肿瘤干细胞标志物巢蛋白和CD133在卵巢癌中的表达及临床意义

目的 探讨卵巢癌中肿瘤干细胞标志物巢蛋白（Nestin）和CD133表达水平及与临床病理参数、预后的相关性.方法 采用免疫组织化学方法检测145例卵巢癌和37例癌旁正常卵巢组织中Nestin和CD133的表达情况.结果 卵巢癌组织中Nestin、CD133表达阳性率分别为39.3％（57/145）、33.8％（49/145）,癌旁正常卵巢组织中Nestin、CD133表达阳性率分别为8.1％（3/37）、0,两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）;在卵巢癌组织中,Nestin、CD133表达水平与患者年龄、病理类型无关,而与患者组织学分级和临床分期相关,低分化和Ⅲ～Ⅳ期患者中Nestin、CD133表达水平显著增高;Nestin表达与化疗耐药相关,CD133表达与化疗耐药无相关性.结论 肿瘤干细胞标志物Nestin和CD133在卵巢正常细胞向恶性细胞转化的过程中可能扮演了重要角色,检侧其在卵巢癌组织中的表达情况有助于预测肿瘤的生物学行为.     

人肺腺癌肿瘤细胞免疫表型CD133、CD34、CD44的实验研究

目的 拟验证CD133、CD34、CD44作为人肺腺癌肿瘤干细胞表面标记物的合理性.方法 采集新鲜肺腺癌组织标本,利用两种体外培养方法扩增出贴壁细胞和悬浮细胞球两种肿瘤细胞,采用免疫荧光检测比较CD133、CD34和CD44在两种培养细胞中表达的差异.结果 悬浮球肿瘤细胞培养较贴壁肿瘤细胞生长速度慢、维持时间长且成功率高(72.5% vs 47.5%,P＜0.05).CD133、CD34和CD44在悬浮细胞球中表达率和表达量明显高于贴壁肿瘤细胞(68.97%,82.76%,93.10% vs 5.26%,15.79%,5.26%,P＜0.01).结论 CD133、CD34和CD44可能作为分离人肺腺癌肿瘤干细胞的表面蛋白表标记组合.

Abstract：

Objective To validate the possibility of CD133 CD34 CD44 be served as biomarkers in cancer stem cell of human lung adenocarcinoma. Methods Two kinds of culturing methods were performed to generate adhesive tumor cells and floating aggregates, and the differences of expression of CD133 CD34 CD44 between 2 kinds of cultured cells were observed by immunofluorescence. Results Floating aggregates grew more slowly, kept activity for longer period than adhesive cells (72.5% vs 47.5%,P＜0.05). Floating aggregates expressed higher level of CD133, CD34 and CD44 than adhesive cells (68.97%,82.76%,93.10% vs 5.26%,15.79%,5.26%,P＜0.01). Conclusions The combination of CD133, CD34 and CD44 probably can be used as surface markers of cancer stem cells for human lung adenocarcinoma.     

肝细胞癌组织检测肿瘤干细胞标记物CD133和CD90的临床表达意义

目的探究肝细胞癌组织检测肿瘤干细胞标记物CD133和CD90的临床表达意义。方法资料随机选自2011年5月-2013年5月在本院诊治的肝细胞癌进行手术患者肝癌的组织标本38例作研究组，及同一例患者的癌旁组织标本38例作对照组，同时选取良性病患者正常的肝组织38例作参照组。分析三组标本的CD133和CD90的表达情况，及肝癌患者病理特征、预后情况。结果研究组CD133与CD90临床表达的水平，均比对照组及参照组高；研究组标本中CD133与CD90临床表达和癌组织的分化程度，胆管或静脉癌栓有无的临床病理特征存在明显相关性（P〈0．05）；研究组中CD133与CD90的阳性表达患者的生存率，均明显比阴性患者低（P〈0．05）。结论肿瘤干细胞标记物CD133与CD90于肝细胞癌组织生长、侵袭及转移中有重要作用，且能够预测肝癌患者预后生存情况，对CD133和CD90的临床表达进行研究，具有一定临床应用价值。     

