血液肿瘤患者大肠埃希菌基因分型及耐药现状分析

目的:探讨血液肿瘤患者大肠埃希菌耐药性及基因型,为血液肿瘤患者合理使用抗生素提供依据。方法:采用MIC法检测大肠埃希菌对抗菌药物的敏感性,肠杆菌科基因重复性一致序列(ERIC)-聚合酶链反应(PCR)对菌株进行基因分型。结果:从血液肿瘤患者中分离出20个大肠埃希菌株,分别属于A和B2两个基因型。其中A型16株来源于痰液、血液、肺灌洗液和尿液,耐阿莫西林、头孢噻吩、庆大霉素、替卡西林、哌拉西林,耐药率均达70%以上;B2型4株来源于血液,对上述抗生素具有更高耐药率。结论:血液肿瘤患者感染的大肠埃希菌为A和B2型,具有多重耐药性。     

大肠埃希菌药敏结果和产超广谱β-内酰胺酶菌株的耐药基因分析

目的 对我院2011年上半年分离出的147株大肠埃希氏菌药敏及耐药基因型进行分析,为临床合理应用抗生素,减少耐药菌株的出现提供参考依据.[方法]采用梅里埃公司的VITEK2全自动微生物分析仪,对标本进行细菌鉴定和药敏分析.对产生超广谱β-内酰胺酶(Extended-spectrum β-lactamase,ESBLs)的大肠埃希菌确证实验,采用美国临床检验室标准化委员会( Clinical and Laboratory Standards Institude,CLSI)推荐的纸片扩散法,进行确证实验.耐药基因采用多重PCR检测鉴定.[结果]147株大肠埃希氏菌,ESBLs菌株有71株,百分比为48.1%.对71株ESBLs大肠埃希氏菌的质粒进行PCR扩增,显示29株CTX-M基因阳性,检出率为40.8%;TEM 基因型菌株25株,所占百分比35.2%;SHV基因型菌株17株,所占百分比23.9%型;OXA基因型菌株11株,所占百分比15.4%.[结论]本地临床分离大肠埃希菌对抗生素敏感性,存在有一定的地域差别,这可能跟不同地区用药习惯用药历史有关.本地区ESBLs大肠埃希菌具有较高的CTX-M型ESBLs检出率.是本地区产ESBLs大肠埃希菌流行的的主要耐药基因型.     

产ESBLs大肠埃希菌耐药基因分型研究

目的对本院分离的31株产ESBLs大肠埃希菌进行耐药基因分型研究。方法用PCR对根据CLSI标准进行产ESBLs大肠埃希菌的初筛确证实验得到的产ESBLs大肠埃希菌31株,进行耐药基因的分型研究。结果31株产ESBLs大肠埃希菌中,TEM型为15株,SHV型为3株,CTX-M型为6株,TEM型对氨苄西林100%耐药,而SHV和CTX-M型主要对三代头孢类抗生素耐药,其治疗的首选药物为亚胺培能。结论本院检出的产ESBLs大肠埃希菌主要型别为TEM型,耐药基因分型研究将为临床用药和医院感染监控提供较有价值的参考。     

多重PCR检测临床产ESBLs大肠埃希菌的耐药基因型研究

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性、产ESBLs的阳性率及耐药基因之间的关系。方法采用Kirby-Bauer(K-B)琼脂扩散法检测120株临床分离的大肠埃希菌对18种抗生素的耐药性,用酶抑制剂增强实验纸片法检测产ESBLs菌株,运用多重PCR技术检测相关耐药基因,用DNA序列分析确认基因亚型。结果120株大肠埃希菌产ESBLs的有51株,阳性率为42.5%。120株大肠埃希菌对亚胺培南全部敏感,产ESBLs的大肠埃希菌对头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶等头孢类抗菌药物的耐药率高达100%;51株产ESBLs菌株其中46株扩增到CTX-M型耐药基因,44株扩增到TEM型基因,2株扩增到SHV基因,1株OXA型基因,未检出PER和VEB型。结论大肠埃希菌产ESBLs较高,耐药显著,碳青酶烯类抗生素是目前治疗产ESBLs大肠埃希菌最有效的药物;产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型别为CTX-M型和TEM型。     

