不同成熟度枳和枳橙种子发芽率影响机理初探

为探索枳和枳橙种子发育过程中积累的内源激素、糖类与发芽率之间的兲系,分别选取不同成熟期的枳和枳橙果实,测定其种子IAA、ABA、淀粉、果糖、蔗糖、葡萄糖、可溶性糖含量。结果表明:枳种子IAA、ABA、果糖、蔗糖对发芽率有促迚作用,淀粉、葡萄糖对种子发芽率有抑制作用,但作用均不显著;枳橙种子IAA、ABA、果糖、蔗糖对发芽率有抑制作用,淀粉、葡萄糖对发芽率有促迚作用,其中发芽率与果糖含量呈显著负相兲,说明枳橙种子果糖对发芽率有显著抑制作用。     

不同株系枳实生苗的菌根依赖性研究

用11个株系枳实生苗在无土基质条件下接种VA菌根真菌Glomus citrocolum,以不接种菌根为对照。培养6个月后的结果表明,不同株系枳的菌根依赖性以枳74-1和飞龙枳为最高,以厚皮枳和莒南枳为最低。其菌根依赖性与株高、枝梢干重呈显著负相关,与根/梢比值和枝梢磷含量有一定相关性,但不明显。矮化枳类型的菌根依赖性具有较乔化枳类型更大的倾向,因而,枳的矮化性状也许可以作为估计不同株系枳菌根依赖性的依据。     

我国枳的主要种质资源

综述了枳资源的研究成果，包括以下两个方面：（１） 枳的变异类型及特征；（２） 枳供砧木的利用     

八种来源不同的枳对枳砧甜橙黄环病的反应

八种来源不同的枳对枳砧甜橙黄环病的反应赵学源何新华（中国农业科学院柑桔研究所重庆６３０７１２）枳是柑桔类果树的优良砧木，在我国广泛应用。７０年代以来，在湖南、江西、广西、广东、福建和四川等地相继发现果实含酸量低的甜橙品种，如暗柳橙、新会橙和改良橙用枳...     

45S rDNA在6个枳属植物中期染色体上的定位

利用染色体荧光原位杂交技术对45S rDNA在枳属6个品种体细胞中期染色体上的分布情况进行了分析。结果表明,供试品种皱皮枳、飞龙枳、日本枳、薄皮枳、泸溪枳和旺仓大叶枳上的45S rDNA杂交位点分别为5、5、5、6、6和4个,且间期核中的信号分布情况与染色体上基本一致。品种间在位点数目和信号分布区域方面存在差异,表现出...     

枳属种质遗传多样性及其与近缘属植物亲缘关系的SSR和cpSSR标记分析

 应用核基因组SSR和叶绿体基因组SSR,分析了枳属28份枳及枳杂种种质的遗传多样性及其与近缘属植物的亲缘关系。核基因组SSR分析表明普通枳的遗传差异明显,22个SSR位点的平均多态性信息含量（PIC）为0.51,平均期望杂合度为0.52,表明中国枳种质资源具有较丰富的遗传多样性。在遗传距离约0.16时,22份普通枳可以分成4个类型。叶绿体基因组SSR分析则发现普通枳间基本无差异,表明以母系遗传为特征的枳叶绿体基因组相对保守。富民枳与普通枳无论是在核基因组还是在叶绿体基因组上均存在较大差异,支持富民枳种的地位。SSR和cpSSR结合使用可比较准确地鉴定枳杂种。     

一个新发现的柑桔嵌合体—枳合芦

枳合芦是继我国已有报道的改良橙、枸合桔等柑桔嵌合体之后,新发现的又一个自然产生的嫁接嵌合体,以其变异兼有芦柑和枳的性状而定名“枳合芦”。一、变异的产生变异发现于福建省连城县莒溪乡柑桔专业户果园中,苗木引自浙江金华,1983年冬定植,1985年冬受冻,冻害使二年生的芦柑     

“低酸甜橙不能用枳作砧木”质疑

20世纪60年代,广东在试用枳(Ｐｏｎｃｉｒｕｓｔｒｉｆｏｌｉａｔｅ)作砧木时,发现枳砧温州蜜柑苗生长正常,而枳砧甜橙苗在当年秋季以后,大部分黄化,认为在广东不能用枳作甜橙的砧木。随后,广西得出了同样的结论。不久后,湖南也发现枳砧冰糖橙在定植数年后逐渐黄化死亡;四川、江西等地也陆续发现新会橙、暗柳橙、改良橙的枳砧嫁接苗也有与广东、广西相似的黄化现象。由于广东、广西发展的甜橙品种正是酸度较低(成熟后果汁的含酸量在0.5%以下)的品种,湖南的冰糖橙也是低酸品种,因此得出了“低酸甜橙不能用枳作砧木”的结论,较长时间以来一直…     