癌前食管与食管鳞状细胞癌表达CD44及CD44v6的差异

目的通过免疫组化研究CD44及CD44v6在癌前食管及食管鳞状细胞癌中的表达情况,探讨其与食管鳞状细胞癌的关系及临床意义。方法收集潮州市中心医院病理科存档的食管病例蜡块(所有病例术前均未接受放、化疗)。采用免疫组化PV-9000二步法(非生物素)检测癌前食管63例,食管鳞状细胞癌140例。SPSS16.0统计软件分析实验结果。对于各组之间表达情况的数据统计采用多独立样本非参数检验:Kruskal-Wallis H检验;各组中两两比较采用两独立样本非参数检验:Kruskal-Wallis H检验的方法进行比较。结果 CD44及CD44v6在正常的鳞状上皮,只表达于上皮基底层3~5层细胞,随着上皮的增生,表达的细胞层数逐渐增加,在非典型增生的上皮则主要表达于有异型的上皮,而原位癌则几乎表达于上皮的全层。CD44及CD44v6在各种食管癌前病变组织与食管鳞状细胞癌中的表达均存在差异(均P<0.01),其中从正常食管组织及伴上皮增生但无细胞异型的食管组织至食管鳞状细胞癌之间,其表达强度逐渐增强,而从非典型增生及原位癌至食管鳞状细胞癌之间的表达强度逐渐减弱。结论 CD44及CD44v6在癌前食管及食管鳞状细胞癌中的表达差异,提示它们可能与食管鳞状细胞癌的发生及发展有关,为食管癌干细胞的进一步研究提供线索。     

女性非小细胞肺癌CD44和CD82表达及意义

目的 分析粘附分子CD44和CD82在女性非小细胞肺癌中的表达及意义.方法 应用流式细胞仪测定61例女性非小细胞肺癌患者癌组织和距癌旁5cm以上组织及45例肺部良性病变组织中CD44和CD82的表达.结果 肺癌组CD44的表达明显高于癌旁对照组和良性对照组(P<0.01);肺癌组CD82的表达显著低于癌旁对照组和良性对照组(P<0.01);而癌旁对照组和良性对照组间CD44和CD82的表达差异无统计学意义(P>0.05);CD44和CD82的表达与肺癌患者的组织分化程度、临床分期和淋巴结转移等病理指标之间差异有统计学意义(P<0.05).CD44和CD82的表达水平呈负相关(r=-0.804,P<0.01).结论 CD44和CD82的表达在女性肺癌的发生、发展和转移过程中具有一定的作用.     

肿瘤标志物CD133和CD166在结直肠癌中的表达及临床意义

目的探讨肿瘤干细胞标志物CD133和CD166在结直肠癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测102例结直肠癌患者的癌组织、40例结直肠癌患者的癌旁正常黏膜组织及40例健康人群的结肠腺瘤组织中CD133和CD166的表达,分析其与结直肠癌临床病理参数间的关系。结果 102例结直肠癌患者的癌组织中,CD133和CD166的阳性率分别为71.6%和60.8%,而对照组结肠腺瘤中的阳性染色率分别为17.5%和15.0%,正常黏膜组织阳性率均为0%,两两比较差异均具有统计学意义(P0.05)。CD133和CD166蛋白的表达与结直肠癌的淋巴结转移和术后复发转移有相关性(P0.05)。CD133和CD166双阳性组的5年生存率为42.5%,双阴性组为75.0%,差异具有统计学意义(P0.05)。结论 CD133和CD166在结直肠癌癌组织中的表达高于腺瘤组织和癌旁组织,两者阳性组与预后呈负相关,提示其可能与结直肠癌的恶性演进有关,可作为结直肠癌侵袭、淋巴结转移和预后的重要标志。     

CD133、CD90在肝癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测肝癌干细胞标志物CD133和CD90在原发性肝癌组织中的表达情况,分析其临床病理学意义.方法 取93例原发性肝癌和10例正常肝组织,采用免疫组织化学(SP法)染色检测CD133和CD90表达.结果 93例肝癌组织中,71例(76.3%)CD133表达阳性,阳性细胞百分数为(6.4±3.3)%,64例(68.8%)CD90表达阳性,阳性细胞百分数为(4.3±3.9)%,10例正常肝组织中未见CD133和CD90阳性表达,差异有统计学意义(P<0.01);肝癌TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者CD133和CD90阳性细胞百分数[(8.1±3.7)%,(5.7±4.2)%]显著高于Ⅰ～Ⅱ期[(4.1±2.3)%,(2.3±1.9)%](P<0.01);Spearman相关分析显示,随病理组织学分级级别增高,CD133和CD90的表达增多(P<0.05);CD133与CD90在肝癌组织中的表达呈正相关(r=0.402,P<0.01).结论 肝癌组织中存在CD133和CD90阳性肝癌干细胞,其表达量与肝癌TNM分期和病理组织学分级呈正相关.     

