SB203580防治新生大鼠高氧肺损伤的作用与机制

目的:探讨P38 MAPK特异性抑制剂SB203580对新生大鼠高氧肺损伤产生保护作用的机制。方法:160只新生大鼠随机分为空气对照组、高氧肺损伤组、高氧肺损伤+SB203580组和高氧肺损伤+生理盐水组,建立模型。作用12,24,72 h和1周后,分别处死大鼠。取72 h的左肺以Western blot法检测P38 MAPK的表达情况,取4个时相点的右肺检测肺组织中丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(TAOC)。结果:72 h时高氧肺损伤组和高氧肺损伤+生理盐水组P38 MAPK呈阳性表达,肺组织MDA含量随时间延长呈上升趋势,在各时相点均高于空气对照组和高氧肺损伤+SB203580组(P<0.01);TAOC随时间延长逐渐降低,在各时相点均低于空气对照组和高氧肺损伤+SB203580组(P<0.01)。结论:SB203580可能通过阻断P38 MAPK表达,进而通过减轻机体的氧化应激反应来减轻新生大鼠高氧肺损伤。     

新生鼠高氧肺损伤中p38MAPK的磷酸化

目的 探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)在新生鼠高氧肺损伤中的表达及意义.方法 160只新生鼠分为空气对照组、高氧肺损伤组、高氧肺损伤 SB203580组和高氧肺损伤 生理盐水组,分别建立动物模型.在12、24、72 h和1周4个时相点处死,进行肺组织病理学检查、肺湿/干重比值(W/D)测定、Western blot法检测p38MAPK的表达.结果 高氧暴露72 h即可建立肺损伤模型.新生鼠暴露于高氧12h后,p38MAPK开始表达,72h达高峰,后逐渐降低.在高氧暴露72 h后,空气对照组未见p38MAPK表达,高氧肺损伤组可见p38MAPK表达;高氧肺损伤 生理盐水组p38MAPK表达明显强于高氧肺损伤 SB203580组.结论 p38MAPK参与了新生鼠高氧肺损伤的过程,SB203580可以减轻这种损伤.     

p38蛋白表达在槲皮素对镉致急性肾损伤保护机制中的作用

目的:探讨p38MARK蛋白表达在槲皮素对镉致急性肾损伤保护机制中的作用。方法:雄性Wismr大鼠随机分成对照组、镉组、治疗组(再根据槲皮素剂量分为高、中、低剂量组)。对大鼠分别给予生理盐水+盐水、氯化镉+盐水、氯化镉+槲皮素,30天后处死大鼠,取肾脏组织。对所取肾脏组织进行western blot检测,观察肾脏p38MAPK的蛋白表达。结果:镉组与对照组相比p38MAPK蛋白表达明显增加(p<0.01):治疗组低、中、高3组与镉组相比p38MAPK蛋白的表达均降低(p<0.05,p<0.01),且3组之间相比随着槲皮素剂量的增加p38MAPK蛋白表达具有下降趋势(p<0.05,P<0.01)。结论:p38MARK参与了槲皮素对镉致急性肾损伤的保护作用;槲皮素可以抑制镉致急性肾损伤过程中p38MARK蛋白的表达:槲皮素是通过p38MARK信号途径而发挥其对镉致急性肾损伤的保护作用。     

p38丝裂素活化蛋白激酶信号转录对IL-1β诱导肾小管细胞转分化的影响

目的　探讨 p38MAPK信号转导途径对IL 1β诱导肾小管上皮细胞转分化的影响及其导致的功能改变。方法　以培养的人近端肾小管上皮细胞 (HK 2 )为研究对象 ,给予IL 1β(10ng/ml)刺激 2 4h ,在阻断实验中加入SB2 0 35 80阻断 p38通路。采用蛋白印记杂交法检测 p38MAPK的磷酸化程度 ;细胞表型特征检测包括细胞形态变化、标志蛋白 (角蛋白、α SMA)的表达及分布、细胞增殖、黏附和移行能力。结果　 (1)IL 1β刺激 6～ 4 8h可使α SMA表达上调 ,刺激 2 4h可使角蛋白表达减弱、α SMA分布紊乱 ,但细胞形态变化不明显 ;(2 )IL 1β在 5min时可使p38激活达高峰 ,较基础水平升高 2～ 3倍 (P <0 0 5 ) ;至 12 0min时 p38则呈持续激活状态 ;(3)p38阻断剂 (SB2 0 35 80 )对HK 2细胞α SMA的基础表达有抑制作用 ,抑制率 37 13% (P <0 0 1) ;同时可明显抑制IL 1β刺激的α SMA表达 ,抑制率 4 7 0 7% (P <0 0 0 1) ;(4)IL 1β及 p38阻断剂并不影响HK 2细胞之间的黏附能力 ,但IL 1β可使细胞的移行能力增强 (P <0 0 1) ,而 p38阻断剂可明显抑制其移行能力。IL 1β并不影响HK 2细胞增殖。结论　IL 1β可以激活肾小管上皮细胞p38/MAPK ,并可使其发生表型转化 ,这一作用部分通过 p38信号通路所介导。     