早实枳生物学特性及其砧木试验

通过14年的时间对早实枳生物学特性的观察，以及用于宜红橙等柑桔砧木的试验，研究早实枳对树体生长、产量和品质的影响。结果认为早实枳作砧木比普通识更矮化，丰产性好，是替代普通柑桔矮化密植的理想砧木。     

沙田柚在不同枳选系砧木上的早期表现

比较了4个枳选系作沙田柚砧木的早期表现。结果表明,以不同枳选系作砧的沙田柚在树冠生长量、早结性等方面有差异。以小叶小花类型枳作砧木的,树冠小,结果早,以小叶大花类型枳作砧木的,树冠大小中等,但结果较迟。     

不同授粉方式下‘度尾蜜柚’亲和性及其生物学效应

 通过3种授粉处理, 对‘度尾蜜柚’自交不亲和性及产生的若干生物学效应进行了观察。结果表明: 在正常自交的情况下, ‘度尾蜜柚’存在不亲和性, 大部分果实无籽, 随着果实的成熟, 果形指数逐步降低, 中心柱空心, 果顶皮层厚度逐渐变薄, 裂瓣大量产生, 同时一部分果实顶部裂开, 霉菌侵染果肉, 失去食用价值; 蕾期自交能在一定程度上克服不亲和性, 产生少量的种子, 能有效防止果实横向和纵向不均衡生长, 促进果实中心柱较好地保持实心状态, 果顶皮层增厚, 从而显著降低了裂果和裂瓣; 用‘琯溪蜜柚’花粉异交授粉, 果实种子数显著增多, 果形指数变化较小, 中心柱实心, 少有裂果和裂瓣发生, 但食用品质受到影响。     

柑橘新品种‘桂青橘1号’

‘桂青橘1号’是从‘五月橘’芽变中选育出的优良新品种,果实扁圆形,平均单果质量54 g,成熟时果实绿色或局部黄色。果肉橙黄色,可溶性固形物含量13% ~ 15%,总酸含量0.16% ~ 0.18%,肉质细嫩化渣,有特殊香味。平均种子数少于1粒,属少核或无核品种。在广西玉林地区9-12月均可采摘上市。     

柑桔种质资源对柑桔根线虫病抗性鉴定

采用带有柑桔根线虫ＴｙｌｅｎｃｈｎｌｕｓｓｅｎｉｐｅｎｅｔｒａｎｓＣｏｂｂ。的病根，病土，接种２年生柑桔实生苗，对参试的４３个材料，以雌成虫寄生密度为依据进行抗病性鉴定，其结果：酒饼筋，皱皮枳，枳橙等８个材料为高度抗病，盘谷文旦，朱桔，宜昌橙，真橙等１３个材料重度感病；其余２２个材料为中间类型。     

浙江南部柑桔病毒病和类似病毒病鉴定

应用指示植物对采自浙南8个县(市、区)28个乡镇田间40个柑桔品种133份样品的带毒情况进行了检测。结果表明:浙南至少已发生4种柑桔病毒病或类似病毒病害。感染了碎叶病毒(TLV)的有8个品种,衰退病毒(CTV)18个品种,裂皮病类病毒(CEV)11个品种,黄龙病类细菌(CYS)2个品种。共计有27个品种感染1种或1种以上病毒类病害,其中感染3种的有2个品种,感染2种的有9个品种。     

柑橘黄龙病、裂皮病和衰退病病原的多重RT-PCR检测

 建立了一种同时检测柑橘黄龙病病原类细菌(Candidatus L iberibacter asiaticus, HLB) 、柑橘裂皮类病毒(Citrus exocortis viroid, CEVd) 、柑橘衰退病病毒(Citrus tristeza virus, CTV) 的多重RT-PCR技术体系。运用根据3 种病原核苷酸保守区序列设计的特异性引物, 成功的对同一样品中的HLB、CEVd、CTV进行多重RT2PCR扩增, 得到1 160 bp、371 bp、273 bp 3条特异性大小与试验设计相符的条带。就影响多重PCR 的主要因素引物浓度和退火温度进行了一系列优化, 建立了能同时检测HLB、CEVd、CTV的多重RT2PCR技术体系。该体系最低能从10 pg总RNA中检测出黄龙病类细菌和柑橘裂皮类病毒, 从1 pg总RNA中检测到柑橘衰退病毒。对采自田间37份材料的实际检测表明: 存在两种或3种病原的复合侵染。     

