传染性法氏囊病病毒抗体检测诊断试剂盒的研制与应用

本文用提纯的ＩＢＤＶ细胞毒为抗原,抗鸡Ｉｇ单抗１Ｂ７ＨＲＰ酶结合物为第二抗体建立了检测ＩＢＤＶ抗体的间接ＥＬＩＳＡ。在此基础上研制出ＩＢＤＶ抗体检测诊断试剂盒。经对１２００份血清进行检测,结果表明：本试剂盒特异性强,灵敏度高,重复性好,快速稳定,易于操作,为雏鸡ＩＢＤＶ母原抗体和疫苗注射后特异性抗体检测提供了可靠的诊断工具。     

IBD抗体与IBDV混合组建的新型IBDV疫苗最佳组合的测定

作者研制了一种新型抗ＩＢＤＶ疫苗。该疫苗是将抗血清中所含的抗ＩＢＤＶ抗体（ＢＤＡ）与活的ＩＢＤＶ在冻干前混合制成。为设置ＢＤＡ与ＩＢＤＶ的不同组合，５￣８０ｕＢＤＡ／５０μｌ与１００ＥＩＤ５０／５０μｌ的ＩＢＤＶ悬液在试验１中混合；在试验２中，１０￣９７７ＥＩＤ５０／５０μｌＩＢＤＶ悬液与２４ｕＢＤＡ／５０μｌ混合。疫苗制备物颈部皮下注射于１日龄ＳＰＦ鸡，利用囊重、囊眼观检查和ＩＢＤＶ抗体效价对不     

分泌抗IBDV独特型抗体细胞株的建立

应用提取纯化的抗ＩＢＤＶ ＩｇＧ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，其脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞在ＰＥＧ作用下融合，应用ＥＬＩＳＡ法检测筛选，经有限稀释法克隆２次，获得了２株（２Ｂ６株、５Ｆ４株）分泌抗ＩＢＤＶ独特型抗体的杂交瘤细胞株，并能诱生Ｂａｌｂ／ｃ小鼠产生高效价的含抗ＩＢＤＶ独型抗体腹水。     

应用双抗体夹心法ELISA检测IBDV的研究

从抗ＩＢＤＶ高免蛋黄液中提取ＩｇＧ，用作包被抗体和酶标记，建立了检测ＩＢＤＶ的双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ。经抗原阻断，无关病毒对照、取代、验证等项试验，并与常规ＡＧＰ法比较，对来源不同的１００多个样品进行检测，结果表明：该法对患鸡腔上囊、脾脏的检出率均为１００％，比ＡＧＰ法敏感１００倍以上，用肉眼观察阳性与阴性之间颜色差异显著，不存在非特异性反应。试验证明该法具有满意的待异性、敏感性、快速性和稳定性，是ＩＢＤ早期病原学诊断和流行病学调查的有效手段。     

抗IBDV独特型抗体疫苗的制备与应用

应用提取纯化的抗ＩＢＤＶＩｇＧ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与ＳＰ２／０细胞在ＰＥＧ作用下融合，应用ＥＬＩＳＡ法检测筛选，经有限稀释法克隆２次，获得２株（２Ｂ６株，５Ｆ４株）分泌抗ＩＢＤＶ独特型抗体的杂交瘤细胞株，其能诱生ＢＡＬＢ／ｃ小鼠产生高效价的含抗ＩＢＤＶ独特型抗体的腹水。用此独特型抗体分别与福氏完全佐剂、福氏不完全佐剂按１∶１比例乳化制备成抗ＩＢＤＶ独特型抗体疫苗，免疫接种ＳＰＦ鸡和普通京白公鸡，然后用ＩＢＤＶ野毒株经点眼和滴鼻方式攻毒，保护率分别为８／８、１４／１４，从而证实抗独特型抗体疫苗有潜在的研究和应用价值。     

抗IBDV独特型抗体免疫效果观察

应用抗ＩＢＤＶ独特型抗体分别与福氏安全佐剂和福氏不完全佐剂按１：１比例乳化制备成抗ＩＢＤＶ独特型抗体疫苗，免疫接种ＳＰＦ鸡和普通京白公鸡，然后用ＩＢＤＶ野毒株经点眼和滴鼻方式攻毒，保护率分别为８／８，１４／１４，野毒株经点眼和滴鼻方式攻毒，保护率分别为８／８，１４／１４，由此证实了抗独特型抗体疫苗潜在研究价值和应用价值。     