CD44及CD44v6在不同分化程度食管癌中的表达水平

目的通过免疫组化研究CD44及其变异体CD44v6在食管癌中的表达情况,探讨其与食管癌的关系及临床意义。方法收集潮州市中心医院病理科存档的食管癌蜡块(所有病例术前均未接受过放、化疗)。采用免疫组化PV-9000二步法(非生物素)检测食管癌中CD44的表达共145例,CD44v6共146例。SPSS16.0统计软件分析实验结果。对于各组之间表达情况的数据统计采用多独立样本非参数检验:Kruskal-Wallis H检验;各组中两两比较采用两独立样本非参数检验:Kruskal-Wallis H检验的方法进行比较。结果 CD44及CD44v6在5例小细胞癌中均不表达0%,在鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为90.71%(127/140)和82.27%(116/141)。其中高分化鳞状细胞癌组分别为100%(10/10)及88.89%(8/9),中分化组分别为98.21%(55/56)及94.74%(54/57),而低分化组则分别为83.78%(62/74)及72%(54/75)。CD44及CD44v6在鳞状细胞癌与小细胞癌之间的表达情况均有显著差异(均P<0.01),在高分化组与中分化组间的表达差别无统计学意义(P>0.05),高分化组与低分化组及中分化组与低分化组间差别均有统计学意义(均P<0.05),分化越好,CD44及CD44v6的表达越强。结论 CD44及CD44v6在食管癌中的表达与肿瘤的组织学分型及鳞状细胞癌的分化程度有关,提示它们可以作为食管癌组织学分型的一个辅助标记物及预后预测因子之一。另外,鉴于CD44及CD44v6在食管癌中的高表达率,提示其可能为食管癌干细胞的标志物。     

干细胞肿瘤标志物CD133与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的研究干细胞肿瘤标志物CD133、下游信号通路蛋白哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)与胃癌临床病理特征的关系,分析两者相关性。方法实时荧光定量检测20例胃癌及癌旁正常组织中CD133和mTOR mRNA的表达;免疫组化检测88例胃癌组织CD133和mTOR蛋白的表达,并与胃癌患者的病理资料进行统计分析。结果 CD133及mTOR mRNA水平均显著高于癌旁正常组织,相关性分析显示CD133水平与mTOR mRNA水平呈正相关(r=0.779,P0.01);免疫组化显示CD133蛋白表达与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度及远处转移无显著相关性(P0.05),但与TNM分期(P=0.007)及淋巴结转移显著相关(P=0.004),mTOR蛋白表达与年龄、性别、肿瘤大小及远处转移无显著相关性(P0.05),但与分化程度(P=0.041)、TNM分期(P=0.001)及淋巴结转移(P0.001)显著相关。相关分析显示,CD133与mTOR蛋白表达呈正相关(r=0.226,P=0.034)。结论 CD133与mTOR在胃癌进展及转移中起协调作用,两者高表达,预示肿瘤有高度侵袭及转移潜能。     

GRP78mRNA在食管鳞状细胞癌中的表达

目的 检测GRP78 mRNA在食管鳞状细胞癌中的表达情况.方法 应用RT-PCR法检测30例食管鳞状细胞癌组织及其癌旁组织中GRP78 mRNA的表达情况.结果 食管鳞状细胞癌组织及癌旁组织中GRP78 mRNA的表达阳性率分别为56.67%(17 /30)和26.67%(8/30),GRP78 mRNA在食管鳞状细胞癌组织中表达水平明显高于癌旁组织.两组差异有统计学意义(P < 0.05).结论 与癌旁组织相比,食管鳞状细胞癌GRP78 mRNA呈现高表达,表明GRP78可能参与了食管鳞状细胞癌的发生过程,可以作为食管鳞状细胞癌的一种有价值的肿瘤分子标志物.     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血CD4+CD28-T细胞和CD4+CD25+T细胞亚群变化及意义