中国柑橘叶斑驳病毒和碎叶病毒发生状况及其分子特性研究

柑橘叶斑驳病毒(Citrus leaf blotch virus,CLBV)和柑橘碎叶病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)均可侵染柑橘的不同种。为明确CLBV及CTLV在中国柑橘上的发生状况和分子特性,采用RT-PCR技术对来源于中国7个省的342份和346份柑橘样品进行检测,检出率分别为9.6%和11.0%。对14个CLBV分离物和15个CTLV分离物的外壳蛋白(Coat protein,CP)基因部分序列分析显示,CLBV分离物间cp核苷酸和编码氨基酸序列相似性分别为82.1%~100%和88.1%~100%,CTLV分离物的cp核苷酸和编码氨基酸序列相似性分别为89.5%~100%和92.5%~100%。测定的14个CLBV分离物在系统进化树中聚为2个组;而CTLV分离物分组不明显,该病毒的系统进化与寄主来源无明显关系。     

柑橘鳞皮病毒3个分离物全基因组序列分析

运用转录组测序和RT-PCR方法克隆测定了柑橘鳞皮病毒（Citrus psorosis virus,CPsV）3个分离物CHN-1、CHN-2和CHN-3的全基因组。序列分析结果表明,CHN-1、CHN-2和CHN-3的基因组全长分别为11 282、11 279和11 278 nt,均包含4个开放阅读框。CHN-1、CHN-2和CHN-3之间的核苷酸相似性为93.48% ~ 95.98%,编码氨基酸相似性为98.18% ~ 98.86%;与6个已知国外CPsV分离物的外壳蛋白基因核苷酸序列相似性为85.83% ~ 95.23%,其对应氨基酸序列相似性为94.09% ~ 99.32%。系统进化分析显示CHN-1、CHN-2和CHN-3与地中海沿岸国家的CPsV分离物聚为一簇,可能具有共同的起源。     

柑橘褪绿矮化相关病毒LAMP检测体系的建立

根据GenBank登录的柑橘褪绿矮化相关病毒(Citrus chlorotic dwarf-associated virus,CCDaV)的移动蛋白(MP)基因序列设计了一组特异性引物,经体系优化,建立了CCDaV的环介导等温核酸扩增(LAMP)检测方法。结果显示该方法能特异扩增CCDaV,与其他5种柑橘病原物(柑橘衰退病毒、柑橘碎叶病毒、柑橘裂皮病类病毒、温州蜜柑萎缩病毒和柑橘黄龙病菌)不发生反应;灵敏度为PCR的100倍,与实时荧光PCR的灵敏度相同。用LAMP方法对50个田间样品进行检测,与PCR和实时荧光PCR的检测结果一致,证明该方法可用于田间样品的检测。该LAMP检测方法可特异、灵敏、快速地对CCDaV样品进行检测。     

Citrus hybrid seedlings reduce initial time to flower when grafted onto shiikuwasha rootstock

The long juvenile period of citrus seedlings before flowering is one of the major obstacles in citrus breeding. Under the citrus breeding program of National Institute of Fruit Tree Science in Japan, 299 citrus hybrid seedlings were grafted onto shiikuwasha (Citrus depressa HAYATA) and cultivated. Approximately one-third of the plants flowered two and a half years after grafting. The average length of the main stems of flowering plants was 308 cm, while that of non-flowering plants was 264 cm. Half of the plants having main stem length ≥300 cm formed flowers, while most of the plants having main stem length <210 cm formed no flower. These results indicate that plant vigor influences the flowering and that grafting effectively accelerated flowering. The proportion of flowering plants varied among cross combinations, ranging from 71.4% to 8.0% among the 10 cross combinations used.     

柑橘转基因研究的现状及展望

从柑橘种及品种、转化方法、导入的目的基因、转化所用的外植体、转基因频率及其影响因素等方面对柑橘转基因的现状进行了综述,并提出了下一步的研究重点。已成功获得转基因植株的柑橘种类有枳、甜橙、酸橙、宽皮柑橘、柚和来檬;柑橘转基因的手段主要是农杆菌介导法,ＰＥＧ介导法和基因枪法也有应用;目前导入柑橘的目的基因主要是与抗病抗虫相关的基因。近年来涉及柑橘糖、类胡萝卜素、有机酸、乙烯、ＧＡ、柠檬苦素、叶绿素、黄酮类及果胶等代谢以及果实发育、成熟和柑橘开花等生理过程的基因均已分离,为通过遗传工程手段调控柑橘果实物质代谢及发育过程奠定了基础。