p38MAPK在细胞凋亡中的作用

丝裂素活化的蛋白激酶(mitogen-activated pro-tein kinase,MAPK)级联是细胞内重要的信号转导系统,参与细胞的生长、发育、分化和凋亡等一系列生理病理过程。在哺乳动物中,细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK)亚族最先被发现和克隆,并已进行了比较详细的研究。近年来又鉴定了c—Jun氨基末端激酶(c—Jun N—ter-minal kinase,JNK),ERK5/大丝裂素活化蛋白激酶 l     

丝裂原活化蛋白激酶与高通气量高氧肺损伤研究进展

机械通气在临床上鲁适应用于新生儿与ARDS,但是高通气高氧引起的氧化应激反应会导致志慢性肺损伤.本文就其中起重要传递作用的MAPKs作用做一概述.     

p38丝裂素活化激酶与脑缺血性损伤关系的研究进展

丝裂素活化激酶(MAPK)级联信号转导途径是许多信号转导通路的整合点。许多酪氨酸激酶都可以通过刺激信号级联反应激活丝裂原活化蛋白激酶通路。p38 MAPK通路是MAPK家族主要成员之一。p38 MAPK在脑缺血后早期被激活,参与炎性反应、自由基损伤、细胞凋亡等病理、生理过程,在脑缺血神经元死亡过程中发挥重要的调控作用。p38 MAPK抑制剂可望成为脑缺血性损伤临床治疗的有效途径。     

五谷虫提取物对H22肝癌细胞荷瘤小鼠的抗肿瘤机制研究

目的 探讨五谷虫提取物对H22肝癌细胞荷瘤小鼠的抑瘤作用及其对p38MAPK信号通路的影响.方法 构建H22荷瘤小鼠模型,随机分为正常组、模型组、阳性对照组、五谷虫提取物低、中、高剂量(0.75 g/kg、1.5 g/kg、3 g/kg)组,每组8只,造模24 h后,模型组小鼠给予0.5％的羧甲基纤维素钠灌胃;阳性药物组给予环磷酰胺腹腔注射;五谷虫提取物低、中、高剂量剂量组分别给予0.75 g/kg、1.5 g/kg、3g/kg五谷虫溶液灌胃,连续给药10 d.观察各组小鼠肿瘤生长情况,计算肿瘤抑制率;检测小鼠血清ALT、AST、尿酸(UA)和肌酐(Cr)含量;免疫印迹法检测肿瘤组织中p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)、p-p38MAPK蛋白表达水平;酶联免疫吸附法检测瘤组织中白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-oα)、血管内皮生长因子(VEGF)水平.结果 阳性对照组、五谷虫提取物低、中剂量组均可抑制H22荷瘤小鼠肿瘤的生长(P＜0.05).五谷虫提取物各剂量组对小鼠肝肾功能指标无影响(P＞0.05);各剂量组的瘤组织p-p38MAPK蛋白表达水平均高于模型组(P＜0.05);低、中剂量组IL-1β3、IL-6、TNF-α水平高于模型组(P＜0.05),而VEGF水平低于模型组(P＜0.05).结论 低、中剂量五谷虫提取物可抑制H22荷瘤小鼠体内的肿瘤生长,其抗肿瘤机制可能与调节肿瘤相关细胞因子及激活p38MAPK信号通路有关.     