[目的]探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血CD4+CD28-T细胞和CD4+CD25+调节性T细胞亚群的变化及意义。[方法]入选病例为我院从2006年6月到2008年12月共59例原发性胆汁性肝硬化患者(活动期36例、稳定期23例),同时以30例健康体检者为对照,借助双色荧光标记技术对外周血CD4+CD28-T细胞和CD4+CD25+占CD4+T细胞比例进行流式细胞术测定。[结果]活动期PBC患者外周血CD4+CD25+细胞比例(1.66±0.83)%低于稳定期(2.53±1.06)%和正常组(4.06±2.36)%(P﹤0.05);而CD4+CD28-细胞比例(4.15±1.89)%则高于稳定组(3.66±0.7)%和正常组(1.54±0.99)%(P﹤0.05)。[结论]活动期PBC患者外周血CD4+CD25+T细胞比例减少而CD4+CD28-T细胞比例升高,CD4+CD25+比例降低可能使外周免疫耐受失去平衡,参与了PBC疾病的发生发展。     

乐山市无症状HIV感染者与正常人CD3、CD4、CD45及CD3/CD45、CD4/CD45的对比分析

[目的]了解无症状HIV感染者与正常人的CD3、CD、CD45淋巴细胞绝对数及CD3/CD45、CD4/CD45情况. [方法]采用BD FACSCalibur流式细胞仪分别检测117例健康成人血液标本和87名无症状HIV感染者中的CD3、CD4、CD45淋巴细胞绝对数及CD3/CD45、CD4/CD45的比值,进行统计学分析. [结果]无症状HIV感染者男性与女性相比除CD3/CD45有统计学差异外(t=3.23,P＜0.05),其余几项指标均无统计学差异.但与正常人相比较比较CD3、CD4、CD3/CD45、CD4/CD45、CD45均存在统计学差异. [结论]当HIV感染者CD4细胞减少的还不是十分明显(未小于200个/μl),但发现感染者CD4/CD45的比值开始持续明显变小时,应开始考虑对感染者进行治疗.     

医学生外周血单个核细胞CD25、CD25mRNA表达

[目的]探讨正常医学生外周血单个核细胞(PBMC)中CD25、CD25 mRNA表达水平,为了解机体生理状态下细胞免疫功能提供实验依据。[方法]用生物素-链霉亲和素(BSA)法检测150名(男91人,女59人)在校医学生外周血单个核细胞植物血凝素(PHA)诱导前后CD25水平,Real-PCR法法检CD25 mRNA含量。[结果]男生PHA诱导前后CD25水平分别为(4.66±1.23)%、(33.12±7.02)%,CD25 mRNA含量分别为1.516 5±0.275 0、1.6050±0.2502;女生PHA诱导前后CD25水平分别为(4.59±1.34)%、(34.78±7.75)%,CD25 mRNA含量分别为1.4420±0.2428、1.7103±0.2755,两者相比,诱导期女生CD25 mRNA水平偏高,差异有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]医学生PBMC中CD25、CD25 mRNA表达正常,女生PBMC对PHA具有更高的反应性。     

肺癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞检测及其临床意义

目的了解肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞的比例和其临床意义,探讨CD4+CD25+调节性T细胞与临床分期的相关性。方法流式细胞分析仪检测外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例。结果肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比为(15.7±1.6)%,明显高于健康对照者(7.1±1.5)(p<0.05),且外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平与患者病情分期呈显著正相关。结论肺癌患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4+CD25+调节性T细胞比例较高,对肺癌患者具有免疫抑制功能。     

红细胞调控CD4／CD8的血细胞快速培养实验研究

目的利用系统免疫学血细胞培养系统模式,在体外研究红细胞调控CD4／CD8规律及其意义。方法22例人枸橼酸抗凝新鲜血（11例正常人和11例原发性肝癌患者）。全血细胞培养组（自然组）：0．2ml全血细胞悬液加0．3ml血浆和0．2ml生理盐水,白细胞培养组（分离组）：0．2ml白细胞悬液加0．3ml血浆和0．2m1生理盐水,充分混匀,37℃温育1小时,2000转／分离心5分钟,两管的白细胞CD4和CD8表达水平用PC-5酶标抗CD4单抗和FITC-酶标抗CD8单抗测定．红细胞调节率=（全血细胞培养组CD4或CD8或CD4／CD8水平-白细胞培养组CD4或CD8或CD4／CD8水平）÷白细胞培养组CD4或CD8或CD4／CD8水平。结果22例全血细胞培养组CD4／CD8水平（1．40±0．59）明显高于白细胞培养组（0．48±0．26）,t=6．6918,P〈0．01,正常人的白细胞培养组CD4／CD8水平（0．58±0．27）明显高于肝癌的白细胞培养组CD4／CD8水平（0．35±0．19,P〈0．01）,正常人CD4／CD8调节率（2．42±2．39）高于肝癌患者CD4／CD8调节率（2．07±1．27）。结论本实验研究属于系统免疫学和计算免疫学领域,正常人红细胞能高调节CD4／CD8水平,在原发性肝癌中,细胞免疫功能低下,表现CD4／CD8表达低水平与红细胞对CD4／CD8低调节率密切相关。     

