金标特异抗原单克隆抗体斑点免疫金染色用于检测脑囊虫病循环抗原的研究

应用金标记猪囊尾蚴囊液抗原为探针,以抗猪囊尾蚴抗原的McAb为联桥,建立了非常规Dot-IGS用于检测脑囊虫病患者CAg的方法,用4G_2McAb检测84例脑囊虫病人脑脊液(CSF),CAg阳性率为88.09％。检测63例其他疾病患者,出现2例假阳性。以1F_(11)McAb检测14例脑囊虫病人,13例检出CAg,阳性率为92.86％。检测其他疾病患者36例,均为阴性。用4G_2与1F_(11),株McAb可分别检出最小抗原量为1ng/ml和0.25ng/ml。本法敏感、特异、操作简单,可用于脑囊虫病的诊断。     

循环抗体和循环抗原检测诊断囊虫病的价值

本文对81例囊虫病人血清同时用 ELISA 和 Dot—ELISA 检测循环抗体和单抗抑制性 ELISA检测循环抗原,并评价了三法诊断该病的价值。前两法的阳性率均为96.3%,但特异性都较差,特别是与包虫病具有明显的交叉反应。81例中血清循环抗原的阳性率为69.1%。血或脑脊液的循环抗原有一项阳性的阳性率为91.1%。此法特异性高,75例正常人、30例包虫病、79例其他寄生虫病患者、5例非寄生虫病患者血清和10例非寄生虫病患者的脑脊液中循环抗原的测定均为阴性。对19例经肠虫清治疗半年到1年的患者(均为随机到本院复诊的患者)的血清检测,前二法的阳性率仍高达84.2%,而循环抗原的值除1例为0.64μg/ml 外,其余病例均为阴性。     

应用特异性单克隆抗体测定脑囊虫病患者血清及脑脊液中循环抗原

应用特异性单克隆抗体作DOT－ELISA和竞争ELISA检测65例脑囊虫病患者血清和脑脊液中游离循环Ag（FCAg）和循环免疫复合物抗原（CICAg）。血清FCAg阳性率分别为81．3％和81．5％（0．20～87．0μg／ml）,CICAg阳性率为95.4％和92．3％（0.19～120.0μg／ml）,脑脊液测定FCAg阳性单为78．5％和86.2％（0．32～25.0μg／ml）,CICAg阳性率为90.8％和93.8％（0.19～46.4μg／ml）。结果表明检测总循环抗原（包括游离部分和复合物部分）有利于提高脑囊虫病的诊断。     

几种猪囊尾蚴抗原用于斑点-ELISA法诊断囊尾蚴病的观察

本研究以囊液10000g上清、囊液100000g上清、全囊抗原、头节抗原和头节尿素溶解性抗原等5种囊尾蚴抗原，对124份各类血清进行斑点-ELISA试验，结果除2种囊液抗原外，都有很高的假阳性反应。2种囊液抗原中以100000g离心者为优，检测70例囊虫病患者，阳性率为82．8％；30例正常人，假阳性率为6．7％；5例血吸虫、5例华支睾吸虫及5例并殖吸虫患者血清，均未出现阳性反应；但9例包虫病患者血清均出现交叉反应。     

循环抗原和特异性IgG4对脑囊尾蚴病诊断和疗效评估价值比较

目的比较循环抗原（circulating antigen, CAg ）和特异性IgG4在脑囊尾蚴病诊断和生存状态、 疗效评估中的价值。方法依据CT和MRI的影像表现将68例脑囊尾蚴病患者分为活虫期、变性死亡早期、变 性死亡后期及钙化期四个病期组,检测各病期患者血清中囊虫CAg和IgG4;分别对38例活虫期患者治疗前 ,治疗中,治疗后血清中CAg和特异性IgG4进行检测和比较分析。结果不同病期患者血清CAg阳性率、IgG4 阳性率差异均有显著意义。38例活虫期患者血清CAg、IgG4阳性率分别为100%和98%,随疗程进展,CAg、 IgG4阳性率逐渐降低,不同疗程间CAg阳性率差别有显著性意义,而IgG4阳性率差异无统计学意义。结论 CAg和特异性IgG4能较客观地反映人体内脑囊尾蚴的生存状态,可作为早期诊断指标,两者的特异性及敏 感性无显著差异;对远期疗效评估可以优先选用CAg。     