p38丝裂原活化蛋白激酶特异性抑制剂SB203580对溃疡性结肠炎大鼠血清IL-6和IL-1β的影响

目的观察p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂SB203580对溃疡性结肠炎大鼠血清IL-6和IL-1β的影响,探讨p38MAPK在溃疡性结肠炎中的可能作用。方法 45只健康SD大鼠随机均分为正常对照组、模型组、SB203580组。采用三硝基苯磺酸(TNBS)制备大鼠溃疡性结肠炎模型,免疫组织化学方法检测大鼠肠组织活化转录因子2(p-ATF2)表达,ELISA法检测大鼠血清白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)表达水平,并观察肠道大体形态和组织学改变;同时分析p-ATF2水平与IL-6及IL-1β含量的关系。结果与正常对照组相比,模型组大鼠肠组织p-ATF2水平、血清IL-6及IL-1β含量显著增高(P<0.05),SB203580组p-ATF2表达与血清IL-6、IL-1β水平均明显低于结肠炎模型组(P<0.05),p-ATF2水平与IL-6及IL-1β含量呈正相关(P<0.05)。结论 p38MAPK抑制剂SB203580通过下调p-ATF2活性及IL-6、IL-1β表达,对TNBS诱导的溃疡性结肠炎大鼠起保护作用。     

高氧对幼鼠肺组织细胞凋亡及p38 MAPK丝裂原活化蛋白激酶的影响

目的 探讨高氧对幼鼠肺组织细胞凋亡及p38 MAPK丝裂原活化蛋白激酶表达的影响.方法 幼年Wistar大鼠90%氧气暴露建立高氧肺损伤模型,行肺组织病理学检查,应用TUNEL法检测肺组织的细胞凋亡,Western blot法检测p38 MAPK表达.结果 高氧暴露3 d可见肺组织水肿、出血、炎症细胞浸润等急性肺损伤改变.高氧3 d组的肺凋亡指数较空气对照组明显增加,凋亡发生的主要部位为肺泡、支气管上皮及血管内皮细胞.Westem blot结果显示高氧暴露1 d,肺组织的p38MAPK活性迅速升高,于第2天达到高峰,第3天活性有所下降,但仍高于空气对照组.结论 高氧暴露可以诱导肺组织发生细胞凋亡;高氧可以激活p38MAPK通路,参与高氧性肺损伤的调控;活化的p38MAPK可能参与了高氧诱导的肺组织细胞凋亡的调控.     

盐酸氨溴索对成年大鼠高氧肺损伤的影响

目的研究盐酸氨溴索对成年大鼠高氧肺损伤的影响。方法成年雄性SD大鼠48只,随机分为6组每组8只。对照组（0h组）吸入空气,其余5组氧舱内吸入100%浓度O2,根据吸氧时间不同分为24h组、48h组、72h组、96h组、盐酸氨溴索（ABX）组（吸氧96h）;ABX组予ABX 30mg/kg腹腔内注射1次/d。到达实验终点后颈动脉采血行动脉血气分析,测定血清及支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症因子水平,肺组织酶活性和Bax、Bcl-2蛋白表达。结果随高氧暴露时间延长,大鼠氧合指数呈逐渐下降趋势,96h达到最低值。血清及BALF中TNF-α、IL-1β水平逐渐增高,48h达到高峰,此后开始下降,IL-6在72h达高峰。肺组织Bax蛋白表达逐渐增多,Bcl-2表达逐渐下降。ABX干预组同96h组相比氧合指数增加（P〈0.01）,血清及BALF中TNF-α、IL-1β和IL-6水平下降（P〈0.01）,肺组织中Bax蛋白表达显著下降（P〈0.01）,Bcl-2蛋白表达显著增高（P〈0.01）。结论盐酸氨溴索通过抗炎、抗氧化及抗凋亡作用能够减轻成年大鼠高氧肺损伤。     

