌旁组织（Ｐ） 和远处正常组织（ Ｎ） 生长抑素（ＳＳ） 含量及其Ⅱ型受体（ＳＳＲ Ⅱ） 基因的表达情况，及其与腹腔淋巴结转移的关系，探讨ＳＳ 及ＳＳＲⅡ在胃癌发生、发展和转移中的作用．方法　外科手术切除的胃癌标本３６ 例，分为２ 组：腹腔淋巴结转移组（Ａ 组）２０ 例，男１７ 例，女３ 例，年龄５８－４ 岁±１４－８ 岁；Ｂ 组（ 无淋巴结转移）１６ 例，男１４ 例，女２ 例，年龄６０－５ 岁±１４－２ 岁． 大体标本离体后立即取癌灶、癌旁和远处正常组织，应用ＲＩＡ 法检测其ＳＳ 含量、同位素掺入ＲＴＰＣＲ 法检测ＳＳＲⅡ基因表达情况（ 以ｃｐ ｍ 高低间接反映基因的表达强弱） ．结果　Ａ，Ｂ 两组的年龄和性别分布无显著性差异（ Ｐ＞ ０－０５） ．癌灶ＳＳ 含量明显低于癌旁和正常粘膜（ Ｐ＜ ０－０５） ，但Ａ，Ｂ 两组间的差异无统计学差异（ｐ ｍｏｌ／ ｇ ，Ａ 组：Ｃ １５ ±８ ，Ｐ３０ ±８ ， Ｎ３２ ±１１ ；Ｂ 组：Ｃ １６ ±９ ， Ｐ３２ ±１０ ， Ｎ ３６ ±１２） ．Ａ 组癌灶ＳＳＲⅡ基因表达明显低于癌旁和远处粘膜（ Ｐ＜ ０－０１） ，也低于Ｂ 组癌灶的ＳＳＲⅡ的表达（     

mdr1基因的表达和肺癌多药耐药的关系

目的进一步研究ｍｄｒ１基因的表达与原发性肺癌多药耐药的关系。方法应用逆转录多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法对４３例未治、５例化疗后的原发性肺癌和３３例癌旁正常肺组织ｍｄｒ１基因的表达进行分析。结果４８例癌标本中有１５例被观察到ｍｄｒ１基因的过度表达，主要分布在非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中，仅１例化疗后标本ｍｄｒ１阳性。ｍｄｒ１基因的过度表达与肿瘤大小，淋巴结转移和病期无明显相关性。随访一年后发现，过度表达ｍｄｒ１基因的病例，其复发率高于无过度表达者。结论在未治的原发性肺癌尤其是ＮＳＣＬＣ中可检测到ｍｄｒ１基因的过度表达，并且可能是提示不良预后的指标。     

17号染色体微卫星不稳定性和杂合性丢失与非小细胞肺癌的关系

目的　明确１７ 号染色体微卫星不稳定性（ＭＩ） 和杂合性丢失（ＬＯＨ） 与非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ） 的关系。方法　对３５ 例ＮＳＣＬＣ肿瘤切除组织和肿瘤旁正常组织,采用聚合酶链反应微卫星长度多态性分析方法检测了１７ 号染色体上４ 个微卫星位点ＴＰ５３（１７ｐ１３－１）、ＴＨＲＡ１（１７ｑ１１－２１２）、Ｄ１７Ｓ５７９（１７ｑ１２２１）、Ｄ１７Ｓ８５５（１７ｑ２１） 的ＭＩ和ＬＯＨ。结果　３５ 例ＮＳＣＬＣ中,１７ 号染色体ＭＩ和（或）ＬＯＨ的发生率为６３％ （２４／３５）,其中ＭＩ为４０％ （１４／３５） ,ＬＯＨ 为３１％ （１１／３５）。同时表现有ＭＩ和ＬＯＨ 为９％ （３／３５） 。早期ＮＳＣＬＣ（ Ⅰ期和Ⅱ期） １７ 号染色体ＭＩ和（ 或）ＬＯＨ 发生率为７９％ （１５／１９）,明显大于晚期（ Ⅲ期）ＮＳＣＬＣ（４４％ ,７／１６,Ｐ＜０－０５） 。无纵隔淋巴结转移的ＮＳＣＬＣ的ＭＩ和（ 或）ＬＯＨ 发生率（８７％ ） 亦明显大于已有纵隔淋巴结转移者（４８％ ）,Ｐ＜ ０－０５。ＭＩ和（ 或）ＬＯＨ 在不同肿瘤组织类型以及不同组织细胞分化程度之间差异无显著性,Ｐ＞０．０５。结论　１７ 号染色体ＭＩ和ＬＯＨ 在ＮＳＣＬＣ的发生中可     