几种猪囊尾螺抗原用于斑点—ELISA法诊断囊尾蚴病的观察

本研究以囊液１００００ｇ上清、囊液１０００００ｇ上清、全囊抗原、头节抗原和头节尿素溶解性抗在等５种囊尾蚴抗原，对１２４份各类血清进行斑点－ＥＬＩＳＡ试验，结果除２种囊液抗原外，都有很高的假阳性反应。２种囊注抗原中以１０００００ｇ离心者为优，检测７０例囊虫病患者，阳性率为８２．８％；３０例正常人，假阳性率为６．７％；５例华支睾吸虫及５例并殖吸虫患者血清，均未出现阳性反应；但９例包虫病患者血清均出现交     

非典型脑囊尾蚴病的诊断研究

目的 分析非典型脑囊尾蚴病患者血清免疫学检查和脑CT影像学检查特点,为该病诊断提供参考。方法 以446例疑似脑囊尾蚴病患者作为研究对象,所有患者均给予吡喹酮实验性治疗,根据治疗效果及脑CT 或MRI复查结果确诊非典型脑囊尾蚴病。同时,采用间接ELISA 法检测患者血清和脑脊液抗囊尾蚴特异性IgG抗体,采用McAb?ELISA法检测患者血清和脑脊液抗囊尾蚴特异性IgG4抗体,采用PEG?ELISA法测定囊尾蚴循环抗原（CAg）,并进行间接血凝试验（IHA）及脑CT检查。计算上述免疫学检测及脑CT检查的检测效能。结果 446例疑似脑囊尾蚴病患者经吡喹酮实验性治疗后,315例临床症状显著好转,被确诊为非典型脑囊尾蚴病。血清特异IgG、IgG4抗体及囊尾蚴CAg检测阳性率分别为15.47%、15.02%、11.21%, IHA试验阳性率为28.47%,差异有统计学意义（[χ2] ＝ 52.45,P＜0.01）。脑CT检查有疑似囊尾蚴病灶者353例,占79.14%。ELISA、McAb?ELISA、PEG?ELISA、IHA和脑CT诊断非典型脑囊尾蚴病的灵敏度为15.36%～96.82%,特异度为63.36%～99.24%,阳性预测值为86.40%～98.52%,阴性预测值为32.83%～98.25%,阳性似然比为2.64～27.86,阴性似然比为0.05～0.81,OR值7.16～52.80;5项检查合并后其OR值为108.00,较CT检查的OR值提高1倍。结论 非典型脑囊尾蚴病主要通过评价实验性抗囊尾蚴治疗效果而确诊,血清免疫学检测及脑CT检查亦具有重要参考价值。     

滴金免疫测定法用于检测囊虫病患者循环抗原的研究

目的　建立一种敏感、快速、简便的囊虫病诊断方法。方法　应用两株抗猪囊尾蚴囊液抗原的单克隆抗体(McAb) ,一株滴于硝酸纤维素膜上 ,另一株与胶体金结合为探针 ,建立了检测囊虫病患者血清中循环抗原 (CA)的滴金免疫测定法 ,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应 ,10min内即可用肉眼观察结果。对不同稀释度的猪囊尾蚴囊液抗原进行检测 ,确定本法的最低抗原检出量 (0 .4 5ng/ml)。将本法与ELISA作了比较。 结果　对 78例囊虫病患者血清进行检测 ,循环抗原阳性率为 87.18%。其中活动型脑囊虫病患者 5 2例 ,循环抗原阳性率为 98.0 8% ;非活动型脑囊虫病患者 2 0例 ,循环抗原阳性率为 6 5 .0 0 % ;单纯皮肌型囊虫病患者 6例 ,循环抗原阳性率为 6 6 .6 7%。 4 0份健康人血清仅有 1例 (2 .5 0 % )出现假阳性 ,与10例华支睾吸虫病患者血清、15例血吸虫病患者血清及 2 3例非囊虫病的脑部疾病患者血清均无交叉反应。该方法检出最低猪囊尾蚴囊液抗原量为 0 .4 5ng/ml。本法与ELISA的符合率为 98.19%。结论　DIGFA简便、快速 ,结果客观 ,对囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高 ,特异性强 ,值得进一步推广应用。     