大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶检测及耐药基因型分析

目的了解宁夏医科大学附属医院大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的分离率、耐药性和基因型。方法收集2008年1月-2008年12月住院患者分离的标本281株,采用K-B法进行药敏试验,采用PCR技术分别检测TEM、CTX-M基因。结果在281株大肠埃希菌中,有186株大肠埃希菌产超广谱ESBLs,产酶率为66.2%。在186株ESBLs菌株中有111株为TEM型,占59.7%,有66株为CTX-M型,占35.5%。结论产ESBLs株大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药性较为严重,而且存在多重耐药;本地区临床标本分离的产ESBLs大肠埃希菌流行的主要基因型是CTX-M型和TEM型。     

儿童患者中检出产ESBLs大肠埃希菌的耐药性和基因分型

目的了解本地区儿童患者临床分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药基因型别和耐药性的变化情况。方法收集自儿童患者分离鉴定的大肠埃希菌株1327株，通过K-B法作药敏试验，采用美国NCCLS1999年推荐的抑制剂增强纸片法确认产ESBLs株，并对ESBLs进行初步基因分型。结果检出产ESBLs菌株702株，检出率为52．9％，产ESBLs大肠埃希菌对青霉素类、氨曲南及头孢菌素类抗生素耐药率为55．5％。95．0％；PCR初步分型结果，单独携带TEM型基因的占56．7％，单独携带SHV型基因的占15．0％，携带两种基因的占25．8％。结论产ESBLs大肠埃希菌检出率逐年上升，具有多重耐药的特点；产ESBLs大肠埃希菌主要携带TEM型和SHV型β-内酰胺酶基因，其中绝大部分产TEM型β-内酰胺酶。     

产新德里金属β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药机制及分子流行病学研究

目的 研究临床分离耐碳青霉烯类抗菌药物的大肠埃希菌中新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi metallo-beta-lactamase,NDM)的分子分型、耐药机制及流行特点等,为医院感染的防控与治疗提供依据。 方法 收集浙江大学丽水医院2017年6月—2018年2月从各种临床标本中分离得到的产NDM的大肠埃希菌。结合临床药敏、EDTA协同及增效试验与PCR扩增检测blaNDM基因;通过肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)及多位点序列分型(MLST)分析菌株之间的同源性;采用药物敏感性试验、接合试验、聚合酶链式反应(PCR)和序列分析等技术研究大肠埃希菌NDM分子分型及耐药的分子机制。 结果 共筛选出9株产NDM的大肠埃希菌菌株,其中3株分离自新生儿科,2株分离自妇科,重症医学科、急诊、血液内科、肾内科各1株;经测定所有菌株的NDM亚型均为NDM-5型,质粒复制子类型均为IncX3型;5株细菌接合试验阳性,分别来自妇科、重症医学科、急诊和新生儿科,同时PCR结果表明接合菌的质粒复制子类型为IncX3型;所有菌株呈现多重耐药现象;MLST分型结果显示,这9株大肠埃希菌共有4个ST分型,分别为ST206、ST167、ST354和ST1642,与ERIC-PCR分型结果相一致。 结论 研究结果表明本地区存在携blaNDM-5基因的大肠埃希菌的流行,同时携带有多种耐药基因,并能够通过IncX3型质粒在大肠埃希菌中传播。因此,为了预防和控制医院感染的暴发,必须重视和加强对耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌的监测。      

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药表型及基因型研究

目的研究大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酸ESBLs耐药表型及基因型特性。方法2006年1月至2006年12月我院临床分离的大肠埃希菌125株。先后用标准纸片法筛选试验和确认试验、Etest条分别检测ES-BLs。聚合酶链反应(PCR)以及基因测序分析测定ESBLs基因的类型。结果125株大肠埃希菌中检出71株产ESBLs(56.8%)菌株。PCR结果显示,产ESBLs大肠埃希菌基因主要是CTX-M-14型为主;TEM基因型均为TEM-1型,SHV基因型均为SHV-1型。产ESBLs肺炎克雷伯菌对头孢曲松、头孢噻肟、左氧氟沙星耐药率在70%以上,对美罗培南,亚胺培南敏感性好。结论本地区大肠埃希菌ESBLs携带率较高,其基因以CTX-M-14型为主,其次CTX-M-3型ESBL,产酶株对多种抗菌药物耐药,对美罗培南、亚胺培南敏感性好。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药机制研究