雌激素对新生大鼠高氧肺损伤的影响

[目的]探讨雌激素对高氧所诱发新生大鼠肺损伤的影响.[方法]选用生后2d、体重为5～10g的新生Wistar大鼠,雌雄不拘,随机分为空气对照组、高氧模型组及雌激素治疗组.将空气对照组新生大鼠暴露在室内空气中,其他各组新生大鼠暴露在90%(体积分数)氧中共14d,雌激素治疗组新生大鼠每日分别腹腔内注射给予雌激素2mg/kg,空气对照组和高氧模型组腹腔内注射给予生理盐水.实验开始第3,7,14天时间点记录各组新生大鼠自然死亡数目,计算死亡率;每组处死10只,取肺组织,在光学显微镜下观察肺组织的病理变化,采用免疫组织化学染色方法观察肺组织中γ干扰素(IFN-γ)的表达.[结果]随着高氧暴露时间的延长,高氧模型组及雌激素治疗组死亡率均呈增高趋势,高氧模型组暴露7 d后开始死亡率迅速升高,而雌激素治疗组死亡率明显降低,相比较差异具有统计学意义(P<0.05).空气对照组IFN-γ无阳性表达,而高氧模型组中的阳性表达在第7天时达到高峰,第14天时明显下降,但仍高于空气对照组;雌激素治疗组中的IFN-γ表达强度在各时间段均明显低于高氧模型组(P<0.01).[结论]雌激素对新生大鼠高氧肺损伤有保护作用.     

中性粒细胞在高浓度氧诱发急性肺损伤中的作用

目的:测定鼠支气管肺泡清洗液中细胞成分,阐明高浓度氧诱发急性肺损伤的发生机制。方法:20只雄性6周龄[(226±53.6)g]Wistar鼠被分为3组:(1)对照组(空气中饲养,n=6)。(2)实验组1(暴露在90%～95%氧气中24～48h,n=7)。(3)实验组2(暴露在90%～95%氧气中72h,n=7)。实验中动物可自由进食和水。结果:与对照组相比,实验组2的支气管肺泡清洗液中总细胞数减少[(3.81±0.35)×105/ml,(2.53±0.77)×105/ml];巨噬细胞数减少[(3.80±0.36)×105/ml,(2.09±0.59)×105/ml];而中性粒细胞计数明显增多[0,(43.56±42.63)×103/ml]。实验组2的动物都出现双侧胸水。结论:中性粒细胞动员并进入肺组织是高浓度氧诱发急性肺损伤的明显特征,损伤的发生与暴露时间有关。提示早期抑制中性粒细胞进入肺组织是治疗高浓度氧诱发急性肺损伤的重要途径。     

Relationship between Notch Receptors and Hyperoxia-induced Lung Injury in Newborn Rats

Alveolar epithelia are the target cells of thehyperoxia lung injury. The repair of lung injuryentirely depends on the proliferation/differentia tion of Type Ⅱ alveolar epithelial cells (AECⅡ),which are stem cells of lung tissues and are in volved in the alveolization so as to form the alveo lar blood barrier. Currently, the regulating mecha nisms of the proliferation/differentiation of AECⅡhave become a hotpot. The Notch signaling, as anevolutionary cell i…     

高氧肺损伤肺组织中IL-8和IL-10含量的变化及意义

目的：研究高氧肺损伤大鼠肺组织中细胞因子IL-8和IL-10的变化,探讨其在高氧肺损伤中的作用。方法：吸入＞95%氧气建立高氧肺损伤大鼠模型,于给氧后6 h,1、3、6、10、14 d留取肺组织标本,HE染色观察肺组织病理形态学改变,并应用双抗体夹心ELISA法检测肺组织匀浆IL-8和IL-10的含量。结果：随给氧时间延长高氧组肺泡腔内出现炎性细胞浸润、肺泡腔增大、肺泡间隔较薄、肺泡数量减少。与空气组比较,高氧组肺组织匀浆中IL-8含量很快升高,在3 d时达到高峰,这种差异持续至生后14 d,高氧组IL-10含量的升高在给氧后6 h时明显,与对照组比较差异有显著性(P<0.05),1 d时仍有差异,约3d即恢复正常。结论：高氧肺损伤时炎症因子IL-8参与炎症反应迅速而持久,而抗炎因子IL-10持续时间短暂。     