组织内猪囊尾蚴循环抗原含量与虫体发育阶段之间的关系

为了解猪囊尾蚴在宿主体内产生的循环抗原含量与其虫体发育阶段之间的关系，本文应用抗猪囊尾蚴单克隆抗体，以反向间接血换法对不同感染密度和不同发育程度的猪囊尾蚴病猪进行了特异性循环抗原的检测。结果表明：（1）发育成熟的囊尾蚴：低密度感染6头猪，18份样品，血凝效价为1：2（＋＋）～1：64（＋＋＋＋），其囊尾蚴循环抗原蛋白含量为0．15～4．0μg／ml；中密度感染猪5头，10份样品，血凝效价1：8（＋＋）～1：128（＋＋＋＋），其循环抗原蛋白含量为0．4～6．4μg／ml；高密度感染猪3头，6份样品，血凝效价为1：128（＋＋）～1：256（＋＋＋＋），其检出的蛋白含量为6.4～12．8μg／ml；（2）发育幼稚期的囊尾蚴：高密度感染猪2头，4份样品，血凝效价为1：2（＋＋）～1：4（＋＋＋＋），其循环抗原蛋白含量为0．15～0．3μg／ml。显示处于同一发育程度的囊尾蚴，感染密度越高，其被检出的蛋白含量越高；高密度感染的幼稚期囊尾蚴，其产生的抗原明显低于中、高密度感染的成熟期囊尾蚴者。提示了囊尾蚴产生的循环抗原量并非单纯地随虫荷的增加而增高，而与虫体发育阶段有密切关系。     

斑点ELISA在脑囊虫病免疫诊断中的应用

本文以猪囊尾蚴囊液为抗原作斑点 ELISA,105例脑囊虫病人血清和脑脊液的阳性率分别为93.3%(84/90)和93.4%(57/61),107例健康人血清均为阴性,与丝虫病、疟疾和华支睾吸虫病人血清无交叉反应。其他脑部疾病脑脊液的检测,全部阴性。结果表明此法诊断脑囊虫病具有较高的敏感性和特异性。     

单克隆抗体胶乳凝集试验检测囊虫病循环抗原

采用抗猪囊虫单克隆抗体化学交联胶乳免疫微球，分别检测了囊虫病患者脑脊液和血甭中的循环抗原，阳性率分别为９０％（２７／３０）和７４．６３％（５０／６７）。同时对比检测了脑脊液和血清中的囊虫抗体，结果表明，脑脊液的抗体检出率明显低于血清，循环抗原的检出率则无显著性划。本实验方法检测循环抗原简便易行，有较高的特异性和敏感性，既可用于早期诊断和现症病人的确定，也可用于疗效考核。     

A serological study of human cysticercosis in Pondicherry, South India

The present study was carried out to determine the extent of the problem of cysticercosis in Pondicherry by assessing the antibody response to porcine cysticercus antigen by the indirect haemagglutination (IHA) in people residing in and around Pondicherry and in patients clinically suspected to have cysticercosis. Serum samples were collected from 1442 persons apparently normal in respect to cysticercosis, 91 cases of clinically suspected cases of cysticercosis, and 100 normal healthy students and blood donors. These sera were tested for cysticercus antibodies by IHA test using whole porcine cysticercus antigen sensitised RBCs. An antibody titre of 1:64 and above by the IHA was considered to be diagnostic of cysticercosis. At this diagnostic titre, 88 (6.10 %) of 1442 apparently normal population sera were seropositive. Of these 88 seropositive subjects, 16 (18.18 %), 33 (37.5 %) and 32 (36.36 %) were in the age groups of 1-13 yrs, 14-40 years and above 40 years respectively. 52 (59.1%) were males and 36 (40.9 %) were females. Twenty (21.97%) out of 91 clinically suspected cases were found to be seropositive out of which 14 (70 %) were males and 6 (30 %) females. 4 cases were in the age group of 6-13 years, 14 cases in 14-40 years and 2 cases were in the age group of 40 years and more. Cysticercus antibodies were not detected in any of the sera from healthy peoples including students. A positive antibody response in 6.1 % of population residing in and around Pondicherry and in 21.97 % of patients clinically suspected cases of cysticercosis show that cysticercosis may be more common in Pondicherry than believed.     

脑囊虫病人血清中循环抗原特性的分析

本研究用免疫印渍法，以三种抗血清为探针，对脑囊虫病人血清中的循环抗原、囊虫头节和体壁抗原及囊液抗原进行了比较观察。结果表明循环抗原与两种囊虫抗原相同的组分有４个ＫＤ数为７５、４３、４０、２３的多肽；仅与虫头及囊壁相同的抗原为６５ＫＤ多肽；仅与囊液相同的多肽为８５、１９ＫＤ二组分。这显示循环抗原主要来源于虫囊的全部结构；循环抗原可诱发三种特异性免疫球蛋白的产生，依次为ＩｇＧ、ＩｇＡ及ＩｇＭ。可诱发ＩｇＧ的循环抗原多肽是８５、５３、４３、４０、３１、１９、１８．５及１７．５ＫＤ多肽；可诱发ＩｇＡ抗体的抗原多肽ＫＤ数为６５、４９、４３、４０及３５的组分；而ＩｇＭ特异性抗体产生于ＫＤ数为７５、４３、４０及３１的多肽。三种抗体血清用于检测血清中的循环抗原都显示出良好的应用价值。免疫兔血清的敏感性与特异性均不亚于单克隆抗体的识别结果。４３及４０ＫＤ多肽是循环抗原中的主要组分，是诊断的重要指标。     