应用长片段PCR扩增全长HIV— 1DNA的研究

目的 探讨长征段ＰＣＲ（ＬＤ－ＰＣＲ）扩增特点,并将它用于对全长ＨＩＶ ＤＮＡ的研究。方法 应用ＬＴＤ（Ｕ５）／ＬＴＤ（Ｒ）,ＣＬ－ＮＳＣ／ＣＬ－ＮＥＦ和ｇａｇＡｌ／ｇａｇＡ２等不同引物,＾３２Ｐｇａｇ,ｐｏｌ,ｎｅｆ和ｔａｔ等为片段探针,对克隆有ＨＩＶ－１完整基因片段,部分基因片段的质粒和ＨＶＩ感染者外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中的ＨＩＶ－１ ＤＮＡ进行扩增。结果 ＬＤ－ＰＣＲ对０．４－９ｋｂ的第     

一种简单迅速筛选肿瘤基因组中基因突变的方法

目的 建立一种新的非同位素ＳＳＣＰ分析方法。方法 常规提取人类基因组ＤＮＡ作为模板,ＰＣＲ扩增ｎｍ２３－Ｈ１基因,变性ＰＣＲ产物,６％非变性聚丙烯酰胺凝胶ＳＳＣＰ电泳,银染后分析结果。结果 改进了目前ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析中应用同位素标记的检测方法,采用银染方法,建立起简单迅速的非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析方法和适宜条件。并将这种方法成功地应用于肿瘤转移抑制基因点突变的检测。结论 非同位素聚合酶链反     

肿瘤转移抑制基因nm23在人肝细胞癌中的表达

目的探讨ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ表达水平与人肝癌转移倾向的相关性．方法采用地高辛标记的ｎｍ２３Ｈ１反义ｃＲＮＡ探针对２４例肝细胞癌进行原位杂交，检测癌及癌旁正常肝组织中ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ表达水平．２４例标本依分组标准合为两组．分组标准：①肝门淋巴结已有转移；②肝内肿癌数≥２；③门静脉内癌栓；③癌性卫星结节形成．具备备件①或②、②或③、④者为高转移潜能组（ｎ＝６），其他归入低转移潜能组（ｎ＝１８）．地高辛标记试剂盒为ＤＩＧＲＮＡｌａｂｅｌｉｎｇｋｉｔ，为德国宝灵曼公司产品．ｎｍ２３Ｈ１ｃＤＮＡ由Ｒｏｓｅｎｇａｒｄ惠赠．原位杂交方法参照公开发表的资料稍加改良．结果原位杂交染色呈阳性者为胞浆型颗粒状或团块状．ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ强阳性表达在低转移倾向组有１０例，高转移倾向组无；阴性表达者在低转移倾向组有１例，高转移倾向组有３例，统计处理Ｐ＜００５．ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ表达水平与肝癌大小、相关肝脏疾病背景等临床指标均无关（Ｐ＞００５）．结论ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ表达水平可被认为是反映人肝细胞癌转移倾向的指标之一．     

丙型肝炎病毒NS5b区与5'-非编码区不同基因区RNA检测结果的比较

为探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ５ｂ区与５’－非编码区（５’－ＮＣＲ）不同基因区ＲＮＡ检测结果的区别及临床应用价值。利用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测１４８例肝炎患者血清ＨＣＶ ＮＳ ５ｂ基因的ｃＤＮＡ,并与５’－ＮＣＲ基因区ｃＤＮＡ检测技术进行了比较。结果 ＨＣＶ ＮＳ ５ｂ基因区ＲＮＡ检出率为２４．３％（３４／１４８）,５’－ＮＣＲ基因区ＲＮＡ检出率为３１．１％（４７／１４８）。Ｈ     

非小细胞肺癌组织蛋白酶D的表达及与预后的关系

目的探讨组织蛋白酶Ｄ（ＣＤ）表达与肺癌患者预后的关系。方法采用链霉抗生物素蛋白－过氧化物酶（Ｓ－Ｐ）快速免疫组织化学法检测非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）患者肺癌组织和配对淋巴结标本中ＣＤ表达。结果６６％（４２／６４）的肺癌组织ＣＤ表达阳性，其中鳞癌为５７％（１７／３０），腺癌为７４％（２５／３４）。在３５例转移淋巴结标本中，２０例５７％ＣＤ阳性。Ⅲ～Ⅳ期肺癌病例中，肺癌组织ＣＤ表达高于Ⅰ～Ⅱ期病例（Ｐ＜０．０５）。腺癌伴有淋巴结转移组，ＣＤ表达显著高于淋巴结阴性组（Ｐ＜０．０１）。结论肺癌组织ＣＤ高表达与肿瘤临床分期和腺癌的淋巴结转移关系密切，ＣＤ有可能作为ＮＳＣＬＣ患者的预后指标。