感染IBDV雏鸡免疫器官组织中抗体生长细胞的变化

无ＩＢＤＶ母源抗体的１日龄健康滨白公雏接种ＩＢＤＶ后，于不同时期检查其法氏囊，胸腺，脾脏，盲肠扁桃体及哈德尔腺中ＩｇＧ，ＩｇＭ和ＩｇＡ生成细胞的数量。结果表明，１日龄ＩＢＤＶ感染全身及局部免疫器官组织中三种抗体生成细胞的数量均明显低于健康对照鸡，呈现体液免疫抑制。     

鸭自然感染传染性法氏囊病病毒的调查

用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体夹心阻断ＥＬＩＳＡ试验对采处三种不同鸭群的３８０份血清进行了ＩＢＤＶ抗体检测，抗体阳性率分别为：农村散鸭１００％，农场圈养鸭２９．９％，市场贩运鸭９５．４％，总阳性率为９５．５％，抗体效价为１＾２～１０＾４，这一结果不仅表明在我国ＩＢＤＶ传染已到了非常高的程度，而且揭示了鸭在ＩＢＤ病原生态和传播中可能起重要作用。     

免疫过氧化物酶单层试验检测鸡传染性法氏囊病病毒抗体的研究

建立了检测鸡血清中传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）抗体的免疫过氧化物酶单层试验（ＩＰＭＡ）。用于野外鸡血清中ＩＢＤＶ抗体检测。结果表明，ＩＰＭＡ比琼脂凝胶扩散试验（ＡＧＤ）更敏感、快速稳定。这为ＩＢＤ和其它疾病的诊断提供了一种新方法。     

传染性法氏囊病的免疫预防研究进展

传染性法氏囊病（ＩＢＤ）是由传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）引起的一种急性接触性传染病。ＩＢＤＶ的主要靶细胞是表面带有ＩｇＭ的Ｂ淋巴细胞，造成以淋巴细胞成分衰竭、坏死为特征的一种免疫缺陷性和免疫抑制性疾病。因此本病的免疫预防倍受世界各国的重视，目前控制本病的有效方法是疫苗接种和增加母源抗体。１　ＩＢＤ疫苗种类及特性１．１　ＩＢＤ经典疫苗　选用ＩＢＤＶ经典毒株制成弱毒苗或灭活苗，其中弱毒苗根据毒株的特点以及免疫抑制作用的程度，可将其分为弱毒株（温和型）、中等毒力弱毒株（中间型）和强毒株（高毒型）疫苗…     

用DIG－标记核酸探针鉴定传染性法氏囊病病毒

用ＤＩＧ－标记ＩＢＤＶｃＤＮＡ探针进行斑点杂交试验鉴定传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）。实验结果证明，该探针能与试验的１０株ＩＢＤＶ的ＲＮＡ发生限性杂交反应，结果清晰稳定，无非特异性反应。本试验是一种新的敏感的ＩＢＤＶ鉴定方法。     

麻雀自然感染鸡传染性法氏病病毒的调查

从鸡传染性法氏囊病流行的鸡场捕杀麻雀５４只，用鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体夹心阻断ＥＬＩＳＡ检测抗体，阳性检出率为７．４％；以逆转录－聚合酶链反应检测病毒核酸，阳性检出率为１１．１％；ＲＴ－ＰＣＲ阳性样本病毒分离亦为阳性。结果表明；ＩＢＤ流行的鸡场里的麻雀能够发生ＩＢＤＶ自然感染，麻雀可能是ＩＢＤＶ的贮存宿主或二次传染源之一。     

用对流免疫电泳试验检测鸡传染性法氏囊病血清抗体

利用自制传染性法氏囊病抗原,采用对流免疫电泳试验检测鸡ＩＢＤＶ抗体。结果表明,该方法能在３０－６０ｍｉｎ内使阳性血清和抗原之间出现明显的沉淀反应,且能被特异性抗原阻断;用ＮＤＶ,ＩＢＶ和ＥＤＳ７６Ｖ等血清代替ＩＢＤＶ血清无交叉反应,对同一批样品进行两次检测,结果具有良好的重复性,同琼脂免疫扩散方法比较,ＣＩＥ法需时短,敏感性高。     

从法氏囊病高兔卵黄中提纯免疫球蛋白IgG的研究

分别用氯仿和聚乙二醇从ＩＢＤ高兔卵黄中提取ＩＢＤＶ特异性免疫球蛋白ＩｇＧ。检测证明，此种纯化的抗体用于ＩＢＤ发病鸡群，在鸡体内能长时间地维持较高浓度，治疗效果显著，与卵黄液相比，疗效好，贮存期长，是治疗ＩＢＤ的有效制剂。     