目的研究临床分离产ESBLs大肠埃希菌的耐药机制和分子流行病学情况。方法PCR检测大肠埃希菌的I类整合酶、插入序列共同区(ISCR/orf513)、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因;以肠杆菌科间的重复序列(ERIC)为引物进行基因扩增,SPSS13.0分析其遗传多态性。结果102株产ESBLs的大肠埃希菌中,I类整合酶阳性菌有59株(57.8%),orf513阳性菌有6株(5.9%),ESBLs中的TEM型有91株(89.2%),SHV型有0株,CTX-M型有35株(34.3%)。根据指纹图谱,可以把102株大肠埃希菌基因型分为82种,经SPSS系统聚类分析,可归为17个大类。结论产ESBLs大肠埃希菌的整合酶阳性率较高;整合子和ISCR可以共存;ERIC-PCR是一种效果较好的基因分型方法。     

大肠埃希菌系统发育群基因检测与耐药率的研究

目的通过检测大肠埃希菌系统发育群基因及细菌耐药率,探讨两者间的关系。方法筛选ESBLs阳性菌株88例,通过多重PCR方法检测ChuA,YjaA和TspE4.C2基因;应用Vitek2 compact细菌自动鉴定及药敏分析仪检测细菌耐药率。结果大肠埃希菌系统发育群以D群57.95%为主,其余依次为A群20.45%、B2群14.78%、B1群6.82%。其中在痰标本中检出率A群、D群比例基本相当,但在其他标本中均以D群为主。B2群耐药率显著高于A群、D群(除外LEV)分离的菌株(P<0.05)。结论根据系统发育群基因检测,大肠埃希菌主要为D群为主,其次分别为A、B2、B1群。不同的系统发育群所表现的耐药性不同,其中毒力最强的B2群耐药率最高。     

血流感染O16-ST131和O25b-ST131型大肠埃希菌的流行、系统发育群及耐药性

目的探讨大肠埃希菌ST131型菌株的流行,及其与非ST131耐药性是否存在差异,ST131感染者与非ST131感染者临床 特征是否存在差异。方法通过收集中南大学湘雅医院2016年1月~12月血流感染患者大肠埃希菌非重复菌株144株,采用多 重PCR方法进行系统发育分群,采用等位基因特异性PCR进行ST131菌株筛选及O血清型分型,收集144例患者的临床信息, 比较ST131感染者与非ST131感染者的临床特征有无差异,采用Vitek2 compact药敏分析仪检测细菌的耐药性。结果系统发 育分群结果显示,144株大肠埃希菌菌株以B2群为主,占41.0%（59/144）,其次分别为F群、B1群和E群,分别占16.7%（24/144）、 13.9%（20/144）和13.2%（19/144）;其中9株（6.3%）属于ST131型,包括8株O25b-B2-ST131和1株O16-B2-ST131;9例ST131患 者中,医院感染患者有7例,占77.8%。ST131感染者的人口特征和临床特征与非ST131感染者相似。ST131型菌株对哌拉西 林/他唑巴坦、亚胺培南、厄他培南、阿米卡星耐药率较低,但对头孢唑林、头孢曲松、环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素以及复方新 诺明耐药率>50%,ESBLs阳性率达77.8%,多重耐药率高达88.9%,并高于非ST131型菌株,但差异并无统计学意义。结论本 地区血液分离大肠埃希菌中,B2 群和F群为最常见系统分群,ST131 型菌株检出率较低,国内首次在血流感染中分离出O16- ST131菌株,ST131感染者的临床特征与非ST131感染者相似,ST131型菌株多重耐药率及ESBLs阳性率高,应引起重视。     

临床大肠埃希氏菌耐药性检测及超广谱β-内酰胺酶流行病学调查

目的了解广州地区临床大肠埃希氏菌耐药及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行情况。方法对临床分离鉴定的57株大肠埃希氏菌进行5大类15种抗菌药物的耐药性检测。通过表型确认试验筛选出产ESBLs菌株,采用PCR法检测15种临床重要且常见的耐药基因。结果 57株大肠埃希氏菌对15种抗菌药物产生了不同程度的耐药性。其中有23株产ESBLs,ESBLs产生率为40.4%;24株产TEM,13株产CTX-M(其中,8株产CTX-M-55、4株产CTX-M-14、1株产CTX-M-27),2株产OXA-1。结论广州地区大肠埃希氏菌耐药情况依然严峻。同时,ESBLs流行趋势发生了变化:以前以流行CTX-M-9型为主,现在以CTX-M-1型和CTX-M-9型同时流行为主要特征。     