急性髓性白血病患者CD7~+ CD56~+和CD7~- CD56~-免疫表型对比分析

目的:比较CD7+CD56+和CD7-CD56-急性髓性白血病患者免疫表型的差异。方法:采用多色流式细胞术检测患者免疫表型,对患者的其他资料和免疫表型进行比较。结果:CD7+CD56+在M0+M1分型中的分布比例、外周血血红蛋白、骨髓原始细胞比例、中枢系统浸润率、CD34平均荧光强度均高于CD7-CD56-;但胞浆髓过氧化物酶(CyMPO)MFI低于CD7-CD56-。结论:CD7+CD56+起源早,浸润性强,需加强巩固治疗和中枢系统微小残留病灶监测。     

自身免疫性糖尿病患者CD_4~+CD_(25)~+T细胞的变化

目的通过观察自身免疫性糖尿病患者外周血CD4+CD25+T细胞的变化,探讨其在发病中的可能作用。方法流式细胞仪检测20例LADA、20例T1DM、20例T2DM及21例正常对照外周血CD4+CD25+、CD3+CD8+T细胞。结果①LADA、T1DM组外周血CD4+CD25+T细胞低于T2DM、正常对照组(p均<0.05)。②LADA、T1DM患者外周血CD3+CD8+T细胞较T2DM、正常对照组增高(LADAvs正常对照p<0.01,其余p<0.05)。结论自身免疫性糖尿病患者免疫调节性CD4+CD25+T细胞减少,不能有效维持对胰岛自身抗原的耐受;外周细胞毒性CD3+CD8+T细胞增多进而破坏胰岛β细胞,导致自身免疫性糖尿病的发生和发展。     

宫颈癌患者CD58/CD2的表达及临床意义

目的:探讨CD58/CD2在宫颈癌患者的表达水平及临床意义。方法:分别应用免疫组织化学技术及流式细胞术检测40例宫颈癌患者及30例C IN患者组织CD58水平和外周血CD2+细胞百分率,以30例子宫肌瘤患者作为正常对照。结果:宫颈癌患者外周血CD2+细胞百分率及癌组织CD58表达水平均明显低于C IN组及正常对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:CD58/CD2的表达与宫颈癌的发生、发展有关,二者可作为治疗及评价预后的参考指标。     

Effects of occupational metallic mercury vapour exposure on suppressor-inducer (CD4+CD45RA+) T lymphocytes and CD57+CD16+ natural killer cells

Objectives: To examine the effects of metallic mercury vapour on the cellular and humoral immune system. Methods: We measured T lymphocyte and natural killer (NK) cell subpopulations, B lymphocytes, and serum immunoglobulins (i.e. IgG, IgA and IgM) together with total T (CD3+) lymphocytes and total lymphocytes in blood samples from 20 male, fluorescent-lamp makers (mercury workers) and the same number of gender-, age- and smoking-matched controls. Urinary concentrations of inorganic mercury (UHg) in the 20 workers ranged from 1.8 to 163.5 (mean 44.8) μg/l. They had been exposed to mercury vapour for 4 to 62 (mean 31) months. Results: Numbers of CD4+CD45RA+ (suppressor-inducer) T lymphocytes and total CD4+ T lymphocytes in the mercury workers were significantly smaller than those in the controls (paired-sample t-test, P < 0.01). The number of CD57+CD16+ NK cells was inversely correlated with UHg. Conclusion: It is suggested that numbers of CD4+CD45RA+ T lymphocytes and CD57+CD16+ NK cells are inversely affected by exposure to metallic mercury vapour in workers, with an average urinary inorganic mercury concentration of 45 μg/l being found. Received: 7 September 1999 / Accepted: 6 May 2000