传染性法氏囊病病毒VP2特异性抗体效价与保护力的相关性

用一种新方法测定传染性法氏囊病病毒的特异性抗体，并对抗体效价与保护力的相关性进行了研究，对不同抗体效价的鸡进行攻毒，用乳胶凝集抑制试验测定抗体效价，该法对检测ＩＢＤＶ ＶＰ２特异性抗体快速，简便，当免疫鸡的ＬＩ效价达１：２或更高时，几乎所有的鸡均可抵抗强毒ＩＢＤＶ的攻击，相反，带有母源抗体的鸡，即使其ＬＩ效价达１：４，用同样方法攻击，仍有半数的鸡易感。     

用ELISA检测牛血清中的牛病毒性腹泻病毒抗体

一般均用血清中和（ＳＮ）试验和间接免疫荧光（１１Ｆ）试验检测牛血清中的抗牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）抗体，本文用ＳＮ和１１Ｆ敏感性相当的ＥＬＩＳＡ检测ＢＶＤＶ抗体，共测定４７２份牛血清，有７９．２％为阳性。ＥＳＩＳＡ与ＳＮ呈正相关，表明ＥＬＩＳＡ可用于ＢＶＤＶ的常规诊断。     

用抗传染性氏囊病毒单克隆抗体建立夹心阻断ELISA检测鸡血清抗体及 …

用酶标记抗传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体，建立夹心阻断ＥＬＩＳＡ，检测ＩＢＤＶ鸡血清抗体。用Ｄ７８细胞毒免疫２４日龄的雏鸡，每周采血一次，共４次，用夹心阻断ＥＬＩＳＡ、微量细胞中和试验（ＶＮ）、琼脂扩散试验（ＮＧＰ）检测鸡血清抗体，结果表明：夹心阻断ＥＬＩＳＡ同ＶＮ之间具有较高的相关性（ｒ＝０．８１２６），与ＡＧＰ的相关性较低（ｒ＝０Ｘ．７５７５）。     

鸡传染性法氏囊病ELISA快速诊断盒的研制及应用

用ＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ快速诊断盒对ＩＢＤＶ阳性法氏囊囊毒及ＩＢＤ阳性出血清，ＩＢＤＶ阴性法氏囊及ＩＢＤ阴性血清和ＩＢ，ＩＬＴ，ＥＳＤ－７６，ＲＥＯ，ＮＤ，ＭＤ等６种鸡传染病的抗原及阳性血清检测，只有ＩＢＤＶ阳性法氏囊囊毒及阳性血清呈阳性反应，证明快速诊断盒对ＩＢＤＶ法氏囊囊毒抗原及其抗体的检测是特异的，与其它６种传染病的抗原和抗体无效叉反应。与ＡＧＰ对比试验结果表明，检测ＩＢＤＶ阳性法氏囊囊毒时，快     

应用间接免疫荧光法检测禽网状内皮组织增生病病毒抗体的研究

用禽网状内皮组织增生病病毒（ＲＥＶ）感染ＳＰＦ鸡胚次代成纤维细胞涂片为抗原,建立了检测ＲＥＶ抗体的间接免疫荧光法（ＩＦＡ）。确定了待检血清稀释度１∶６４和兔抗鸡ＩｇＧ荧光抗体的稀释度１∶３２的工作浓度。应用该ＩＦＡ方法对人工感染ＲＥＶ的２０只３０日龄ＳＰＦ鸡进行了检测,接种后４天时均呈阴性反应,７天时８只鸡呈阳性反应,１４天２０只全部呈阳性的反应。通过对ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＡＬＶ、ＭＤＶ、ＣＩＡＶ、ＡＩＶ等标准阳性血清的交叉试验,证明该方法特异性强。应用该ＩＦＡ方法对我国辽宁、山东、黑龙江省部分鸡群进行ＲＥＶ抗体检测,证明该方法特异性强、敏感性高,适于在生产中推广应用。     

传染性法氏囊病病毒与鸡淋巴细胞的凝集作用

检测了４株传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）血清Ｉ型野外株和１株血清Ｉ型参考标准株凝集鸡末梢血中淋巴细胞的能力，所有５株毒均可凝集鸡淋巴细胞，血清Ｉ型抗ＩＢＤＶ血清不能抑制凝集作用。因此，有必要详细分析ＩＢＤＶ配体与细胞表面受体的关系。