新CMY型头孢菌素酶在大肠埃希菌中的流行

目的 对临床产质粒介导AmpC酶大肠埃希菌的耐药表型以及分子生物学特性进行研究,以期发现新的头孢菌素酶。方法 对从临床分离的大肠埃希氏菌先后用纸片扩散法、三维试验、等电聚焦试验以及微量稀释法等进行表型检测。然后用接合试验、多重PCR以及基因测序等方法进行分子生物学研究。结果 719株受试的大肠埃希菌经三维试验,等电聚焦以及酶抑制试验表明有6株细菌都能够产一种等电点(PI)为8．9的能够被氯唑西林抑制而不能被克拉维酸抑制的β—内酰胺酶。用微量稀释法检测表明这些菌株对多种三代头孢菌素耐药,但对头孢吡肟、亚胺培南和美洛培南均敏感。接合试验表明它们携带的AmpC酶具有转移性,多重PCR检测表明这些基因来源于费氏枸橼酸杆菌家族,DNA测序表明该基因和CMY-2以及CMY-7有99％的同源性,为一种新的CMY型头孢菌素酶。结论发现了一种新的CMY型头孢菌素酶,它介导了高产AmpC酶大肠埃希菌对多种抗生素的耐药,其耐药性能够水平传播。     

内科ICU医院感染病原菌分布及耐药性分析

目的 探讨内科重症监护病房患者医院感染病原菌类型、分布及耐药情况,为指导医院感染病原菌耐药性监测和临床合理应用抗菌药物提供依据.方法 回顾性分析2013年1月至2016年6月海南医学院第二附属医院内科ICU住院患者送检标本中分离的病原菌及其对临床常用抗菌药物的耐药性.药敏试验采用K-B纸片扩散法,药敏结果依据美国临床实验室标准化研究所标准进行判定,采用WHONET软件进行统计分析.结果 共分离出病原菌607株,其中革兰氏阴性杆菌占72.3％(439株),革兰氏阳性球菌占21.4％(130株),真菌占6.3％(38株).革兰氏阴性杆菌主要为鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、嗜麦芽窄食单胞菌,其中非发酵革兰氏阴性杆菌占70.8％(311株),革兰氏阳性菌主要为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌.多重耐药革兰氏阴性杆菌284株,其中产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌(ESBLECOL)和肺炎克雷伯菌(ESBLKPN)占18.0％(51株),多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-AB)占36.3％(103株),多重耐药铜绿假单胞菌占(MDR-PA)26.4％(75株).多重耐药革兰氏阳性球菌57株,主要为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌,对万古霉素、利奈唑胺敏感率为100％.真菌主要为白色假丝酵母菌,对抗真菌药物敏感性≥80％.结论 内科ICU患者医院感染的致病菌主要为革兰氏阴性杆菌,且主要为非发酵革兰氏阴性杆菌和多重耐药菌.ICU应加强病原菌耐药性监测,并根据药敏结果指导合理应用抗生素.     

尿培养产ESBLs大肠埃希菌的耐药特点及对磷霉素的敏感性分析

目的：：分析尿培养产超广谱β内酰胺酶( ESBLs)大肠埃希菌的耐药特点,了解磷霉素对产ESBLs大肠埃希菌的体外抗菌活性,并与其他种抗菌药物进行比较。方法：从菌株库复苏2010-2014年尿培养大肠埃希菌821株,使用ESBLs的表型确认实验筛选产ESBLs菌株,用K-B法测定磷霉素等15种抗菌药物对其的体外抗菌活性。结果：821株大肠埃希菌中465株产ESBLs,对亚胺培南敏感性较高(91.4%),其次是磷霉素(88.0%),然而对左氧氟沙星、青霉素类和头孢菌素类抗生素的敏感性较差。结论：碳青霉烯类抗生素依然是敏感率最高的药物,磷霉素对尿培养产ESBLs大肠埃希菌有良好的体外抗菌活性,具有一定的临床应用价值。     