氧化苦参碱减轻肺缺血再灌注损伤的实验研究

目的探讨氧化苦参碱(OMT)减轻肺缺血再灌注损伤(LIRI)的机制。方法建立肺缺血再灌注模型,将32只大白兔随机分为对照组(n=8)、缺血再灌注组(I/R组,n=8)、OMT颈静脉给药组(OMT-1组,n=8)、OMT左肺动脉给药组(OMT-2组,n=8)。应用ELISA法测定各组再灌注后40、80、120min不同时间点肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)含量;用TUNEL法测定肺泡细胞凋亡(AI);用肺组织损伤定量评价指数(IQA)综合评价OMT对LIRI的保护作用。结果I/R组TNF-a、IL-8含量高于对照组和OMT-2组,差异有统计学意义(P<0.01),与OMT-1组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。OMT-2组TNF-α、IL-8含量低于OMT-1组,差异有统计学意义(P<0.05)。OMT-1组和OMT-2组IL-10含量均显著高于I/R组,差异有统计学意义(P<0.01),但OMT-1组低于OMT-2组,差异有统计学意义(P<0.05)。缺血再灌注80min后I/R组AI值明显高于OMT-2组、对照组,差异有统计学意义(P<...     

腹腔注射氢气与富氢生理盐水对新生大鼠高氧肺损伤的作用研究

目的 对比分析腹腔注射氢气(H2)和富氢生理盐水对高氧致新生大鼠肺损伤的作用.方法 将SD新生大鼠分为6组(每组10只),A组(空气组)、B组(空气十富氢生理盐水组)、C组(空气+ H2组)、D组(高氧组)、E组(高氧十富氢生理盐水组)、F组(高氧+ H2组).A、B、C组置于空气中,D、E、F组置于95％ O2中,B、E组每日腹腔注射富氢生理盐水2次(10 mL/kg),C、F组每日腹腔注射H2 2次(10mL/kg),A、D组每日腹腔注射普通生理盐水2次(10mL/kg).于实验第15天收集肺组织和血清标本,苏木精-伊红(HE)染色后光镜下观察肺组织病理改变和辐射状肺泡计数(RAC),碱水解法检测肺组织羟脯氨酸(HYP)、血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,免疫组织化学SP法检测肌成纤维细胞袁型标志α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达.结果 与A组相比,D组RAC、血清SOD活力明显降低,HYP、MDA水平及α-SMA表达均明显增加,H2干预可显著缓解高氧所致上述变化,腹腔注射H2较腹腔注射富氢生理盐水效果更佳.结论 H2可一定程度减轻高氧导致的肺氧化损伤、发育受阻及纤维化指标,腹腔注射H2较腹腔注射高氢生理盐水效果更佳.     

通腑法通腑利肺作用机制的实验研究

目的 从整体、细胞及分子3个层面探讨通腑法通腑利肺的作用机制。方法 将40只SD大鼠随机等分为正常对照组、模型组、解扎组及治疗组，每组各10只，采用体外直肠不全结扎法造模。然后用放射免疫分析法检测各组血清IL-8含量，RT-PCR法检测肺组织TNFα mRNA水平，检测各组支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中肺泡巨噬细胞（pulmonary alveolar macrophage，PAM）死亡百分率，并将通腑治疗组、解扎组与模型组及正常对照组对照。结果 模型组血清IL-8含量明显高于正常对照组（P〈0．01），肺组织TNF-α mRNA表达明显增高（P〈0．01）；通腑法治疗后IL-8含量和TNF-α mRNA表达均低于模型组（P〈0．01）。且肺损伤程度减轻。结论 IL-8、TNF-α在肠源性肺损伤过程中起重要作用。通腑法对损伤肺组织起保护作用。     

慢性高氧肺损伤新生鼠肺微血管超微结构的动态变化

目的观察高氧对新生鼠肺微血管发育的影响。方法以新生鼠慢性高氧肺损伤28例和对照24例为研究对象,在实验3、7和14d观察肺组织病理、微血管超微结构变化,放射性肺泡计数(RAC)。结果高氧组3d微血管发生炎症反应,血管基底膜增厚、断裂;7d炎症反应明显,血管腔被炎细胞和坏死的内皮细胞堵塞,血管减少;14d毛细血管稀少,间质有胶原纤维沉积,气血屏障增厚。高氧组RAC值7天降低(6.87±1.11)vs(7.53±0.86),P<0.05,14d差异更显著(P<0.001)。结论炎症是高氧肺微血管损伤的一个始动环节,由此导致的毛细血管闭塞可能是微血管减少的一个重要原因。提示控制炎症反应可能是治疗和预防高氧肺损伤的有效手段。