斑点金免疫渗滤法在检测囊虫抗体中的应用

目的　将斑点金免疫渗滤法用于检测囊虫抗体 ,以制备囊虫病诊断试剂盒。方法　经透析的猪囊尾蚴囊液作为检验抗原 ,对 71份囊虫病患者、90份正常人和 2 0份其他病患者血清进行了斑点金免疫渗滤法检测并与酶联免疫吸附法比较。结果　斑点金免疫渗滤法的敏感性为 90 .1% (6 4 / 71) ,特异性为 95 .6 % (86 / 90 ) ,其他病患者血清反应中仅 1例脑肿瘤患者血清阳性 ,其余为阴性。斑点金免疫渗滤法和酶联免疫吸附法的符合率为94 .4 % (15 2 / 16 1)。结论　斑点金免疫渗滤法有较好的应用于临床检测囊虫病的潜力     

Dot-IGSS检测脑脊液中循环抗原诊断脑囊虫病的研究

应用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)和Dot-ELISA检测96份确诊为脑囊虫病患者脑脊液(CSF)中的循环抗原(CAg),阳性率分别为94.79%和92.71%.检测51例非囊虫病者和62例其他脑部疾病患者的CSF,两种方法均为阴性.诊断指数分别为194.79%和192.71%,检测CAg的最小量Dot-IGSS为244ng/ml,Dot-ELISA为488ng/ml.试验表明两法诊断脑囊虫病均具有敏感性高、特异性强、重复性好和方法简便易行,有希望用于脑囊虫病的临床诊断.     

应用胶体金免疫层析法检测囊虫病患者血清循环抗原的研究

为探讨应用胶体金免疫层析法检测囊虫病患者血清循环抗原（CAg）诊断囊虫病的价值，应用胶体金免疫层析法检测囊虫病人及非囊虫病人血清中的CAg，并将该方法与ELISA作了比较。检测78份囊虫病患者血清，56例显示为阳性，阳性率为71．79％。其中52份活动型脑囊虫病人血清的阳性率为80．77％；20份非活动型脑囊虫病人血清的阳性率为55％；6份单纯皮肌型囊虫病血清的阳性率为50％。检测40份健康人血清，阴性符合率为87．5％。检测10份包虫病患者血清、10份吸虫病患者血清的交叉反应率分别为20．00％和10％。10份毕支睾吸虫病人血清均为阴性反应。23例其他脑疾患（脑肿瘤、脑脓肿、脑结核、脑外伤）患者血清的交叉胍应率为11．32％。本方法的敏感性和特异性与ELISA相似。应用胶体金免疫层析法检测囊虫病人血清CAg具有较高的敏感性和特异性，操作简便快速，无需特殊仪器设备，具有较好的应用前景，值得进一步研究。     

Taenia solium taeniasis and cysticercosis in three communities in north Vietnam

OBJECTIVES: (1) To investigate the response to a serum antigen-detecting ELISA for cysticercosis and a stool coproantigen test for taeniasis in two rural communities (mountainous and coastal areas) and one group of (peri-)urban factory workers; and (2) to examine clinical features of human cysticercosis in northern Vietnam. METHODS: Villagers and factory workers and their families were informed and invited to participate in the study. Blood and faecal samples were collected from the participants and a simple questionnaire on taeniasis/cysticercosis completed. Serum was examined for the presence of circulating cysticercus antigen by a monoclonal-based sandwich ELISA. Ag-ELISA positive persons underwent a clinical examination and a computed tomography (CT) scan. Stool samples were examined microscopically for the presence of Taenia eggs and for copro-antigens. Tapeworms were identified following therapeutic expulsion using morphology and PCR-RFLP. RESULTS: Circulating cysticercus antigens, suggesting active infection, were detected in 5.3% (16/303), 0.6% (1/175) and 0.0% (0/229) of the sampled individuals from the mountainous, coastal and urban regions, respectively. Clinical examination and CT scan of the cysticercus antigen positive persons showed that active cysticercosis did not cause severe disease in most cases. Taenia copro-antigens were found in 0.3% (1/297), 1.8% (3/166) and 0.0% (0/228) of the stool samples from the mountainous, coastal and urban communities, respectively. Three tapeworms were expelled after treatment: two Taenia solium and one Taenia saginata. CONCLUSION: This survey points to a focal distribution of taeniasis/cysticercosis and suggests that human cysticercosis is rather acquired due to close contact with a T. solium carrier and self-infection, than through infection from the environment.