临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中超广谱β-内酰胺酶的检测

目的：检测临床分离的临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）菌株的发生率、耐药性、流行性以及酶的基因型别。方法：采用双纸片法、琼脂稀释法、PCR、脉冲场电泳对1999年复旦大学附属华山医院临床分离的559株肺克雷伯菌和427株大肠埃希菌进行检测。结果：肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中产ESBL菌株的发生率分别为51％和23.6％,产ESBL菌株主要分布于ICU和神经外科病房,对大多数的β-内酰胺酶和非β-内酰胺类抗菌药物耐药;PFGE显示,产ESBL菌株（尤其是产ESBL肺炎克雷伯菌株）在ICU病房中存在同一菌株的克隆传播;PCR检测显示TEM型是最为常见的β-内酰胺酶型别,CTX-M型ESBL亦较为普遍。结论：产ESBL菌株在临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中较为普遍,而且为多重耐药菌株,在医院内中存在流行与传播。     

医院内肠杆菌科细菌耐药性监测结果分析

目的:调查医院内肠杆菌科细菌常见临床分离株的耐药性.方法:采用K-B方法,对中国医科大学附属第一医院1999年1月～2003年12月临床分离的肠杆菌科细菌进行药敏试验.根据NCCLS推荐方法检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的情况.结果:5年间,最常见的肠杆菌科细菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、变形杆菌属、沙雷菌属.耐药分析显示,亚胺培南一直对所有常见肠杆菌科细菌保持良好的抗菌活性,其次为头孢哌酮/舒巴坦和头孢吡肟,耐药率均＜20%.氟喹诺酮类药物对除大肠埃希菌以外的其它肠杆菌细菌抗菌活性好.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的比例逐年增高,分别从1999年的9.7%、18.4%上升到2003年的26.3%和33.9%(均P＜0.05).产ESBLs菌株对头孢噻肟和氨曲南的耐药率明显高于头孢他啶.结论:院内细菌耐药性监测不仅能指导临床合理使用抗菌药物,还能延缓耐药性的产生和蔓延.     

大肠杆菌sRNA sdsR表达水平与其耐药性的相关性分析

目的旨在探究临床分离的大肠埃希菌株中sRNA sdsR的表达水平与环丙沙星以及头孢噻肟耐药性之间的关系。方法采用实时荧光定量PCR方法测定医院2018年1月—2018年12月从临床标本非重复分离得到的50株大肠埃希菌的sRNA sdsR的表达水平,并通过pearson相关分析确定环丙沙星及头孢噻肟耐药性与sRNA表达水平之间的相关性。结果利用MIC数值将50株临床分离株分为CIP耐药组27株,CIP敏感组23株;CTX耐药组22株,CTX敏感组28株;CIP敏感组的sdsR表达水平明显高于CIP耐药组(P<0.05);而CTX敏感组和CTX耐药组的sdsR表达水平相比较,差异无统计学意义(P>0.05);sRNA sdsR的基础表达水平与CIP MIC呈负相关(P<0.01),而与CTX MIC比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论大肠埃希菌临床分离株中sRNA sdsR的基础表达水平与环丙沙星耐药性呈负相关。     

致感染大肠埃希菌临床分离株耐药性研究

目的　了解临床分离的致感染大肠埃希菌的耐药性及产超广谱β-内酰胺酶 (ESBL s)情况 ,指导临床合理使用抗生素控制感染性疾病。方法　采用 Miroscan Walk Away4 0全自动细菌分析仪 ,对临床分离的 10 0株致感染大肠埃希菌进行细菌鉴定、抗生素敏感性测定和产 ESBL s判定。结果　所测抗生素大肠埃希菌耐药率在 5 0 %以上的占 14种 ,耐药率最高的为氨苄青霉素 ,亚胺硫霉素最为敏感 ,耐药菌株耐受抗生素种类从 1到 19种 ,多重耐药菌株占 93% ,产 ESBL s菌株为 4 9% ,产 ESBL s株对绝大部分抗生素的耐药率高于非产 ESBL s株。结论　致感染大肠埃希菌普遍耐药 ,尤其多重耐药广泛流行 ,临床医师须高度重视本医院和本地区大肠埃希菌的药物敏感模式与流行分布 ,合理使用各种抗生素以减缓细菌耐药对其的筛选压力 ,控制耐药菌株的流行     

多黏菌素B联合不同抗菌药物抗耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的协同作用

目的:观察多黏菌素B与几种抗菌药物联合抗耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的协同作用.方法:16株碳青霉烯类耐药菌中肺炎克雷伯菌11株,大肠埃希菌5株,观察多黏菌素B与利福平、强力霉素、头孢吡肟、亚胺培南、头孢曲松和庆大霉素对上述菌株的协同作用,通过棋盘微量稀释法确定每种抗菌药物的最小抑菌浓度( MIC)值,根据MIC...